采用Ⅳ 型胶原酶构建大鼠脑出血模型
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提 要 ：目的 利用 Ⅳ型胶原酶构建 大 鼠脑 出血模 型 ， 并研究血肿 形成速度 和血肿 形成 大小 的影响 因素 。方法 使 用健 康雄
性 ２ ０ ５ Ｗｉａ 大 鼠， ０ ～２０ｇ ｓ ｒ ｔ 随机分组 ， 分别脑 内尾状核 注 射不 同容 积 Ⅳ型胶原 酶， 素 生理 盐水 溶 液 、 肝 单纯 Ⅳ型胶 原酶 生理 盐 水溶 液、 单纯生理 盐水 ， 于术后 ６ｈ １ 、 、 ｄ７ｄ 、２ｈ２ ｈ ３ 、 分别 观察冰冻切 片连 续切 片血肿大小 。结 果 单纯 生理盐水注 射仅引起 １ ４ ２ｈ内的 针道 渗血 ， 纯胶原酶生理 盐水注射 ３ｄ可以形成直径 ３Ｆ 单 ｌ 右 的血肿 ， ｉ ｍ左 Ⅳ型胶 原酶， 素生理盐水 注射 ２ 肝 ４ ｈ可形 成直径 ３Ｆ ｌ ｉ ｍ左 右 的血肿 。结论 Ⅳ型胶原酶， 素生理盐 水注射可 以建立 理想稳定 的脑 出血动物 模型 ， 肝 且血肿大小 和注射溶 液容积呈正相 关 。 关键词 ： 原酶 ； 出血 ； 胶 脑 动物模 型
ｌ９ ３４
第２ ４卷第 ｌ ２期 ２０ ０２年 ｌ ２月
第
三
军
医
大
学
学
报
Ｖｏ ．２ １ ４．Ｎｏ． １ ２
Ａ ’ ＡＣ ＤＥ ＡＥ ＭＥ Ｉ Ｎ ＭⅡ Ｔ ＲＩ Ｔ ＲⅡＡ （Ｉ Ａ Ａ ＭＩ Ｄ Ｃｌ ＡＥ Ｊ Ａ Ｓ Ｅ ｒ Ｅ
Ｄｃ ０２ ｅ ．２ ０
－ 精
研究很多 ， 动物模型有很多种 。曾经使用水 、 气囊模仿 脑 出血 的 占位 效应 ， 后 采 用 自体 血 脑 内注 射 的 自体 之 血肿 模 型 … ， 及 目前 使 用 较 多 的 胶 原 酶 脑 出 血 模 以 型ｌ 。水 、 ２ Ｊ 气囊可以模仿脑 出血后的 占位效应 ， 但不能 反映 出血后 局 部红 细胞 在 病 理 生 理 中 的作 用 ； 自体 血 肿 模 型很 好 的解 决 了 上述 问 题 ， 是 自体血 肿 模 型 是 但 人 为 的血 肿 过程 ， 肿来 势 突然 ； 血 胶原 酶脑 出血模 型 相 对 更接 近 病理 过 程 ， 现 了一 个 逐 渐 渗 血 的过 程 。 目 体 前 利 用胶 原 酶构 建脑 出 血 动 物 模 型 主要 有 两 种 ， 别 分 使 用 Ⅳ型胶 原酶 和 Ⅶ型 胶 原酶 。我们 使 用 Ⅳ型 胶原 酶 配合肝素建立动物模型 ， 实验证 实Ⅳ型胶原酶可达到 稳定的脑 出血效果 ， 配合肝 素局部注射可 以加快脑 出 血血 肿 形成 的速度 。
Ｃ ｏｇｉ ００ ８ Ｃ ｉａ ｈｎｑ ｇ４０ ３ ，ｈｎ ） ｎ
