动物细胞与微生物发酵生产技术
大规模细胞培养及发酵技术
渗透压
• 用于对引进的培养基进行质量控制
• 关联渗透压与细胞数、细胞活性和产量的关系 • 监控连续补加营养引起渗透压的增加
细胞密度
• 细胞密度通常等于 “生物量”
– 它是指给定体积的细胞数，可以是体积浓度或百分比 浓度.
– 它不是指活细胞数量 (但可很好显示细胞活力）
• 细胞活力/活性测定取决于细胞的种类、细胞生命周期及膜 的结构.
Cell Counts vs Ammonia Levels Over Time
500 450 400 350 300 250 200 150 100 50 0
C.D. 1 NH3
8 7 5 4 3 2 1 0
2 3 4 5 6 7
Cell Density (cells/ml)
• 铵的水平也取决于细胞密度和细胞代谢 方式. • 引起细胞抑制的铵离子浓度范围: – 从: 0.5 mM (L Mouse Cells) – 到: 40.0 mM (M. Ascites Tumor Cells) (不同的细胞株对铵有不同的耐受度)
• • • • • •
乳酸 NH4+ 磷酸盐 乙醇(酵母) 甲醇(酵母) 细胞密度
微生物高密度培养
发酵培养基 表达基因的调控 宿主菌 质粒的拷贝数及稳定性
高密度培养的关键是发酵的补料控制,根据 重组菌的生长特点及产物的表达方式采 取合理的营养物质的流加方式 恒速流加 变速流加 指数流加
微生物高密度培养乙酸的形成:培养液中葡 萄糖的含量超过菌体生长所需量或在缺氧 的情况下,便会大量产生乙酸. 减少乙酸的策略: 限制性流加葡萄糖 甘油代替葡萄糖 降低培养温度
• 宿主菌 • 降低比生长速率 • 透析培养
细胞培养和微生物发酵中的重要 参数
动物发酵工程—液体深层发酵
01
温度
02
pH
03
溶解氧
04
泡沫
05 营养物质的浓度
DNA重组含义
DNA重组与DNA杂交的区别
DNA杂交是在两条单链之间进行；DNA重组是在双链DNA片段 之间进行的。
自然界的DNA重组
例如：减数分裂；病毒侵染。
发酵设备
（一）机拌式发酵罐
01
通用式发酵罐
发酵设备
（一）机拌式Байду номын сангаас酵罐
02
自吸式发酵罐
一、深层发酵的操作方式
微生物分批生长的生长曲线 1.延滞期；2.加速生长期；3.指数生长期；
4.减速期；5.稳定期；6.衰亡期
一、深层发酵的操作方式
连续 发酵
01
连续发酵
所谓连续发酵，是指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜
培养基，同时以相同的速度流出培养液，从而使发酵罐内的
液量维持恒定，微生物在稳定状态下生长。稳定状态可以有
发酵设备
（二）通风搅拌式发酵罐
常用的有循环式通风发酵罐和高位塔式发酵罐
循环式通风发酵罐优点： ①发酵罐内没有搅拌装置，结构简单，清洗方便，加厂容易； ②由于取消了搅拌用的电机，而通风量与通用式发酵罐大致相等，所以动
力消耗有很大降低。
高位塔式发酵罐则将空气由罐底导入，经筛选板逐渐上升的同时带动发酵 液上升，又通过有液封作用的降液管下降形成循环。
动物生物技术
3. 液体深层发酵
第一章
液体深层发酵
一、深层发酵的操作方式
（一）分批发酵
营养物和菌种一次加入进行培养，直到结束放出，中间除了空气进入和尾气排 出，与外部没有物料交换。它除了控制温度、ph及通气以外，不进行任何其他控制 ，操作简单。但从细胞所处的环境来看，则有明显改变。
微生物技术的发展与创新2024
引言：微生物技术作为一门高新技术，已经取得了许多重要的突破和创新。
本文将从五个方面阐述微生物技术的发展和创新，包括基因工程的进展、生物制药的新技术、环境治理中的微生物应用、食品工业的创新以及农业领域的新发展。
通过对这些领域的详细分析，可以清楚地了解微生物技术的发展方向和应用前景。
概述：随着科技的不断进步，微生物技术的发展呈现出日新月异的发展态势。
微生物技术是利用微生物及其代谢产物进行工业生产，环境治理和农业发展等方面的技术，具有广泛的应用前景。
本文将依次从基因工程的进展、生物制药的新技术、环境治理中的微生物应用、食品工业的创新以及农业领域的新发展五个大点展开讨论。
正文：一、基因工程的进展1. 分子克隆技术的创新：分子克隆技术的发展促进了基因工程的迅速发展，包括重组DNA技术和限制性内切酶等的应用。
2. 基因编辑技术的突破：CRISPR-Cas9技术的出现革新了基因编辑领域，使得基因编辑变得更加精确和高效。
3. 基因组学的进展：高通量测序和基因组分析技术的发展使得基因组学的研究取得了重大突破，进一步推动了微生物技术的发展。
