病理制片技术——常用试剂及染液的配制

病理制片技术——常用试剂及染液的配制一、Harris氏苏木精染色液的配制1．试剂准备：苏木精10 g，硫酸铝钾80 g，无水乙醇200 ml，蒸馏水2000 rnl，氧化汞3 g，冰乙酸40ml。

2．配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内，加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。

(2)将200 ml无水乙醇注入一只300 ml的三角烧瓶内，加入10 g苏木精摇动使之完全溶解。

(3)将已完全溶解于无水乙醇的苏木色精液体缓缓注入已完全溶解的2000 ml硫酸铝钾液体中，继续加热至液体沸腾关闭电源。

此时液体应呈透明的玫瑰红色。

(4)将3 g氧化汞溶于20ml蒸馏水中搅匀后缓缓(一定要缓慢)方入未被氧化的苏木精液体中，边加氧化汞边搅拌。

此时苏木精被氧化，液体的颜色会迅速地变成深蓝紫色。

(5)氧化汞加完后用玻棒充分的搅拌液体并继续加热至液体再度沸腾关闭电源。

(6)用湿毛巾保护，将装有停止沸腾的热苏木精的三角烧瓶转移至冷水中迅速降温至室温。

(7)密封瓶口室温避光直射储存备用，临用前每100 ml苏木精液加入2～3 ml冰乙酸混匀。

二、伊红染色液的配制l. 试剂准备；伊红Y 20 g，蒸馏水1500 ml，95％乙醇500 ml，冰乙酸lml。

2．配制步骤(1)先将20 g伊红Y溶于500 m1蒸馏水中，用玻棒搅拌至其完全溶解后再加入1000 ml 蒸馏水并搅匀，液体呈深红色。

(2)加入500 ml 95％乙醇并搅匀，此时液体由深红色转变为荧光绿色。

(3)加入lml冰乙酸并搅匀，密封瓶口室温储存备用。

三、HE染色分化液的配制0.5％盐酸乙醇液：蒸馏水300 ml与95％乙醇700 ml混合后加入浓盐酸5 ml混匀。

四、HE染色返蓝液的配制0.5％氢氧化氨液：在1000毫拜蒸馏水中溶入5毫升浓氢氧化氨混匀。

常用染色液的配制

一、常用染色液的配制⒈碘—碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂.配方:碘化钾2g ;蒸馏水300ml ；碘1g先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内.用时可将其稀释2—10倍,这样染色不致过深，效果更佳。

⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。

配方：（1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉；95％酒精10ml ；过滤后再加入10ml甘油（2)先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70％酒精50ml.（3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液.⒊1％醋酸洋红（aceto carmine）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。

配方：洋红1g ；45％醋酸100ml煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4％铁明矾溶液1～2滴（不能多加，否则会发生沉淀)，放入棕色瓶中备用.⒋改良苯芬品红染色液（Carbol fuchsine) 核染色剂。

配制步骤：先配成三种原液，再配成染色液。

原液A:3g碱性品红溶于100ml 70％酒精中。

原液B：取原液A10ml加入到90ml 5％石炭酸水溶液中。

原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林（38％的甲醛）.（原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用）染色液：取C液10～20ml，加45％冰醋酸80～90ml，再加山梨醇1～，配成10％～20％浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著(若立即用，则着色能力差）。

适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。

山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。

⒌中性红(neutral red)溶液用于染细胞中的液泡,可鉴定细胞死活。

病理室常用试剂配制方法

苏木精染色液的配制
人工氧化：是指在配制苏木精染液时加入一定量的氧化剂如氧化汞、碘酸钠等可立即使苏木精氧化成苏木红.但要注意加入氧化剂的量不能太多,不要使苏木精分子全部氧化变成苏木红,否则,苏木精染液的染色力减弱甚至失效.
苏木精染色液的配制
苏木精氧化剂中首选碘酸钠.其优点是在室温下易溶于水,不需煮沸就能放氧.氧化后,产生的碘化钠是无害的,染液的稳定性好.而氧化汞需要在苏木精染液煮沸时加入才能放氧,当开始放氧时又要立即把染液置入冷水中终止放氧.随后苏木精染液每天都会在液面形成一层金属膜,需要把染液过滤后才能用以染色,而汞盐也是一种毒性物质.
苏木精染色液的配制
苏木精的媒染：苏木精被氧化成苏木红,为弱酸性,染色浅淡. 但当加入二价或三价的金属盐如铝、铁盐后,染料分子就能与这些金属盐的离子结合形成色淀.这种色淀具有阳电荷,和带负电荷的DNA极性吸着而完成染色.这些二价或三价的金属盐就称为媒染剂.
苏木精染色液的配制
配制苏木精使无染色力
苏木精染色液的配制
苏木精的氧化与下列因素有关：苏木精染液PH值.染液偏碱性氧化快,中性时稍慢,酸
性时很慢,所以加酸时的苏木精染液可延缓氧化. 氧化剂的量.加入人工氧化剂后苏木精可立即被氧化
成熟可用.自然氧化和供氧量有关.如靠近阳光、染液通风、经常摇动等可加速氧化. 氧化时苏木精液的温度.用碘酸钠等作氧化剂时,在常温下加入即可,而用氧化汞作氧化剂时,需把苏木精液煮沸时加入才能放氧.
福尔马林的配制
固定液的种类很多,分为单纯固定液和混合固定液.
常用单纯固定液：1.甲醛<formaldehyde ；
2.乙醇<alcohol> ；
又名乙酸

