红细胞裂解液使用说明
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer ,10×)简介: 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH 4Cl 。
RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
使用1×RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测,尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成:操作步骤(仅供参考):注意:绝大多数情况下,应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用,流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃离心,弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液:新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer ,10×)简介: 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH 4Cl 。
RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
使用1×RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测,尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成:操作步骤(仅供参考):注意:绝大多数情况下,应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用,流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃离心,弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液:新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
ACK红细胞裂解液(ACKLysisBuffer)
改良Barth溶液(含钙)
氯化钾-EDTA溶液(0.15mol/L)
阿氏液(2×Alsever液)
STM溶液(0.25M)pH7.4)
蔗糖-CaCl2溶液(0.25M:3mM)
蔗糖-CaCl2溶液(1M:1mM)
碘化丙啶PI溶液(20ug/ml)含RNase)
上海远慕科技专业供应:ACK红细胞裂解液(ACKLysisBuffer) 100ml 上海远慕生物科技有限公司生产的: ACK红细胞裂解液(ACKLysisBuffer) 主要用于:去除细胞悬液中的红细胞,属于溶解红细胞方法的一种 产品组成及特殊说明:注意无菌操作,主要由氯化铵、碳酸氢钾、EDTA等组成。 "产品名称:ACK红细胞裂解液(ACKLysisBuffer),
说明书请致电我公司销售人员,(ACK红细胞裂解液(ACKLysisBuffer) )其他相关产品信息:
现本公司成立周年之际,为了回馈新老客户,在此期间特价供应: ACK红细胞裂解液(ACKLysisBuffer)"
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远慕生物咨询电话:021-51829250 13310162040 在 线QQ:953483277 183118024
规格:100ml
分类:细胞组分分离
储存条件:4℃,过滤除菌,6个月
产品用途:去除细胞悬液中的红细胞,属于溶解红细胞方法的一种
产品说明:注意无菌操作,主要由氯化铵、碳酸氢钾、EDTA等组成。
产品编号: YM-S1225 ,
供货能力:现货 作为实验用品,供研究用,不能直接用于人体。
染色液相关产品信息:
G418溶液(geneticin)20mg/ml)
Tris-氯化铵红细胞裂解液使用说明
Tris-氯化铵红细胞裂解液使用说明Tris-NH4Cl Lysis Buffer货号:R1012规格:100ml/500ml保存:4℃保存,有效期至少6个月。
产品简介:Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer),也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为氯化铵。
Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
对于裂解、去除有细胞核红细胞,例如鸟或禽类的红细胞,效果不佳,裂解类似细胞时,不建议采用。
本裂解液经过滤除菌,经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
自备材料:胰蛋白酶、胎牛血清(FCS)、离心机、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液操作步骤(仅供参考):(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入3~5倍细胞沉淀体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~2min。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心:4℃,400~500g离心5min,弃红色上清。
如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据具体实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,400~500g离心2~3min,弃上清,离心步骤亦可在室温下操作。
所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
C3702 红细胞裂解液(碧云天)
