Gateway重组克隆技术
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Gateway® 重组克隆技术
经典的克隆工作流程包括许多步骤,尤其是传统的限制性内切酶克隆方法。这种传统的方法限制了克隆的成功率。
例如,当其可能会在目的基因内部进行切割,
从而截短插入片段,并使得基因无法用于下游表达时,某些限制性内切酶是不能使用的。采用传统的克隆方法,
需要额外的片段回收步骤,而且在克隆大片段DNA 时,将会遇到重组效率降低,
从而需要浪费费很多时间以筛选到所需的克隆的问题- 所有这些步骤都会耗费大量的时间和精力,而且成功还无法得到保障。
而Gateway® 重组克隆技术则不存在这些问题。
极好的通用性
相反,Gateway® 重组克隆技术则规避了这些克隆限制,使您几乎能够使用任何表达系统。Gateway® 重组克隆采用了99% 有效且可逆的一小时重组反应,
并且不使用限制性内切酶、连接酶、亚克隆步骤,也不需要对不计其数的菌落进行筛选,从而节省您的时间、金钱和精力。Gateway® 技术自推出后便为研究界广泛采用,
仅参考文献便超过1500 篇。此技术使跨学科研究的合作变得简单方便,而且能从这些研究团体中获得众多载体用于真正的多学科科学研究。
最后,MultiSite Gateway® 技术等最新进展使得Invitrogen 的
Gateway® 克隆成为蛋白质表达和功能分析的理想克隆方法。
Gateway® 技术的优点
只需一小时,室温克隆反应便能快速产生您所需的克隆,效率高达99% 以上
无需使用限制性内切酶或连接酶便能保持片段正确的插入方向和阅读框,从而,获得可直接进行表达的克隆
从靶标鉴定到验证始终使用同一个克隆,无需重新测序,从而确保结果在整个实验过程中一致
使DNA 插入片段从一个表达载体穿梭到另一个表达载体,既提高了灵活性,同时还简化了克隆工作流程