二、生物制药的新技术1. 基因表达技术的改进：通过优化基因的表达和表达载体的构建，提高了生物制药产品的产量和纯度。
2. 新型药物生产平台的创新：包括植物表达系统、动物细胞培养技术和工程细菌等，为生物制药的发展打开了新的可能性。
3. 个性化药物研发的新思路：基于基因组学数据的个性化药物研发，有望为治疗特定疾病提供更好的解决方案。
三、环境治理中的微生物应用1. 污水处理与废物降解：通过微生物降解废物和处理污水，可以减少对环境的污染，实现可持续发展。
2. 生物能源的开发利用：利用微生物对有机质进行发酵，可以生产生物能源如生物气和生物乙醇，减少对传统能源的依赖。
3. 环境修复与生态恢复：利用微生物修复土壤污染和油污等环境问题，促进生态系统的恢复和保护。
四、食品工业的创新1. 微生物发酵技术的应用：通过微生物发酵生产酸奶、酱油等食品，提高食品的品质和口感。
微生物、动物、植物细胞培养的异同点
微生物、动物、植物细胞培养的异同点如下：不同点：首先在培养基上，微生物是固体、半固体培养基都有，成分主要是水、无机盐、生长因子、碳源、氮源等。
如果是病毒的话要用细菌进行培养；动物的话用天然培养基加生长因子比较好，一般是液体培养基，成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；而植物培养基用合成培养基就可以了，一般是固体培养基，成分主要是矿质元素、蔗糖、纤维素、植物激素、有机添加剂。
其次是各自培养的原理上的不同，微生物细胞培养的原理是微生物细胞的增殖，动物细胞培养的原理是细胞的增殖，植物细胞培养原理是细胞的全能性。
最后，微生物细胞培养主要是获得其代谢产物或次级代谢产物或得到细胞本身；植物细胞培养主要是获得新个体或细胞产品，应用与快速繁殖试管苗、细胞产品、人工种子、转基因植物的培育等。
动物细胞培养是获得大量新生细胞或细胞产品，应用是获得细胞的产物或细胞等。
另外，动物细胞分散用到的是胰蛋白酶，植物是纤维素酶等。
相同点：两者都需要培养基、都需要无菌操作，防止染菌、培养时候都需要适当的温度等条件。
综上所述见下表：微生物动物细胞植物细胞大小(um) 1~10 10~100 10~100 悬浮生长可以，多数细胞需附着表面才能生长可以，但易结团无单个细胞营养要求简单非常复杂较复杂生长速率快，倍增时间为0.5~5小时慢，倍增时间为15~100小时慢，倍增时间为24~74小时代谢调节内部内部激素内部激素环境敏感不敏感非常敏感能忍受广泛范围细胞分化无有高剪切力敏感低非常高高传统变异，筛选技术广泛使用不常使用有时使用细胞或产物浓度较高低低由于他们所用的培养基不同，培养是所要求的条件不同所以在批量生产我们所需的目的产物时就要选择相应的生物反应器。
在选择生物反应器时要注意到生物反应器在生物反应过程的剪切力、传质问题如气-液质量传递和液-固质量传递。
生物反应器是利用生物催化剂为细胞培养（或发酵）或酶反应提供良好的反映环境的设备，通常称为发酵罐或酶反应器。
发酵工程的发展史
发酵工程的发展史如下是有关发酵工程的发展史：发酵的定义是通过微生物(或动植物细胞)的生长培养和化学变化，大量产生和积累专门的代谢产物的反应过程。
近百年来，随着科学技术的进步，发酵技术发生了划时代的变革，已经从利用自然界中原有的微生物进行发酵生产的阶段进入到按照人的意愿改造成具有特殊性能的微生物以生产人类所需要的发配产品的新阶段。
现代意义上的发酵工程是一个由多学科交叉、融合而形成的技术性和应用性较强的开放性的学科。
约9000年前，我们的祖先就会利用微生物将谷物、水果等发酵成酒精饮料。
一、传统(古老)发酵技术的追溯在几千年前，人们就开始从事酿洒、酱、醋，奶酪的发酵生产，并积累了许多有关发酵的经验，但当时人们是知其然而不知所以然。
据考古发掘证我国在龙山文化(跟今4000-4200年)已有酒器出现先秦的《周礼天宫》一书中记载有主管王室、官用造酒事的“酒正”、“酒人”等官职说明酿酒已成为专门的职业。
3000年前，中国已有用长霉的豆腐治疗皮肤病的记载，我们今天知道，这可能是抗生素的缘故。
国外酿酒的传说则可推溯到更早，相传埃及和中亚两河流域在公元前40-30世纪就已开始酿酒，烘制面包。
二、纯培养技术的建立1857年，巴斯德通过著名的曲颈瓶试验，彻底否定了生命的自然发生说。
在此基础上，他提出了加热灭菌法，后来被人们称为巴氏消毒法成功地解决了当时困扰人们的牛奶、酒类变质问题。
巴斯德还研究了酒精发酵、乳酸发酵、醋酸发酵等，并发现这些发酵过程都是由不同的发酵菌引起的，从而奠定了初步的发酵理论。
1897年德国的毕希纳进一步发现腐碎了的酵母仍能使精发酵而形成酒精，并将此具有发酵能力的物质称为酶，揭开了发酵现象的本质。