Ａ ｓ ａｔ ｂｅｔｅ ｏｅｔ ｌｈａ ｅｅｒ ｅ ｏｒａｅｍ ｄｌｎｒｓｂ ａｉ ｅｔｎｏ ｔ ｅⅣｃｌ ｅａｅ ａｄｅｐ ｒ ｔｅ ａｔ ｓ ｆ ｔ ｂｔ ｃ：Ｏ ｊ ｉ Ｔ ｓ ｂ ｓ ｒｂａｈｍ ｒ ｇ ｏｅ ｉ ａ ｙｌ ｌ ｎ ｃｏ ｆｙ ｒ ｃｖ ａｉ ｃ ｌ ｈ ｔ ｃ ｏ ｊ ｉ ｐ ｏａ ｎ ， ｎ ｘｌ ｃ ｒ ａｅ — ｌ ｓ ｇ ｏ ｈ ｆ ｏ ｃ ｅ
ｆ ｒ ｎ ｉ ｏｔ ｌ ｒ ｐ Ｈ ｍ ｔ ａａｏｔ ｌ ｉ ｄ ｍ ｔ ｓ ｆｎ ｔｒｎ ｉ ｏａ ｎ ｒ ｐ ｗ ｉ ｌ ｎ ｅｈｐｒ ａｅ ｊ ｔ ｎｉ ｃｎ ｏ ｇ ｕ ． ｅ ａ ｍ ｂｕ ３Ｆ ａ ｅ ｒ ａ ｕｄｉ ３ｄａｅ ｊ ｔｎｉ ｃｌ ｅａｅｇ ｕ ， ｈ ｅ ｎ ｏ ａｅａ ／ｅａ ｎ ｔ ｉｅ ｏ ｎ ｃ ｒ ｏ ｏ ｉ ｎ ｍ ｉ ｅＷ ｏ ｎ ｆ ｉｅ ｏ ｎ ｌ ｓ ｏ ｃ ｇ ｌｉｃ ｌ ｓ ｇ ｉ ｇ ｕ ，ｉＷ ｕｄｉ ． ｏ ｃ ｓ ｎ Ｃ ｒ ｒ ｅ ｏ ｈ ｅ ｏｅ ｅｔ ｌｈｄｂ ｃ ｊ ｔｎｏ ｌ ｅａｅｈｐｒ ｌ ｅｓｌｉｎ ｓｄａ ｒ ｐ ｔ ａ ｆ ｎ ２ ｈ Ｃ ｎ ｌ ｉ ｅ ｂａ ｈｍ ｒ ａ ｄ ｌ ｓ ｂ ｓｅ ｙｌ ａｉ ｅ ｉ ｆ ｏａ ｎ ／ｅａｉ ｉ ｓｉ ｕ ｏ ｅｌ ｏ ｓ ｏ ｎ ４ ｕｏ ｅ ｌ ｒｇ ｍ ａｉ ｏｌ ｎ ｏ ｃ ｃｌ ｓ ｇ ｎ ｎａｎ ｏ ｔ ｉｉ
Ｋｅ ｒ ｓ ｏｌ ｅ ａ ｅ ｃ ｒｂ ａ ｅ ｒｈ ｅ ａ ｉ ｌｍｏ ｅ ｙ ｗｏ ｄ ：ｃ ｌ ｎ ； ｅ ｒ ｌ ｍｏ ａ ； ｎｍａ ｄ ｌ ｇ ａ ｓ ｅ ｈ ｇ
脑 出血 是 一种 常 见病 、 多发 病 ， 于脑 出血 的实验 关
鼠龄 ４～７月 ， 由第 三军 医大学 附 属大坪 医 院医用 实验 动物 中
ｉｇ ｔｅ ｓ ｅ ｄ ａ ｄ ｖ ｌｍｅｏ ｅ ｔ ｏｍａｉ ｎ ｎ ｈ ｐ ｅ ｏｕ ｆｈ ｍａｏ ｆｒ ｔ ．Ｍ酬 １ ｄ Ａ ｔｔ ｆ１ ０ ｈ ａｔｙ ｍａｅ Ｗ ｉ ａ ｔ ｅｇ ｉｇ ｆ ｍ ０ ｏ２ ０ ｇ ｗ ｒ ａ ｄ ｍ ｙ ｄ— ｎ ｍａ ｏ Ｏｓ ｏａ ｏ ５ ｅ ｈ ｌ ｓ ｒｒ ｓ ｗ ｉｈｎ ｏ ２ ０ ｔ ５ ｅ ｒｎ ｏ ｌ ｉ ｌ ｌ ｔ ａ ｒ ｅ
文章编 号 ： ０ — Ｏ （０２ １— ９ － １ ０５ ４２Ｏ ）２１ ４ ２ ０ ４ ３ ０
采 用 Ⅳ 型 ຫໍສະໝຸດ Baidu 原 酶 构 建 大 鼠脑 出血 模 型
张艳玲 陈康 宁 邵淑 琴 王 英 （ ， ， ， 第三军医大学： 附属西南医院神经内科； 基础医学部病原生物学教研室 ， 重庆 ４０３） ００８
