采用Ⅳ 型胶原酶构建大鼠脑出血模型
不同剂量胶原酶Ⅳ尾壳核内注射建立重度出血性脑卒中大鼠模型
第３ ８卷 第 ４期
２０ ０ ８年 ７月
温
州
医
学
院
学
报
Ｖ０ ３ ８ ＮＯ． ｌ ４ Ｊ １２ ０ ｕ ．０ ８
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｅ ｈｏ ｅ ｃ ｌＣｏ ｌ ｇ ｏ ｒ ａ ｆ Ｗ ｎｚ ｕ Ｍ ｄｉ ａ ｌｅ ｅ
融
不同剂量胶原酶 Ｉ 尾壳核 内注射建立重度ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ血性 Ｖ
脑卒 中 大 鼠模 型
王 振 忠 ， 诸 葛 启 钏
（ 温州医学院第一附属医院 神经外科 ，浙江 温州 ３ ５ ０ ） ２ ０ ０
霸
［ 要］ 目的 ： 摘 通过胶原酶 Ｉ尾壳核内注射 ， 索建立一种稳定的重度 出 Ｖ 探 血性脑卒 中大鼠 模型。方法 ：４ ５
ｒ ｄ ｍ ｙ ｄ ｖ ｄ ｄ ｉ ｔ ｒ ｕ ，ｇ ｏ ｐ Ｂ ａ ｄ ｇ ｏ ｐ Ｃ ｎ ｍ ｌ ｎ ３ ｇ ｏ ｐ ｅ ｅ ｖ ｄ ｉ ｊ ｃ ｉ ｎ ｏ ｏ ｌ ｇ ｎ ｓ ｎ ａ ｏ ｌ ｉ ｉ ｅ ｎ ｏ ｇ ｏ ｐ Ａ ｒ ｕ ｒ ｕ ．Ａ ｉ ａ ｓ ｉ ｕ ｓ ｒ ｃ ｉ ｅ ｎ ｅ ｔ ｏ ｆ ｃ ｌ ａ ｅ ａ ｅ ｎ ｒ
Ａ 、 组 间作 两 两比较 差 异均 有显 著性 （ ＜ ．１ 。脑血 肿 区组 织病 理 学观 察表现 为典型 的脑 出血 改 变。 、Ｂ Ｃ ３ Ｐ Ｏ０ ）
结论：０ ７ Ｖ型胶原酶尾壳核 内注射可以诱导建立稳定的重度 出血性脑卒中大鼠模型，该模型肢体 功 ．５ Ｕ Ｉ
能缺损 明显 ， 存活 率 高 ，能作 为促进 出血性 脑 卒 中大 鼠神经 功 能 恢 复研 究 的可 靠应 用平 台。
［ 关键词］ 胶原酶类；脑血 管意外；模型 ，动物 ［ 中图分类号］ Ｒ ４ ．４ ［ ７３３ 文献标识码］ Ａ ［ 文章编号］ １０— １８ ２０ ）４０ １—３ ００２３（０８ ０— ３４０
两种脑出血动物模型的制备和比较研究
两种脑出血动物模型的制备和比较研究魏纯纯;王培;缪朝玉【摘要】目的本研究制备两种脑出血动物模型:脑缺血后使用tPA诱导的出血转化模型(MCAO-HT)及胶原酶注射诱导的脑出血模型(clCH),并比较两种出血模型的异同及可能的优缺点.方法 MCAO-HT模型:栓线经颈内动脉入颅,堵塞大脑中动脉,构建线栓法大脑中动脉堵塞模型,堵塞后5h静脉注射组织型纤溶酶原激活剂(tPA,10mg/kg)制备脑缺血后出血转化模型;cICH模型:利用脑立体定位技术,直接向纹状体注射0.05U胶原酶Ⅳ,诱导脑出血模型.结果 MCAO-HT模型小鼠较MCAO模型小鼠,24h患侧半脑血红蛋白含量显著升高,MCAO-HT模型小鼠血-脑脊液屏障(BBB)通透性显著高于MCAO模型小鼠;cICH模型小鼠,较假手术组小鼠,24h神经功能损伤、脑水肿、出血量和炎性水平都有显著升高.结论 MCAO-HT 模型引起的出血为tPA诱导BBB通透性增加,导致的“渗血”,可能更适用于对血-脑脊液屏障及血管通透性的研究.而clCH模型引起的出血为胶原酶直接破坏小血管壁导致的“漏血”,可能更适用于出血诱导的水肿、炎性反应、细胞死亡和氧化应激的研究.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2016(045)011【总页数】6页(P39-44)【关键词】脑缺血;出血转化;脑出血;动物模型【作者】魏纯纯;王培;缪朝玉【作者单位】200433 上海,中国人民解放军第二军医大学药理学教研室;200433 上海,中国人民解放军第二军医大学药理学教研室;200433 上海,中国人民解放军第二军医大学药理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R96脑卒中是脑血液循环障碍引起的急性脑血管病，因为循环障碍的原因不同主要分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中，也分别称为脑缺血和脑出血(intracerebral hemorrhage，ICH)。
缺血性脑卒中约占全部卒中的80%，是由各种原因引起的局部脑组织供血障碍，导致缺血缺氧性的脑组织病变坏死，进而造成一系列的神经功能损伤。
米诺环素对大鼠脑出血后bFGF表达的影响
米 诺 环 素 对 大 鼠脑 出血 后 ｂ Ｇ Ｆ Ｆ表 达 的 影 响
王 睿智 ，师 蔚 ，濮瑶楠 ，王子章。
（ ． 安 交 通 大 学 医学 院第 二 附 属 医 院神 经 外 科 ， １西 陕西 西 安 ７ ０ ０ ；． 西省 肿 瘤 医 院 头颈 外 科 ， 西 西 安 ７ ０ ６ ） １０４２陕 陕 １ ０ １
【 要】 目的 摘
研 究 米诺 环 素 （ ＭＣ） 实验 性 脑 出血 后 碱 性 成 纤 维 细胞 生长 因子 （ Ｆ ） 达 的 影 响 。方 法 选 用 对 ｂ ＧＦ 表 ｉ ）Ｉ ０ ，ＣＨ 组 、 ＭＣ组 随机 分 为 １ ２ ４ ７和 、、、
ｓａ ｇｏ ｐ（ ｈ ｍ ｒ ｕ 一 １ ０，ｗｉｈ ４ ｄ ｙ ｆｅ ｄ ｌ ｇａ ｈ ｅ ｅ ａ ｏ ｔ ｏ ｏ ｎ ，ｎ ５ｆ ｒｉ ｔ ａ ｓａ ｔ ｒｍｏ ｅ ｉ ｓｔ ｅ ｇ ｎ ｒ ｌ ｎ ｒ ｌｐ ｉ ｔ ＝ ｏ ｍｍｕ ｏ ｉｔ ｃ ｅ ｓ ｒ ｎ ： ５ｆ ｒ ｎ ｃ ｎ ｈ ｓ ｏ ｈ ｍｉｔ ｙａ ｄ ｏ ＲＴ— ＰＣＲ） ．Ｔｈ ｎ ＣＨ ｏ ｔ ｏ ｒ ｕ ｎ ｅ ，Ｉ ｃ ｎ ｒ ｌｇ ｏ ｐ ａ ｄ ＭＣ ｒ ａ ｍｅ ｔｇ ｏ ｐ ｗｅ ｅｒ ｎ ｏ ｙ ｓ ｂ ｉ ｉ ｅ ｎ ｏ ５ ｓ ｂ ｒ ｕ ｓ （ ｄ，２ ｔ ｅ ｔ ｎ ｒ ｕ ｒ ａ ｄ ｍｌ ｕ ｄ ｖ ｄ ｄ ｉｔ ｕ ｇ ｏ ｐ １ ｄ，４ ｄ，
１ ０ ｍａ ｅＳ ｒ ｔ ２ ０ ２ ０ ） ｗｅ ｅ ｒ ｎ ｏ ｙ ｄ ｖｄ ｄ ｉ ｔ ＣＨ ｏ ｔｏ ｒ ｕ （ ＝ ５ ） １ ｌ Ｄ ａ ｓ（ ０ — ５ ｇ ｒ ａ ｄ ｍｌ ｉ ｉ ｅ ｎ ｏ Ｉ ｃ ｎｒ ｌ ｏ ｐ ｎ ｇ ０ ，Ｍ Ｃ ｔ ｅ ｔ ｎ ｒ ｕ （ ｒ ａ ｍｅ ｔｇ ｏ ｐ ： ５ ）ａ ｄ ０ ｎ
胶原酶和自体血注入法建立脑出血动物模型的比较
Ｃｏ ｐ ｒｓ ｎ ｏ ｎ ｒ ｃ ｒ ｂ ａ ｅ ｒ ｈ ｇ ｎｉ ａ ｏ ｅ ｓｅ ｔ ｂ ｉｈｅ ｍ ａ ｉｏ ｆ ｉ ｔ ａ ｅ ｅ ｒ ｌｈ ｍｏ ｒ ａ ｅ ａ ｍ ｌｍ ｄ ｌ ｓａ ｌｓ ｄ
ｂ ｊｃｉｇｃ ｌ ｇｎ ｓ ｎ ｕｏｏ ｏ ｓｂｏ ｄ ｙｉ ｅｔ ｏｌ ｅ ａｅａ ｄａ ｔｌ ｕ ｌｏ ｎ ｎ ａ ｇ
４０１） ０ ０ ６
伍修 宇
（ 重庆 医科大学神经科学研究 中心 ， 重庆
摘要
目的： 为脑 出血发病机制和／ 或干预性状核 建立脑
出血 （ Ｈ） Ｉ 模型 ， Ｃ 运用磁共振成像（ Ｉ、 ＭＲ ）干湿重法 、 伊文思蓝（ Ｂ 测定法 、 Ｅ） 免疫荧 光和免疫 印迹分别 比较两组脑 出血模型 的 血肿体积 、 脑含水量 （ＷＣ 、 Ｂ ）血脑屏 障 （ Ｂ ） 透性 和水通 道蛋 白 ４ ＡＱ ４ 的表 达变 化。结果 ： Ｂ Ｂ通 （ Ｐ） 两组 脑 出血模 型在 ＭＲ 、 Ｉ Ｂ 、 Ｂ含量和 Ａ ４的表达变化均存在差异。结论 ： ＷＣ Ｅ ＱＰ 自体血模型是较为接近临床的脑 出血动物模型 。 关键词 脑出血 ；动物模型 ； 胶原酶 ；自体血 ； 水通道蛋白 ４ 大 鼠 ；
采用胶原酶加肝素构建大鼠脑出血致多器官功能障碍综合征模型
＋肝 素钠 组 缓 慢 注入 Ⅶ 型胶 原 酶 ６６ ８ｎ ａ 和 ３ Ｕ ． ｋｔ ６ ． Ｉ ５
Ｏ 引 言
肝 素钠 混 合液 ２ Ｌ Ⅶ 型胶 原酶 １ ．３ ｋ ｔ 肝素 钠 ； ３３ ６ｎ ａ ＋ 组 注 入 Ⅶ 型 胶 原酶 １．３ ｋ ｔ ３５Ｉ 肝 素钠 混 合 ３３ ６ｎ ａ 和 ． Ｕ 液 ２ Ｌ 留针 １ ｉ ， ０ｍ ｎ后缓 慢退 出。假手 术组 注射 等体
１ 材 料和方 法 设计 ： 随机对 照实 验 。 单位： 山东大 学齐 鲁 医院神经 内科 。 材 料 ： 验 于 ２ ０ 一 １２ ｏ — ２在 山东 省 医学 科 实 ０ ３ ｌ／ ０ ４ ０
意识 、 精神 状态 、 肢体 活动 等情 况 。 动 物麻 醉后 ， 录 将 记
各时相 点 动物 的体 温 、 吸 、 率改 变 。 呼 心 常规 消毒 皮肤 ， 颈 静 脉抽 血 ５ ｍ ， 于 化 验 血 常 规 、 肾功 能 、 肌 Ｌ用 肝 心
酶 。 开胸 暴露 心 脏 从 左 心 室 经 升 主 动 脉 插 管 ，先 以 ２ ０ｍ ０ Ｌ生 理盐水 快速 灌注 ， 以质 量浓 度为 ４ ／ 后 ０ｇＬ的
多聚 甲醛 ２ ０ｍＬ缓慢 灌 注 ， ０ 注毕 立 即取 脑 置于 ４ ／ ０ｇ Ｌ 的多 聚 甲醛 溶液 内固定 。 同时 迅速取 肺脏 、 脏 、 肝 肾脏 、 小肠 ， 察 大体 标本 的形 态 变 化 ， 于 ４ ／ 观 置 ０ｇ Ｌ的 中性
升高（ Ｐ（０Ｏ ） 且 Ⅶ型 胶 原 酶 ｌ ． ６ ｎ ａ ＋ 肝 素钠 组 各指 标 升高 幅 度 ．１ ， ３３ ｋ ｔ ３
动 物模 型 的建 及给 药 ： 除正 常对照组 外 ， 其余 组
均 造模 ～调 整 肭立 体 定 向仪 ， 门齿 钩平 面 比耳 问线 使 平 面 低 ２４ ｍｌ 将 大 鼠俯 卧 ［ 定 在立 体 定 向仪 上 ， ． ｉ， ｌ 舌 １ 此 时前 囟 和后 肉基 本 在 同 一平 面 ． ］ Ｅ 。常规 消 毒 头顶 皮 肤 ， 矢 状缝 切 开 头 皮 ， 沿 暴露 前 囟 及冠状 缝 ， 于前 囟前 ０２ｍｍ，中线 右侧 旁 开 ３Ｉｍ，用 牙科 钻 钻 一 直径 约 ． ｌ Ｙ １ ｍ 的 圆孔 ， 度 达 硬 脑 膜 表 面 ， 伤 及 脑 组 织 。 ．ｍ ５ 深 不 在 立 体 定 向仪 的引 导 下 ， 微 量 注射 器 （ 头 直 径 约 用 针
地塞米松对高血压脑出血大鼠模型水通道蛋白4表达的影响
地塞米松对高血压脑出血大鼠模型水通道蛋白4表达的影响（2.陕西省人民医院陕西西安 710068）【摘要】目的：观察地塞米松对高血压脑出血大鼠模型脑组织水通道蛋白-4表达的影响。
方法：将60只成年健康雄性SD大鼠均用胶原酶诱导脑出血，并随机分为2组，无干预组（n=30）、地塞米松干预组（n=30），并按时间分成6h、12h、1d、3d、5d、7d 6个亚组（n=5）。
分别检测各组大鼠脑水含量和脑组织AQP4表达。
结果：与无干预组相比较：1.地塞米松干预组大鼠脑组织含水量在1、3、5d时间点显著低降低（P<0.05）；2.AQP4表达水平减弱，尤其是在3d时间点（P<0.05）。
结论：（1）地塞米松能减少胶原酶诱导的脑出血模型大鼠脑组织水含量；（2）地塞米松可以降低胶原酶诱导的脑出血模型大鼠脑组织AQP4表达水平。
【关键词】高血压；脑出血；地塞米松；水通道蛋白-4【中图分类号】R459 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）6-0779-021 前言近年来有许多研究发现，高血压脑出血（Hypertensive intracerebral hemorrhage，HICH) 与在脑内高度表达的水通道蛋白-4（AQP4）关系密切[1]。
本实验通过建立胶原酶诱导的大鼠脑出血模型，评估应用地塞米松（DEX）后，血肿周围水肿区脑组织含水量的变化及AQP4表达的变化，并探讨水通道蛋白-4与脑水肿的相关性。