常用染色液配方

实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。

2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。

将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。

将两者混合即成。

3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。

将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。

两液混合即成。

4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。

5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。

7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。

8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。

实验室常用染色液和试剂配方

实验室常用染色液和试剂配方染色液和试剂在实验室中被广泛使用，用于各种科学研究和实验。

它们可以用来染色细胞、分析化合物和反应产物、诊断疾病等。

下面是一些常用的染色液和试剂配方。

1. Hematoxylin-Eosin染色液：Hematoxylin-Eosin（HE）染色液是一种经典的组织染色方法，常用于病理学研究和诊断。

配方如下：- Hematoxylin染色液：将5 g hematoxylin溶解在100 mL乙醇中，加入2 mL盐酸和900 mL蒸馏水，最后调节pH值为5-6-酸性酒红染液：将0.5g酸性酒红溶解在100mL乙醇中。

- Eosin染色液：将0.5 g eosin溶解在100 mL乙醇中。

2. Giemsa染色液：Giemsa染色液用于染色细胞，特别是白细胞，常用于血液学和微生物学研究。

配方如下：- Giemsa染色液：将4 g Giemsa粉末溶解在1 L蒸馏水中。

可以加入2 mL甲醇增强染色效果。

3.厌氧培养试剂：用于厌氧条件下培养微生物的试剂。

配方如下：- Thioglycollate培养基：将11.5 g thioglycollate溶解在1 L蒸馏水中，加热至溶解。

- Dithiothreitol（DTT）溶液：将1 g DTT溶解在100 mL蒸馏水中，用10 mL离心管分装，-20℃保存。

4. Bradford试剂：用于蛋白质的浓度测定，常用于生物化学和分子生物学实验。

配方如下：- Coomassie Brilliant Blue G-250：将100 mg染料溶解在50 mL浓硫酸中，加热至溶解。

再用1 L蒸馏水稀释至30%浓度。

5. Gill's胶片显影试剂：用于胶片的显影，常用于分子生物学实验。

配方如下：-显影溶液A：将1.5g氯化钴和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.8-显影溶液B：将3g溴化钾和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.86.RIPA裂解缓冲液：用于细胞或组织的裂解，提取蛋白质或RNA，常用于生物化学和分子生物学实验。

常用染色液和试剂的配制

一、埃利希(EhrIiCh)氏苏木精染液先将苏木精2g溶于IOOm1乙醇中，再加冰醋酸IOm1,混合后加蒸储水IOOm1和IOOm1甘油，然后加硫酸铝钾(约Iog)至饱和，搅拌均匀，倒入瓶中。

将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上，放在暗处通风的地方，并经常摇动促进“成熟”，直到液体颜色变为深红色为止。

成熟时间约2-4周。

若加0.4g碘酸钠可加快成熟。

二、吉姆萨(GiemSa)氏母液将吉姆萨粉末Ig先溶于少量甘油，在研钵内研磨30min以上，至看不见颗粒为止，再将全部(66m1)剩余甘油倒入，于56℃温箱内保温2h。

然后再加入甲醇(66m1),搅匀后保存于棕色瓶中。

母液配制后放入冰箱可长期保存，一般刚配制的母液染色效果欠佳，保存时间越长越好。

临用时用PH6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。

三、瑞(Wright)氏染液称取瑞氏染料粉末OJg于研钵内研细后，加入少量甲醇再反复研磨，最后将全部甲醇(总共60m1)加入研匀，染料全部溶解后，将染液保存于棕色瓶内备用。

四、醋酸洋红染液将洋红粉末Ig倒入IOOm145%醋酸溶液中，边煮边搅拌，煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤，即可使用。

也可再加入1%~2%铁明矶水溶液5-10滴，至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。

如制作永久标本染色时，可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴，至染色液呈浅蓝色为止。

五、硫堇染液(工作液)①干液(硫堇)：硫堇Ig或2g溶于Ioom150%乙醇中，溶解后过滤备用；②醋酸钠缓冲液：醋酸钠∙3H2O9.7g,巴比妥钠14.7g,溶于50Om1蒸储水中；③0.1mo1/1盐酸；按①：②：③=40：28：32比例配成混合液，调pH5.7±0.2,即得硫堇工作液。