Ｚ ＡＮ ａ—ｎ ，Ｃ Ｅ ６ —ｉｇ Ｈ Ｏ Ｓ ｕｑｎ Ｈ ＧＹ ｎｌｇ Ｈ Ｎ Ｉ ｉ ｍｇｎｎ ，Ｓ Ａ ｈ—ｉ，ＷＡ Ｇ Ｙｎ （ ｅａｍ ｎ ｏ Ｎｕ ｌｙ Ｓｕ ｗｓ Ｈｓｉｌ ｈｄＭｌ ｒ Ｍｄ ａ Ｕｉ ｒｔ Ｎ ｉ ｇ Ｄｐｒ ｅｔ ｆ ｅ ｏ ｇ， ｏｔ ｅ ｏ ｔ，Ｔｉ ｉａ ｅｉ ｌ ｎｅ ｉ ｔ ｒｏ ｈ ｔ ｐａ ｒ ｉｙ ｔ ｃ ｖ ｓｙ
从事脑血管病方 面的研究。电话 ： ３６ ７２０ （ ）８ ５９５
收 稿 日期 ： ０ ４ ，９ 修回 日期 ：Ｏ２１－ ２ ２） １； ０ ７ ２Ｏ ， １ ０５
第ｌ ２期
张艳玲 ， ． 等 采用 Ⅳ型胶 原酶构建大 鼠脑 出血模 型
ｌ９ ３５
心耳剪开一小 口做 出 口。４ ℃生 理盐 水 １０ｍ 快 速灌 注 ， 后 ０ ｌ 之 稍减慢灌注速 度冲洗至 流出液 清亮 ， ４ 换 ％多聚 甲醛 １０ｍ 快 ０ ｌ 速灌注 ， 之后稍减慢 灌注 速度 继续 固定 ， 灌注 约 ３ ｎ至动 物 ０ｍｉ 四肢变硬 。断头取脑 ， 以注射针道 为中心做冠状 切片 ， 厚度约 ５ ｍ ３ ％蔗糖，％多聚 甲醛 液脱水后至恒 冷 冰冻切 片机做连 续 ｍ，０ ４ 切片， 切片后测量 血肿直径 。
３ ． ７５Ｃ， ６５～３ ．￣ 手术后动物被送 至通风 和有空调 的动物房 饲养 。
Ⅳ型胶原酶， 肝素 钠组 （ ｏａｅａｅｈｐｒ ） ３个小组 分别注射 Ｃ ｌ ｎ ／ｅａｉ 的 ｌ ｓ ｇ ｎ Ⅳ胶 原酶， 肝素， 生理盐水溶 液 ０ ７ 、． 和 ２０ （ １ 含 ． １４ ． 每
ｖ ｅ ｔ ３ｇ ｕｓ ｃｎｒ ， ｏａｅａｅ ｎｄｃｌ ｅａｅｈｐ ｒ ｏｐ． ｎ ａ ｏｅｇ ｕｓ ｃｉ ｊ ｔ ｎｏ ｓｌｅ ｏ ａｅａ ０ ２Ｕ ｉ ｄｉｏ ｒ ｐ ， ｏ ｔｌ ｃｌ ｎ ，ａ ｏ ａ ｎ ／ｅａ ｎｇ ｕｓ Ａ ｉ ｌｉ ｔ ｓ ｒ ｐ ｅ ｅ ｉ ｅ ｉ ｉ ，ｃｌ ｎ ｅ（ ． ／ ｄ ｎ ｏ ｏ ｌ ｓ ｇ ｌ ｓ ｇ ｉ ｒ ｍ ｓ ｎｈ ｏ ｒ ｖ ｎ ｏ ｆａ ｎ ｅ ｄ ｃ ｌ ｓ ｇ ） ｎｄｃｌ ｅａｅ（ａｌ ｄｓ）ａｄｈｐｒ ２ｕ ｔ）ｗｔ ｄｆｒｎ ｖｌ ｅｒｓ ｃｖｌ ａ ｔｅｃｕａｅｎｃ ｕ． ｈ ｏ ｍ ｆ ｅｈｍ ｔ ａｉ ，ａ ｏａ ｎ ｌ ｓ ＳＢ ｏ ｎ ｅａ ｎ（ ／ ｇ ｅ ｅ ｉ ａ ｉ ｉｅ ｔ ｏ ｍ ｐ ｔｅ ｔ ａｄｔ ｕｌ ｓ Ｔ ｅｖｌ ｅｏ ｅ ａ ｍ ｈ ｅ ｕ ｅｅ ｉ ｙ ｈ ｅ ｕ ｈ ｔ ｏ ｎ ｔ ｔ ｎ＝６ａ ｅｃ ｍ ｏ ｔ ａ ｂｅｖ ，１ ， ｄ２ ， ｄ３ ７ ｆｒ ｅｉ ｅｔｎ Ｒ ｓ ｌ Ｐｒ ｅｔ ｎｏ ｏｄＷ ｕｄｉ １ ｈ ｒ ｓ（ ｅａ ｔ ａｈｔ ｅｐｉ ）ｗ ｓ ｓｒｅ ６ ２ ａ ｈ ａ ， ｄａｅ ｊｃｏ ． ｅ ｕｓ ｅｍ ａｏ ｆ ｌ ａ ｆ ｎ ２ｈ ｉ ｎ ｏ ｄ ｎ ４ ｎ ｔ ｔ ｎ ｉ ｈ ｔ ｉ ｂｏ ｓ ｏ ｎ