2 材料和方法2.1动物和药品SD健康雄性大鼠60只，体重220-250g，标准颗粒喂养和饮用纯净水，由大连医科大学动物实验中心提供。
大鼠随机分为2组：胶原酶诱导脑出血组（n=30）、脑出血后地塞米松干预组（n=30）。
其中胶原酶诱导脑出血组和脑出血后地塞米松干预组按造模后6h、12h、1d、3d、5d、7d时间点分成6个亚组（n=5）。
从实验开始到结束，饲养室温度始终保持20-25℃和湿度恒定。
t细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3在脑出血大鼠模型血肿周围组织中的表达
临床医药文献电子杂志Electronic Journal of Clinical Medical Literature 2020年第 7 卷第 8 期2020 Vol.7 No.889 T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3在脑出血大鼠模型血肿周围组织中的表达王光进（招远市人民医院外一科，山东烟台 265400）【摘要】目的 目前对T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（TIM-3）的研究主要倾向于其免疫介导作用，在脑出血领域研究不多。
同样作为一种炎性指标，本文重在研究其在脑出血大鼠模型血肿周围组织中的表达，探讨TIM-3在脑出血损伤中的价值，减少脑出血二次损伤造成的病情加重，并为脑出血免疫治疗提供依据。
方法 大鼠脑出血模型的建立依靠Ⅳ型胶原酶，分为脑出血≤6 h组（1组）、6～24 h组（2组）、24～72 h组（3组）和＞72 ｈ组（4组），每组10只，另外选取正常脑组织10例作为对照组（5组），灌注取脑后，逆转录聚合酶链反应法检测T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3 mRNA的表达。
用SPSS 11.0及Excel软件进行统计处理。
采用方差分析和t检验进行分析。
结果 1-4为不同脑出血时间实验组TIM-3基因扩增产物，5为对照组TIM-3基因扩增产物。
TIM-3基因扩增产物为558bp，β-action扩增产物为299bp。
图像分析仪测琼脂糖凝胶上TIM-3/β-action扩增产物的平均灰度，1-5其基因表达量与其对应的β-action表达量的比值分别0.30±0.07、0.45±0.13、0.67±0.12、0.53±0.16、0.26±0.12。
与对照组相比，1组血肿周围组织TIM-3的表达差异无统计学意义（P＞0.05），其他组血肿周围组织中TIM-3的表达提示差异有统计学意义（P＜0.05）。
3组血肿周围组织中TIM-3的表达显著高于其他各实验组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。
脑出血动物模型研究进展
脑出血动物模型研究进展段晓春王中陈罡【摘要】本综述为了深入研究脑出血的病理生理过程，对目前用来开展科学研究的常用脑出血模型，包括胶原酶注射脑出血模型，自体血注入脑出血模型，微球囊充盈脑出血模型，高血压性脑出血模型进行了总结。
在本文中笔者将详细探讨狗、兔子、猪等不同动物模型制作方法、病理生理机制以及在研究中的优点和缺点。
【关键词】脑出血；动物模型；研究进展The research progress of animal model of cerebral hemorrhage Duan Xiaochun,Wang Zhong, Chen Gang.The Department of Neurosurgery,The First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou215006,ChinaCorresponding author:Chen Gang,Email:nju_neurosurgery@【Abstract】For the reason to study the procedure of pathophysiology of cerebral hemorrhage, this review has summarized the models currently used in cerebral hemorrhage scientific research including cerebral hemorrhage model by injection of collagenase,by injection of autologous blood,by filling microsphere and by hypertensive.In this paper,the author will discuss in detail the making method of different animal model such as dog,rabbit,pig,etc.and pathophysiological mechanism and advantages and disadvantages in the research work.【Key words】Cerebral hemorrhage;Animal model;Research progress脑出血是一种致残率和致死率极高的疾病，占所有中风病例的15%[1]。
采用IV型胶原酶建立小鼠脑出血模型
采用IV型胶原酶建立小鼠脑出血模型谭敬;肖新莉;陈新林;徐曦;高燕凤;刘勇【摘要】目的：用脑内注射胶原酶方法建立小鼠脑出血模型。
方法：在动物脑立体定位仪下将不同剂量Ⅳ型胶原酶0．5μl 注射到昆明小鼠左侧纹状体处，分别在术后24 h对小鼠运动功能进行检测，并对出血部位脑组织进行尼氏染色，光镜观察染色结果来验证模型制作是否成功。
结果：术后小鼠即表现右侧肢体运动功能障碍。
形态学观察证实左侧纹状体内血肿形成，且在一定范围内，出血灶大小与肢体偏瘫症状发展过程基本一致。
不同个体间相同单位的胶原酶出现的血肿体积和部位基本一致。
结论：应用Ⅳ型胶原酶脑内注射方法建立的小鼠脑出血模型，是一种方法简单，效果可靠，易于大批量制作的动物模型。
脑内注射0．02U 的IV型胶原酶制备的脑出血模型能较好满足实验要求。
%Objective:To establish a typical mouse model of intracerebral hemorrhage (ICH) .Methods :Intracerebral hemorrhage in mice were generated by stereotaxically injecting different dose of collagenase type Ⅳ into the left corpus striatum .Every mouse received a volume of 0 .05μl collagenase type Ⅳ .Neurological scores were as-sessed and recorded 24 hours after injection .After behavioral testing the brains were processed for routine histologi-cal examination .Light microscope observation to determine if the animal model was successful .Results:Mice showed the motor dysfunction afteroperation .Morphology confirmed that the hematoma formed at the left corpus striatum ,and within a certain range ,the size of hemorrhage and the development of symptoms of hemiplegia was re-lated .Different individuals of the same unit of collagenase type Ⅳmaking the volume andlocation of hematoma was same .Conclusion :Intracerebral hemorrhage can be induced in mouse by injecting collagenase type Ⅳ into the corpus striatum of the brain .This is a useful economical and reproducible method to make intracerebral hemorrhage .ICH model was made by intracerebral injection of 0 .02U type IV collagenase can meet our experimental requirements .【期刊名称】《陕西医学杂志》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】4页(P522-525)【关键词】脑出血/化学诱导;脑出血/病理学;胶原酶;模型 ,动物;小鼠【作者】谭敬;肖新莉;陈新林;徐曦;高燕凤;刘勇【作者单位】西安交通大学医学院神经生物学研究所·环境与疾病相关基因教育部重点实验室西安710061; 西安交通大学医学院第一附属医院麻醉科;西安交通大学医学院神经生物学研究所·环境与疾病相关基因教育部重点实验室西安710061; 西安交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学系;西安交通大学医学院神经生物学研究所·环境与疾病相关基因教育部重点实验室西安710061; 西安交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学系;西安交通大学医学院神经生物学研究所·环境与疾病相关基因教育部重点实验室西安710061; 西安医学院解剖教研室;西安交通大学医学院神经生物学研究所·环境与疾病相关基因教育部重点实验室西安710061; 西安交通大学医学院第一附属医院麻醉科;西安交通大学医学院神经生物学研究所·环境与疾病相关基因教育部重点实验室西安710061【正文语种】中文【中图分类】R322.81脑出血是临床上常见的神经系统疾病，病死率及致残率均较高。
采用Ⅳ 型胶原酶构建大鼠脑出血模型
按注射药 物溶 液容 积 不 同又 分 为 ３个 小 组 。每组 分 为术 后 ６ ｈ １ 、 、 ， 共 ５个时相点 ， 时相 点动物 ６只。各组 间 、２ｈ２ ｈ３ｄ ７ｄ ４ 每 动物体重 无显著差异 。 １２２ 动物模型 的建立 ．．
使用 Ⅳ型胶原 酶建 立脑 出血 模型
ｎ ｉ ｅ ｎ ｉ ｆ ｍ ｔ ａｉ ｉ ｃｒ ａｏ ｉ ｏ ｍ ｆ ｕ ｏ ｊ ｔ ｔ ｈ ｂａ ａｄｒｌ ｌ，ａｄｔｅｓｅｏ ｅ ａ ｍ ｏｒｌｉｎｗｔ ｔｅｖｌ ｅｏ ｓｌ ｉ ｓ ｎ ｃ ｄｉ ｏｔ ｒｉ． ｅａ ｂ ｈ ｚ ｈ ｏ ｓｎ ｅｔ ｈｈ ｕ ｔｎ ｉｅ ｅ ｎ ｅ ｏ ｎ
文章编 号 ： ０ — Ｏ （０２ １— ９ － １ ０５ ４２Ｏ ）２１ ４ ２ ０ ４ ３ ０
采 用 Ⅳ 型 胶 原 酶 构 建 大 鼠脑 出血 模 型
