Tris-氯化铵红细胞裂解液使用说明
脾细胞分离 红细胞裂解液配制
1.小鼠脾细胞的制备：
Balb/c小鼠摘眼球放血，处死，75％浸泡消毒2~3min
↓
超净台内解剖、取脾，剪碎
↓
于200目筛网中研磨过筛，小平皿收集（小皿放约5ml 20%血清的1640）
↓
移至离心管中，800rpm，离心5min，弃上清
↓
加入5ml红细胞裂解液，吹打均匀，静置3～4min
↓
1000rpm离心5min，弃上清，少量RPMI 1640洗涤2～3遍
↓
加入2ml RPMI 1640（含10％FBS），吹打均匀，计数
红细胞裂解液配方：
NH4Cl: 0.747g
Tris：0.26g
定容100ml
PH=7.4
0.22um的滤膜抽滤除菌。
注：红细胞裂解液可以从冰箱拿直接出来用，预冷的红细胞裂解液加到细胞中后可以在冰上放置1min左右，裂解更充分些。
我做实验时，一般红细胞裂解液加完离心后，只用1640洗一次，一只小鼠的脾脏细胞最后悬浮于3ml 1640中，稀释50倍计数，即：100ul台盼蓝+880ul 1640（或PBS）+20ul 细胞。
那个问题等师兄过来了帮你问一下。
红细胞裂解液的配方
红细胞裂解液的配方红细胞裂解液是一种可以用于制备单细胞悬液的液体，是用于培养细胞、测定细胞特性或进行免疫学和细胞生物学分析时必不可少的。
红细胞裂解液的配方可能会随着应用不同而有所不同，一般来说，红细胞裂解液应该包含两种主要成分：溶剂和除去红细胞壁的酶。
第一步，选择溶剂。
红细胞裂解液的溶剂有多种，如水、生理盐水、PBS(phosphate buffered saline)、Tris-HCl（tris hydrochloric acid）及EDTA （ethylenediaminetetraacetic acid）等。
其中，生理盐水和PBS是最常用的，因为它们能够保持细胞环境的稳定性，PBS也是大多数细胞生物学实验中最常用的溶剂之一，而EDTA是一种有助于去除红细胞壁的溶剂。
第二步，选择酶。
红细胞裂解液中的酶一般是由trypsin或RNase组成，这两种酶都有助于去除红细胞壁，以便使细胞可以被溶解。
有些研究者会添加DNAse （deoxyribonuclease），这种酶可以帮助降解DNA，从而减少胎牛血清白蛋白对细胞的污染。
第三步，添加抗凝剂。
抗凝剂可以防止细胞在悬液中凝结，常用的抗凝剂有EDTA、heparin、citrate等。
抗凝剂的用量一般以0.1%~0.5%的浓度添加到溶剂中。
第四步，添加抗生素。
抗生素可以有效预防致病微生物的污染，常用的抗生素有penicillin/streptomycin、gentamicin、amphotericin B等，一般以100U/ml的浓度添加到溶剂中，以防止污染。
最后，将上述所有成分添加到一定的比例中，并搅拌均匀，就可以制备出一种完整的红细胞裂解液了。
通常情况下，红细胞裂解液的配方可以根据具体的实验要求而有所不同，可根据实验的具体要求调整添加的各种成分的比例，以满足实验的要求。
总之，红细胞裂解液的配方应当包括溶剂、除去红细胞壁的酶、抗凝剂和抗生素，经过调整添加各种成分的比例，即可制备出一种完整的红细胞裂解液。
细菌细胞裂解液配方
细菌细胞裂解液配方细菌细胞裂解液是一种含有多种细胞成分的液体，可以用于分离、纯化、检测和分析细胞内的各种基因、蛋白质和代谢产物。
以下是一组常用的细菌细胞裂解液配方：配方一：Tris-HCl裂解液- Tris-HCl缓冲液（pH 8.0） 50mM- EDTA 1mM- Lysozyme 1mg/mL步骤：将含菌量为10^8cfu/mL的蒸馏水悬液加入裂解液中（10mL/1mL），在室温下振荡30min-1h，最终离心，将沉淀洗涤后获取裂解液。
配方二：甘油-SDS裂解液- Tris-HCl缓冲液（pH 8.0） 50mM- EDTA 1mM- Lysozyme 1mg/mL- 10%甘油 10mL- 10%SDS 10mL步骤：将含菌量为10^8cfu/mL的蒸馏水悬液加入裂解液中（10mL/1mL），在室温下振荡30min-1h，最终离心，将沉淀洗涤后获取裂解液。
配方三：BugBuster裂解液- BugBuster蛋白质裂解液 20mL- Benzonase 70U/mL步骤：将含菌量为10^8cfu/mL的蒸馏水悬液加入裂解液中（10mL/1mL），在室温下振荡30min-1h，最终离心，将沉淀洗涤后获取裂解液。
配方四：液氮裂解液- 液氮 200-300mL步骤：将含菌量为10^8cfu/mL的细胞悬液倒入液氮中，将混合物充分研磨，研磨时需要在液氮中浸泡，并间歇性振荡，直到细胞破裂。
然后将混合物离心，将上清液收集。
以上是常用的几种细菌细胞裂解液配方。
每种配方针对不同的细胞类型、目的和实验需求，都有其独特的优点和适用性。
根据实验情况和需要，选择适宜的裂解液，能更加高效、准确地进行细胞裂解和成分分离分析。
红细胞裂解液使用说明书
红细胞裂解液红细胞裂解液红细胞裂解液是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
应用对于组织细胞样品1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2. 加入3~5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4~5min。
例如细胞沉淀的体积为1mL，则加入3~5mL的红细胞裂解液。
3. 1000g离心5 min，弃红色上清。