1905年德国的罗伯特·柯赫等首先应用固体培养基分离培养出炭疽芽孢杆菌、结核芽孢杆菌、霍乱芽孢杆菌等病原细菌，建立。
一套研究微生物纯培养的技术方法此后，随着纯种微生物的分离及培养技术的建立，以及密闭式发酵罐的设计成功，使人们能够利用某种类型的微生物，在人工控制的环境条件下。
生物制药利用生物体产生药物的方法
生物制药利用生物体产生药物的方法生物制药是指利用生物体（包括微生物、哺乳动物等）作为药物生产的工具，通过生物体内的生物反应合成和提取药物。
这种方法具有高效、环保、可再生等特点。
下面将介绍几种常见的生物制药方法。
1. 微生物发酵生产药物微生物发酵是最常用的生物制药方法之一。
通过培养发酵菌株并提供合适的培养条件，使其产生所需药物。
例如，青霉素的生产就是利用青霉菌进行大规模发酵。
这种方法的优点在于微生物可以快速繁殖，产量高，且生产成本较低。
2. 基因工程技术基因工程技术是指将外源基因导入到宿主生物体中，使其产生目标药物。
常见的方法是将目标基因插入到大肠杆菌等细菌的染色体中，通过细菌的复制和表达机制，合成目标蛋白，进而得到所需药物。
这种方法的优势在于可通过基因技术使生产目标蛋白更加高效，有利于降低生产成本。
3. 哺乳动物细胞培养对于一些复杂的蛋白质药物，如抗体药物，常采用哺乳动物细胞培养进行生产。
通过将目标基因导入到哺乳动物细胞中，使其表达所需的药物。
这种方法能够确保药物的正确折叠和糖基化等重要的后修饰，从而增加药物的活性和稳定性。
4. 植物表达系统植物表达系统是一种新兴的生物制药方法。
通过将目标基因导入植物细胞中，通过植物的生长和代谢过程，合成目标药物。
植物表达系统具有许多优点，如生产成本低、易于扩大规模、无需复杂的设备等。
而且植物可以合成复杂的蛋白质，并且可以进行正确的修饰。
5. 动物体内制药某些药物，特别是针对罕见病的特效药物，可能需要通过动物体内制药来生产。
这种方法是将目标基因导入到动物的遗传物质中，使其在生长发育过程中产生所需药物，并通过动物的乳汁、血液或其他组织提取所需药物。
总结起来，生物制药利用生物体产生药物的方法包括微生物发酵、基因工程技术、哺乳动物细胞培养、植物表达系统和动物体内制药等。
这些方法在药物生产中发挥着重要的作用，为医药行业提供了更多有效、安全的药物选择。
未来随着生物技术的不断发展，生物制药的方法也会进一步创新和完善。
第二章 微生物发酵产酶
细胞发酵产酶的最适温度与最适生长温度有所 不同，而且往往低于最适生长温度，这是由于在较 低的温度条件下，可提高酶的稳定性，延长细胞产 酶时间。
在细胞生长和发酵产酶过程中，由于细胞的新 陈代谢作用，不断放出热量，会使培养基的温度升 高，同时，热量不断扩散和散失，又会使培养基温 度降低，两者综合，决定了培养基的温度． 温度控制的方法一般采用热水升温，冷水降温， 故此在发酵罐中，均设计有足够传热面积的热交换 装置，如排管、蛇管、夹套、喷淋管等。
8、 毛霉（Mucor）
毛霉的菌丝体在基质上或基质内广泛蔓延，菌 丝体上直接生出孢子囊梗，分枝较小或单生，孢子 囊梗顶端有膨大成球形的孢子囊，囊壁上常带有针 状的草酸钙结晶。
毛霉用于生产蛋白酶、糖化酶、α—淀粉酶、脂 肪酶、果胶酶、凝乳酶等。
9、 链霉菌（Streptomyces）
链霉菌是生产葡萄糖异构酶的主要菌株，还可以用于生 产青霉素酰化酶、纤维素酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、 几丁质酶等。此外，链霉菌还含有丰富的16α羟化酶，可 用于甾体转化。
3．无机盐
无机盐的主要作用是提供细胞生命活动不可缺少 的无机元素，并对培养基的pH值、氧化还原电位 和渗透压起调节作用。 主要元素有：磷、硫、钾、钠、镁、钙等。 微量元素有：铜、锰、锌、钼、钴、碘等。 微量元素是细胞生命活动不可缺少的，但 需要量很少，过量反而会引起不良效果， 必须严加控制
4．生长因素（酵母膏、玉米浆、麦芽糖）
4、 提高酶产量的措施
–除了选育优良的产酶细胞，保证发酵工艺条 件并根据需要和变化情况及时加以调节控制 以外，还可以来取某些行之有效的措施，诸 如添加诱导物，控制阻遏物浓度，添加表面 活性剂或其他产酶促进剂等。
• 1）添加诱导物
– 对于诱导酶的发酵生产，在发酵培养基中添 加适当的诱导物，可使产酶量显著提高。
南京林业大学酶工程-3 动、植物细胞发酵产酶讲解
一般为无机氮源。 一般以蔗糖为碳源。
植物细胞培养的工艺条件及其控制（续）