张艳玲 陈康 宁 邵淑 琴 王 英 （ ， ， ， 第三军医大学： 附属西南医院神经内科； 基础医学部病原生物学教研室 ， 重庆 ４０３） ００８
Ⅳ型胶原酶 ０ ２Ｕ及肝 素 ２Ｕ 。对 照组 （ ｏｔ １颅 内注 射生理 ． ） Ｃ ｎｏ） ｒ 盐水 ２０ ， ． Ⅳ型 胶原 酶组 （ ｏａｅａｅ 注 射 Ⅳ胶原 酶， 理 盐 Ｃｌ ｎ ） ｌ ｓ ｇ 生 水 溶液 ２０ （ １ 含 Ⅳ型胶原酶 ０２ Ｕ 。 ． 每 ． ） １２ ３ 标本 的取材和制备 ．． 术后在 相应 时相 点过 量 乙醚麻 醉动物 ， 速开胸暴露心脏 ， 迅 从左心 室插管 至主 动脉根部 ， 右 在
Ｚ ＡＮ ａ—ｎ ，Ｃ Ｅ ６ —ｉｇ Ｈ Ｏ Ｓ ｕｑｎ Ｈ ＧＹ ｎｌｇ Ｈ Ｎ Ｉ ｉ ｍｇｎｎ ，Ｓ Ａ ｈ—ｉ，ＷＡ Ｇ Ｙｎ （ ｅａｍ ｎ ｏ Ｎｕ ｌｙ Ｓｕ ｗｓ Ｈｓｉｌ ｈｄＭｌ ｒ Ｍｄ ａ Ｕｉ ｒｔ Ｎ ｉ ｇ Ｄｐｒ ｅｔ ｆ ｅ ｏ ｇ， ｏｔ ｅ ｏ ｔ，Ｔｉ ｉａ ｅｉ ｌ ｎｅ ｉ ｔ ｒｏ ｈ ｔ ｐａ ｒ ｉｙ ｔ ｃ ｖ ｓｙ
脑出血大鼠锥体束显微和超微结构改变
Ｎ ｕ ｓｒ ｒ， ｕ ｏｇＧｎｒ ｏ ｉｌｆＮ ｎｎ ｌ ｒ ｏ ｍ Ｍ Ｉ Ｆｚｏ ５ ２ ， ｈ ａ ｅｒ ｕ ｅ Ｆｚ ｎ ｅ ａ Ｈ ｓｔ ａｊ ｇＭｉａｙＣｍ ａ ｏ Ａ， ｕ ｕ３０ ５ Ｃ ｉ ｏ ｇ） ｈ ｅ ｌ ｐａ ｏ ｉ ｉ ｔ ｆＰ ｈ ．０ ｎ
Ａ ｓ ａｔ Ｏ ｊｃｖ Ｔ ｔ ｙｔ ｈｎｅ ａｄｐｔ ｌ ｉ ｌｅｔ ｅ ｏ ｙ ｍｄｌｔ ｃ ａ ｅ ｉｒｃｒ ｒ ｂｔ ｃ ｒ ｂｅｔ ｅ ｏｓ ｄ ｅｃａｇｓ ｎ ａ ｏ ｇ ａ ｆ ｕ ｓ ｆ ｒ ｉ ａｔ ｆｒ ｎ ａｅｅ ａ ｉ ｕ ｈ ｈｏ ｃ ａｒ ｐ ａ ａ ｒ ｔ ｔ ｂｌ ｈｍ ｒ ａｅｉ ｒ ｏｅ Ｍｅ ｏｓ ｙｅ１ ｌｇｎ ｅ ｄｈｐｒ ｅ ｊ ｔ ｅ ａｄｔ ｎｃ ｕ ｏ ｒｓｔ ｅ ｏ ｈｇ ｔ ｄ１ ｔ ｄ Ｔ ｐ ｃ ｌ ｅａ ｅａｉ ｗｒ ｉｅ ｅ ｔ ｔ ｕａ ｕｌ ｓ ｆａ ｒ ｎ ａｍ ． ｈ Ｖ ｏａ ｓ ａ ｎ ｎ ｅｎ ｃｄ ｏｈ ｃ ｅ ｅ ｔ ｏ
Ｏ ｌｌ ｅ ｆｍｉｒ ｓｒ ｃｕ ｅａ ｉ ｔａ ｔｕ ｔ ｒ ｆ ｙ ａｒ ｄ ｔａ ｔ ｆｅ ｎ ｒ ｃ ｒ ｂ ａ ｅ ｒ ｈ ｇ ｎ ｒ ｔ ｄ ｌ ａ， ｓｏ ｇ ｃ ｏ ｔｕ ｔ ｒ ｒ ｕ ｒ ｓｒ ｃｕ ｅ ０ ｐ ｒ ｒ ￣ ｒ ｃ ｔｒｉ ｔａ ｅ ｅ ｒ ｌ ｍｏ ｒ ａ ｅｉ ａ ｄｌ ／ ａ ｈ ｍｏ ｅ
注射用胶原酶-肝素诱导大鼠脑出血模型研究
注射用胶原酶-肝素诱导大鼠脑出血模型研究廖群纷;王向东;何敏【期刊名称】《现代医药卫生》【年(卷),期】2008(024)014【摘要】目的:探讨注射用胶原酶-肝素诱导建立大鼠脑出血模型的可行性和特点.方法:应用生理盐水配制注射用胶原酶和肝素混合液(每微升含胶原酶0.25U、肝素1.25U),将此混合液3μl定位注射至大鼠右侧尾状核,对照组注射等量生理盐水,分别观察大鼠术后6、24、48、72、96 h和6 d的神经行为学评分、血肿体积、组织病理变化.结果:对照组大鼠未见明显的神经功能缺损和脑血肿形成,而注射用胶原酶-肝素注射组大鼠出现不同程度的神经功能缺损,以脑出血24 h组最重(P<0.05);血肿体积于术后24 h达到高峰,48 h后开始缩小,6 d时部分吸收,且组织病理学观察也表现为典型的脑出血改变.结论:注射用胶原酶-肝素注射可以诱导建立稳定理想的大鼠脑出血模型,重复性好、成功率高、价格低廉、易于获得,值得推广应用.【总页数】3页(P2066-2068)【作者】廖群纷;王向东;何敏【作者单位】四川省科学城医院内科,四川,绵阳,621900【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.Ⅰ型胶原酶-肝素诱导的大鼠脑出血后的血液流变学变化 [J], 曹勇军;陈孝东;王引明;刘春风2.Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型研究 [J], 倪厚杰;刘娜;陈娟;刘永明;张誉;杨二方;唐洲平3.Ⅰ型胶原酶-肝素诱导的大鼠脑出血模型研究 [J], 曹勇军;陈孝东;王引明;刘春风4.注射用阿魏酸钠对胶原酶致大鼠脑出血模型的治疗作用及机制研究 [J], 孙余明;楼建涛;黄光祥;孙军5.胶原酶Ⅳ肝素生理盐水立体定向注入尾状核建立脑出血大鼠模型 [J], 李中秋;陆兵勋;吕田明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
田蓟苷调节AMPK
田蓟苷调节AMPK/SIRT1/PGC1α信号通路对脑出血大鼠认知功能和神经元损伤的影响罗聪1,钟崛2,邓敏敏2,肖潇2,黄丹霞2,范慧2,王盼2摘要目的:探讨田蓟苷(TIL)对脑出血(ICH)大鼠认知功能㊁神经元损伤及腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/沉默调节蛋白1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子1α(PGC1α)信号通路的影响㊂方法:采用Ⅳ型胶原酶注射法构建ICH大鼠模型,将造模成功的ICH大鼠随机分为模型组(ICH组)㊁TIL组(16mg/kg)㊁AMPK抑制剂组(Compound C组,250μg/kg)㊁TIL+AMPK抑制剂组(TIL+Compound C组),另设假手术组(Sham组),每组12只㊂采用改良的Garcia JH法㊁Morris水迷宫实验和敞箱实验评价大鼠的神经功能和认知功能;苏木素-伊红(HE)和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法行脑组织病理学和神经元凋亡观察;蛋白质印迹法(Western Blot)检测AMPK/SIRT1/PGC1α通路蛋白表达㊂结果:与Sham组相比,ICH组大鼠脑组织出现细胞核皱缩㊁排列紊乱等损伤,神经功能评分㊁穿越平台次数㊁垂直活动得分和水平活动得分㊁磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK㊁SIRT1㊁PGC1α蛋白水平均明显下降(P<0.05),找寻平台时间㊁神经元凋亡率㊁半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)㊁B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)蛋白表达水平均明显增加(P<0.05);与ICH组相比,TIL组大鼠脑组织损伤减轻,神经功能评分㊁穿越平台次数㊁垂直活动得分和水平活动得分㊁p-AMPK/AMPK㊁SIRT1㊁PGC1α蛋白水平均明显增加(P<0.05),找寻平台时间㊁神经元凋亡率㊁Caspase-3㊁Bcl-2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);而Compound C组大鼠以上指标呈现相反的趋势㊂且TIL对ICH大鼠脑组织及认知功能的保护作用均被AMPK抑制剂Compound C减弱(P<0.05)㊂结论:TIL可能通过激活AMPK/SIRT1/PGC1α通路,改善ICH大鼠认知功能,减轻神经元损伤㊂关键词脑出血;田蓟苷;腺苷酸激活蛋白激酶/沉默调节蛋白1/过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子1α通路;认知功能;神经元;实验研究d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2024.02.012Influences of Tilianin on Cognitive Function and Neuronal Damage in Rats with Cerebral HemorrhageLUO Cong,ZHONG Jue,DENG Minmin,XIAO Xiao,HUANG Danxia,FAN Hui,WANG PanWuhan Sixth Hospital,Wuhan430015,Hubei,ChinaCorresponding Author ZHONG Jue,E-mail:********************Abstract Objective:To investigate the influences of tilianin(TIL)on cognitive function and neuronal damage in rats with intracerebral hemorrhage(ICH).Methods:The ICH rat model was established byⅣcollagenase injection.The successful modeling ICH rats were randomly dvided into model group(ICH group),TIL group(16mg/kg),AMP-activated protein kinase(AMPK)inhibitor group(Compound C group,250μg/kg),TIL+AMPK inhibitor group(TIL+Compound C group),and sham operation group(Sham group),with12rats in each group.The neurological and cognitive functions of rats were evaluated by modified Garcia JH method,Morris water maze test,and open-box test.The brain histopathology and neuronal apoptosis were observed by hematoxylin-eosin(HE)and Terminal-deoxynucleoitidyl Transferase Mediated Nick End Labeling(TUNEL)staining.The expression of AMPK/Sirtuin type1(SIRT1)/ peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator1α(PGC1α)pathway proteins was measured by Western Blot.Results: Compared with Sham group,nucleus shrinkage disordered arrangement and other damages was observed in the rat brain tissue,the neurological score,platform crossing times,vertical activity score,horizontal activity score,and phosphorylated AMPK(p-AMPK)/AMPK, SIRT1,PGC1αprotein levels decreased obviously(P<0.05),the searching platform time,neuron apoptosis rate,and Caspase-3,Bcl-2 protein levels of ICH group increased obviously(P<0.05).Compared