六、0.02%盾纳斯绿B(JanusGreenB)用0.9%生理盐水溶液配制。

七、甲基绿一派洛宁染液(Unna试剂)派洛宁0.25g,甲基绿0.15g,95%乙醇20m1,甘油20m1。

染色液配制方法

常用染色液的配制1．骆氏美蓝染色液甲液：美蓝0.3g 95％酒精溶液 30ml乙液：0.01％氢氧化钠溶液 100ml甲液与乙液相混合即成。

2．1％美蓝酒精溶液美蓝1g 95%酒精溶液 100ml，充分混合溶解即可。

3．革兰氏染色液（1）草酸铵结晶紫染液甲液：结晶紫2.0g 95％酒精20ml乙液：草酸铵0.8g 蒸馏水80ml用时先以蒸馏水将甲液稀释5倍，然后加20ml于80ml乙液中，混合即成。

（2）革兰氏碘溶液碘片 1g 碘化钾 2g蒸馏水 300ml先将碘化钾置于干净的乳钵中，加入蒸馏水少许（约5ml），待碘化钾完全溶解后，再加入碘片，略作研磨，使碘片完全溶解，然后徐徐加水，充分混合，直至足量。

切忌将碘片与碘化钾一起直接加入瓶中，一次加水配制。

否则，碘片往往不能完全溶解而影响碘的浓度。

（3）95％酒精（4）复染色液可用碱性复红或沙黄液及稀释的石炭酸复红液。

碱性复红液：碱性复红0.1g 蒸馏水100ml，混合即成。

沙黄液：3.41％沙黄酒精溶液10ml、蒸馏水90ml。

稀释石炭酸复红液：石炭酸复红液10ml、蒸馏水90ml，混合即成。

4．抗酸染色液（1）石炭酸复红液 3％碱性复红酒精溶液10ml、5％石炭酸水溶液90ml，二液混合即成。

（2）盐酸酒精溶液浓盐酸3ml、95％酒精溶液97ml，二液混合即成。

5．瑞氏染色液瑞氏染料粉0.1g、纯甘油1.0ml、中性甲醇60ml。

置染料粉于乳钵中，加入甘油，充分研磨，再徐徐加入甲醇，边研磨边搅拌，促其溶解，然后盛于棕色瓶中，置暗处过夜，次日以滤纸滤过后，仍盛于棕色瓶中，保存于暗处备用。

磷酸盐缓冲液：溶液一：Na2HPO4.12H2O（磷酸二氢钠）23.864g、蒸馏水1000ml。

溶液二：KH2PO4（磷酸二氢钾）9.078g、蒸馏水1000ml。

用时以溶液一4份与溶液二1份混合即成。

6．姬姆萨氏染色液取姬姆萨氏染料粉0.6g，加入甘油50ml，置于55—60度温度中1.5—2h，再加入甲醇50ml，静置一日以上，滤过后即可作染料原液用。

病理制片技1

病理制片技术——常用特殊染色一、六胺银染色1．第一步准备工作：配制六胺银染液，将10％硝酸银2．5ml倒入干净的染色缸内，加入2％硼砂5ml，液体呈乳白色，再加入3％乌洛托品40ml，染液逐渐呈透明状。

2．第二步染色过程：事先把温箱调至60℃备用，切片经脱蜡至水，用1％过碘酸氧化10 min，水洗，然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h，染真菌时间要相对短一些，一般情况下肉眼看到染液变色，切片呈棕色时从温箱取出染色缸，倒掉染液，自来水冲洗1min，用0．25％氯化金调色1 min，水洗后，用3％硫代硫酸钠染5min,水洗，用苏木精染液浅染，水洗、分化、冲水返蓝，伊红染10 s，最后经脱水、透明、封固。

3．图示结果：基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色，核呈蓝色。

4．注葸事项(1)掌握染色温度和时间，如60℃染1 h，80℃染30～40 min。

(2)真菌类染色时间相对要短，染色时间过长，切片染色过深，可用分色剂处理。

二、黏液卡红染色1．第一步准备工作：配制黏卡染液，将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内，加入5 0％L醇100 rnl混合摇匀，再加入氯化铝0．5g，水浴加温逐渐煮沸并搅动液体，使其充分溶解(注意染液容易外溅)，数分钟后，染液由红色变成透明深紫红色，冷却后将液体倒入量筒，再加入50％乙醇至原量，过滤，放人冰箱备用。

2．第二步染色方法：染液使用时原液与蒸馏水比例为1：4稀释.切片厚5 um，脱蜡至水，经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上，染液可以重复使用多次，但要适当延长染色时间．切片水洗后，脱水、透明、封固。

3．图示结果：黏液为红色，胞核为蓝色．4．注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液，4份蒸馏水。

(2)用酶消化对照染色特异性很大，消化时间为20 min。

(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。

三、石碳酸品红染色1．第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液：盐基性品红溶于乙醇内。

病理制片技术――常用特殊染色

病理制片技术――常用特殊染色1．第一步准备工作：配制六胺银染液，将10％硝酸银2．5ml倒入干净的染色缸内，加入2％硼砂5ml，液体呈乳白色，再加入3％乌洛托品40ml，染液逐渐呈透明状。