（三）温度的控制 室温（25℃）、 （四）pH值的控制 微酸性（pH5～6） （五）溶解氧的调节控制 代谢慢，耗氧少，对剪切力敏感，搅拌不宜强烈。 （六）光照的控制 （七）前体的添加 提高次级代谢物的产量。 （八）刺激剂(electior)的应用 强化次级代谢产物的生物合成。常用微生物细胞 壁碎片和胞外酶。
动、植物细胞培养与微生物培养区别
动物细胞无细胞壁，且大多数哺乳动物细胞附着在固 体或半固体的表面才能生长；对营养要求严格，除氨 基酸、维生素、盐类、葡萄糖或半乳糖外，还需有血 清。动物细胞对环境敏感，包括pH、溶氧、温度、剪 切应力都比微生物有更严的要求，一般须严格的监测 和控制。 植物细胞对营养要求较动物细胞简单。但由于植物细 胞培养一般要求在高密度下才能得到一定浓度的培养 产物，以及植物细胞生长较微生物要缓慢，长时间的 培养对无菌要求及反应器的设计也提出特殊的要求。
紫草宁及其结构
植物细胞培养的特点（续）
ห้องสมุดไป่ตู้
（2）缩短周期 发酵周期10～30天，种植周期几个月～几年。 （3）易于管理 减低劳动强度；不受地理环境和气候条件等影响。 （4）提高产品质量 主要产物浓度高，易于分离纯化，减少环境中各种有 害物质污染和侵蚀。 （5）其它 生物反应器的设计工艺条件注意的问题。
主要产物
醇类，有机酸， 色素，香精， 激素，疫苗， 氨基酸，抗生素， 药物，酶 单克隆抗体， 酶，核苷酸 酶
二、植物细胞培养的特点
（1）提高产率
例如,紫草宁(shikonin) 生产，发酵细胞中的紫 草宁比 紫菜根 (Lithospermum erythrorhizon)中高10 倍，比产率达到种植紫 草的830倍。
蛋白饲料生物制造
蛋白饲料生物制造
蛋白饲料的生物制造通常涉及利用微生物（ 如细菌、真菌、酵母等）或植物等生物来生产蛋白质，主要包括以下几种方式：
1.微生物发酵法：利用微生物进行发酵生产蛋白质。
常见的微生物包括大肠杆菌、酵母菌、霉菌等。
通过对微生物进行优化培养，提供适宜的营养物质和环境条件，使其合成并分泌蛋白质。
随后通过提取、纯化等步骤来获取所需的蛋白饲料。
2.植物蛋白提取：利用植物中富含蛋白质的部分（ 例如大豆、豌豆、玉米、甜菜等），经过提取、加工等工艺步骤，从植物中提取出蛋白质，并进行精炼和纯化，制备成蛋白饲料。
3.细胞培养肉：这是一种新兴的技术，利用细胞培养技术直接从动物细胞中培养肉类组织。
通过培养和扩增动物细胞，以产生类似肉类的蛋白质。
虽然这主要用于人类食品生产，但也有可能应用于动物饲料生产。
这些方法在生产过程中都涉及到生物工程学、发酵技术、生物化学等方面的知识。
目前，越来越多的研究致力于开发新的、可持续的蛋白饲料生产方法，以应对全球不断增长的动物饲料需求和资源有限性问题。
1/ 1。
生物制药技术的生产工艺流程解析
生物制药技术的生产工艺流程解析生物制药技术是利用生物体（包括微生物、动物细胞、植物细胞等）来生产药物的一种技术手段。
生物制药技术的生产工艺流程是一个复杂的过程，涉及到发酵、分离纯化、制剂等多个环节。
本文将对生物制药技术的生产工艺流程进行解析。
首先，生物制药的生产开始于对目标药物的基因克隆。
基因克隆是将我们所需要的药物基因从捐赠者中的DNA中剥离出来并放入宿主细胞中的过程。
这一步骤通常包括DNA提取、PCR扩增、酶切、连接等多个操作，以获得我们所需要的基因。
接下来，获得基因后，就需要选择一个适合的宿主细胞来表达这个基因。
常见的宿主细胞包括大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞等。
选择宿主细胞主要考虑宿主的生长特性、分离纯化能力以及基因表达效率等因素。
在宿主细胞中进行基因的转染、筛选和培养过程，确保目标基因的稳定表达和高产量。
然后，生物技术中最重要的环节就是发酵过程。
发酵是将宿主细胞培养到一定的规模并使其进行生长和产生所需要的药物的过程。
发酵过程中，我们需要为细胞提供适当的培养基，包括碳源、氮源、微量元素和生长因子等。
同时，还需要调控温度、pH值、气体氧合等参数，以提高细胞的产物输出。
发酵过程的优化能够提高产量并减少副产品的产生。
发酵完成后，我们需要对发酵液进行分离和纯化。
在生物制药过程中，药物的纯度非常关键。
分离和纯化过程主要包括细胞去除、产物去除、浓缩和纯化等步骤。
其中，常用的分离技术包括离心、过滤、超滤、硅胶柱层析、HPLC等。
通过这些技术，我们可以获得高纯度的目标药物。
最后，经过分离纯化的药物需要进行制剂。
制剂是将药物的活性成分制成适合临床使用的药物形态的过程。
制剂可以是片剂、注射剂、胶囊剂等形式。
在制剂过程中，需要添加辅料、调节药物的溶解度、稳定性和可控性。
制剂的包装也是十分重要的，要确保药物的长期稳定性和安全性。