4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5. 洗涤1~2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，1000g离心2~3 min，弃上清。
可再重复1次，共洗涤1~2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2. 对于0.2mL细胞沉淀加入1mL红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4~5min。
3. 加入15~20mL PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。
4. 1000g离心5min，弃红色上清。
5. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。
快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。
红细胞裂解液使用说明
货号：R1010
规格：100ml /500ml
保存：2-8℃保存，保质期 2 年。常温运输。
产品简介：
红细胞裂解液是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细
胞的。
红细胞裂解液经无菌处理，主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离
其余同上。）
注意事项：
本裂解液为无菌产品，分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关产品： D8210 DEPC P1020 1×PBS，PH7.2-7.4，0.01M H1020 Hanks，含钙镁，含酚红 31800 RPMI Medium 1640 T1300 胰蛋白酶－EDTA 消化液(0.25%)不含酚红 P1400 青链霉素混合液(100×) D1800 全血基因组 DNA 提取试剂盒 G1010 姬姆萨染色液（工作液）
纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。
使用说明：
1. 1 倍体积的新鲜全血，加入 3 倍体积的红细胞裂解液。如 1ml 新鲜全血加入 3ml 红细胞
裂解液，轻轻涡旋或颠倒混匀。
2. 冰上放置 15 分钟，其间轻轻涡旋混匀两次，红细胞裂解后，溶液应该是清亮透明的。
3. 收集细胞：4℃，450×g 离心 10 分钟以沉淀白细胞，小心吸弃上清液。
4. 向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液，轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液
为 1ml，则加入 2ml 的红细胞裂解液。
பைடு நூலகம்
5. 4℃，450×g 离心 10 分钟沉淀白细胞，小心并彻底吸去上清液。
6. 重悬细胞，用于后续实验；如提取 RNA，最好于此步开始使用 DEPC 水配制的溶液进行操
TritonX-100细胞裂解液
TritonX-100细胞裂解液Triton X-100细胞裂解液简介：Triton X-100细胞裂解液是一种经典的快速裂解细胞组织并获得蛋白的裂解液。
所获得的蛋白质可以用于PAGE 电泳，Western ，免疫沉淀(Immunol Precipitation ，IP)和免疫共沉淀(co-IP)等。
Triton X-100、NaCl 、Tris-HCl 等组成，并含有多种蛋白酶抑制剂成分，可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。
作用原理是利用去污剂Triton X-100破坏脂质双分子层，溶解胞质和细胞膜，破坏分子间微弱结合键的大部分蛋白质抗原。
不宜用Bradford 法测定由Triton X-100 Lysis Buffer 获得样本的蛋白浓度。
组成：操作步骤(仅供参考)：(一)贴壁培养细胞1、取Triton X-100 Lysis Buffer 室温溶解混匀，使PMSF 终浓度为1mM 。
2、去培养液，低速离心，弃上清。
3、按照6孔板每孔加入150～250μl 含有PMSF 的裂解液的比例加入Triton X-100 LysisBuffer 。
移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。
置于冰上或4℃裂解，通常裂解液作用于细胞1～3s 内，细胞就会被裂解。
(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
4、进行后续的SDS-PAGE 、Western 、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二)悬浮培养细胞1、取Triton X-100 Lysis Buffer 室温溶解混匀，加入PMSF ，使PMSF 终浓度为1mM 。
2、低速离心悬浮细胞，弃上清，收集沉淀。
3、用手指轻弹细胞，使其松散。
按照6孔板每孔细胞加入150～250μl 含有PMSF 的裂解液的比例，加入Leagene Triton X-100 Lysis Buffer4、4℃离心(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、进行后续的SDS-PAGE 、Western 、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