2．第二步染色过程：事先把温箱调至60℃备用，切片经脱蜡至水，用1％过碘酸氧化10 min，水洗，然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h，染真菌时间要相对短一些，一般情况下肉眼看到染液变色，切片呈棕色时从温箱取出染色缸，倒掉染液，自来水冲洗1min，用0．25％氯化金调色1 min，水洗后，用3％硫代硫酸钠染5 min,水洗，用苏木精染液浅染，水洗、分化、冲水返蓝，伊红染10 s，最后经脱水、透明、封固。

3．图示结果：基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色，核呈蓝色。

4．注葸事项(1)掌握染色温度和时间，如60℃染1 h，80℃染30～40 min。

(2)真菌类染色时间相对要短，染色时间过长，切片染色过深，可用分色剂处理。

二、黏液卡红染色1．第一步准备工作：配制黏卡染液，将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内，加入50％L醇100 rnl混合摇匀，再加入氯化铝0．5g，水浴加温逐渐煮沸并搅动液体，使其充分溶解(注意染液容易外溅)，数分钟后，染液由红色变成透明深紫红色，冷却后将液体倒入量筒，再加入50％乙醇至原量，过滤，放人冰箱备用。

2．第二步染色方法：染液使用时原液与蒸馏水比例为1：4稀释.切片厚5 um，脱蜡至水，经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上，染液可以重复使用多次，但要适当延长染色时间．切片水洗后，脱水、透明、封固。

3．图示结果：黏液为红色，胞核为蓝色．4．注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液，4份蒸馏水。

(2)用酶消化对照染色特异性很大，消化时间为20 min。

(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。

三、石碳酸品红染色1．第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液：盐基性品红溶于乙醇内。

一种用于病理切片的快速组织处理试剂的制作方法

一种用于病理切片的快速组织处理试剂的制作方法病理切片是医学领域中重要的诊断手段之一，而组织处理是切片制备的关键步骤。

本文将详细介绍一种用于病理切片的快速组织处理试剂的制作方法，以帮助病理学家和实验室技术人员提高工作效率。

一、试剂原料1.固定剂：戊二醛溶液（25%浓度）。

2.脱水剂：乙醇（95%浓度）。

3.透明剂：二甲苯。

4.包埋剂：石蜡（熔点为56-58℃）。

5.染色剂：苏木精-伊红染液。

二、制作方法1.固定组织将新鲜的组织样本放入戊二醛溶液中，固定4-6小时，期间轻轻摇动容器，使组织充分固定。

2.脱水将固定好的组织样本取出，用95%乙醇进行脱水处理，每次脱水时间为1小时，共进行3次脱水。

3.透明将脱水后的组织样本放入二甲苯中，透明处理时间为1小时。

4.包埋将透明处理好的组织样本放入石蜡中，加热至石蜡完全熔化，然后将组织样本浸入石蜡中，冷却后形成包埋块。

5.切片将包埋好的组织块进行切片，切片厚度为4-6微米。

6.染色将切好的组织切片放入苏木精-伊红染液中，染色时间为1-2小时。

三、注意事项1.在固定、脱水、透明等过程中，要确保组织样本充分处理，以提高切片质量。

2.切片时，刀片要保持锋利，避免产生刀痕，影响观察。

3.染色过程中，要严格控制染液浓度和染色时间，以保证染色效果。

四、优点1.本方法操作简便，易于掌握。

2.处理速度快，可提高工作效率。

3.切片质量高，有利于病理诊断。

总结：本文介绍了一种用于病理切片的快速组织处理试剂的制作方法，包括固定、脱水、透明、包埋、切片和染色等步骤。

使用该方法可提高病理切片制备的效率和质量，为病理诊断提供可靠依据。

常用染色液的配制

常用染色液的配制1.吕氏(Loefflev)美蓝染色液A液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液B液:10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。

2.石炭酸复红染色液A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解、配成A液。

B液:5%石炭酸溶液取A液10ml、B液90ml混合即可。

一般可将此溶液稀释5-10倍使用。

但稀释液易变质失效,一次不宜多配。

3.革兰氏(gram)染色液(1)草酸铵结晶紫染液:A液:1%结晶紫(Crystal violet)95%酒精溶液B液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。

(2)路哥氏(Lugol)碘液:碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部溶解后,加够水即成。

(3)95%酒精溶液(4)蕃红(沙黄)复染液:2.5%蕃红(Safranlne O)95%酒精溶液。

取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。

4.芽孢染色液(1)5%孔雀绿(Malachite green)溶液。

(2)0.5%蕃红溶液。

(3)苯酚品红溶液称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。

再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合,过滤备用。

(4)黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液,置沸水浴中30min后,滤纸过滤二次,补加水到100ml, 然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