with ICH group,the brain tissue damage of TIL group reduced, the neurological deficit score,platform crossing times,vertical activity score,horizontal activity score,and p-AMPK/AMPK,SIRT1,PGC1αprotein levels increased obviously(P<0.05),the searching platform time,neuron apoptosis rate,and Caspase-3,Bcl-2protein levels decreased obviously(P<0.05).The above indicators in Compound C group showed the opposite trends.The protective effects of TIL for brain tissue and cognitive function of ICH rats were attenuated by AMPK inhibitor Compound C(P<0.05).Conclusion:TIL may improve cognitive function and reduce neuronal damage in ICH rats by activating AMPK/SIRT1/PGC1αpathway. Keywords intracerebral hemorrhage;tilianin;AMP-activated protein kinase/Sirtuin type1/peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator1αpathway;cognitive function;neuron;experimental study脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)是以脑部自发性和非创伤性出血为特征的脑卒中类型,具有较高的发病率和死亡率[1]㊂目前,神经外科医生已采用各种医疗和手术方式来预防和治疗该疾病,然而成基金项目武汉市医学科研项目(No.WX21Q15)作者单位 1.武汉市第六医院(武汉430015);2.武汉市第三医院(武汉430061)通讯作者钟崛,E-mail:********************引用信息罗聪,钟崛,邓敏敏,等.田蓟苷调节AMPK/SIRT1/PGC1α信号通路对脑出血大鼠认知功能和神经元损伤的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志,2024,22(2):274-279.功率并不理想[2]㊂田蓟苷(Tilianin,TIL)是香青兰总黄酮中的主要活性成分,具有抗炎㊁抗氧化和抑制神经元凋亡等作用,已应用于对动脉粥样硬化的防治[3]㊂研究发现,TIL可能对脑缺血再灌注损伤具有保护作用[4]㊂而TIL是否对ICH大鼠也有一定治疗作用的研究较少㊂腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)是代谢功能的中心调节剂,包括脂质代谢和线粒体功能,AMPK通过其在苏氨酸172处的磷酸化而被激活,发挥神经保护作用[5]㊂报道称,激活AMPK/沉默调节蛋白1(SIRT1)通路可以在ICH病理过程中发挥神经保护作用[6]㊂因此,本研究构建ICH大鼠模型,观察TIL对ICH大鼠认知功能和神经元损伤的影响,并初步探究AMPK/SIRT1/过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子1α(PGC1α)通路在其中的作用㊂1材料与方法1.1实验动物无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠,体质量260~ 275g,7周龄,购自广东南模生物科技有限公司,动物许可证号SCXK(粤)2022-0062㊂本实验得到医院动物伦理委员会批准㊂1.2主要试剂及仪器TIL(货号:SND-1786),由滁州仕诺达生物科技有限公司生产;AMPK抑制剂Compound C(货号: HY-145432),购自MCE公司;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)神经元凋亡检测试剂盒(货号:FS-79507),购自上海抚生实业有限公司;AMPK(货号:ab32112)㊁磷酸化AMPK(p-AMPK) (货号:ab133448),购自美国abcam公司;SIRT1(货号:9475)㊁PGC1α(货号:ab544481)㊁半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)(货号:9661)㊁促凋亡基因(Bax)(货号: 2774),购自英国Biorbyt公司㊂荧光显微镜(货号:FMA-04),购自香港友诚生物科技有限公司;石蜡切片机(货号:S700/S700A),购自深圳市瑞沃德生命科技有限公司㊂1.3ICH模型的构建及分组ICH模型构建参照文献[7-8],通过将Ⅳ型胶原酶注射到大脑纹状体区来建立㊂假手术组(Sham组)手术过程同ICH模型,用生理盐水代替Ⅳ型胶原酶㊂共造模成功48只ICH大鼠㊂随机将造模成功的48只大鼠分为4个处理组,分别为模型组(ICH组)㊁TIL组㊁AMPK抑制剂组(Compound C组)㊁TIL+AMPK抑制剂组(TIL+Compound C组),每组12只㊂另设Sham 组12只㊂TIL组灌胃16mg/kg TIL,Compound C组尾静脉注射250μg/kg Compound C[9],ICH+TIL组在灌胃TIL前15min尾静脉注射250μg/kg Compound C, Sham组和ICH组给予等量的生理盐水,每日1次,连续7d㊂1.4神经功能评分末次灌胃TIL后,采用改良的Garcia JH法评价大鼠的神经功能㊂神经行为研究包括以下6项测试内容:自发活动㊁四肢运动的对称性㊁前爪伸展㊁攀爬㊁身体本体感觉和对触须触摸的反应㊂神经系统评分最低为3分,最高为18分,评分越低表明神经功能缺损越严重㊂1.5Morris水迷宫实验在1.4项完成后,进行Morris水迷宫实验㊂在水池里放1个平台,标上记号,记录大鼠从进入水池到找到平台所花费的时间,连续记录4d㊂完成后,撤去平台,记录大鼠120s内经过原平台的次数㊂1.6敞箱实验在1.5项完成后,将大鼠放入敞开的箱子内,以大鼠双脚离开底面直立次数为垂直活动得分,以大鼠3只脚跨入邻格的次数记为水平活动得分,测定10min 内两种得分情况㊂1.7标本采集在1.6项完成后,麻醉处死,每组取6只大鼠的出血部位脑组织固定于4%多聚甲醛中,剩余大鼠的出血部位脑组织储存于-80ħ㊂1.8脑组织病理学变化脑组织经4%多聚甲醛溶液固定后,脱水㊁包埋㊁切成5μm左右的石蜡切片,用苏木素-伊红(HE)染色后在光学显微镜下观察㊂1.9TUNEL法检测神经元凋亡情况按照TUNEL神经元凋亡检测试剂盒产品说明书进行㊂在荧光显微镜下观察脑神经元凋亡情况,凋亡神经元呈绿色荧光㊂1.10蛋白质印迹法(Western Blot)检测AMPK/SIRT1/ PGC1α蛋白表达用RIPA裂解缓冲液提取脑组织总蛋白,将蛋白质进行变性㊁定量㊁电泳㊁转膜,将膜室温封闭2h后分别加入一抗AMPK(1ʒ1000)㊁p-AMPK(1ʒ2000)㊁SIRT1(1ʒ2000)㊁p-SIRT1(1ʒ2000)㊁PGC1α(1ʒ1000)㊁Caspase-3(1ʒ1000)㊁Bcl-2(1ʒ1000)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体(1ʒ1000),4ħ孵育过夜,加入二抗,室温孵育2h,加入电化学发光(ECL)试剂检测蛋白质印迹㊂使用Image Lab TM软件分析目标蛋白的灰度值㊂1.11统计学处理采用SPSS25.0软件进行数据分析㊂符合正态分布的定量资料用均数ʃ标准差(xʃs)表示,多组间比较采用单因素方差分析,采用SNK-q检验进行两两比较㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1各组大鼠神经功能评分比较与Sham组相比,ICH组大鼠神经功能评分明显降低(P<0.05);与ICH组相比,TIL组大鼠神经功能评分明显升高(P<0.05),Compound C组大鼠神经功能评分明显降低(P<0.05);与TIL组相比,TIL+Compound C组大鼠神经功能评分明显降低(P<0.05)㊂详见表1㊂表1 各组大鼠神经功能评分比较(x ʃs )单位:分组别只数神经功能评分Sham 组1216.00ʃ0.00ICH 组1210.23ʃ0.16①TIL 组1214.98ʃ0.18②Compound C 组12 3.65ʃ0.09②TIL +Compound C 组1211.88ʃ0.14③注:ICH 组与Sham 组比较,①P <0.05;与ICH 组比较,②P <0.05;TIL +Compound C 组与TIL 组比较,③P <0.05㊂2.2 Morris 水迷宫实验结果与Sham 组相比,ICH 组大鼠找寻平台时间明显延长(P <0.05),穿越平台次数明显减少(P <0.05);与ICH 组相比,TIL 组大鼠找寻平台时间明显缩短(P <0.05),穿越平台次数明显增加(P <0.05),Compound C 组大鼠找寻平台时间明显延长(P <0.05),穿越平台次数明显减少(P <0.05);与TIL 组相比,TIL +Compound C 组大鼠找寻平台时间明显延长(P <0.05),穿越平台次数明显减少(P <0.05)㊂详见表2㊂表2 各组大鼠找寻平台时间及穿越平台次数比较(x ʃs )组别只数 找寻平台时间(s )第1天第2天第3天第4天穿越平台次数(次)Sham 组1265.91ʃ4.2959.91ʃ5.7747.89ʃ4.5336.43ʃ3.967.34ʃ0.49ICH 组1282.53ʃ8.86①75.23ʃ7.13①63.67ʃ6.21①51.54ʃ5.27① 4.76ʃ0.29①TIL 组1269.67ʃ6.35②60.67ʃ6.78②49.67ʃ4.34②38.67ʃ4.02② 6.65ʃ0.35②Compound C 组1294.32ʃ9.12②84.32ʃ8.35②76.67ʃ7.37②63.82ʃ6.78② 2.32ʃ0.16②TIL +Compound C 组1284.19ʃ8.46③76.12ʃ7.65③65.33ʃ6.64③52.76ʃ5.21③5.24ʃ0.23③注:ICH 组与Sham 组比较,①P <0.05;与ICH 组比较,②P <0.05;TIL +Compound C 组与TIL 组比较,③P <0.05㊂2.3 敞箱实验结果与Sham 组相比,ICH 组大鼠垂直活动得分和水平活动得分均明显降低(P <0.05);与ICH 组相比,TIL 组大鼠垂直活动得分和水平活动得分均明显升高(P <0.05),Compound C 组大鼠垂直活动得分和水平活动得分均明显降低(P <0.05);与TIL 组相比,TIL +Compound C 组大鼠垂直活动得分和水平活动得分均明显降低(P <0.05)㊂详见表3㊂2.4 HE 染色结果Sham 组大鼠脑组织结构清晰,细胞排列整齐,无异常现象;与Sham 组相比,ICH 