裂解液配制方法
裂解液配制方法 The manuscript was revised on the evening of 20211、红细胞裂解液（去除红细胞）配制试剂所需材料：1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solutiona) NH4Cl (1.5 M) 80 gb) KHCO3 (100 nM) 10 gc) Na4EDTA (10 nM) 3.7 gd) Distilled H2O 1000 mL2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用）配制步骤：1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中；2.调节溶液pH值到，加去离子水定容到1000ml；3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。
保存：储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）；2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。
2、ripa裂解液NP-40 or Triton-100 1%TrisHCl (pH 50mmol/LNaCl 150mmol/LPMSF（苯甲基磺酰氟） L(100μg/ml)Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/Lμg/ml)Leupeptin（亮抑制肽） mlAprotinin（抑蛋白酶肽）μmol/L(1μg/ml)（注：PMSF 贮存液：100mmol/L即ml于异丙醇中；Aprotinin 贮存液：10mg/ml溶于LHEPES；Leupeptin 贮存液：10mg/ml溶于水中；Pepstatin 贮存液 10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存）3、细胞裂解液（Tris－HCL）1．1M Tris 溶液的配置取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。
2．1M Tris－HCL Ph=溶液的配置取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=（需浓盐酸约），加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。
Tris-氯化铵红细胞裂解液说明书
北京索莱宝科技有限公司Tris-氯化铵红细胞裂解液说明书货号：R1012规格：500mL保存：4℃保存，12个月有效。
产品说明：在生物科研领域，经常需要去除红细胞，去除红细胞的方法有多种，如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。
Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH4Cl。
Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。
本裂解液经过滤除菌，经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
自备材料：胰蛋白酶、离心机、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液、胎牛血清注意事项：1、制备细胞悬液时应根据实验需要，不一定要制备成单细胞悬液。
2、后续试验如果是用于细胞培养，操作过程中应注意无菌操作，尽量在超净工作台内操作。
3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
4、常规步骤与快速步骤的区别在于：常规步骤多了一步洗涤过程的离心，可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好，不需要大体积的离心管；快速步骤少了一次离心过程，洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。
5、离心洗涤后，通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6、如果经过ACK Lysis Buffer处理后的样品后续用于总RNA的提取，在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液，即无需在该操作中特意去除RNase。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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如何配置细胞裂解液
如何配置细胞裂解液
组织裂解液（全细胞蛋提取）：
1：Tris-HCL 50mmoL/L PH 7.4
2: Nacl 150 mmoL/L
3: 去氧胆酸钠0.25%
4：NP-40或Triton-x-100 1%
5: EDTA 1 mmoL/L
6：PMSF 1 mmoL/L
7：Aprotinin 1μg/ml