5.荚膜染色液(1)黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,配成5%溶液,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

(2)蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。

6.鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。

常用染色液的配制

常用染色液的配制常用染色液的配制1.吕氏（Loefflev）美蓝染色液A液：2%美蓝（Methylene blue）95%酒精溶液B液：10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。

2.石炭酸复红染色液A液：4%碱性复红（basic fuchsin）95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解、配成A液。

B液：5%石炭酸溶液取A液10ml、B液90ml混合即可。

一般可将此溶液稀释5-10倍使用。

但稀释液易变质失效，一次不宜多配。

3.革兰氏（gram）染色液（1）草酸铵结晶紫染液：A液：1%结晶紫（Crystal violet）95%酒精溶液B液：1%草酸铵（Ammonium oxalate）溶液取A液20mlB液80ml，静置48/小时后使用。

（2）路哥氏（Lugol）碘液：碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液另，待碘全部溶解后，加够水即成。

（3）95%酒精溶液（4）蕃红（沙黄）复染液：2.5%蕃红（Safranlne O）95%酒精溶液。

取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。

4.芽孢染色液（1）5%孔雀绿(Malachite green)溶液。

（2）0.5%蕃红溶液。

（3）苯酚品红溶液称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。

再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合，过滤备用。

（4）黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液，置沸水浴中30min后，滤纸过滤二次，补加水到100ml，然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

5.荚膜染色液（1）黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min，配成5%溶液，然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

（2）蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。

6.鞭毛染色液A液：单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml，福尔马林（15%）2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。

染液配制方法

88ml 1g
碘化钾
2g
蒸馏水 95%酒精溶液
300ml
0.1%碱性品红水溶液
[操作步骤] 1．Stirling 氏结晶紫溶液过滤滴于涂片上 50~60 秒钟。
2．充分水洗。
3．革兰氏碘溶液 30 秒钟。 4．水洗。
5．95%酒精溶液分化至清晰为止。 6．水洗。 7．0.1%碱性品红溶液 30 秒钟；
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶解时可稍加热，最
后补足蒸馏水量。配成后贮于棕色瓶内备用，如变为浅黄色即不能使用。
脱色剂：
95%乙醇
或丙酮乙醇溶液
100 mL
95%乙醇
70 mL
丙酮
30 mL
3 . 番红花红染色液： 2.5%番红 95%酒精溶液
10 mL
蒸馏水
90 mL
21.革兰氏染色液 (1)结晶紫(cristal violet)液：结晶紫乙醇饱和液(结晶紫 2g 溶于 20mL95%乙醇中)20mL， 1%草酸铵水溶液 80mL。将两液混匀置 24h 后过滤即成。此液不易保存，如有沉淀出现，需重新配制。 (2)芦戈(Lugol)氏碘液：碘 1g，KI 2g，蒸馏水 300mL。先将 KI 溶于少量蒸馏水中，然后加入碘使之完全溶解，再加蒸馏水至 300mL，即成。配成后贮于棕色瓶内备用，如变为浅黄色能使用。 (3)95%乙醇：用于脱色，脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。 (4)稀释石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱液(碱性复红 1g，95%乙醇 10mL，5%石炭酸 90mL)10mL，加蒸馏水 90mL。 (5)番红溶液：番红 O(safranine O，又称沙黄 O)2.5g，95%乙醇 100mL，溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中，用时取 20mL 与 80mL 蒸馏水混匀即可

病理室常用试剂配制方法

病理室常用试剂配制方法病理室是进行病理学检查和诊断的重要场所，常用试剂的正确配制对于病理学工作的准确性和有效性具有重要作用。

以下是病理室常用试剂的配制方法：1.石蜡：石蜡是进行组织切片的必备试剂。

石蜡通常以晶片或颗粒形式提供，并需要经过熔化和冷却才能获得良好的切片。

一般的石蜡配方是由60%的苯乙烯、25%的苯、10%的Paraplast（一种特殊石蜡）和5%的硬脂酸混合而成。

将这些成分加入石蜡加热锅中，加热至温度达到石蜡的熔点，然后冷却至合适的温度即可。

2.组织切片染色试剂：组织切片染色是病理学检查中常用的技术之一，常用的染色试剂包括血液学染色试剂（如H&E染色）、免疫组织化学染色试剂（如免疫组化试剂）等。

这些试剂的配制方法略有不同。

-H&E染色试剂：将碱性伊红和酸性亚瑟尔蓝按照一定比例（通常为3：1）混合即可得到H&E染色试剂。

-免疫组化试剂：免疫组织化学检测需要用到抗体，配制方法和商业试剂盒提供的说明一般有较大区别，通常需要先对抗体进行稀释，将其与一定浓度的缓冲液混合，再加入适量的显色试剂等。

