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硅胶
十八烷基 氯硅烷
ODS(C18)键合相
双重分离机制:
硅胶为基质键 合的C18填料
(键合基团的覆盖率决定分离机理)
高覆盖率:分配为主;
低覆盖率:吸附为主。
2. 键合固定相类型
反相柱
类 型
正相柱
不同碳原子数的 烷烃(C8和C18)、 苯基等疏水基团
氨丙基 氰乙基、醚和醇等 极性基团
• C8——硅胶键合辛烷基 • C18——硅胶键合十八烷基
化学键合固定相
液-液分配色谱与化学键合固定相色谱
固定相极性>流动相极性
正相分配色谱 (正相柱)
组分极性越大,保留 时间越长;使用极性 化合物的分离。
固定相极性<流动相极性
反相分配色谱 (反相柱)
组分极性越小,保留 时间越长;适用非极 性化合物的分离。
正相与反相的出峰顺序相反 待测物极性:A>B>C
C8和C18都是反相色谱柱的一种,适用于分 析弱极性的物质,
C8适合分析弱极性物质里极性稍强的一类 物质,C18适合分析弱极性物质里极性更弱的物 质。
wenku.baidu.com
例:以ODS键合色谱柱、甲醇-水为流动相分离以 下两种苯甲酸,试判断出峰次序。
COOH
HO
OH
OH
没食子酸
COOH
OH OH
3,4-二羟基苯甲酸
化学键合固定相
利用硅胶表面存在的硅羟基,通过化学反应将 有机分子键合到硅胶表面。
特点:非常稳定,在使用中不易流失。可将各
种极性的官能团键合到载体表面,适用于种类繁多
样品的分离。 A.
硅氧碳键型:
≡Si—O—C
B. 硅氧硅碳键型:≡Si—O—Si — C
C. 硅碳键型: ≡Si—C
D. 硅氮键型: ≡Si—N