生物制药技术的生产工艺流程经过多个环节的严格控制和优化，最终可以获得高纯度、高产量的药物产品。
微生物发酵技术
二、菌种培养基的配制
培养基是选择出的菌种生活的环境，对菌种有多方面的影响， 所以至关重要。一般来说，培养基的配方要经过反复的实验才 能确定。另外，发酵工程中所用的菌种多要求是纯培养的，即 整个发酵过程不能混有杂菌，否则将导致产量大大下降，甚至 得不到产品。例如，如果青霉素生产过程中污染了杂菌，这些 杂菌会分泌青霉素酶，将形成的青霉素分解掉。因此，培养基 和发酵设备都必须经过严格的灭菌。
发酵罐的大型化、多样化、连续化和自动化方 面有了极大发展。发酵过程的基本参数包括T 、Ph、罐压、溶O2 、Eh、空气流量、泡沫、 CO2含量等均可自动记录和控制。（在线测试 探头等） ——发酵与酿造技术的第四个转折点
第五个转折点
——微生物生物合成和化学反应合成相结合工程 技术的建立
针对单纯发酵法的缺陷，利用发酵法生产前 体，用化学合成法得到终产品或反之。如 Amyno法生产酱油。
微生物发酵技术
201623202401012 胡碧如
目录
什么是发酵、酿造 发酵工业的微生物技术发展史 发酵工业的工程技术发展史
发酵技术是生物技术中最早发展和应用的 食品加工技术之一。
许多传统的发酵食品，如酒、豆豉、甜酱、豆 瓣酱、酸乳、面包、火腿、腌菜、腐乳以及干 酪等。
随着分子生物学和细胞生物学的快速发展 ，现代发酵技术应运而生。
列文虎克（Leewenhoch,1632-1723） ——微生物形态学发展阶段
荷兰业余科 学家，1676年 ，用自磨镜片 创造了一架能 放大 266倍的 原始显微镜一 生制作了419 台显微镜； 发表论文400 余篇，375篇 寄往英国皇家 学会发表。
列文虎克 1684年寄给皇家协会信的部 分内容
不同时期观察到的酵母菌细胞结构
生物发酵工艺研究与生物制品生产
生物发酵工艺研究与生物制品生产第一章引言生物制品是指通过生物发酵工艺和生物技术手段，利用微生物、动植物细胞等生物材料生产出来的具有医药、食品等特定功能的产品。
生物制品的生产是一项复杂而重要的工作，对于提高生物制品质量和产量具有重要意义。
本文将着重介绍生物发酵工艺研究以及其在生物制品生产中的应用。
第二章生物发酵工艺研究方法与原理2.1 微生物筛选与改良技术微生物是生物发酵工艺的核心。
在生物制品生产过程中，合适的微生物菌种的选择和改良技术的应用非常重要。
目前，通过高通量筛选技术和基因工程手段，科学家们能够筛选出具有高发酵产率和优良特性的微生物菌种，并进行基因改造以提高其生产能力。
2.2 发酵过程控制技术生物发酵过程中，合理控制发酵条件对于生产高品质生物制品非常关键。
发酵过程控制技术包括温度、pH值、氧气含量的控制，以及营养物质的添加等。
通过精确的控制策略，可以提高生物制品的产量和纯度，同时优化发酵过程的效能。
第三章工艺优化与产物提纯3.1 发酵产物分析与过程优化为了获得高产量和高效益的生物制品，需要对发酵过程进行细致分析和优化。
通过监测发酵产物的浓度、纯度、活性等指标，并结合统计建模和优化算法，可以找到最优的发酵条件，并实现工艺的高效运行。
3.2 产物提纯技术在生物发酵过程中，产物的提纯是一个关键环节。
常用的提纯技术包括超滤、层析、电泳、膜分离等。
这些技术能够有效去除杂质，提高产品的纯度和活性。
此外，还可以采用重组蛋白工程技术，通过基因重组手段将目标蛋白的表达和纯化效率提高到一个新的水平。
第四章生物制品生产中的应用4.1 生物制药品生产生物制药品是指利用生物发酵工艺生产的药品，如抗生素、血液制品、肿瘤治疗药物等。
生物制药品具有高效、低毒副作用等优点，已成为现代医学发展的关键组成部分。
生物发酵工艺的研究对于生物制药品产业的发展具有重要意义。
4.2 生物食品生产生物食品是指通过生物发酵工艺生产的食品，如酸奶、豆豉、酱油等。
生物制药工艺学 思考题
第一章。
1、简述生物制药工艺学的性质和任务生物制药工艺学是一门从事各种生物药物的研究、生产和制剂的综合性应用技术科学。
具体任务:①生物药物的来源及其原料药物生产的主要途径和工艺过程；②生物药物的一般提取、分离、纯化、制造原理和生产方法；③各类生物药物的结构、性质、用途及其工艺和质量控制.2、重点研究方向利用基因工程开发生物药物已经成为一个重要的发展方向，已经上市的有人胰岛素（1982）、人生长素（1987）、干扰素（1987）、乙肝疫苗（1987）等等。
3、生物药物的特性和分类性质:(1)在化学构成上，生物药物十分接近于体内的正常生理物质, 进入体内后也更易为机体所吸收利用和参与人体的正常代谢与调节。
(2)在药理学上, 生物药物具有更高的生化机制合理性和特异治疗有效性。