具体的配制方法应根据实际试剂和生产商提供的说明进行操作。

3.缓冲液：缓冲液用于保持试剂或溶液的酸碱度稳定，常用的缓冲液包括PBS缓冲液、Tris缓冲液、甘氨酸缓冲液等。

缓冲液的配制方法如下：-PBS缓冲液：将8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4加入1L的去离子水中，搅拌溶解。

最后用盐酸或氢氧化钠调节pH至7.4即可。

- Tris缓冲液：将60.6g Tris加入1L的去离子水中，搅拌溶解。

最后使用盐酸或氢氧化钠调节pH至所需范围。

-甘氨酸缓冲液：将120g甘氨酸加入1L的去离子水中，搅拌溶解。

使用盐酸或氢氧化钠调节pH至所需范围。

4.酶消化试剂：在一些病理学检查中需要进行组织的酶消化，用于去除组织中的胶原等物质，以便进一步的分析。

常用的酶消化试剂包括胰蛋白酶、透明质酸酶、DNA酶等。

病理使用试剂的配制流程

病理使用试剂的配制流程1. 简介本文档介绍了病理实验室中常用的试剂的配制流程，帮助实验人员正确制备各种试剂以保证实验的顺利进行。

2. 前期准备在开始试剂的配制之前，需要做一些前期准备工作，包括准备好所需的原料、器材和工作区域等。

确保工作区域干净整洁，避免杂质或细菌的污染对试剂质量产生影响。

3. 试剂配制步骤3.1 试剂A配制1.准备所需原料A1、A2、A3等。

按照配方比例称取所需的原料量。

2.在一个干净的容器中，按照配方比例依次加入原料A1、A2、A3等。

3.使用搅拌器将原料均匀混合，直至溶解彻底。

4.检查溶液是否澄清，如有悬浮物或沉淀物应重新调制。

5.将配制好的试剂A进行标识，包括试剂名称、配制日期和配制人员等信息。

6.将试剂A存放在储存容器中，并妥善密封。

3.2 试剂B配制1.准备所需原料B1、B2、B3等。

按照配方比例称取所需的原料量。

2.在一个干净的容器中，按照配方比例依次加入原料B1、B2、B3等。

3.使用搅拌器将原料均匀混合，直至溶解彻底。

4.检查溶液是否澄清，如有悬浮物或沉淀物应重新调制。

5.将配制好的试剂B进行标识，包括试剂名称、配制日期和配制人员等信息。

6.将试剂B存放在储存容器中，并妥善密封。

3.3 试剂C配制1.准备所需原料C1、C2、C3等。

按照配方比例称取所需的原料量。

2.在一个干净的容器中，按照配方比例依次加入原料C1、C2、C3等。

3.使用搅拌器将原料均匀混合，直至溶解彻底。

4.检查溶液是否澄清，如有悬浮物或沉淀物应重新调制。

5.将配制好的试剂C进行标识，包括试剂名称、配制日期和配制人员等信息。

6.将试剂C存放在储存容器中，并妥善密封。

4. 试剂质量控制为确保试剂的质量和稳定性，需要进行试剂的质量控制。

常见的方法包括pH 值测定、浓度测定、纯度测试等。

在配制试剂之前和配制完成后，都需要进行相应的质量控制测试，以验证试剂的质量符合预期要求。

5. 结论通过本文档的介绍，我们了解了病理使用试剂的配制流程，包括前期准备、试剂配制步骤和试剂质量控制等内容。

病理制片技术

病理制片技术一、方法石蜡切片，苏木精—伊红染色二、试剂配制苏木精和伊红染液：配制方法很多，现介绍一种既省染料又比较耐用，而且染色效果较稳定的配制方法Gili苏木精配方：甲液：苏木精……………………………………2g碘酸钠……………………………………0.2g乙二醇……………………………………250ml乙液：硫酸铝铵…………………………………17.6g蒸馏水…………………………………730ml将甲、乙液混合后加冰乙酸20ml，即可使用。

1%酸性伊红染液：称取伊红20g，加入蒸馏水500ml，溶解后加HCL110ml，用蒸馏水反复洗3次，过滤，渣烤干，溶于95%酒精1000ml备用。

可长期保存，用时取备用液和95%酒精等量混合。

三、操作步骤1、固定手术活检下的组织应立即放入固定液中固定。

常用的固定液为10%甲醛。

配方如下：40%甲醛…………………………………1份自来水……………………………………9份2、脱水将固定好的组织，根据检验要求，切成适宜制作切片的小组织块，经流水冲洗后放入各级酒精脱水，一般从70%酒精开始→80%酒精→95%Ⅰ酒精→95%酒精Ⅱ→100%Ⅰ酒精→100%Ⅱ酒精。