组大鼠脑组织出现细胞核皱缩㊁细胞数量减少㊁排列紊乱等损伤;TIL 组细胞排列较ICH 整齐,脑组织结构趋于Sham 组;Compound C 组细胞排列最乱,脑组织损伤最重;TIL +Compound C 组细胞减少且排列紊乱,脑组织结构与ICH 组相似㊂详见图1㊂表3 各组大鼠敞箱实验评分比较(x ʃs )单位:分组别只数垂直活动得分水平活动得分Sham 组1219.00ʃ2.5663.00ʃ6.78ICH 组1210.23ʃ1.23①40.00ʃ4.60①TIL 组1217.98ʃ2.18②57.00ʃ5.32②Compound C 组12 5.65ʃ0.59②31.45ʃ3.87②TIL +Compound C 组1211.88ʃ1.14③42.34ʃ4.98③注:ICH 组与Sham 组比较,①P <0.05;与ICH 组比较,②P <0.05;TIL +Compound C 组与TIL 组比较,③P <0.05㊂图1 各组大鼠脑组织细胞病理变化(HE 染色,ˑ200)2.5 各组大鼠脑组织神经元凋亡情况比较与Sham 组相比,ICH 组脑组织神经元凋亡率明显升高(P <0.05);与ICH 组相比,TIL 组脑组织神经元凋亡率明显下降(P <0.05),Compound C 组脑组织神经元凋亡率明显升高(P <0.05);与TIL 组相比,TIL +Compound C 组脑组织神经元凋亡率明显升高(P <0.05)㊂详见图2㊁表4㊂图2TUNEL染色检测大鼠脑组织神经元凋亡(ˑ200)表4各组大鼠脑组织神经元凋亡率比较(xʃs)单位:%组别只数神经元凋亡率Sham组6 4.64ʃ0.43 ICH组635.23ʃ3.34①TIL组6 6.78ʃ1.07②Compound C组657.23ʃ5.67②TIL+Compound C组631.54ʃ3.90③注:ICH组与Sham组比较,①P<0.05;与ICH组比较,②P<0.05;TIL+Compound C组与TIL组比较,③P<0.05㊂2.6各组大鼠脑组织AMPK/SIRT1/PGC1α通路蛋白表达水平比较与Sham组相比,ICH组大鼠脑组织p-AMPK/ AMPK㊁SIRT1㊁PGC1α蛋白表达水平明显下降(P<0.05), Caspase-3㊁Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与ICH组相比,TIL组大鼠脑组织p-AMPK/AMPK㊁SIRT1㊁PGC1α蛋白表达水平明显升高(P<0.05), Caspase-3㊁Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05), Compound C组大鼠脑组织p-AMPK/AMPK㊁SIRT1㊁PGC1α蛋白表达水平明显下降(P<0.05),Caspase-3㊁Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与TIL 组相比,TIL+CompoundC组大鼠脑组织p-AMPK/AMPK㊁SIRT1㊁PGC1α蛋白表达水平明显下降(P<0.05), Caspase-3㊁Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)㊂详见图3㊁表5㊂图3Western Blot检测脑组织AMPK/SIRT1/PGC1α通路蛋白表达表5各组大鼠脑组织AMPK/SIRT1/PGC1α通路蛋白表达水平比较(xʃs)组别只数p-AMPK/AMPK SIRT1/GAPDH PGC1α/GAPDH Caspase-3/GAPDH Bax/GAPDH Sham组60.89ʃ0.10 1.65ʃ0.16 1.21ʃ0.13 1.42ʃ0.15 1.15ʃ0.11 ICH组60.30ʃ0.03①0.57ʃ0.08①0.82ʃ0.12① 2.36ʃ0.21① 2.13ʃ0.20①TIL组60.76ʃ0.14② 1.37ʃ0.15② 1.10ʃ0.11② 1.53ʃ0.15② 1.24ʃ0.11②Compound C组60.10ʃ0.01②0.30ʃ0.03②0.43ʃ0.05② 2.78ʃ0.26② 2.89ʃ0.28③TIL+Compound C组60.38ʃ0.05③0.64ʃ0.07③0.86ʃ0.08③ 2.27ʃ0.18③ 2.07ʃ0.19③注:ICH组与Sham组比较,①P<0.05;与ICH组比较,②P<0.05;TIL+Compound C组与TIL组比较,③P<0.05㊂3讨论ICH是预后最差的脑卒中类型[10]㊂58%的ICH 病人在1年内死亡,66.7%的幸存者处于中度甚至重度残疾状态[11-12]㊂因此,探究ICH的发病机制,可能为寻找ICH新药物提供方向㊂本研究通过注射Ⅳ型胶原酶构建ICH模型,发现ICH组大鼠脑组织出现细胞核皱缩㊁细胞排列紊乱等损伤,神经功能评分㊁穿越平台次数㊁垂直活动得分和水平活动得分明显降低,找寻平台时间明显延长,提示ICH模型构建成功㊂TIL 是香青兰总黄酮中含量最高的成分,可通过减轻脂质沉积和炎症反应,对动脉粥样硬化起到一定改善作用[13]㊂既往研究发现,TIL可以促进脑血管新生,对脑组织起到一定保护作用[4]㊂本研究结果显示,TIL可明显减轻ICH大鼠脑组织损伤,提高神经功能评分㊁穿越平台次数㊁垂直活动得分和水平活动得分,缩短大鼠找寻平台的时间,提示TIL可能减轻ICH大鼠脑损伤,并对其认知功能起到积极改善作用㊂神经元凋亡在ICH后继发性脑损伤的病理生理过程中起关键作用[14]㊂Caspase-3㊁Bcl-2等凋亡蛋白是细胞凋亡的关键效应物,可反映细胞凋亡程度㊂Huang等[15]研究发现,促进神经元凋亡会加重ICH损伤㊂Li等[16]研究发现,抑制神经元凋亡可以对ICH起到一定保护作用㊂本研究结果显示,ICH大鼠脑组织神经元凋亡率以及Caspase-3㊁Bcl-2蛋白表达水平明显升高,而TIL可以明显降低神经元凋亡率以及Caspase-3㊁Bcl-2蛋白表达水平,表明TIL可能对ICH 大鼠神经元损伤起到一定修复作用㊂AMPK作为细胞能量传感器,是调节生物能量代谢的关键分子,活化后可上调SIRT1㊁PGC1α的表达并增加其活性,进而在线粒体生物合成㊁能量代谢和氧化应激中发挥重要调节作用[17-18]㊂AMPK/SIRT1/ PGC1α通路的激活有利于维持神经元的氧化还原平衡,保护神经元氧化应激㊁衰老等诱导的凋亡[19]㊂Xu 等[20]研究发现,通过激活AMPK通路可以减轻蛛网膜下腔出血造成的大鼠脑损伤,改善神经功能受损情况㊂本研究结果显示,ICH组大鼠脑组织p-AMPK/AMPK㊁SIRT1㊁PGC1α水平明显下降,表明ICH大鼠可能通过调节AMPK/SIRT1/PGC1α信号通路加重认知功能障碍和神经元损伤;而TIL组p-AMPK/AMPK㊁SIRT1㊁PGC1α水平明显升高,表明TIL可能通过抑制AMPK/ SIRT1/PGC1α信号通路减轻认知功能障碍和神经元损伤㊂为了验证推测,本实验利用AMPK抑制剂Compound C进行干预,结果显示,与TIL组相比,TIL+ Compound C组大鼠认知功能变差,脑组织神经元凋亡率㊁Caspase-3㊁Bcl-2蛋白表达水平均明显增加, p-AMPK/AMPK㊁SIRT1㊁PGC1α蛋白表达水平均明显下降,进一步证实TIL可能通过抑制AMPK/SIRT1/ PGC1α信号通路对ICH大鼠的认知功能和神经元起到保护作用㊂综上所述,TIL可能通过抑制AMPK/SIRT1/PGC1α信号通路来减轻ICH大鼠的认知功能障碍和神经元损伤㊂然而,黄酮类药物是否都有此类功效,需要进一步探究㊂参考文献:[1]AL-KAWAZ M N,HANLEY D F,ZIAI W.Advances in therapeuticapproaches for spontaneous intracerebral hemorrhage[J].Neurotherapeutics,2020,17(4):1757-1767.[2]ABUNIMER A M,ABOU-AL-SHAAR H,CA V ALLO C,et al.Minimallyinvasive approaches for the management of intraventricularhemorrhage[J].Journal of Neurosurgical Sciences,2018,62(6):734-744.[3]曹文疆,信盼,赵云丽,等.田蓟苷对动脉粥样硬化模型小鼠的改善作用及机制研究[J].中国药房,2022,33(1):19-25.[4]马丽月,曾诚,郑瑞芳,等.田蓟苷对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织的保护作用研究[J].中国药房,2018,29(20):2805-2810. [5]FORRESTER S J,KIKUCHI D S,HERNANDES M S,et al.Reactive oxygen species in metabolic and inflammatory signaling[J].Circ Res,2018,122(6):877-902.[6]DONG X L,WANG Y H,XU J,et al.The protective effect of thePDE-4inhibitor rolipram on intracerebral haemorrhage isassociated with the cAMP/AMPK/SIRT1pathway[J].ScientificReports,2021,11(1):19737.[7]PI Z D,LIU J Y,XIAO H,et al.L-3-n-butylphthalide promotesrestoration after an experimental animal model of intracerebralhemorrhage[J].International Journal of Medical Sciences,2021,18(12):2607-2614.[8]何文婧,刘亚东,米思蓉,等.脂联素通过减少NLRP3炎症体的表达来减轻脑出血大鼠模型认知障碍的机制[J].临床和实验医学杂志,2021,20(13):1348-1353.[9]赵云丽,袁勇,马晓莉,等.基于AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路研究香青兰总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护机制[J].中国药房,2021,32(3):278-283.[10]CHEN Y H,CHEN S P,CHANG J B,et al.Perihematomal edemaafter intracerebral hemorrhage:an update on pathogenesis,riskfactors,and therapeutic advances[J].Frontiers in Immunology,2021,12:740632.[11]VELTKAMP R,PURRUCKER J.Management of spontaneousintracerebral hemorrhage[J].Current Neurology and NeuroscienceReports,2017,17(10):80.[12]LA TT ANZI S,DI NAPOLI M,RICCI S,et al.Matrix metalloproteinases inacute intracerebral hemorrhage[J].Neurotherapeutics,2020,17(2):484-496.