常用培养基的制备.

4．倒平板或倒试管分装：
若做平板培养基应倒于培养皿中，每板约15ml左右， 以刚好覆盖平皿底为易。 若做斜面培养基应倒入试管中，量为试管的1/3
5．灭菌：用高压灭菌器灭菌
将平板培养基整齐地平放入 高压灭菌器的内筒中，将试 管口盖上棉塞或橡胶塞，用 纸包扎好，直立放入内筒中， 在121.3℃灭菌20-30min。
（一）营养琼脂培养基
计算 称量 溶化 倒平板或倒试管 灭菌 无菌检验 备用
1．计算：
根据营养琼脂培养基的说明书了解营养琼脂粉与水的比 例，一般是1000 ml蒸馏水中应加营养琼脂粉31.3g，再根据 培养基的需要量确定营养琼脂粉的用量。
营养琼脂粉的量=31.3×15×n/1000 （g） 其中：
灭菌完毕后，将平板培养基 拿出平放于桌面，凝固前勿 动；将试管培养基摆成斜面， 凝固前勿动。
6．无菌检验：
随机抽取几个平板或试管培养基于温箱中培养24小 时，若无菌 生长则为合格。
7．备用：
中培将
保养合
存基格
备放的
用 。
入 冰
平 板
箱培
， 在
养 基
0和
-℃
4试
管
（二）血液琼脂培养基
将灭菌的营养琼脂冷至45～50℃，以无菌操 作，加入5%～10%的无菌血液（或脱纤维 血），然后倾注平皿或分装试管制成斜面。
（三）肉汤培养基
1．成分 牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，蒸馏水 1000ml。
2．制法 将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠加蒸馏水后，加热 溶解。矫正pH至7.4～7.6，过滤分装。置高压蒸气灭 菌器内，121.3℃灭菌20min即成。
3．用途 可供一般细菌生长，同时也是制作一般培养基 的基础原料。供营养要求较高的细菌分离培养，亦可 供溶血性的观察和保存菌种。
技能训练3 常用培养基的制备
实训目标
熟悉培养基制备的基本程序 会制备常用的培养基
仪器材料
高压蒸气灭菌器、电热干燥箱、电炉、天平、 量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶、 营养琼脂培养基（或伊红美兰琼脂培养基、三 糖铁琼脂培养基、SS琼脂培养基、麦康凯琼脂 培养基）等
方法步骤
（一）营养琼脂培养基 （二）血液琼脂培养基 （三）肉汤培养基 （四）半固体培养基
15代表一个平板需要营养琼脂约15 ml； n代表要做的百度文库养基平板的数量
2．称量：
用普通天平准确称量出营养琼脂粉的量，用量筒量出相 应的 蒸馏水的量，要尽量准确。
3．溶化：
将营养琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中，于电炉上加热溶 化，边加热边搅拌，沸腾时立即从电炉上拿下，等泡沫 消失后再放在电炉上加热，注意不能让琼脂溢出，煮沸 2—3次。
（四）半固体培养基
肉汤培养基中加入0.3%～0.5%琼脂粉制成， 用于菌种的保存或观察细菌的运动性。
课后作业
1.写出实习报告； 2.掌握普通营养琼脂培养基的制备过程