病理制片技术——常用试剂及染液的配制
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病理制片技术——常用试剂及染液的配制
一、Harris氏苏木精染色液的配制
1.试剂准备:苏木精10 g,硫酸铝钾80 g,无水乙醇200 ml,蒸馏水2000 rnl,氧化汞
3 g,冰乙酸40ml。
2.配制步骤
(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内,加入80 g硫酸铝钾后置电炉或
电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。
(2)将200 ml无水乙醇注入一只300 ml的三角烧瓶内,加入10 g苏木精摇动使之完全溶
解。
(3)将已完全溶解于无水乙醇的苏木色精液体缓缓注入已完全溶解的2000 ml硫酸铝钾液体
中,继续加热至液体沸腾关闭电源。此时液体应呈透明的玫瑰红色。
(4)将3 g氧化汞溶于20ml蒸馏水中搅匀后缓缓(一定要缓慢)方入未被氧化的苏木精液体中,
边加氧化汞边搅拌。此时苏木精被氧化,液体的颜色会迅速地变成深蓝紫色。
(5)氧化汞加完后用玻棒充分的搅拌液体并继续加热至液体再度沸腾关闭电源。
(6)用湿毛巾保护,将装有停止沸腾的热苏木精的三角烧瓶转移至冷水中迅速降温至室温。
(7)密封瓶口室温避光直射储存备用,临用前每100 ml苏木精液加入2~3 ml冰乙酸混匀。
二、伊红染色液的配制
l. 试剂准备;伊红Y 20 g,蒸馏水1500 ml,95%乙醇500 ml,冰乙酸lml。
2.配制步骤
(1)先将20 g伊红Y溶于500 m1蒸馏水中,用玻棒搅拌至其完全溶解后再加入1000 ml 蒸馏水并搅匀,液体呈深红色。
(2)加入500 ml 95%乙醇并搅匀,此时液体由深红色转变为荧光绿色。
(3)加入lml冰乙酸并搅匀,密封瓶口室温储存备用。
三、HE染色分化液的配制
0.5%盐酸乙醇液:蒸馏水300 ml与95%乙醇700 ml混合后加入浓盐酸5 ml混匀。
四、HE染色返蓝液的配制
0.5%氢氧化氨液:在1000毫拜蒸馏水中溶入5毫升浓氢氧化氨混匀