8: leupeptin 1μg/ml
9: pepstain 1μg/ml
其中:7,8,9作用不持久，要使用前加入。
细胞裂解液：1：NP-40裂解体系：150 mmoL/L Nacl 1.0%NP-40或Triton-x-100
50 mmoL/L Tris(PH8.0)
2：RIPA裂解体系：150 mmoL/L Nacl
1.0%NP-40或Triton-x-100
0.5%脱氧胆酸钠
0.1%SDS
50 mmoL/L Tris( ph8.0)
如何配置细胞裂解液 如何配置细胞裂解液 组织裂解液(全细胞蛋提取): 1:tris-hcl 50mmol/l ph 7.4 2: nacl 150 mmol/l 3:去氧胆酸钠0.25% 4:np-40或triton-x-100 1% 5: edta 1 mmol/l 6:pmsf 1 mmol/l 7:aprotinin 1μg/ml 8: leupeptin 1μg/ml 9: pepstain 1μg/ml 其中:7,8,9作用不持久,要使用前加入. 细胞裂解液:1:np-40裂解体系:150 mmol/l nacl 1.0%np-40或triton-x-100 50 mmol/l tris(ph8.0) 2:ripa裂解体系:150 mmol/l nacl 1.0%np-40或triton-x-100 0.5%脱氧胆酸钠 0.1%sds 50 mmol/l tris( ph8.0) 下载文档原格式( word原格式 ,共1页)
红细胞裂解液使用说明书
红细胞裂解液使用说明书产品货号：SL1070储存条件：2-8度保存，有效期1年。
产品内容：产品内容SL1070-100ml SL1070-500ml 红细胞裂解液100ml500ml说明书1份产品简介：红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称ACK Lysis Buffer，是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本产品经过优化配方，在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞（lymphocyte）或其它有细胞核的细胞。
不适用于鸟或禽类等有细胞核红细胞的裂解。
本产品主要成分为氯化铵，经过无菌处理。
经过处理的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合，核酸或蛋白的提取，及各种常规的分析和检测。
使用说明：组织细胞样品常规操作步骤：.1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2、加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。
室温或4度操作均可。
3、400-500g离心5分钟，弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4、如果红细胞裂解不完全，可以重复步骤2和步骤3。
一般极微量的红细胞不影响后续检测。
5、加入5-8倍细胞体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。
4℃离心效果更佳。
洗涤1-2次。
6、根据实验需要，选用适当溶液重悬细胞沉淀，随后进行计数等后续实验。
组织细胞样品快速操作步骤：1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2、加入5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。
室温或4度操作均可。
3、加入15-20倍红细胞裂解液体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。
4、400-500g离心5分钟，弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
5、如果红细胞裂解不完全，可以重复步骤2和步骤3。
红细胞裂解液说明书
产品说明书红细胞裂解液产品货号：H9032产品规格：100mL储存条件常温避光保存，有效期见产品外包装。
产品介绍本裂解液有别于市场上销售的其它红细胞裂解液，其配方经过本公司优化在裂解红细胞的同时不损伤并在一定程度上保护淋巴细胞（lymphocyte）或其它有细胞核的细胞，所获得的细胞可保持完好的生物活性和完整的细胞形态。
另外，本裂解液中无DNA及RNA酶，配合细胞分离液使用所提细胞可广泛用于细胞培养及分子生物学实验，请广大用户从优选择。
红细胞裂解液（Red Blood Cell Lysis Buffer），也称ACK Lysis Buffer，是一种用于从人或鼠等的血液或组织细胞样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
使用方法裂解过程及离心需在4℃的条件下进行。
对于细胞悬液样品：1.第一次裂解，加入5-8倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解2min。
2.300g离心10min，弃红色上清。
3.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤1、2步进行短时多次裂解。
但后续每次加入的红细胞裂解液为上一次的一半，但最少不能低于2mL。