红细胞裂解液产品简介:碧云天生产的红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称ACK Lysis Buffer,是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本裂解液经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
本裂解液的主要有效成分为氯化铵。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
保存条件:4℃保存,一年有效。
室温保存, 3个月有效。
注意事项:本裂解液为无菌产品,请注意保持无菌,使用本产品时宜在超净工作台内进行。
如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:对于组织细胞样品:1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入3-5ml的红细胞裂解液。
本步骤在室温或4度操作均可。
3.400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4.如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5.洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。
可再重复1次,共洗涤1-2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
4℃离心效果更佳。
6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤:1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
Tris-氯化铵红细胞裂解液
Tris-氯化铵红细胞裂解液产品简介:在生物科研领域,经常需要去除红细胞。
去除红细胞的方法有ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵细胞裂解液、Gey,s Lysis Buffer。
Tris-氯化铵细胞裂解液(Tris-NH4CI Red Blood Cell Lysis Buffer),也称为Tris-NH4CI Lysis Buffer,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成份为NH4CI。
Jimei Tris-NH4CI Lysis Buffer经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
本裂解液经高压灭菌及过滤除菌,经过Tris-NH4CI Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
自备材料:1、胰蛋白酶2、胎牛血清3、低温离心机4、Hanks平衡盐溶液(HBSS)操作步骤(仅供参考):(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入3~5倍细胞沉淀体积的Tris-NH4CI Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~2min。
本操作在4。
C条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心:4。
C,400~500g离心5min,弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根椐实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4。
C,400~500g离心2~3 min,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。
所加入PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
联科生物科技有限公司流式细胞仪红细胞裂解液说明书
Toll Free: 400 6721 600 (China Only) Website: Lysing solution for FACS (10×)I.产品信息目录号: LSB01, LSB02, LSB03 规格: 100T,250T, 500T保存: 室温效期: 一年II.产品简介本产品可在哺乳动物外周血细胞经荧光素标记的抗体染色后,将红细胞裂解,随后进行流式分析。
当抗体加入到全血中,与白细胞特异性的表面抗原结合。
染色的样品随后用流式红细胞裂解液处理,在温和的低渗条件下裂解红细胞,从而保留住白细胞。
III.使用方法1.用蒸馏水将10×红细胞裂解液稀释为1×,稀释后的工作液可在室温保存一个月。
2.用合适的抗凝管收集全血。
3.取100 μl混匀的抗凝血到流式管。
4.按照抗体说明书加入合适的剂量,混匀后孵育适当时间。
5.加入2 ml 1×红细胞裂解液,涡旋振荡混匀。
6.室温避光孵育10分钟。
7.300 - 400 g离心5分钟,弃上清。
8.加入2 ml PBS,300 - 400 × g离心5分钟。
9.弃上清,加入0.5 ml PBS重悬细胞沉淀。
10.在流式细胞仪上进行分析。
如不能马上检测,请将样品避光保存于2 - 8℃。
IV. 结果示例图. FSC/SSC散点图。
全血细胞经1×红细胞裂解液裂解后,在Becton Dickinson FACSCalibur TM流式细胞仪。
通过FSC和SSC可以清晰地区分出淋巴细胞、单核细胞和粒细胞,几乎很少细胞碎片产生。
Toll Free: 400 6721 600 (China Only) Website: V. 注意事项1.本产品经优化,专门针对临床实验室所用的流式细胞仪,包括Becton Dickinson FACSCalibur TM和CoulterEPICS® XL®。
红细胞裂解液使用说明书
红细胞裂解液红细胞裂解液红细胞裂解液是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