(3)在医疗上，生物药物具有药理活性高、针对性强、毒性低、副作用小、疗效可靠及营养价值高等特点。
(4)生物药物的有效成分在生物材料中浓度都很低, 杂质的含量相对比较高。
(5)生物药物常常是一些生物大分子。
它们不仅分子量大, 组成、结构复杂, 而且具有严格空间构象, 以维持其特定的生理功能。
(6)生物药物对热、酸、碱、重金属及pH变化都较敏感，各种理化因素的变化易对生物活性发生影响。
分类:天然生物药物: 氨基酸类药物、多肽和蛋白质类药物、酶与辅酶类药物、核酸类药物、多糖类药物、脂类药物、细胞生长因子与组织制剂、微生物药物(抗生素类)、海洋生物药物（多糖类、聚醚类、大环类脂类、萜类、多肽和蛋白质类）基因工程药物:细胞因子干扰素类、细胞因子白介素类和肿瘤坏死因子、造血系统生长因子类、生长因子类、重组多肽与蛋白质类激素、心血管病治疗剂与酶制剂、重组疫苗与单抗制品基因药物医学生物制品：包括各种疫苗、抗血清(免疫血清)、抗毒素、类毒素、免疫制剂(如胸腺肽、免疫核酸等)、诊断试剂等。
4、简述生物药物的研究发展趋势●利用基因组学的研究成果促进生物技术新药的研发●蛋白质工程药物的开发●新型疫苗的研制●新的高效表达系统的研究与应用●生物技术药物新剂型研究迅速发展●生物资源的综合利用与扩大开发●应用现代科学技术，改造传统的抗生素和氨基酸等生产工艺中西结合创制新型生物药物。
第9章 微生物发酵技术
第一节 微生物发酵概论 第二节 工业发酵的工艺流程 第三节 工业发酵的主要产品
发酵工程是一门具有悠久历史，又融合了现代 科学的技术，是现代生物技术的组成部分。本 章主要介绍发酵工程的基本内容和基本原理， 重点介绍了工业发酵的工艺流程,还介绍了典型 产品的发酵生产工艺，如青霉素，谷氨酸和维 生素C的生产。
青霉素是最早发现并用于临床的—种抗生素，1928年为英国人 A . Fleming发现，40年代投入工业生产。在二战期间立刻大显身 手，它能有效控制伤口的细菌感染，挽救了数百万战争中受伤者 的性命。我们就以青霉素为例简单介绍抗生素的发酵生产过程。
(一)青霉素发酵生产菌株
最初由弗莱明分离的点青霉，只能产生2 U／ml的青霉素。 目前全世界用于生产青霉素的高产菌株，大都由菌株Wis Q l76(一种产黄青霉)经不同改良途径得到。70年代前育种采用 诱变和随机筛选方法，后来由于原生质体融合技术、基因克 隆技术等现代育种技术的应用，青霉素工业发酵生产水平已 达85 000U／ml以上。青霉素生产菌株一般在真空冷冻干燥状 态下保存其分生孢子，也可以用甘油或乳糖溶剂作悬浮剂， 在－70度冰箱或液氮中保存孢子悬浮液和营养菌丝体。
三、微生物发酵工业所用菌种
优良的微生物菌种是发酵工业的基础和关键，微生物资源非常 丰富，广泛分布于土壤、水和空气中，尤以土壤中为最多
1.从微生物分类学的角度把所需菌种分为：细菌类如短杆菌、枯 草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、梭状芽孢杆 菌等；酵母菌如啤酒酵母、酒精酵母、汉逊酵母和假丝酵母 等；霉菌如黄曲霉、红曲霉、青霉菌和赤霉菌等；放线菌如 各种抗生素，链、庆大等。
(3)脱色 在二次B A提取液中加活性炭150 一300g／10亿单位， 脱色、过滤。
2024届高考一轮复习生物教案(苏教版)：传统发酵技术、发酵工程及应用
第2课时传统发酵技术、发酵工程及应用课标要求 1.概述传统发酵技术生产的食品的制作。
2.举例说明发酵工程的应用。
考点一传统发酵技术生产的食品1．传统发酵技术2．果酒和果醋的制作(1)原理和条件项目制作果酒制作果醋发酵菌种酵母菌醋酸菌代谢类型异养兼性厌氧型异养需氧型发酵过程有氧条件下，酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖：C6H12O6＋6H2O＋6O2――→酶6CO2＋12H2O＋能量；无氧条件下，酵母菌通过无氧呼吸产生酒精：C6H12O6――→酶2C2H5OH＋2CO2＋能量C2H5OH＋O2――→酶CH3COOH＋H2O＋能量对氧的需求前期需氧，后期不需氧一直需氧产物检测闻气味、品尝、酸性条件下的重铬酸钾(橙色→灰绿色)酸碱指示剂(pH试纸)、闻气味、品尝(2)方法步骤源于选择性必修3 P32“本节练习·应用题”：果酒和果醋改进装置及其分析装置的使用：使用该装置制作果酒时，应该关闭充气口；制作果醋时，应将充气口连接充气泵，输入空气。