１ 材 料 和方 法
１ １ 材料 ．
实验动物选用健康雄性 Ｗｉａ 大鼠 ｌＩ只， ｓｒ ｔ ５ ） 体重 ２０ ５ ， ０ ～２０ｇ
基金项 目： 第三军医大学基金 资助项 目（ ｏ２ ２ｏ ） 作者简介 ： 张艳玲（９ ４ ， ， 北省 石家庄 市人 、 士研 究生 ， 师， １ 一）女 河 ７ 硕 医 主要
中 图 法 分 类 号 ： 一３ ； ３５ Ｒ ４ ．４ Ｒ ３２ Ｒ ４ ； ７ ３３ 文 献 标 识 码 ：Ａ
Ｅ ｔｂｉ ｍｅ ｔ ｆｒｔｃｒｂ ａ ｅ ｒｈ ｇ ｄ ｌ ｙｔｐ ｓａ ｌｈ ｎ ａ ｅｅ ｒｌ ｍｏ ｒ ａ ｅｍｏ ｅ ｅⅣｃ ｌ ｇｎ ｓ ｊｃｉｎ ｓ ｏ ｈ ｂ ｙ ｏｌ ｅ ａｅｉ ｅｔ ａ ｎ ｏ
心提供 ； Ⅳ型胶原 酶 （ 国 Ｓｔ ａ公 司） 肝 素钠 注射 液 （ 生物 美 ｉ ￣ｌ ； 沪 １ ０ ／ ）江湾 型动物头颅 立体定位仪 ； ２５０Ｕ２ｍ ； １ 微量 注射 器 ； 微量
分析天平 ； 恒冷 冰冻切片机 。
１２ ． 方法
１２ １ 动物分组 Ｗｉａ 大 鼠随机分 为生 理盐 水对 照组 、 ．． ｓｒ ｔ Ⅳ 型胶原酶组 、 Ⅳ型胶原酶， 肝素 钠组 ， 中 Ⅳ型胶原 酶， 其 肝素 钠组
的方 法参 照文献 Ｅ ～６ ， 鼠术前 １ 禁食 ， 禁水 ， ０ ４ ３ ］大 ２ｈ ４ｈ 用 ．％ 戊 巴比妥钠 腹腔麻 醉 ， 保证 手 术操 作 期间 大 鼠有 自主 呼吸 ， 俯 卧 固定 于江湾型动 物头 颅 立体 定位 仪上 ， 头皮 丁 字切 开 ， 取前 囟为原点 ， 向右 ３Ｆ 向后 １Ｆ 深 度 ５Ｆ ｉ ｌ ｍ， ｉ ｌ ｍ， ｉ ｌ 注射点（ ｍ为 尾状 核 ）骨钻钻 开 颅骨 ， 针后 缓慢 注 射药 物溶 液 ， ， 进 留针 ２ｍｎ 缓 ｉ， 慢退 针 ， 骨蜡 封闭颅骨钻 孔。缝合 皮肤 。术 中大 鼠肛温 保持 在
ｎ ｉ ｅ ｎ ｉ ｆ ｍ ｔ ａｉ ｉ ｃｒ ａｏ ｉ ｏ ｍ ｆ ｕ ｏ ｊ ｔ ｔ ｈ ｂａ ａｄｒｌ ｌ，ａｄｔｅｓｅｏ ｅ ａ ｍ ｏｒｌｉｎｗｔ ｔｅｖｌ ｅｏ ｓｌ ｉ ｓ ｎ ｃ ｄｉ ｏｔ ｒｉ． ｅａ ｂ ｈ ｚ ｈ ｏ ｓｎ ｅｔ ｈｈ ｕ ｔｎ ｉｅ ｅ ｎ ｅ ｏ ｎ
Ⅳ型胶原酶 ０ ２Ｕ及肝 素 ２Ｕ 。对 照组 （ ｏｔ １颅 内注 射生理 ． ） Ｃ ｎｏ） ｒ 盐水 ２０ ， ． Ⅳ型 胶原 酶组 （ ｏａｅａｅ 注 射 Ⅳ胶原 酶， 理 盐 Ｃｌ ｎ ） ｌ ｓ ｇ 生 水 溶液 ２０ （ １ 含 Ⅳ型胶原酶 ０２ Ｕ 。 ． 每 ． ） １２ ３ 标本 的取材和制备 ．． 术后在 相应 时相 点过 量 乙醚麻 醉动物 ， 速开胸暴露心脏 ， 迅 从左心 室插管 至主 动脉根部 ， 右 在
