果汁饮料中还原糖的测定--直接滴定法

果汁饮料中还原糖的测定
--直接滴定法
一、实验原理
将一定量的碱性酒石酸铜甲液，乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快和与酒石酸钾纳反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。

在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用除蛋白质后的样品进行滴定，样品溶液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原为其隐色体，溶液的蓝色消失，即为沉淀重点，根据样品溶液消耗量可计算出还原糖含量。

实验结果表明，1mol葡萄糖只能还原5mol多点的铜离子，且随反应条件变化而变化。

因此，不能简单的根据化学反应式直接计算出还原糖的含量，而是用已知浓度的葡萄糖标准溶液标定的方法，或利用通过实验编制出的还原糖检索表来计算。

二、实验试剂与仪器
①碱性酒石酸甲液称取15.00g五水硫酸铜及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释到1000ml
②碱性酒石酸乙液称取50.00g酒石酸钾钠及75.00g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释到1000ml，储存于橡皮塞玻璃瓶中，
③葡萄糖标准溶液精密称取1.0000g经过99℃干燥至衡量的纯葡萄糖，加水溶解后移入1000ml容量瓶中，加入5ml盐酸，用水稀释到1000ml。

④酸式滴定管
⑤可调式电炉
三、操作方法
①样品处理
果汁饮料：吸取4.0ml样品，移入250ml容量瓶中，加水至刻度，混合后，备用。

②标定碱性酒石酸铜溶液
准确吸取碱性酒石酸铜钾液和乙液各5ml，置于150ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9ml葡萄糖标准溶液，加热使其在2min内沸腾（严格控制），准确沸腾30s，趁沸以每2s1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。

记录消耗葡萄糖标准溶液的体积。

同时平行操作3份，取平均值，按下式计算。

F=cV
F----------10ml碱性酒石酸铜溶液（甲液，乙液各5ml）相当于还原糖的质量，mg；
c----------葡萄糖标准溶液的浓度，mg/ml；
V----------标定时平均消耗葡萄糖标准溶液的总体积，ml
③样品溶液预测
吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各5.00ml，置于150ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠2粒，加热使其在2min内沸腾（严格控制），准确沸腾30s，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液，滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态。

待溶液蓝色变浅时，以2s1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。

记录样品溶液消耗的体积（样品中还原糖浓度根据预测加以调节，以0.1g/100g为宜，即控制样品溶液消耗体积10ml左右，否则误差太大）。

④样品溶液测定
吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各5.00ml，置于150ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠2粒，从滴定管中加入比预测时样品溶液消耗总体积少1ml的样品溶液，加热使其在2min内沸腾（严格控制），准确沸腾30s，趁热以2s1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。

记录样品溶液消耗的体积。

同时平行操作3份，取其平均值。

四、结果计算
F
还原糖（以葡萄糖计%）=——————*100
m（V/250）*1000
m------样品质量，g
F-------10ml碱性酒石酸铜溶液（甲液，乙液各5ml）相当于还原糖的质量，mg V-------测定时平均消耗样品的体积，ml
五、注意事项。