[13]姜雯,杨浩,席梅,等.田蓟苷对高脂饮食ApoE-/-小鼠抗动脉粥样硬化活性及作用机制[J].中成药,2021,43(8):2024-2029. [14]WU C H,TSAI Y C,TSAI T H,et al.Valproic acid reducesvasospasm through modulation of Akt phosphorylation andattenuates neuronal apoptosis in subarachnoid hemorrhage rats[J].International Journal of Molecular Sciences,2021,22(11):5975.[15]HUANG D J,LI Y,YANG Z X,et al.Association of the TLR4-MyD88-JNK signaling pathway with inflammatory response inintracranial hemorrhage rats and its effect on neuronal apoptosis[J].European Review for Medical and Pharmacological Sciences,2019,23(11):4882-4889.[16]LI B,ZHANG Y,LI H Y,et al.Miro1regulates neuronalmitochondrial transport and distribution to alleviate neuronaldamage in secondary brain injury after intracerebral hemorrhagein rats[J].Cellular and Molecular Neurobiology,2021,41(4):795-812.[17]YANG X P,LIU Q H,LI Y P,et al.The diabetes medicationcanagliflozin promotes mitochondrial remodelling of adipocytevia the AMPK-Sirt1-Pgc-1αsignalling pathway[J].Adipocyte,2020,9(1):484-494.[18]TIAN L,CAO W J,YUE R J,et al.Pretreatment with Tilianinimproves mitochondrial energy metabolism and oxidative stressin rats with myocardial ischemia/reperfusion injury via AMPK/SIRT1/PGC-1alpha signaling pathway[J].Journal of PharmacologicalSciences,2019,139(4):352-360.[19]LIN J Y,KUO W W,BASKARAN R,et al.Swimming exercisestimulates IGF1/PI3K/Akt and AMPK/SIRT1/PGC1αsurvivalsignaling to suppress apoptosis and inflammation in aginghippocampus[J].Aging,2020,12(8):6852-6864.[20]XU W L,YAN J,OCAK U,et al.Melanocortin1receptor attenuatesearly brain injury following subarachnoid hemorrhage bycontrolling mitochondrial metabolism via AMPK/SIRT1/PGC-1αpathway in rats[J].Theranostics,2021,11(2):522-539.(收稿日期:2022-08-11)(本文编辑王丽)lncRNA DANCR靶向调控miR-193a-3p表达对缺氧诱导的神经细胞氧化损伤的影响宋海英1,李红霞1,王逍2摘要目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)DANCR对缺氧诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12氧化损伤的影响及其可能作用机制㊂方法:选取榆林市星元医院于2019年10月 2021年10月就诊的缺血性脑卒中病人40例为疾病组,以同期30名健康体检者为正常组,检测lncRNA DANCR㊁miR-193a-3p表达量,Pearson法分析血清lncRNA DANCR与miR-193a-3p的相关性;建立缺氧诱导的PC12细胞损伤模型,si-NC㊁si-DANCR㊁miR-NC㊁miR-193a-3p mimics分别转染至PC12细胞后缺氧处理24h,si-DANCR+anti-miR-NC㊁si-DANCR+anti-miR-193a-3p分别共转染至PC12细胞后缺氧处理24h;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测lncRNA DANCR㊁miR-193a-3p表达量;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率㊁丙二醛(MDA)含量㊁超氧化物歧化酶(SOD)活性;用凋亡试剂盒检测凋亡率;双荧光素酶报告实验检测lncRNA DANCR㊁miR-193a-3p靶向关系;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测cleaved-Caspase-3㊁cleaved-Caspase-9蛋白表达量㊂结果:血清中lncRNA DANCR与miR-193a-3p表达呈负相关㊂缺氧处理后,PC12细胞中lncRNA DANCR表达量升高(P<0.05),miR-193a-3p表达量降低(P<0.05);分别与转染si-NC或miR-NC比较,转染si-DANCR 或miR-193a-3p mimics后,缺氧诱导的PC12细胞LDH漏出率㊁MDA含量㊁凋亡率㊁cleaved-Caspase-3㊁cleaved-Caspase-9蛋白水平降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05);与共转染si-DANCR+anti-miR-NC比较,共转染si-DANCR+anti-miR-193a-3p后,缺氧诱导的PC12细胞LDH漏出率㊁MDA含量㊁凋亡率㊁cleaved-Caspase-3㊁cleaved-Caspase-9蛋白水平升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05)㊂结论:干扰lncRNA DANCR可通过促进miR-193a-3p表达而抑制氧化应激㊁细胞凋亡,从而减轻缺氧诱导的PC12细胞损伤,血清中lncRNA DANCR㊁miR-193a-3p水平对缺血性脑卒中病人具有预测价值,且联合诊断价值更高㊂关键词缺氧;长链非编码RNA DANCR;miR-193a-3p;神经细胞;氧化应激;细胞凋亡d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2024.02.013缺血性脑卒中属于脑血管疾病,我国缺血性脑卒中发病率㊁死亡率逐年上升,严重影响病人生活质量,脑组织缺氧㊁缺血可促进神经细胞损伤进而诱发神经作者单位 1.榆林市星元医院(陕西榆林719000);2.陕西中医药大学附属医院(陕西咸阳712000)通讯作者王逍,E-mail:****************引用信息宋海英,李红霞,王逍.lncRNA DANCR靶向调控miR-193a-3p表达对缺氧诱导的神经细胞氧化损伤的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志,2024,22(2):279-285.功能障碍[1]㊂长链非编码RNA(lncRNA)可调节细胞分化㊁代谢等生理过程,并可在脑血管疾病发生中发挥调控作用[2]㊂已有研究表明,lncRNA MALAT1在缺氧诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12中表达量增加,并可促进细胞凋亡㊁氧化应激[3-4]㊂lncRNA DANCR在葡聚糖硫酸钠诱导的肠上皮细胞中表达上调,并可增加白细胞介素(IL)-1β㊁IL-6表达量㊁细胞凋亡率从而引起细胞损伤[5]㊂但lncRNA DANCR与脑血管疾病相关研究相对较少㊂StarBase预测显示,lncRNA DANCR㊁miR-193a-3p存在结合位点㊂有研究表明,miR-193a-3p。
大鼠脑出血动物模型的制作技巧
大鼠脑出血动物模型的制作技巧
韩佳炜;王淑华;李桂平;郑健刚
【期刊名称】《中国实用神经疾病杂志》
【年(卷),期】2018(021)007
【摘要】目的将理论与实践相结合,为建立可信度高、稳定性强、重复性好、更贴近人体生理病理的动物模型提供参考.方法在对比四种不同造模方式利弊的基础上,选取较合适的方法制作200只脑出血大鼠模型.结果通过对200只大鼠模型的实践操作,总结出造模过程中需要特殊注意的事项、操作技巧以及常用的四种造模方法的优缺点,并分析四种不同造模方法分别适应的实验类型和测量指标.结论每种造模方法各有其优缺点,我们开展动物实验时要根据观测的指标和预期结果的不同来选择合适的造模方法进行实验,以提高动物实验的可信度.
【总页数】5页(P707-711)
【作者】韩佳炜;王淑华;李桂平;郑健刚
【作者单位】天津中医药大学 ,天津 300193;中国人民解放军第 254 医院 ,天津300142;天津中医药大学第一附属医院 ,天津 300381;天津中医药大学第一附属医院 ,天津 300381
【正文语种】中文
【中图分类】R-332
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3.采用Ⅶ型胶原酶制作大鼠脑出血模型的技巧 [J], 李东方;赵海滨;姜天元;翟瑶瑶;杨丹丹
4.自体血注入法大鼠脑出血模型建立的制作技巧 [J], 杨亚萍;刘晓鹏;台立稳
5.自体血注入法大鼠脑出血模型建立的制作技巧 [J], 杨亚萍;刘晓鹏;台立稳;
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胶原酶诱导的脑出血大鼠模型及其行为学改变
胶原酶诱导的脑出血大鼠模型及其行为学改变
李红玲;吴红然;郭艳苏;李春岩
【期刊名称】《中国康复医学杂志》
【年(卷),期】2006(021)011
【摘要】目的:建立稳定的脑出血大鼠模型,并观察其行为学及组织结构变化.方法:采用Ⅶ型胶原酶0.5U/2.5μl生理盐水,在立体定位仪下注入大脑尾状核,然后在不同时间观察其行为学及形态学变化.结果:模型成功率80%,出血后6h大体形态可见明显出血灶,直径约3.0-3.5mm,且血肿大小、形态、部位相近;光镜下可见出血早期神经细胞水肿,白细胞浸润,后期神经胶质细胞、血管内皮细胞及神经细胞增生;大鼠行为学改变明显,并可持续到出血后7d.结论:此模型死亡率低,成功率高,血肿稳定,行为学改变明显,病理学改变符合临床.