裂解液减少到只剩余2mL 时，每次裂解结束，需先加入10mL PBS进行终止，并300g 离心10min，弃红色上清。
直至红细胞裂解完全，裂解结束。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
4.洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，300g离心5min，弃上清。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
5.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于血液样品：1.取新鲜抗凝血，400-500g离心5min，离心弃血浆。
2.第一次裂解，加入5-8倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解2min。
细胞组织裂解液
细胞/组织裂解液1. 溶液准备2×样品缓冲液：130mM Tris-HCl （ pH8.0 ） , 20% （ v/v ）甘油 , 4.6% （ w/v ） SDS , 0.02% 溴酚蓝 ,2%DTTPBS （ pH7.4 ） :10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4，50mM NaCl，2.7mM KClRIPA缓冲液：50mM Tris-HCl（pH7.4），150mM NaCl，1mM EDTA，1%Trito n×100 ，1%去氧胆酸钠，0.1%SDS，1mM PMSF，1μg/ml 牛胰蛋白酶抑制剂（aprotinin ），1μg/ml亮抑蛋白酶肽（ leupeptin ）裂解液缓冲液：10mM Tris-HCl（pH7.4），0.15M NaCl，5mM EDTA（pH8.0），1%Triton×100；使用前加5mM DTT，0.1mM PMSF异丙醇和5mM ε-氨基己酸。
2. 裂解液的制备A. 制备细胞裂解液：①收集胰蛋白酶消化的细胞并离心，用PBS清洗。
②用100μl RIPA缓冲液冰浴溶解沉淀10min（每500000个细胞20μl RI PA缓冲液）。
③10000rpm，4℃离心10min，取上清转移至新管。
④用考马斯亮蓝法检测蛋白质浓度。
⑤用裂解缓冲液将溶液浓度调到5mg/ml,每小瓶中放100μl，-80℃储存。
⑥按照1:1体积比混合2×样品缓冲液，煮沸5min后，室温放置5min.⑦短时离心后点样电泳检测。
B．制备组织裂解液：①在制备过程中一直将溶胞液或组织放在冰上。
②切开组织，称取组织1.5g于PBS中清洗。
③在RIPA缓冲液中剪碎组织后，转移到匀浆器中，加足5ml RIPA缓冲液，研磨20min.④将研磨液转移到1.5ml的离心管中，14000rpm，4℃离心10min.⑤取上清液作为完整的组织裂解液。
⑥用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度。
红细胞裂解液的配制
红细胞裂解液的配制我在一个公司的网站上看到的红细胞裂解液的说明书上说操作要点是：1.在37度预热；2.充分混匀细胞我就是这样做的，效果还可以。
不过我只做流式细胞仪的检测，活性没测。
我的裂解液是0.16M NH4Cl，0.13mM EDTA，12mM NaHCO3我用的方法：全血：裂解液=1：3，如2ml的全血加上6ml的红细胞裂解液，充分混匀后，室温静置5mim，1000rpm离心6~10min。
红细胞裂解得非常充分。
0.15 M NH4CL, 0.01 M NaHCO3 and 1 mM EDTA (Sigma)Ammonium chloride (NH4Cl) 8.29 g 0.155 MPotassium bicarbonate (KHCO3) 1 g 10mMEDTA 0.37 g 1mMH2O 1l.Filter with 0.45µm filteraliquot in 100 ml aliquotsfilter the solution to be used with 0.2µm filter.我们用的是Tris-NH4Cl,具体配方如下:NH4Cl:4.15克加双蒸水500ml,取450ml;Tris:1.0297克加双蒸水50ml,再加上上面的450ml,共计500ml,高压灭菌,用时加10-20ml,静置5min,效果蛮好.9月29日我用的配方氯化铵3.735g，tris 1.3g，加在500ml水中，ph约7.2。
将全血约5ml加入配好的加入30ml裂解液的50ml试管中5分钟或15分钟，发现5分钟组细胞要多些，15分钟组细胞要少些，而且红细胞仍然有。
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)简介：在生物科研领域，经常需要去除红细胞。
去除红细胞的方法有多种，如ACK Lysis Buffer 、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer 。
红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH 4Cl 。
Leagene RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
对于裂解、去除有细胞核红细胞，例如鸟或禽类的红细胞，效果不佳，裂解类似细胞时，不建议采用。
