输血科操作规程

目录

1、输血前检测实验程序

2、改良低离子聚凝胺法实验操作规程

3、冰箱维护程序

4、ABO 血型鉴定

5、Rh（D）血型鉴定

6、抗体筛选和鉴定试验

7、临床自体输血标准操作规程

8、冰冻血浆溶化操作规程

输血前检测实验程序

1、实验要求

血清和血浆都可以用于交叉实验和抗体检测，最好是血清标本，标本使用限制在 3 天内，含有肝素等抗凝标本可以用凝血酶或硫酸鱼精蛋白处理使其凝集析出血清。允许通过静脉输液口采集标本，但必须丢弃受残留静脉输液影响的5ml标本。一般不允许使用溶血标本，对急性溶血性贫血和烧伤病人的溶血标本，在实验前后必须做溶血程度的比较。标本和输血申请单上的所有资料必须填写清楚并完全符合，否则应重抽标本。对所有用过的献血员和受血者标本必须在1-6℃冰箱至少保存7 天，所有实验都必须保证观察和记录同时进行，且记录和资料都必须至少保存 5 年。

2、血型检测

要求完成病人ABO 正反定型、Rh（D），献血员血型ABO 正定型（必要时做Rh 血型），D 阴性病人必须做Du 实验确定。

3、交叉试验

3.1 受血者交叉配血时所用的标本必须是输血前 3 天之内的。

3.2 配血时要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样，复查受血者和供血者ABO 血型（正、反定型），并常规检查患者Rh（D）血型（急诊抢救患者紧急输血时Rh（D）检查除外），正确无误时可进行交叉配血。

3.3 凡是输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩红细胞、手工分离浓缩血小板等患者，应该进行交叉配血试验。机器单采浓缩血小板、冷沉淀、新鲜血浆应与ABO 血型同型输注。

3.4 凡遇有下列情况时必须按《全国临床检验操作规程》要求完成凝聚胺交叉试验和检测不完全抗体的交叉试验（酶法、聚凝胺法、抗人球蛋白法）。除紧急输血和自身输血外，所有输入红细胞的其他制品均要求做血交叉试验。

3.5 其他试验

另外必须开展的试验有抗人球蛋白试验，抗体筛选、抗体鉴定、新生儿溶血病的全套实验。

改良低离子聚凝胺法实验操作规程

1、目的：减少交叉配血试验的假阳性。

2、适用范围：交叉配血、血型鉴定、抗体筛检血型血清学试验。

3、试剂来源：(台资)珠海贝索生物技术有限公司

4、采集与处理：

4.1 静脉采血3-4ml，并观察是否溶血、乳糜血，如有此现象应再留标本并做记录。

4.2 检查留样试管、标签、标号、姓名、血型是否齐全，如有遗漏应拒收。

4.3 将血标本试管放37℃水浴中10 分钟，离心。

5、标准操作：

5.1 主（次）管加入受（供）血者血清 2 滴，加供（受）血者4%红细胞盐水悬液 1 滴。

5.2 各管加LIM0.8ml，混匀，静置 1 分钟，各管加Polybrene Reagent 1 滴，混匀，3000转/分离心15 秒，倒出上清液（残留约0.1ml），轻摇，肉眼可见明显的凝集状（如无凝集须重做），加假凝集清除液 1 滴于管底，轻摇，凝集 1 分钟内消失呈均匀混悬液，为阴性，凝集 1 分钟内不能被消除，即为阳性。

5、结论：

阳性表示受（供）血者血清中含供（受）者红细胞血型Ag 相应的Ab（IgG、IgM），供受血者不相容，阴性表示供受血者相容。

6、注意事项：

6.1 操作者须严格按照操作说明进行试验，红细胞浓度、血清滴量、反应时间、离心速度等均可影响试验结果。

6.2 若为弱凝集结果，本试剂盒按下述试验操作方法，还可进一步提高试验灵敏度。试验操作方法如下：

6.2.1 检测管中加试验血清 2 滴，4%红细胞盐水悬液 1 滴。

6.2.2 加LIM0.8ml，混匀，静置 1 分钟，各管加Polybrene 2 滴混匀，3000 转/分离心15 秒，倒出上清液（残留约01ml），轻摇，肉眼可见明显的凝集状（如无凝集须重做），加假凝集清除液 1 滴于管底，轻摇，凝集 1 分钟内消失呈均匀混悬液，为阴性，凝集1分钟内不能被消除，即为阳性。

6.3 检测标本应为非抗凝血，如标本中含抗凝成分的含量过高明显干扰凝集反应，可适当调加Promoter 的滴量，以中和抗凝成分的干扰。

6.4 试验温度以20-30℃为宜，若为寒冷凝集，37℃水浴5分钟，在此温下观察，凝集消失，说明冷凝集素存在。

6.5 肉眼直观判断的结果应确保与显微镜下观察结果一致，直观不能明确判断的可疑结果须镜检，镜下：阴性结果应该是单个RBC 均匀分布，有RBC 凝集状散在的即为弱阳性。

6.6 试验质量检验：取自身血清与自身红细胞用本试剂盒试验方法作自身阴性对照试验，取IgG 抗 D 血清与RhD（+）RBC 用本试剂盒试验方法作阳性对照实验，对照实验符合，试剂有效。

6.7 疑难结果以抗人球蛋白实验（AGT）作最终判断试验，试验操作参照经典AGT（在AGT中，加入本试剂盒中的LIM0.8ml 37℃孵育时间可缩短至10 分钟）。

6.8 本试剂盒适宜大多数血型抗体的检测，但对kell 血型系统抗体（主要存在白种人群）检测效果较差，由于我国黄种人群中kell 血型系统抗体阳性者罕见，因此适合在国内推广。可补充抗人球蛋白试验，以提高对kell 血型系统抗体的检出率。

冰箱维护程序

1、目的：对冰箱进行适当的维护，以确保冰箱的正常使用。

2、适用范围：本实验室使用的各种品牌、型号的冰箱。

3、负责人：科室值班人员

4、操作方法

4.1 储血冰箱高低温度报警装置完好；

4.2 储血冰箱温度记录每天 3 次(8:00/AM,14:00/PM,20:00/PM),冰箱温度保持在2-6℃，温度计应在冰箱的上、中、下层轮流放置一天，从而测量出冰箱内温度的变化情况。如果温度不在2-6℃之间，冰箱发出报警声，应记录可能的原因和采取的措施（将血液转移到2-6℃中的冰箱中）；

4.3 所有备血存放在2-6℃储血专用冰箱中；

4.4 不同血型、品种、规格的血液分别储存；

4.5 不同日期的血液依次储存并登记；

4.6 储血冰箱内不得存放其他物品；

4.7 每天对血液进行检查。凡标签污染被查对项目不符合规定，或已破坏血袋密闭状态，应查明原因，立即处理；

4.8 尽量减少冰箱箱门的开启次数；

4.9 储血冰箱每周用2%戊二醛擦拭冰箱内表面；

4.10 每月一次冰箱内空气培养，由院感科采样。细菌生长菌落＜200CFU/m3合格。

4.11 应急措施：

①如遇停电，立即通知医院电工房发电；

②冰箱如温度不在2-6℃之间，立即通知输血科主任采取冰箱维修，将库存血液尽快使用，在未使用完毕前另存于其它冰箱（做好冰箱的消毒及温度监测）。