应用对于组织细胞样品1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2. 加入3~5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解4~5min。
例如细胞沉淀的体积为1mL,则加入3~5mL的红细胞裂解液。
3. 1000g离心5 min,弃红色上清。
4. 如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5. 洗涤1~2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,1000g离心2~3 min,弃上清。
可再重复1次,共洗涤1~2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2. 对于0.2mL细胞沉淀加入1mL红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解4~5min。
3. 加入15~20mL PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。
4. 1000g离心5min,弃红色上清。
5. 如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
说明:对于常规步骤,多一步洗涤过程中的离心,但可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好一些,同时不需要大体积的离心管。
快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
红细胞裂解液使用说明书
红细胞裂解液使用说明书产品货号:SL1070储存条件:2-8度保存,有效期1年。
产品内容:产品内容SL1070-100ml SL1070-500ml 红细胞裂解液100ml500ml说明书1份产品简介:红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称ACK Lysis Buffer,是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本产品经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
不适用于鸟或禽类等有细胞核红细胞的裂解。
本产品主要成分为氯化铵,经过无菌处理。
经过处理的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合,核酸或蛋白的提取,及各种常规的分析和检测。
使用说明:组织细胞样品常规操作步骤:.1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2、加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
室温或4度操作均可。
3、400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4、如果红细胞裂解不完全,可以重复步骤2和步骤3。
一般极微量的红细胞不影响后续检测。
5、加入5-8倍细胞体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。
4℃离心效果更佳。
洗涤1-2次。
6、根据实验需要,选用适当溶液重悬细胞沉淀,随后进行计数等后续实验。
组织细胞样品快速操作步骤:1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2、加入5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
室温或4度操作均可。
3、加入15-20倍红细胞裂解液体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。
4、400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
5、如果红细胞裂解不完全,可以重复步骤2和步骤3。
RIPA裂解液说明书
使 用 说 明 书◆RIPA裂解液◆目录号1912◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外RIPA裂解液目录号:1912目录编号包装单位191201 50ml191202 100ml产品介绍:RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。
RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。
RIPA裂解液的配方有很多种,本产品RIPA裂解液的主要成分为50mM Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS 以及sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA 等多种磷酸酶抑制剂。
产品储存:4℃注意事项:1.裂解得到的蛋白样品,由于含有较高浓度的去垢剂干扰,不能用Bradford法测定蛋白浓度,可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
2.用户使用前需加入蛋白酶抑制剂如PMSF或者根据需要再加入leupeptin,aprotinin等其它抑制剂。
3.裂解液中SDS 4℃保存易沉淀析出,使用前应该37℃-60℃水浴重新溶解完全后回复到室温使用。
4.裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)1.对于培养细胞样品:1)取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2)对于贴壁细胞,去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。