按注射药 物溶 液容 积 不 同又 分 为 ３个 小 组 。每组 分 为术 后 ６ ｈ １ 、 、 ， 共 ５个时相点 ， 时相 点动物 ６只。各组 间 、２ｈ２ ｈ３ｄ ７ｄ ４ 每 动物体重 无显著差异 。 １２２ 动物模型 的建立 ．．
使用 Ⅳ型胶原 酶建 立脑 出血 模型
性 ２ ０ ５ Ｗｉａ 大 鼠， ０ ～２０ｇ ｓ ｒ ｔ 随机分组 ， 分别脑 内尾状核 注 射不 同容 积 Ⅳ型胶原 酶， 素 生理 盐水 溶 液 、 肝 单纯 Ⅳ型胶 原酶 生理 盐 水溶 液、 单纯生理 盐水 ， 于术后 ６ｈ １ 、 、 ｄ７ｄ 、２ｈ２ ｈ ３ 、 分别 观察冰冻切 片连 续切 片血肿大小 。结 果 单纯 生理盐水注 射仅引起 １ ４ ２ｈ内的 针道 渗血 ， 纯胶原酶生理 盐水注射 ３ｄ可以形成直径 ３Ｆ 单 ｌ 右 的血肿 ， ｉ ｍ左 Ⅳ型胶 原酶， 素生理盐水 注射 ２ 肝 ４ ｈ可形 成直径 ３Ｆ ｌ ｉ ｍ左 右 的血肿 。结论 Ⅳ型胶原酶， 素生理盐 水注射可 以建立 理想稳定 的脑 出血动物 模型 ， 肝 且血肿大小 和注射溶 液容积呈正相 关 。 关键词 ： 原酶 ； 出血 ； 胶 脑 动物模 型
ｌ９ ３４
第２ ４卷第 ｌ ２期 ２０ ０２年 ｌ ２月
第
三
军
医
大
学
学
报
Ｖｏ ．２ １ ４．Ｎｏ． １ ２
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Ｄｃ ０２ ｅ ．２ ０
－ 精
研究很多 ， 动物模型有很多种 。曾经使用水 、 气囊模仿 脑 出血 的 占位 效应 ， 后 采 用 自体 血 脑 内注 射 的 自体 之 血肿 模 型 … ， 及 目前 使 用 较 多 的 胶 原 酶 脑 出 血 模 以 型ｌ 。水 、 ２ Ｊ 气囊可以模仿脑 出血后的 占位效应 ， 但不能 反映 出血后 局 部红 细胞 在 病 理 生 理 中 的作 用 ； 自体 血 肿 模 型很 好 的解 决 了 上述 问 题 ， 是 自体血 肿 模 型 是 但 人 为 的血 肿 过程 ， 肿来 势 突然 ； 血 胶原 酶脑 出血模 型 相 对 更接 近 病理 过 程 ， 现 了一 个 逐 渐 渗 血 的过 程 。 目 体 前 利 用胶 原 酶构 建脑 出 血 动 物 模 型 主要 有 两 种 ， 别 分 使 用 Ⅳ型胶 原酶 和 Ⅶ型 胶 原酶 。我们 使 用 Ⅳ型 胶原 酶 配合肝素建立动物模型 ， 实验证 实Ⅳ型胶原酶可达到 稳定的脑 出血效果 ， 配合肝 素局部注射可 以加快脑 出 血血 肿 形成 的速度 。