时间各为1-3小时。

3、透明组织经脱水后，入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ各30~60分钟透明。

4、浸蜡组织从二甲苯中出来后，入石蜡2次或3次，以熔点较低的作为石蜡Ⅰ，然后再换熔点较高的。

整个浸蜡过程约3-4小时。

5、包埋将已熔化的石蜡倾入金属的组织包埋框内，随机将浸蜡组织块用加温的镊子送置于包埋框内，将切面朝下，放平放正。

等石蜡凝固，用刀片把已经包好组织的石蜡块的周边修切完整。

组织外围的石蜡不宜留的过多。

6、切片将包埋好的石蜡组织块的底部加热固定在金属的或木制的支持器上，然后放入冰箱冷冻室内稍冻片刻，增强硬度。

再将组织块固定在切片机上进行修整，真正组织全部暴露在切面时，即可进行切片。

切片时应根据需要调整切片的厚度。

7、贴附将切下的切片先放入50%左右的酒精中，再用玻片将其捞入45℃左右的温水中，使切片伸展于水面上，如仍有细小的皱褶，可用镊子细心地将皱褶拨开。

常用染色液的配制

常用染色液的配制一、骆氏美蓝染色液（碱性美蓝染色液）甲液：美蓝0.3克，95%酒精30ML乙液：0.01%氢氧化钾溶液100ML甲、乙混合即可，密闭保存，一年后可获多色性。

二、革兰氏染色液1、草酸铵结晶紫染液甲液：结晶紫2G，95%酒精20ML，或结晶紫饱和酒精溶液2ML加蒸馏水18ML。

乙液：草酸铵0.8克，蒸馏水80ML。

甲、乙混合，静置48小时，过滤后备用，可较久贮存。

2、革兰氏碘溶液碘片1G，碘化钾2G，蒸馏水300ML碘化钾+3－5ML蒸馏水，溶解后+碘片，摇匀后+蒸馏水至足量。

3、95%酒精，用作脱色剂4、碱性复红染色液碱性复红（一品红）0.1G，蒸馏水100ML可用沙黄水溶液或稀释石炭酸复红液代替此液。

沙黄水溶液：沙黄饱和酒精溶液+10倍蒸馏水，保存期小于4个月。

稀释石炭酸复红染色液：石炭酸复红液10ML+蒸馏水90ML三、抗酸染色液1、石炭酸复红染色液3%碱性复红酒精溶液10ML+5%石炭酸水溶液90ML，过滤即可。

2、盐酸酒精液浓盐酸3ML+95%酒精97ML四、克利特氏荚膜染色液1、美蓝溶液：美蓝1G+96%酒精10ML+100ML蒸馏水2、碱性红溶液：碱性复红0.03G+1ML96%酒精+99ML蒸馏水五、瑞特氏染色液1、0.1G瑞特氏染粉研磨，再加中性甘油3ML，充分研磨，后徐徐加入甲醇液60ML，边研边搅，存于棕色瓶中过夜，过滤后贮于棕色瓶中，越久越好。

2、磷酸盐缓冲液甲液：磷酸氢二钠23.86G，1000ML蒸馏水。

乙液：磷酸二氢钾9.07G，1000ML蒸馏水。

4份甲液+1份乙液即可。

常用染料和试剂的配制与使用

常用染料和试剂的配制与使用1. 碘－硫酸法植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素，纤维素被硫酸水解后，遇碘呈蓝色反应。

因此用碘－硫酸法可鉴定细胞壁的成分。

试剂配制方法：1% 碘液将1.5 克碘化钾溶于100 毫升的蒸馏水中，待完全溶解后，加入1 克碘，震荡溶解。

66.5% 硫酸7 份浓硫酸加入3 份蒸馏水配制而成。

配制时要将浓硫酸慢慢地加入水中，并不断地用玻璃棒搅拌，否则会因急剧发热，而使容器炸裂。

2. 苏丹Ⅲ反应苏丹Ⅲ可将细胞中脂肪、栓质、角质染为桔红色，因此可用此染料显示出上述物质在细胞中的分布和位置。

配制方法：将苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染料0.1 克，溶于10 毫升95% 酒精中，然后加入10 毫升甘油。

3. 间苯三酚反应法间苯三酚反应是植物显微化学中确定木质化细胞壁的最常用和最简单的方法。

这一反应的原理是当间苯三酚在酸性环境下与细胞壁中的木质素相遇时，发生樱桃红色或紫红色反应。

其方法是将要鉴定的切片先用一滴1mol/L盐酸浸透（间苯三酚要在酸性环境下才能与木质素起作用），然后滴一滴5-10% 间苯三酚的85% 酒精溶液，木质化的细胞壁即发生颜色反应。

4．碘液测试淀粉法淀粉遇碘呈蓝色反应，它是鉴定淀粉的最常用方法。

碘液配制方法：将2 克碘化钾放入5 毫升蒸馏水中，加热使其完全溶解；然后加入1克碘，完全溶解后用蒸馏水稀释至300毫升，放入具有毛玻璃塞的棕色玻璃瓶中，置于暗处保存。