按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。
用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
3)对于悬浮细胞,离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。
按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。
红细胞裂解液的配制
红细胞裂解液的配制我在一个公司的网站上看到的红细胞裂解液的说明书上说操作要点是:1.在37度预热;2.充分混匀细胞我就是这样做的,效果还可以。
不过我只做流式细胞仪的检测,活性没测。
我的裂解液是0.16M NH4Cl,0.13mM EDTA,12mM NaHCO3我用的方法:全血:裂解液=1:3,如2ml的全血加上6ml的红细胞裂解液,充分混匀后,室温静置5mim,1000rpm离心6~10min。
红细胞裂解得非常充分。
0.15 M NH4CL, 0.01 M NaHCO3 and 1 mM EDTA (Sigma)Ammonium chloride (NH4Cl) 8.29 g 0.155 MPotassium bicarbonate (KHCO3) 1 g 10mMEDTA 0.37 g 1mMH2O 1l.Filter with 0.45µm filteraliquot in 100 ml aliquotsfilter the solution to be used with 0.2µm filter.我们用的是Tris-NH4Cl,具体配方如下:NH4Cl:4.15克加双蒸水500ml,取450ml;Tris:1.0297克加双蒸水50ml,再加上上面的450ml,共计500ml,高压灭菌,用时加10-20ml,静置5min,效果蛮好.9月29日我用的配方氯化铵3.735g,tris 1.3g,加在500ml水中,ph约7.2。
将全血约5ml加入配好的加入30ml裂解液的50ml试管中5分钟或15分钟,发现5分钟组细胞要多些,15分钟组细胞要少些,而且红细胞仍然有。
红细胞裂解液使用说明书
红细胞裂解液使用说明书
产品简介红细胞裂解液是一种专门设计用来裂解红细胞的新型试剂。
它是一种经过精心制备的化学试剂,能有效地溶解红细胞,以便进一步进行血液样本的处理和分析。
本产品具有使用方便、裂解效果好、安全性高等优点。
使用目的使用红细胞裂解液的主要目的是裂解红细胞,释放其中的血红蛋白和其他细胞内成分,以便进行后续的生化、免疫或分子生物学分析。
同时,该试剂也可以用于分离和纯化血红蛋白,以进行更深入的研究。
成分与特性红细胞裂解液的主要成分包括溶血剂、稳定剂、防腐剂等。
其中溶血剂可以破坏红细胞的细胞膜,使细胞内物质释放出来。
稳定剂和防腐剂则可以保持试剂的稳定性和延长保存时间。
本试剂具有高效率、高纯度、低毒性的特点。
操作流程使用红细胞裂解液的操作流程如下:
(1)准备实验样品:将需要裂解的红细胞悬液准备好。
(2)加入红细胞裂解液:按照样品与红细胞裂解液的比例加入适量的红细胞裂解液。
(3)充分混合:轻轻旋转或摇动混合器,使红细胞裂解液与样品充分混合。
(4)静置:将混合物静置一段时间,让红细胞充分裂解。
(5)离心:将混合物离心,分离出上清液和沉淀物。
(6)处理上清液:根据后续分析的需要,处理上清液,如进行蛋白质沉淀、蒸发、纯化等。
安全性及注意事项(1)请在实验前仔细阅读说明书并穿戴实验服和手套。
(2)请在通风良好的实验环境中进行实验操作。
(3)避免皮肤接触试剂,如不慎接触,请立即用清水冲洗。
(4)请将试剂存放在儿童触及不到的地方,并放在通风、干燥、避光的地方保存。
(5)请勿将试剂与其他物质混合使用。
红细胞裂解液使用说明书
北京索莱宝科技有限公司
红细胞裂解液使用说明书
货号:R1010
规格:100ml/500ml
保存:2-8℃保存,保质期2年。
常温运输。
产品简介:
本产品是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细胞的。
本产品经无菌处理,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。
使用说明:
1.1倍体积的新鲜全血,加入3倍体积的红细胞裂解液。
如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液,轻轻涡
旋或颠倒混匀。
2.冰上放置15分钟,其间轻轻涡旋混匀两次,红细胞裂解后,溶液应该是清亮透明的。
3.收集细胞:4℃,450×g离心10分钟以沉淀白细胞,小心吸弃上清液。
4.向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液,轻轻涡旋充分重悬白细胞。
如起始血液为1ml,则加入
2ml的红细胞裂解液。
5.4℃,450×g离心10分钟沉淀白细胞,小心并彻底吸去上清液。
6.重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,最好于此步开始使用DEPC水配制的溶液进行操作。
(组织细
胞处理:新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液,其余同上。
)
注意事项:
本裂解液为无菌产品,分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。
为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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bd红细胞裂解液说明书
bd红细胞裂解液说明书
红细胞裂解液是一种用于裂解红细胞膜以释放细胞内成分的试剂。
通常用于实验室研究中,特别是在分离红细胞内的细胞器或其他细胞成分时。
以下是一般情况下红细胞裂解液的说明书内容:
1. 产品名称和规格,首先会列出产品的名称,可能还会包括产品的规格,例如包装的容量或浓度。
2. 成分,说明红细胞裂解液的成分,可能包括裂解红细胞膜的化学物质或酶类成分。