易错提醒①果酒、果醋制作时防止杂菌污染的措施：a.榨汁机要洗净并晾干，发酵瓶要清洗干净并用体积分数为70%的酒精消毒；b.清洗葡萄时要先冲洗后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会；c.装入葡萄汁后要封闭发酵装置的充气口；d.发酵瓶的排气管用曲颈管而不用直管。
若用简易的发酵装置，每隔一定时间排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖。
②葡萄汁装入发酵瓶时，要留有约1/3空间的目的：a.先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽O2后再进行酒精发酵；b.防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液溢出。
深度思考(1)制作葡萄酒时，为什么要将温度控制在18～25 ℃？制作葡萄醋时，为什么要将温度控制在30～35 ℃？提示温度是影响酵母菌和醋酸菌生长和发酵的重要因素。
酿酒酵母的最适生长温度约为20 ℃。
因此需要将温度控制在其最适温度范围内。
而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30～35 ℃，因此要将温度控制在30～35 ℃。
生物制药中的细胞培养与发酵技术
生物制药中的细胞培养与发酵技术生物制药是指利用生物制剂来生产药物的一门技术，生物制剂主要包括微生物、动物或植物细胞、细胞器和基因工程产品等。
生物制药具有高效、精准、可控等优点，并且其产物具有较高的生物活性和安全性，因此在现代医药工业中得到了广泛的应用。
其中，细胞培养和发酵技术是生产生物制药的重要工艺环节。
一、细胞培养技术细胞培养技术是指将细胞种子或小片组织移植到含有适合其生长的营养物质和条件的培养基上，使其继续生长和繁殖的过程。
在生物制药中，细胞培养技术的主要应用为生产重组蛋白（包括抗体、酶、激素等）、细胞因子、疫苗和基因治疗药物等。
细胞培养技术的基本步骤如下：1. 细胞株的选取：选择稳定、易于培养、生长较快、产出量高和不易变异等特性的细胞株。
2. 培养基的配制：根据细胞的需求，选用适宜的培养基配方，并添加必要的生长因子、血清和其他辅助物质等。
3. 细胞的落区与传代：将细胞移植到含有配制好的培养基的培养皿中，使其继续生长和繁殖，一般24-72小时进行第一次细胞落区，然后进行传代至制定期数。
4. 细胞的培养与维持：根据细胞的生长特性和生长周期，定期更换培养基，补充必要的营养物质和生长因子等，以确保细胞的稳定生长和产出。
细胞培养技术的优点在于在体外可以大量生产稳定的蛋白和其他重复的药物，但也存在一些缺点，如诱导变异（如增殖性肝细胞瘤、颅内压低下综合征等）、成本高、成产周期长、不能生产具有高度复杂性的生物药物等。
二、发酵技术发酵技术是一种利用微生物或其他生物细胞进行代谢反应的过程，以产生目的物质为目的的生产技术。
在生物制药中，发酵技术主要应用于生产抗生素、激素、酶和生物质量的高分子量生长激素等。
发酵技术的基本步骤如下：1. 微生物株的选取：选择具有产出目的物质的菌株，如大肠杆菌、毕赤酵母等。
2. 发酵料的组成与配置：根据细胞的特性、营养物质需求、基质成分和反应产物等因素，确定合适的发酵料组成和配置方法。
发酵工程 第二章 发酵工业微生物菌种制备原理和技术
发酵工程 工业生产水平的
生产菌种的性能 发酵和提取工艺条件
三个决定要素
生产设备
获得优良的生产菌种是实现高水平发酵工程工 业生产的第一环节。
本章内容
第一节 发酵工业常用的微生物菌种
第二节 自然界中微生物菌种的选择性分离
第三节 微生物菌种的选育
第四节 微生物菌种的退化、复壮和保藏 第五节 工业微生物菌种的扩大培养 第六节 种子培养基及其制备
集的培养物到固体培养基，分离优势微生物的单
菌落。
移种时间是关键，应在所需菌占优势时移种。
连续富集培养（恒化式富集培养）
改变限制性基质浓度来控制两种菌的比生长速率。 用于连续发酵生产的菌种选育特别适合。
固体培养基的使用
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
常用于分离酶产生菌，选择培养基中常含有所
需的基质，以便促使酶产生菌的生长，并在菌落
使目的微生物在种群中占优势，使筛选 1. 目的：
变得可能。
2. 两种方案：
（1）施加选择性压力分离法：采用特定的有利于 目的微生物富集的条件进行培养，使目的微生物 占优势，以实现快速分离纯化的目的。 （2）随机分离法：不能提供任何有助于筛选产生 菌的信息时，只能通过随机分离法进行分离。
（1）施加选择性压力分离法
酵母(既是微生物又是真核细胞)
生长迅速，营养要求不高，易培养； 安全性好； 比哺乳动物细胞操作简单； 具有一定的修饰蛋白的能力。