测定淀粉时，可将上述溶液稀释2-10 倍，使染色不致过深，效果更好。

5. 压片法常用的染料(1) 醋酸洋红为压片法中最常用的染料。

配制方法是：先将100 毫升45% 醋酸水溶液放于烧瓶中煮沸，移去火焰，停止加热。

然后缓慢加入1 克洋红粉末，全部加入后再煮沸1-2分钟。

此时可将一枚生锈铁钉用棉线悬入溶液中约1 分钟后取出（铁为媒染剂）。

静置12 小时后经过过滤，放入磨口玻璃塞棕色瓶中保存备用。

(2) 石炭酸---品红为近年创用的一种优良核染色剂，将细胞核和染色体染为红紫色，细胞质一般不着色，背景清晰。

KMSOP组织病理技术室染色常用液体配制标准程序

病理技术室常用试剂配制程序（Reagent Confect Procedure of Pathology technology lab）1.目的(Purposes)：规范HE染色常用液体的配制以及质量控制。

2.范围(Scope)：染色常用液的配制方法、有效期及试剂的选择。

3.职责(Responsibility)：3.1病理技术员按此规程进行HE染色常用液体的配制。

3.2技术主管负责监督配制是否符合规程。

4.程序(Procedure)4.1苏木素染液的配制：4.1.1原料的准备（以配制2000ml为例）：蒸馏水（或者纯净水）1400ml、苏木精10g、硫酸铝（Al2(SO4)3.18H2O）100g、无水乙醇100ml、丙三醇（甘油）500ml、冰醋酸（乙酸）10ml、碘酸钠1.1g。

4.1.2配制硫酸铝饱和溶液：将100g硫酸铝溶解于1400ml蒸馏水中（硫酸铝需全部溶于水中，可适当加热加速溶解，但需冷切到室温才可）。

标记为A液。

4.1.3苏木精10g溶于100ml无水乙醇中，搅拌使苏木精充分溶解，标记为B液。

4.1.4将碘酸纳1.1g充分溶于10ml左右的蒸馏水中，标记为C液。

4.1.5将C液加入B液中，充分搅拌5分钟左右，将混合液加入到A液中，充分搅拌5分钟，然后加入冰醋酸10ml，混匀，再加入丙三醇（甘油）500ml，混匀，此时肉眼观察为暗红色的液体，即为配制好的半氧化型苏木素溶液。

4.1.6将配好的溶液过滤后即可装入试剂瓶，贴上配制标签。

4.1.7本试剂有效期为6个月。

4.2酒精伊红溶液的配制：4.2.1原料的准备（以配制2000ml为例）：伊红Y(水溶性)粉剂10g、蒸馏水2000ml、乙酸（冰醋酸）100ml，95%乙醇溶液2000ml、滤纸。

4.2.2配制规程，将伊红Y（水溶性）10g充分溶解于2000ml蒸馏水中后，加入100ml乙酸（冰醋酸）充分混合后用滤纸过滤取沉渣在烤箱烤干后加入2000ml95%乙醇溶液即为配制好的酒精伊红溶液。

病理试剂的配制

病理试剂的配制
一、固定
乙醇—甲醛液（AF液）配方70%乙醇90ml
40%甲醛10ml
二、染色
1、哈瑞苏木素液的配制
【材料】苏木素1g
无水乙醇10ml
硫酸铝钾15g
红色氧化汞0.5—1g
蒸馏水200ml
【步骤】
(1)将苏木素溶入无水乙醇中，使之溶解。

(2)将硫酸铝钾和蒸馏水放入500ml三角烧瓶中加温搅拌，待硫
酸铝钾完全溶解时，再缓慢加入苏木素乙醇溶液，用玻璃棒搅之继续加热1min
(3)将火焰闭小，徐徐倾入红色氧化汞，再使溶液沸腾片刻，当
染液呈紫红色时，立即将染液置入冷水中，连续摇荡使之迅速冷却。

(4)正常室温下静置染液一夜，用滤纸过滤后即可使用。

使用前
每100ml染液加冰醋酸4ml
2、伊红染液
水溶性伊红液的配制
【材料】伊红Y 0.5—1g 蒸馏水100ml
【步骤】先将水溶性伊红加入蒸馏水中，用玻璃棒将伊红搅拌起泡沫后过滤，每100ml加冰醋酸1滴。

乙醇性伊红液的配制
【材料】伊红Y 0.5—1g 90%乙醇100ml
【步骤】先将伊红荣誉乙醇中，用玻璃棒研碎溶解后，每100ml 加冰醋酸1滴。

用乙醇伊红液染细胞后可不经洗涤直接用85%乙醇脱水。

三、酒精配制
1、95%酒精配制70%酒精
95%酒精274ml加水至400ml
2、95%酒精配制75%酒精
95%酒精79ml 加水至100ml
237ml加水至300ml
395ml加水至500ml
3、95%酒精配制80%酒精95%酒精421ml加水至500ml
4、95%酒精配制85%酒精95%酒精447ml加水至500ml。