3. 储存条件,包括建议的储存温度、避光要求等,以确保产品稳定性和有效性。
4. 使用方法,详细说明如何正确使用红细胞裂解液,包括稀释比例、操作步骤等。
5. 注意事项,可能包括对使用过程中需要特别注意的事项,如避免接触皮肤或吸入等安全注意事项。
6. 应用范围,说明红细胞裂解液的主要用途和适用范围,以便
用户正确选择和使用。
7. 质量控制,可能包括产品质量控制的相关信息,如质量标准、质检报告等。
8. 生物安全,可能包括产品的生物安全性说明,如无菌、无毒
等相关信息。
以上是一般情况下红细胞裂解液的说明书内容,具体说明书可
能会根据不同厂家或产品有所差异。
在使用红细胞裂解液前,建议
仔细阅读并按照说明书正确操作。
红细胞裂解液法操作
红细胞裂解液法分离脐带血单个核细胞实验设计
操作步骤:
将新鲜采集的脐血在2小时内送至实验室并开始分离操作。
↓
无菌室内75%酒精喷射表面消毒注射器、操作台及操作涉及到的相关器具。
↓
用50ml一次性注射器将采血袋内脐血转至50ml离心管n管(每管血液体积不大于30ml),血袋交计数组进行有核细胞(NC)计数(NC计数1)。
余下用于分离的血液4℃冰箱预温30min。
↓
2000rpm 10℃10min离心,取血浆到一个50ml离心管(NC计数2 ),(找时间500g 10min 离心血浆余下细胞单独冻存),用PBS还原体积混匀。
每450ml红细胞裂解液加入还原体积的血液50ml(室温避光计时10min准时开始离心)充分混匀并立刻分装到12个50ml离心
管中放入离心机400g 10℃5min离心。
↓
用血浆配制10%DMSO冻存保护剂(血浆体积/9=需要DMSO量,精确到微升)5℃预温
↓
去上清,加入过量PBS混匀400g 10℃5min
↓
去上清,尽量将细胞集中到1个离心管加入PBS至40ml混匀,交计数组有核细胞(NC)计数
(NC计数3)然后400g 10℃5min
↓
去上清,根据NC计数2NC计数3与血浆管B一并加入配制好的冻存保护剂(5℃),混匀,分装至n(细胞总数/1.8×107)个冻存管中,每管1.8ml(控制终浓度在0.5~1 ×107 /ml)。
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手工冻存或程序降温,转液氮保存
备注:试验操作可根据具体情况进行适当修改
蔡一村王瑛
2005-7-19。
北京普利莱基因技术有限公司红细胞裂解液说明书
北京普利莱基因技术有限公司 电话:************,62027915 Email:*****************.cnApplygen Technologies Inc. DocRev: 201308 Page 1 of 1 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer ) C1311描述:我们提供的红细胞裂解液可直接与血液或脾细胞悬液混合,也可用于重悬离心收集的血细胞,其能够选择性裂解样品中的红细胞,而不破坏白细胞。
通过低速离心的方法去除红细胞裂解碎片和血小板,收集白细胞,回收率可达90%以上。
被富集的白细胞的生物学活性不受影响,可用于各种后续的细胞实验。
当从得到的白细胞中提取DNA 、RNA 、和蛋白质时,可免除红细胞成分如血红素等的不利影响。
适于裂解人全血、小鼠全血或脾细胞悬液中的红细胞。
规格:100 ml储存: 4ºC , 24个月与全血混合直接裂解红细胞:1. 采取0.35 ml 人或小鼠全血,加入1.5 ml 离心管2. 加1 ml 红细胞裂解液,颠倒混合,室温放置10 min 。
3. 1500g 离心5分钟,弃上清。
细胞沉淀应为白色。
如果裂解不完全,可用1 ml 裂解液重悬细胞沉淀,室温静置10 min 。
1500g 离心5分钟,弃上清。
4. 用1.5 ml PBS 缓冲液或生理盐水重悬细胞,1500g 离心5分钟,弃上清。
重复洗涤2次。
重悬细胞沉淀后裂解红细胞:1. 采取1 ml 人全血或小鼠全血,枸橼酸钠或EDTA 或肝素抗凝。
或用1个小鼠脾脏制备的细胞悬液,1500g 离心10分钟收集所有细胞。
弃上清。
2. 加3 ml 裂解液重悬细胞(约100~200万个细胞)。
颠倒混合,室温放置10 min 。
3. 1500g 离心5分钟,弃上清。
细胞沉淀应为白色。
如果裂解不完全,应重复步骤2-34. 用1.5 ml PBS 或生理盐水重悬细胞,1500g 离心5分钟,弃上清。
红细胞裂解液使用方法
红细胞裂解液使用方法
红细胞裂解液是一种常用的实验室试剂,它可以用来破坏血液红细胞膜从而释放出血红蛋白。
红细胞裂解液使用方法很简单,只要按照以下步骤进行即可。
第一步,准备材料和设备。
需要准备的材料包括红细胞裂解液和待处理的血液样品,需要准备的设备包括离心管、离心机、移液管等。
第二步,制备血浆。
将血液样品放入离心管中,以3000rpm的速度离心10分钟,将血细胞和血浆分离。
将血浆转移到另一个离心管中。
第三步,加入红细胞裂解液。
在离心管中加入适量的红细胞裂解液,根据不同的实验要求可以添加不同的浓度。
第四步,混匀。
使用移液管将红细胞裂解液和血浆充分混合,然后放置在室温下静置30分钟。
第五步,离心。
将混合液置于离心机中,以3000rpm的速度离心10分钟,离心之后可以直接利用上清液继续进行实验。
注意事项:
1、最好在使用前检查红细胞裂解液的药物有效期,避免因为过期而导致实验结果不准确。
2、在制备血浆的过程中一定要避免将红细胞破坏,否则可能会影响到实验数据的准确性。
3、离心过程中要注意离心管的平衡性,避免因为离心速度不均匀而使血细胞重新沉淀。
总之,红细胞裂解液是一种常用的实验试剂,其使用方法不仅简单易行,而且操作方便,适用于各种血液学和生物学实验。
但是在使用时需要注意一些细节问题,遵守操作规程,确保实验结果的准确性。
Tris-氯化铵红细胞裂解液
Tris-氯化铵红细胞裂解液简介:去除红细胞的方法有多种,如ACK Lysis Buffer 、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer 。
Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH 4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer),也称为Tris-NH 4Cl Lysis Buffer ,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH 4Cl 。
本裂解液经过滤除菌,经过Tris-NH 4Cl Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
组成:操作步骤(仅供参考):(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入Tris-NH 4Cl Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀裂解。
3、离心,弃红色上清。
如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入细胞5倍细胞沉淀体积的Tris-NH 4Cl Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀裂解。
3、加入1PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀。
4、离心5min ,弃红色上清,本离心步骤亦可在室温下操作。
5、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2~4各一次。
(三)血液样本的常规操作1、取新鲜抗凝血,离心,弃上清。
Y-Tec 红细胞裂解液说明书
上海七纯生物科技有限公司网址:产品说明书品名:Y-Tec 红细胞裂解液货号:YLC0500规格:500ml ➽产品特色:●本裂解液经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞;●本裂解液的主要有效成分为氯化铵;●本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。
;➽操作步骤:对于组织细胞样品:1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入3-5ml 的红细胞裂解液。
本步骤在室温或4度操作均可。
3.400-500g 离心5分钟,弃红色上清。
4ºC 离心效果更佳。
4.如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5.洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g 离心2-3分钟,弃上清。
可再重复1次,共洗涤1-2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
4ºC 离心效果更佳。
6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品(无洗涤):1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2.对于0.2ml 细胞沉淀加入1ml 红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
本步骤在室温或4ºC 操作均可。
3.加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。
4.400-500g 离心5分钟,弃红色上清。
4ºC 离心效果更佳。
5.如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
上海七纯生物科技有限公司网址: 说明:对于常规步骤,多一步洗涤过程中的离心,但可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好一些,同时不需要大体积的离心管。
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货号:R1010
规格:100ml /500ml
保存:2-8℃保存,保质期 2 年。常温运输。
产品简介:
红细胞裂解液是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细
胞的。
红细胞裂解液经无菌处理,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离
其余同上。)
注意事项:
本裂解液为无菌产品,分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关产品: D8210 DEPC P1020 1×PBS,PH7.2-7.4,0.01M H1020 Hanks,含钙镁,含酚红 31800 RPMI Medium 1640 T1300 胰蛋白酶-EDTA 消化液(0.25%)不含酚红 P1400 青链霉素混合液(100×) D1800 全血基因组 DNA 提取试剂盒 G1010 姬姆萨染色液(工作液)
纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。
使用说明:
1. 1 倍体积的新鲜全血,加入 3 倍体积的红细胞裂解液。如 1ml 新鲜全血加入 3ml 红细胞
裂解液,轻轻涡旋或颠倒混匀。
2. 冰上放置 15 分钟,其间轻轻涡旋混匀两次,红细胞裂解后,溶液应该是清亮透明的。
3. 收集细胞:4℃,450×g 离心 10 分钟以沉淀白细胞,小心吸弃上清液。
4. 向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液,轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液
为 1ml,则加入 2ml 的红细胞裂解液。
பைடு நூலகம்
5. 4℃,450×g 离心 10 分钟沉淀白细胞,小心并彻底吸去上清液。
6. 重悬细胞,用于后续实验;如提取 RNA,最好于此步开始使用 DEPC 水配制的溶液进行操
作。
(组织细胞处理:新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液,