该裂解液经过滤除菌，为浓缩液，使用RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测，尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成：自备材料：1、 胰蛋白酶2、 离心机3、 PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液操作步骤(仅供参考)：注意：绝大多数情况下，应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)使用，流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解: 加入细胞沉淀体积的RBC Lysis Buffer ，轻柔吹打混匀，裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3、离心，弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
编号 名称 CS0003 CS0003 Storage RBC Lysis Buffer(10×) 100ml 500ml 4℃使用说明书 1份5、洗涤：根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。
红细胞裂解液使用说明书
红细胞裂解液使用说明书
产品简介红细胞裂解液是一种专门设计用来裂解红细胞的新型试剂。
它是一种经过精心制备的化学试剂，能有效地溶解红细胞，以便进一步进行血液样本的处理和分析。
本产品具有使用方便、裂解效果好、安全性高等优点。
使用目的使用红细胞裂解液的主要目的是裂解红细胞，释放其中的血红蛋白和其他细胞内成分，以便进行后续的生化、免疫或分子生物学分析。
同时，该试剂也可以用于分离和纯化血红蛋白，以进行更深入的研究。
成分与特性红细胞裂解液的主要成分包括溶血剂、稳定剂、防腐剂等。
其中溶血剂可以破坏红细胞的细胞膜，使细胞内物质释放出来。
稳定剂和防腐剂则可以保持试剂的稳定性和延长保存时间。
本试剂具有高效率、高纯度、低毒性的特点。
操作流程使用红细胞裂解液的操作流程如下：
(1)准备实验样品：将需要裂解的红细胞悬液准备好。
(2)加入红细胞裂解液：按照样品与红细胞裂解液的比例加入适量的红细胞裂解液。
(3)充分混合：轻轻旋转或摇动混合器，使红细胞裂解液与样品充分混合。
(4)静置：将混合物静置一段时间，让红细胞充分裂解。
(5)离心：将混合物离心，分离出上清液和沉淀物。
(6)处理上清液：根据后续分析的需要，处理上清液，如进行蛋白质沉淀、蒸发、纯化等。
安全性及注意事项(1)请在实验前仔细阅读说明书并穿戴实验服和手套。
(2)请在通风良好的实验环境中进行实验操作。
(3)避免皮肤接触试剂，如不慎接触，请立即用清水冲洗。
(4)请将试剂存放在儿童触及不到的地方，并放在通风、干燥、避光的地方保存。
(5)请勿将试剂与其他物质混合使用。
Triton-SDS细胞裂解液
Triton-SDS 细胞裂解液简介：Triton-SDS 细胞裂解液由 Triton X-100、SDS 、Tris-HCl 等组成，并含有蛋白酶抑制剂成分，可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。
作用原理是利用Triton X-100破坏脂质双分子层，溶解胞质和细胞膜，破坏分子间微弱结合键的大部分蛋白质抗原。
所获得的蛋白质可以用于PAGE 电泳，Western ，免疫沉淀(Immunol Precipitation ，IP)和免疫共沉淀(co-IP)等。
不宜用Bradford 法测定由Triton-SDS 细胞裂解液获得样本的蛋白浓度。
组成：操作步骤(仅供参考)：(一)贴壁培养细胞1、 取Triton-SDS Lysis Buffer 置于室温溶解混匀使PMSF 终浓度为1mM 。
2、 去除培养液，低速离心，弃上清。
3、 按照6孔板每孔加入150～250μl 含有PMSF 的裂解液的比例加入riton-SDS LysisBuffer 。
移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。
置于冰上或4℃裂解，通常裂解液作用于细胞1～3s 内，细胞就会被裂解。
4、 离心(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、 进行后续的SDS-PAGE 、Western 、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二)悬浮培养细胞1、 取Triton-SDS Lysis Buffer 置于室温溶解混匀后加入PMSF ，使PMSF 终浓度为1mM 。
2、 低速离心悬浮细胞，弃上清，收集沉淀。
3、 用手指轻弹细胞，使其松散。
按照6孔板每孔细胞加入150～250μl 含有PMSF 的裂解液的比例，加入Triton-SDS Lysis Buffer 。
4、 离心(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、 进行后续的SDS-PAGE 、Western 、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(三)组织样本1、 取Triton-SDS Lysis Buffer 置于室温溶解混匀后加入PMSF ，使PMSF 终浓度为1mM 。