【总页数】4页(P977-979,插页1)
【作者】李红玲;吴红然;郭艳苏;李春岩
【作者单位】河北医科大学第二医院康复科,石家庄,050000;河北医大二院神经内科实验室;河北医大二院神经内科实验室;河北医科大学第二医院神经内科,050000【正文语种】中文
【中图分类】R74
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1.Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型研究 [J], 倪厚杰;刘娜;陈娟;刘永明;张誉;杨二方;唐洲平
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4.骨髓间充质干细胞移植对Ⅶ型胶原酶诱导的脑出血大鼠模型神经功能的保护作用[J], 阎晓玲; 张学斌; 唐帆; 孔繁明; 杜从斌; 苏心; 王新平
5.氨基胍对胶原酶诱导脑出血大鼠模型的影响 [J], 唐涛;罗团连;罗杰坤;梁清华;黎杏群
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采用胶原酶加肝素构建大鼠脑出血致多器官功能障碍综合征模型
采用胶原酶加肝素构建大鼠脑出血致多器官功能障碍综合征模型孙海荣;郭洪志;王蕾;齐新【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2006(010)038【摘要】目的:利用Ⅶ型胶原酶加肝素构建大鼠脑出血致多器官功能障碍综合征模型,为进一步探讨急性脑血管病致多器官功能障碍综合征的发病机制提供实验模型依据.方法:实验于2003-11/2004-02在山东省医学科学院完成.①选取清洁级5～8月龄健康雄性Wistar大鼠96只,随机数字表法分为4组:正常对照组6只、假手术组6只、Ⅶ型胶原酶6.668 nlat+肝素钠组42只、Ⅶ型胶原酶13.336 nkat+肝素钠组42只,后两组又分为4,8,12,24,36,48,72 h 7个时相点,6只/时相点.②除正常对照组外,其余组均采用立体定向术在大鼠尾状核注入Ⅶ型胶原酶加肝素建立脑出血致多器官功能障碍综合征模型.在立体定向仪的引导下,用微量注射器(针头直径约0.6 mm)沿钻孔垂直进针6 mm,Ⅶ型胶原酶6.668 nkat+肝素钠组缓慢注入Ⅶ型胶原酶6.668 nkat和3.5IU肝素钠混合液2μL;Ⅶ型胶原酶13.336 nkat+肝素钠组注入Ⅶ型胶原酶13.336 nkat和3.5 IU肝素钠混合液2μL,留针10 min后缓慢退出.假手术组注射等体积生理盐水.③观察术后各时相点大鼠症状及体征变化,检测外周血白细胞、肝肾功能及心肌酶学的改变,光镜下观察脑、肺、肝、肾和小肠组织病理变化,计算全身炎症反应综合征、多器官功能障碍综合征的发生率.结果:实验选取清洁级健康雄性Wistar大鼠96只,全部进入结果分析.①各组大鼠术后脑大体形态观察结果:假手术组未见明显血肿;Ⅶ型胶原酶6.668 nkat+肝素钠组、Ⅶ型胶原酶13.336 nkat+肝素钠组在术后4 h均形成血肿,24 h后血肿基本不再增大.Ⅶ型胶原酶13.336 nkat+肝素钠组形成的血肿大于Ⅶ型胶原酶6.668 nkat+肝素钠组.②各组大鼠术后神经功能的变化:假手术组神经功能评分为0分;Ⅶ型胶原酶13.336 nkat+肝素钠组神经功能评分明显高于Ⅶ型胶原酶6.668 nkat+肝素钠组[(3.32±0.49),(1.64±0.18)分,P＜0.01].③各组大鼠术后呼吸、心率、体温、外周血白细胞、肝功、肾功、心肌酶学的变化:与正常对照组比较,假手术组上述各项指标均无明显差异(P＞0.05);Ⅶ型胶原酶6.668 nkat+肝素钠组、Ⅶ型胶原酶13.336 nkat+肝素钠组均明显升高(P＜0.01),且Ⅶ型胶原酶13.336 nkat+肝素钠组各指标升高幅度显著高于Ⅶ型胶原酶6.668 nkat+肝素钠组(P＜0.05).④各组大鼠术后主要脏器病理的改变:正常对照组和假手术组各器官组织结构基本正常.Ⅶ型胶原酶6.668 nkat+肝素钠组肺、肝、小肠、肾等脏器各时相点的病理改变以非特异性炎症反应为主.Ⅶ型胶原酶13.336 nkat+肝素钠组肺、肝、小肠、肾等脏器各时相点的炎性病理改变均较Ⅶ型胶原酶6.668 nkat+肝素钠组更加明显、持久.⑤脑出血后全身炎症反应综合征、多器官功能障碍综合征的发生率:Ⅷ型胶原酶6.668 nkat+肝素钠组分别为75.4%和21.4%,Ⅶ型胶原酶13.336 nkat+肝素钠组分别为100%和67.9%.结论:大鼠尾状核注入13.336 nkatⅦ型胶原酶加肝素法可以成功构建脑出血致多器官功能障碍综合征模型.【总页数】4页(P110-113)【作者】孙海荣;郭洪志;王蕾;齐新【作者单位】山东大学齐鲁医院神经内科,山东省,济南市,250012;威海市立医院神经内科,山东省,威海市,264200;山东大学齐鲁医院神经内科,山东省,济南市,250012;山东大学齐鲁医院神经内科,山东省,济南市,250012;济南市铁路医院神经内科,山东省,济南市,250012;山东大学齐鲁医院神经内科,山东省,济南市,250012【正文语种】中文【中图分类】R74【相关文献】1.采用Ⅶ型胶原酶构建大鼠脑出血模型 [J], 张磊;沈延春;李艳;陈莹;王翠兰;陈琼霞;高友晶;刘丽江2.注射用胶原酶-肝素诱导大鼠脑出血模型研究 [J], 廖群纷;王向东;何敏3.构建大鼠脑出血致多器官功能障碍综合征模型 [J], 梁临平;王蕾;郭洪志;王静4.采用Ⅳ型胶原酶构建大鼠脑出血模型 [J], 张艳玲;陈康宁;邵淑琴;王英5.胶原酶Ⅳ肝素生理盐水立体定向注入尾状核建立脑出血大鼠模型 [J], 李中秋;陆兵勋;吕田明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
采用Ⅳ型胶原酶构建大鼠脑出血模型
采用Ⅳ型胶原酶构建大鼠脑出血模型张艳玲;陈康宁;邵淑琴;王英【期刊名称】《第三军医大学学报》【年(卷),期】2002(24)12【摘要】目的利用Ⅳ型胶原酶构建大鼠脑出血模型 ,并研究血肿形成速度和血肿形成大小的影响因素。
方法使用健康雄性 2 0 0～ 2 5 0gWistar大鼠 ,随机分组 ,分别脑内尾状核注射不同容积Ⅳ型胶原酶肝素生理盐水溶液、单纯Ⅳ型胶原酶生理盐水溶液、单纯生理盐水 ,于术后 6h、12h、2 4h、3d、7d分别观察冰冻切片连续切片血肿大小。
结果单纯生理盐水注射仅引起 12h内的针道渗血 ,单纯胶原酶生理盐水注射 3d可以形成直径 3mm左右的血肿,Ⅳ型胶原酶肝素生理盐水注射 2 4h可形成直径 3mm左右的血肿。
结论Ⅳ型胶原酶肝素生理盐水注射可以建立理想稳定的脑出血动物模型。
【总页数】2页(P1394-1395)【关键词】Ⅳ型胶原酶;大鼠;脑出血模型【作者】张艳玲;陈康宁;邵淑琴;王英【作者单位】第三军医大学附属西南医院神经内科;第三军医大学基础医学部病原生物学教研室【正文语种】中文【中图分类】R743.3【相关文献】1.Ⅶ型胶原酶构建大鼠脑出血模型的组织病理学研究 [J], 杨洁;倪厚杰;唐洲平2.采用Ⅶ型胶原酶构建大鼠脑出血模型 [J], 张磊;沈延春;李艳;陈莹;王翠兰;陈琼霞;高友晶;刘丽江3.采用胶原酶加肝素构建大鼠脑出血致多器官功能障碍综合征模型 [J], 孙海荣;郭洪志;王蕾;齐新4.采用Ⅶ型胶原酶制作大鼠脑出血模型的技巧 [J], 李东方;赵海滨;姜天元;翟瑶瑶;杨丹丹;5.采用Ⅶ型胶原酶制作大鼠脑出血模型的技巧 [J], 李东方;赵海滨;姜天元;翟瑶瑶;杨丹丹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
胶原酶Ⅳ肝素生理盐水立体定向注入尾状核建立脑出血大鼠模型
胶原酶Ⅳ肝素生理盐水立体定向注入尾状核建立脑出血大鼠模
型
李中秋;陆兵勋;吕田明
【期刊名称】《临床军医杂志》
【年(卷),期】2009(37)4
【摘要】目的使用胶原酶Ⅳ肝素生理盐水立体定向注入大鼠脑尾状核,制作稳定的脑出血大鼠模型。
方法使用280～300 g成年SD大鼠,随机分组,以前囟为原点,前囟后0.2、0.6、1 mm位置分别注入胶原酶Ⅳ肝素生理盐水和单纯胶原酶Ⅳ生理盐水,术后不同时相对大鼠进行神经功能学评分。
结果前囟后1 mm组在不同时相的神经功能学评分高于前囟后0.2、0.6 mm组;肝素能加速脑出血血肿的形成。
结论前囟后1 mm注入胶原酶Ⅳ肝素生理盐水24 h内产生有稳定神经缺损体征的脑出血大鼠模型。
【总页数】2页(P546-547)
【关键词】胶原酶;脑出血;动物模型
【作者】李中秋;陆兵勋;吕田明
【作者单位】解放军第169医院二内科;南方医科大学南方医院神经内科
【正文语种】中文
【中图分类】R743.34
【相关文献】
1.经顶部入路预置管二次注射自体动脉血建立大鼠尾状核脑出血模型的可行性研究[J], 何国林;陆兵勋;吕田明
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3.不同剂量胶原酶Ⅳ尾壳核内注射建立重度出血性脑卒中大鼠模型 [J], 王振忠;诸葛启钏