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脑 出血 是 一种 常 见病 、 多发 病 ， 于脑 出血 的实验 关
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文章编 号 ： ０ — Ｏ （０２ １— ９ － １ ０５ ４２Ｏ ）２１ ４ ２ ０ ４ ３ ０
采 用 Ⅳ 型 ຫໍສະໝຸດ Baidu 原 酶 构 建 大 鼠脑 出血 模 型
张艳玲 陈康 宁 邵淑 琴 王 英 （ ， ， ， 第三军医大学： 附属西南医院神经内科； 基础医学部病原生物学教研室 ， 重庆 ４０３） ００８
Ｚ ＡＮ ａ—ｎ ，Ｃ Ｅ ６ —ｉｇ Ｈ Ｏ Ｓ ｕｑｎ Ｈ ＧＹ ｎｌｇ Ｈ Ｎ Ｉ ｉ ｍｇｎｎ ，Ｓ Ａ ｈ—ｉ，ＷＡ Ｇ Ｙｎ （ ｅａｍ ｎ ｏ Ｎｕ ｌｙ Ｓｕ ｗｓ Ｈｓｉｌ ｈｄＭｌ ｒ Ｍｄ ａ Ｕｉ ｒｔ Ｎ ｉ ｇ Ｄｐｒ ｅｔ ｆ ｅ ｏ ｇ， ｏｔ ｅ ｏ ｔ，Ｔｉ ｉａ ｅｉ ｌ ｎｅ ｉ ｔ ｒｏ ｈ ｔ ｐａ ｒ ｉｙ ｔ ｃ ｖ ｓｙ
从事脑血管病方 面的研究。电话 ： ３６ ７２０ （ ）８ ５９５
收 稿 日期 ： ０ ４ ，９ 修回 日期 ：Ｏ２１－ ２ ２） １； ０ ７ ２Ｏ ， １ ０５
第ｌ ２期
张艳玲 ， ． 等 采用 Ⅳ型胶 原酶构建大 鼠脑 出血模 型
ｌ９ ３５
心耳剪开一小 口做 出 口。４ ℃生 理盐 水 １０ｍ 快 速灌 注 ， 后 ０ ｌ 之 稍减慢灌注速 度冲洗至 流出液 清亮 ， ４ 换 ％多聚 甲醛 １０ｍ 快 ０ ｌ 速灌注 ， 之后稍减慢 灌注 速度 继续 固定 ， 灌注 约 ３ ｎ至动 物 ０ｍｉ 四肢变硬 。断头取脑 ， 以注射针道 为中心做冠状 切片 ， 厚度约 ５ ｍ ３ ％蔗糖，％多聚 甲醛 液脱水后至恒 冷 冰冻切 片机做连 续 ｍ，０ ４ 切片， 切片后测量 血肿直径 。
３ ． ７５Ｃ， ６５～３ ．￣ 手术后动物被送 至通风 和有空调 的动物房 饲养 。
Ⅳ型胶原酶， 肝素 钠组 （ ｏａｅａｅｈｐｒ ） ３个小组 分别注射 Ｃ ｌ ｎ ／ｅａｉ 的 ｌ ｓ ｇ ｎ Ⅳ胶 原酶， 肝素， 生理盐水溶 液 ０ ７ 、． 和 ２０ （ １ 含 ． １４ ． 每
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１ 材 料 和方 法
１ １ 材料 ．
实验动物选用健康雄性 Ｗｉａ 大鼠 ｌＩ只， ｓｒ ｔ ５ ） 体重 ２０ ５ ， ０ ～２０ｇ
基金项 目： 第三军医大学基金 资助项 目（ ｏ２ ２ｏ ） 作者简介 ： 张艳玲（９ ４ ， ， 北省 石家庄 市人 、 士研 究生 ， 师， １ 一）女 河 ７ 硕 医 主要