中国仓鼠卵巢细胞（CHO细胞）表达系统
具有准确的转录后修饰功能； 具有产物胞外分越功能，便于下游产物分离纯化； 具有重组基因的高效扩增和表达能力； 具有贴壁生长特性，也可进行悬浮生长； CHO很少分泌自身的内源蛋白。
发酵技术生物知识点总结
发酵技术生物知识点总结一、微生物发酵1. 微生物发酵的基本原理微生物发酵是利用微生物在适宜的环境条件下，利用糖类等有机物质进行代谢活动，产生有机酸、醇、酶、细胞蛋白等化合物的过程。
微生物发酵包括静态、摇瓶和发酵罐等方式，通过控制各项发酵条件来实现对微生物代谢产物的生产。
2. 常见的微生物发酵产品微生物发酵可以生产多种产品，如食品添加剂、酶制剂、抗生素、氨基酸等。
以革兰氏阳性菌为代表的产酶细菌可以制备多种酶类产品，如纤维素酶、酰化酶等；革兰氏阴性菌则可生产抗生素、氨基酸等。
3. 微生物发酵的应用微生物发酵技术在食品工业、制药工业、环境保护和生物能源等领域有着广泛的应用。
如酵母菌可以制备面包、啤酒等食品；乳酸菌可以发酵乳制品；大肠杆菌可以生产胰岛素等生物药品。
4. 发酵罐的设计原理发酵罐是进行微生物发酵生产的主要设备，其设计原理主要包括对发酵罐体积、通气、搅拌、温度、pH等多方面因素的控制。
发酵罐应保证培养物中的氧气和营养物充分混合，并控制好温度、pH值等参数。
5. 优化微生物发酵条件微生物发酵的主要生产因素包括微生物菌种的选取、发酵基质的配方、发酵罐操作条件、发酵周期等。
优化这些发酵因素能够提高微生物发酵的效率，减少成本。
二、植物细胞发酵1. 植物细胞发酵原理植物细胞发酵是利用植物细胞培养在适宜的条件下进行代谢活动，产生有机物质的过程。
植物细胞发酵可以利用植物器官、植物细胞悬浮培养和植物愈伤组织等方式进行。
2. 植物细胞发酵产品植物细胞发酵可以生产多种产品，如植物次生代谢产物、生物活性物质等。
利用植物细胞发酵技术可以制备植物活性成分、抗氧化物质等保健品原料。
3. 植物细胞发酵的应用植物细胞发酵技术在保健品、生物医药和植物资源保护等领域有着广泛的应用。
植物细胞发酵可以制备生物活性成分，开发植物资源的利用价值。
4. 植物细胞发酵工程设计植物细胞发酵的工程设计包括植物细胞培养的生物反应器设计、培养基优化、植物细胞工程等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
动物细胞与微生物发酵生产技术生物工程是一门将生物科学、化学和工程学知识集于一体的学科，它的应用极广，包括医学、农业、食品科技、环境保护、能
源等等领域。
其中动物细胞与微生物发酵生产技术是生物工程中
最为常见也是最为重要的技术之一。
动物细胞发酵生产技术
动物细胞发酵生产又被称为细胞培养技术，是一种将动物细胞
培养在无菌的培养条件下进行发酵，以制备出特定的生物药品或
化学物质的生产工艺。
细胞培养技术的优点在于其生产出来的药
品具有较高的纯度和活性，并且很少与其他化学成分杂交，因此
这些药品不仅能够达到理想的治疗效果，同时也能够减少副作用
和不良反应。
细胞培养技术中的培养基是十分关键的一环，因为它能够为细
胞的繁殖提供所需的营养物质和环境条件。
常用的培养基有无血
清培养基和饱和培养基两种。
其中无血清培养基中不含纤维蛋白、胶原等成分，因此生产出来的药品更加纯净，但是无血清培养基
的制备成本高，同时在操作过程中也需要更高的技术水平和无菌
条件。
微生物发酵生产技术
微生物发酵生产技术是将含有特定微生物株的发酵菌种在特定
条件下进行发酵制造，以得到低成本、高产量的化学物质或生物
制品技术。
生物工程中经过几十年的发展和研究，现在已经可以
制造出很多常见的化学物质和生物制品，其中最常见的就是酸奶、干酪和海鲜等。
发酵过程中，微生物菌株能够将有机物质转化为有用的代谢产物，通过调控发酵菌种的条件，能够预测化学反应的过程和结果。
微生物发酵生产技术主要适用于大规模生产，但是要保证操作时
无菌条件以及选择适合的微生物菌株才能达到最好的效果。
微生物发酵生产技术和动物细胞发酵生产技术有很大的相似性，因为它们都需要特定的培养环境来满足生物生长和代谢所需的条件。
与动物细胞发酵生产技术不同的是，微生物发酵生产技术不
需要使用特殊的培养基，而是以廉价的基础培养物为基础，加入
特定的营养成分和生境条件来控制微生物繁殖和代谢。
结论
动物细胞发酵生产技术和微生物发酵生产技术是两种极为重要的生物制品制造技术，其优点在于其生产出来的药品或化学物质具有较高的活性和纯度，同时也更加安全和无副作用。
这两种技术对于各种药品、化学原料和生物制品的制造过程都有所涉及，能够满足大众需求并带来重大的社会贡献。