红细胞裂解液使用方法
红细胞裂解液使用方法
红细胞裂解液是一种常用的实验室试剂，它可以用来破坏血液红细胞膜从而释放出血红蛋白。
红细胞裂解液使用方法很简单，只要按照以下步骤进行即可。
第一步，准备材料和设备。
需要准备的材料包括红细胞裂解液和待处理的血液样品，需要准备的设备包括离心管、离心机、移液管等。
第二步，制备血浆。
将血液样品放入离心管中，以3000rpm的速度离心10分钟，将血细胞和血浆分离。
将血浆转移到另一个离心管中。
第三步，加入红细胞裂解液。
在离心管中加入适量的红细胞裂解液，根据不同的实验要求可以添加不同的浓度。
第四步，混匀。
使用移液管将红细胞裂解液和血浆充分混合，然后放置在室温下静置30分钟。
第五步，离心。
将混合液置于离心机中，以3000rpm的速度离心10分钟，离心之后可以直接利用上清液继续进行实验。
注意事项：
1、最好在使用前检查红细胞裂解液的药物有效期，避免因为过期而导致实验结果不准确。
2、在制备血浆的过程中一定要避免将红细胞破坏，否则可能会影响到实验数据的准确性。
3、离心过程中要注意离心管的平衡性，避免因为离心速度不均匀而使血细胞重新沉淀。
总之，红细胞裂解液是一种常用的实验试剂，其使用方法不仅简单易行，而且操作方便，适用于各种血液学和生物学实验。
但是在使用时需要注意一些细节问题，遵守操作规程，确保实验结果的准确性。
提取组织DNA
细胞裂解液（Cell Lysis Solution）的配置方法1．1M Tris 溶液的配置取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。
2．1M Tris－HCL Ph=8.0溶液的配置取1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=8.0（需浓盐酸约8.5ml），加ddH2O 定容至200ml，高压灭菌备用。
3.0.5M EDTA溶液的配置称EDTA－N a2 37.2g 先用140ml ddH2O溶解，加入14ml N a OH（10M）使EDTA －N a2溶解，再用N a OH（10M）溶液调至Ph=8.0，加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。
4.细胞裂解液的配制称15gCTAB（Hexadecyltrimethylammonium bromide）（先用约600ml ddH2O加热溶解）放入烧杯中，加入75ml 1M Tris－HCL（Ph=8.0），58.5g N a CL（先用少量ddH2O溶解），30ml 0.5M EDTA，定容至1000ml，混合均匀备用。
沉淀液（Precipitation Solution）的配置方法10gCTAB（先用约600ml ddH2O加热溶解），50ml 1M Tris－HCL（Ph=8.0），20ml 0.5M EDTA，定容至1000ml备用。
基因组DNA的提取操作过程：1．取已经保存在70％酒精中的耳组织大约10mg，与200μl细胞裂解液（Cell Lysis Solution）混匀，加入1.5μl Proteinase K，置于55℃水浴锅中水浴过夜。
2．第二天从水浴锅中取出后，加入300μl氯仿，混匀，不能太剧烈，摇动10～15分钟，以保证DNA的完整性。
3．用台式离心机10000rpm离心2分钟，此时应分为三层，基因组DNA在上层中，取约200μl的上清液，置于1.5ml离心管中。
4．加入250μl 沉淀液（Precipitation Solution）后，混匀，室温放置2分钟。
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Tris-氯化铵红细胞裂解液使用说明
Tris-NH4Cl Lysis Buffer
货号：R1012
规格：100ml/500ml
保存：4℃保存，有效期至少6个月。
产品简介：
Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为氯化铵。
Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
对于裂解、去除有细胞核红细胞，例如鸟或禽类的红细胞，效果不佳，裂解类似细胞时，不建议采用。
本裂解液经过滤除菌，经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
自备材料：
胰蛋白酶、胎牛血清(FCS)、离心机、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液
操作步骤（仅供参考）：
（一）组织细胞样本的常规操作
1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解:加入3～5倍细胞沉淀体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～2min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3、离心:4℃，400～500g离心5min，弃红色上清。
如无低温离心机，本步骤亦可在室温
下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤：根据具体实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。
4℃，400～500g离心2～3min，弃上清，离心步骤亦可在室温下操作。