中 图 法 分 类 号 ： 一３ ； ３５ Ｒ ４ ．４ Ｒ ３２ Ｒ ４ ； ７ ３３ 文 献 标 识 码 ：Ａ
Ｅ ｔｂｉ ｍｅ ｔ ｆｒｔｃｒｂ ａ ｅ ｒｈ ｇ ｄ ｌ ｙｔｐ ｓａ ｌｈ ｎ ａ ｅｅ ｒｌ ｍｏ ｒ ａ ｅｍｏ ｅ ｅⅣｃ ｌ ｇｎ ｓ ｊｃｉｎ ｓ ｏ ｈ ｂ ｙ ｏｌ ｅ ａｅｉ ｅｔ ａ ｎ ｏ
心提供 ； Ⅳ型胶原 酶 （ 国 Ｓｔ ａ公 司） 肝 素钠 注射 液 （ 生物 美 ｉ ￣ｌ ； 沪 １ ０ ／ ）江湾 型动物头颅 立体定位仪 ； ２５０Ｕ２ｍ ； １ 微量 注射 器 ； 微量
分析天平 ； 恒冷 冰冻切片机 。
１２ ． 方法
１２ １ 动物分组 Ｗｉａ 大 鼠随机分 为生 理盐 水对 照组 、 ．． ｓｒ ｔ Ⅳ 型胶原酶组 、 Ⅳ型胶原酶， 肝素 钠组 ， 中 Ⅳ型胶原 酶， 其 肝素 钠组
的方 法参 照文献 Ｅ ～６ ， 鼠术前 １ 禁食 ， 禁水 ， ０ ４ ３ ］大 ２ｈ ４ｈ 用 ．％ 戊 巴比妥钠 腹腔麻 醉 ， 保证 手 术操 作 期间 大 鼠有 自主 呼吸 ， 俯 卧 固定 于江湾型动 物头 颅 立体 定位 仪上 ， 头皮 丁 字切 开 ， 取前 囟为原点 ， 向右 ３Ｆ 向后 １Ｆ 深 度 ５Ｆ ｉ ｌ ｍ， ｉ ｌ ｍ， ｉ ｌ 注射点（ ｍ为 尾状 核 ）骨钻钻 开 颅骨 ， 针后 缓慢 注 射药 物溶 液 ， ， 进 留针 ２ｍｎ 缓 ｉ， 慢退 针 ， 骨蜡 封闭颅骨钻 孔。缝合 皮肤 。术 中大 鼠肛温 保持 在
ｎ ｉ ｅ ｎ ｉ ｆ ｍ ｔ ａｉ ｉ ｃｒ ａｏ ｉ ｏ ｍ ｆ ｕ ｏ ｊ ｔ ｔ ｈ ｂａ ａｄｒｌ ｌ，ａｄｔｅｓｅｏ ｅ ａ ｍ ｏｒｌｉｎｗｔ ｔｅｖｌ ｅｏ ｓｌ ｉ ｓ ｎ ｃ ｄｉ ｏｔ ｒｉ． ｅａ ｂ ｈ ｚ ｈ ｏ ｓｎ ｅｔ ｈｈ ｕ ｔｎ ｉｅ ｅ ｎ ｅ ｏ ｎ
Ⅳ型胶原酶 ０ ２Ｕ及肝 素 ２Ｕ 。对 照组 （ ｏｔ １颅 内注 射生理 ． ） Ｃ ｎｏ） ｒ 盐水 ２０ ， ． Ⅳ型 胶原 酶组 （ ｏａｅａｅ 注 射 Ⅳ胶原 酶， 理 盐 Ｃｌ ｎ ） ｌ ｓ ｇ 生 水 溶液 ２０ （ １ 含 Ⅳ型胶原酶 ０２ Ｕ 。 ． 每 ． ） １２ ３ 标本 的取材和制备 ．． 术后在 相应 时相 点过 量 乙醚麻 醉动物 ， 速开胸暴露心脏 ， 迅 从左心 室插管 至主 动脉根部 ， 右 在
按注射药 物溶 液容 积 不 同又 分 为 ３个 小 组 。每组 分 为术 后 ６ ｈ １ 、 、 ， 共 ５个时相点 ， 时相 点动物 ６只。各组 间 、２ｈ２ ｈ３ｄ ７ｄ ４ 每 动物体重 无显著差异 。 １２２ 动物模型 的建立 ．．
使用 Ⅳ型胶原 酶建 立脑 出血 模型