4.胶原酶注入小鼠尾状核建立脑出血模型 [J], 许东;文玉军;张莲香;秦毅
5.自体血与胶原酶注入大鼠尾状核建立脑出血模型的比较研究 [J], 邓世山;王松;张本斯;王中亮;周德明
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地塞米松对脑出血大鼠模型脑组织AQP4表达的影响及意义
地塞米松对脑出血大鼠模型脑组织AQP4表达的影响及意义李慧;陈吉相【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2007(47)23【摘要】目的观察地塞米松对脑出血(ICH)大鼠模型脑组织水通道蛋白4(AQP4)表达的影响及意义.方法 32只大鼠脑尾状核部位立体定向注入胶原酶建立ICH模型,随机分为观察1、2、3组和对照组各8只后单笼饲养,观察1、2、3组分别腹腔注射地塞米松1、15、30 mg/kg,均为2次/d,连续3 d;对照组常规饲养.检测各组脑含水量、血脑屏障通透性及脑组织AQP4蛋白及mRNA表达.结果用药3 d 后观察1～3组血脑屏障通透性、AQP4蛋白及AQP4 mRNA含量均低于对照组(P均＜0.05),且AQP4蛋白及其mRNA表达与地塞米松呈剂量依赖性关系;观察1组脑含水量较对照组降低(P＜0.05).结论地塞米松能降低ICH模型大鼠脑组织AQP4表达,此可能为其早期小量使用减轻脑水肿的机制之一.【总页数】3页(P23-25)【作者】李慧;陈吉相【作者单位】华中科技大学同济医学院附属协和医院,湖北武汉,430032;华中科技大学同济医学院附属协和医院,湖北武汉,430032【正文语种】中文【中图分类】R743.34【相关文献】1.地塞米松对大鼠脑出血后周围脑组织MMP-9表达的影响 [J], 王善军;王道奎;王玉亭;闫瑞云2.醒脑静合生脉注射液下调大鼠脑出血后脑组织PAR1和AQP4表达 [J], 李国良;马承泰3.活血及利水中药对脑出血大鼠脑组织AQP4和PAR-1蛋白表达的相关性分析[J], 曾侠林;艾华;张君4.脑血疏口服液对脑出血模型大鼠脑组织ZO-1和AQP4表达的影响 [J], 王晓峰;田超;张岩;袁梦晨;张涵莱;王丽琴;安娜;高永红5.立体定向血肿碎吸术对大鼠脑出血后血肿周围脑组织AQP4表达的影响 [J], 罗凯;何宏;纪晓军;朱德辉;王泽;魏凌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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中 图 法 分 类 号 ： 一３ ； ３５ Ｒ ４ ．４ Ｒ ３２ Ｒ ４ ； ７ ３３ 文 献 标 识 码 ：Ａ
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心提供 ； Ⅳ型胶原 酶 （ 国 Ｓｔ ａ公 司） 肝 素钠 注射 液 （ 生物 美 ｉ ￣ｌ ； 沪 １ ０ ／ ）江湾 型动物头颅 立体定位仪 ； ２５０Ｕ２ｍ ； １ 微量 注射 器 ； 微量
分析天平 ； 恒冷 冰冻切片机 。
１２ ． 方法
１２ １ 动物分组 Ｗｉａ 大 鼠随机分 为生 理盐 水对 照组 、 ．． ｓｒ ｔ Ⅳ 型胶原酶组 、 Ⅳ型胶原酶， 肝素 钠组 ， 中 Ⅳ型胶原 酶， 其 肝素 钠组
提 要 ：目的 利用 Ⅳ型胶原酶构建 大 鼠脑 出血模 型 ， 并研究血肿 形成速度 和血肿 形成 大小 的影响 因素 。方法 使 用健 康雄
性 ２ ０ ５ Ｗｉａ 大 鼠， ０ ～２０ｇ ｓ ｒ ｔ 随机分组 ， 分别脑 内尾状核 注 射不 同容 积 Ⅳ型胶原 酶， 素 生理 盐水 溶 液 、 肝 单纯 Ⅳ型胶 原酶 生理 盐 水溶 液、 单纯生理 盐水 ， 于术后 ６ｈ １ 、 、 ｄ７ｄ 、２ｈ２ ｈ ３ 、 分别 观察冰冻切 片连 续切 片血肿大小 。结 果 单纯 生理盐水注 射仅引起 １ ４ ２ｈ内的 针道 渗血 ， 纯胶原酶生理 盐水注射 ３ｄ可以形成直径 ３Ｆ 单 ｌ 右 的血肿 ， ｉ ｍ左 Ⅳ型胶 原酶， 素生理盐水 注射 ２ 肝 ４ ｈ可形 成直径 ３Ｆ ｌ ｉ ｍ左 右 的血肿 。结论 Ⅳ型胶原酶， 素生理盐 水注射可 以建立 理想稳定 的脑 出血动物 模型 ， 肝 且血肿大小 和注射溶 液容积呈正相 关 。 关键词 ： 原酶 ； 出血 ； 胶 脑 动物模 型
研究很多 ， 动物模型有很多种 。曾经使用水 、 气囊模仿 脑 出血 的 占位 效应 ， 后 采 用 自体 血 脑 内注 射 的 自体 之 血肿 模 型 … ， 及 目前 使 用 较 多 的 胶 原 酶 脑 出 血 模 以 型ｌ 。水 、 ２ Ｊ 气囊可以模仿脑 出血后的 占位效应 ， 但不能 反映 出血后 局 部红 细胞 在 病 理 生 理 中 的作 用 ； 自体 血 肿 模 型很 好 的解 决 了 上述 问 题 ， 是 自体血 肿 模 型 是 但 人 为 的血 肿 过程 ， 肿来 势 突然 ； 血 胶原 酶脑 出血模 型 相 对 更接 近 病理 过 程 ， 现 了一 个 逐 渐 渗 血 的过 程 。 目 体 前 利 用胶 原 酶构 建脑 出 血 动 物 模 型 主要 有 两 种 ， 别 分 使 用 Ⅳ型胶 原酶 和 Ⅶ型 胶 原酶 。我们 使 用 Ⅳ型 胶原 酶 配合肝素建立动物模型 ， 实验证 实Ⅳ型胶原酶可达到 稳定的脑 出血效果 ， 配合肝 素局部注射可 以加快脑 出 血血 肿 形成 的速度 。
的方 法参 照文献 Ｅ ～６ ， 鼠术前 １ 禁食 ， 禁水 ， ０ ４ ３ ］大 ２ｈ ４ｈ 用 ．％ 戊 巴比妥钠 腹腔麻 醉 ， 保证 手 术操 作 期间 大 鼠有 自主 呼吸 ， 俯 卧 固定 于江湾型动 物头 颅 立体 定位 仪上 ， 头皮 丁 字切 开 ， 取前 囟为原点 ， 向右 ３Ｆ 向后 １Ｆ 深 度 ５Ｆ ｉ ｌ ｍ， ｉ ｌ ｍ， ｉ ｌ 注射点（ ｍ为 尾状 核 ）骨钻钻 开 颅骨 ， 针后 缓慢 注 射药 物溶 液 ， ， 进 留针 ２ｍｎ 缓 ｉ， 慢退 针 ， 骨蜡 封闭颅骨钻 孔。缝合 皮肤 。术 中大 鼠肛温 保持 在
从事脑血管病方 面的研究。电话 ： ３６ ７２０ （ ）８ ５９５
收 稿 日期 ： ０ ４ ，９ 修回 日期 ：Ｏ２１－ ２ ２） １； ０ ７ ２Ｏ ， １ ０５
第ｌ ２期
张艳玲 ， ． 等 采用 Ⅳ型胶 原酶构建大 鼠脑 出血模 型
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心耳剪开一小 口做 出 口。４ ℃生 理盐 水 １０ｍ 快 速灌 注 ， 后 ０ ｌ 之 稍减慢灌注速 度冲洗至 流出液 清亮 ， ４ 换 ％多聚 甲醛 １０ｍ 快 ０ ｌ 速灌注 ， 之后稍减慢 灌注 速度 继续 固定 ， 灌注 约 ３ ｎ至动 物 ０ｍｉ 四肢变硬 。断头取脑 ， 以注射针道 为中心做冠状 切片 ， 厚度约 ５ ｍ ３ ％蔗糖，％多聚 甲醛 液脱水后至恒 冷 冰冻切 片机做连 续 ｍ，０ ４ 切片， 切片后测量 血肿直径 。
文章编 号 ： ０ — Ｏ （０２ １— ９ － １ ０５ ４２Ｏ ）２１ ４ ２ ０ ４ ３ ０
采 用 Ⅳ 型 胶 原 酶 构 建 大 鼠脑 出血 模 型
张艳玲 陈康 宁 邵淑 琴 王 英 （ ， ， ， 第三军医大学： 附属西南医院神经内科； 基础医学部病原生物学教研室 ， 重庆 ４０３） ００８
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第２ ４卷第 ｌ ２期 ２０ ０２年 ｌ ２月
第
三
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大
学
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报
Ｖｏ ．２ １ ４．Ｎｏ． １ ２
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脑 出血 是 一种 常 见病 、 多发 病 ， 于脑 出血 的实验 关
鼠龄 ４～７月 ， 由第 三军 医大学 附 属大坪 医 院医用 实验 动物 中
３ ． ７５Ｃ， ６５～３ ．￣ 手术后动物被送 至通风 和有空调 的动物房 饲养 。
Ⅳ型胶原酶， 肝素 钠组 （ ｏａｅａｅｈｐｒ ） ３个小组 分别注射 Ｃ ｌ ｎ ／ｅａｉ 的 ｌ ｓ ｇ ｎ Ⅳ胶 原酶， 肝素， 生理盐水溶 液 ０ ７ 、． 和 ２０ （ １ 含 ． １４ ． 每
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１ 材 料 和方 法
１ １ 材料 ．
实验动物选用健康雄性 Ｗｉａ 大鼠 ｌＩ只， ｓｒ ｔ ５ ） 体重 ２０ ５ ， ０ ～２０ｇ
基金项 目： 第三军医大学基金 资助项 目（ ｏ２ ２ｏ ） 作者简介 ： 张艳玲（９ ４ ， ， 北省 石家庄 市人 、 士研 究生 ， 师， １ 一）女 河 ７ 硕 医 主要