所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、如有必要，重复上述步骤5一次，共洗涤1～2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
（二）组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)
1、制备细胞悬液：新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解：加入细胞5倍细胞沉淀体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～2min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3、加入15～20ml的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。
4、离心：4℃，400～500g离心5min，弃红色上清，本步骤亦可在室温下操作。
5、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2～4各一次。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
（三）血液样本的常规操作
1、取新鲜抗凝血，400～500g离心5min，离心弃上清。
2、裂解:加入6～10倍细胞沉淀体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～5min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
（特别提醒：对于鼠的血液，裂解1～2min已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4～5min，并且裂解过程中轻轻摇动以促进红细胞裂解。
）
3、离心:4℃，400～500g离心5min，弃红色上清。
如无低温离心机本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、洗涤:根据具体实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。
4℃，400～500g离心3～5min，弃上清，离心步骤亦可在室温下操作。
所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
注意：对于微量或少量的血液样本，可以不用第1步操作，可直接加入10倍血液体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer进行第2步操作，并在4℃或室温裂解4～15min。
对于鼠的血液，裂解4～5min已经足够；对于人的外周血，宜延长裂解时间至10min，但通常不宜超过15min，并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。
（四）血液样本的快速操作(无需洗涤)
1、新鲜抗凝血中加入10倍体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，轻轻吹打混匀，裂解4～15min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
（特别提醒：对于鼠的血液，裂解4～5min已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10min，但通常不宜超过15min，并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。
2、加入20～30ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。
3、400～500g离心5min，弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
注意事项：
1、制备细胞悬液是应根据具体实验需要，不一定要制备成单细胞悬液。
2、后续试验如果是用于细胞培养，操作过程中应注意无菌操作，尽量在超净工作台内操作。
3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
4、常规步骤与快速步骤的区别在于：常规步骤多了一步洗涤过程的离心，可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好，不需要大体积的离心管；快速步骤少了一次离心过程，洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。
5、离心洗涤后，通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6、如果经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理后的样品后续用于总RNA的提取，在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液，即无需在该操作中特意去除RNase。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。