设计性实验

可见分光光度计法测定新血宝中亚铁含量

2012级药物制剂（一）班李凤丽一实验综述

摘要：据文献报道，目前国内外用于铁含量测定的方法主要有分光光度法、火焰原子吸收法、原子光谱吸收法等等[1-7]。可见分光光度法以其设备简单、操作快捷、灵敏度高、结果直观的优点深受欢迎。本实验我们采用分光光度法，用盐酸羟胺作还原剂，以邻二氮菲为显色剂，用722型分光光度计测定铁的含量[6]。在pH=2-9的溶液中，亚铁离子与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物。其最大吸收波长为506nm当铁以三价铁离子形式存在于溶液中时因与邻二氮菲生成配合物而产生干扰，测定时可预先用还原剂（盐酸羟胺）将其还原为亚铁离子。在实验中我们用可见分光光度法测定新血宝中铁的含量[6]，通过考察显色剂的用量、最大吸收波长、盐酸羟胺的用量等实验因素对吸光度的影响，绘制出各实验影响因素与吸光度的标准曲线图，由标准曲线图对显色反应条件的优化与选择，然后根据优化与选择后的最佳显色条件和测量条件测定新血宝胶囊中铁的含量。

关键词：邻二氮菲，分光光度计法，新血宝，铁

二、实验目的

1、掌握可见分光光度计的使用。

2、掌握分光光度法在药物含量测定中的应用。

3、熟悉对照品溶液的配制，供试品溶液的制备方法。

4、熟悉中外文献的查阅方法。

二、实验原理

可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件。这些条件主要包括入射光波长、显色剂用量、盐酸羟胺的用量等。

显色原理：

测量过程。

（1）入射光波长一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光，这样不仅灵敏度高，准确度也好。当有干扰物质存在时，不能选择最大吸收波长，可根据“吸收最大，干扰最小”的原则选择波长。

（2）显色剂用量显色剂的合适用量可通过实验确定。配制一系列被测元素浓度相同不同显色剂用量的溶液，分别测其吸光度，作曲线，找出曲线平台部分，选择合适用量即可。（3）盐酸羟胺的用量选择合适的用量在同一pH缓冲溶液中，加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作曲线，从曲线上选择适量的盐酸羟胺。

三、仪器及试剂

1.仪器：722E（或其他型号）分光光度计、容量瓶、移液管

2.0 胶头滴管、吸耳球、、分析天平、

2试剂：铁标准溶液浓度：100ug/ml、 10%新配制盐酸羟胺溶液（还原剂）0.15%邻二氮菲溶液（显色剂）醋酸盐缓冲溶液

四试液的制备

1.样品溶液的配制：取新血宝胶囊内容物0.25g，精密称定，置于250ml容量瓶中，加

2.5ml硫酸和100ml，混匀，加水稀释至刻度线，摇匀。

2醋酸盐缓冲溶液的配制：取醋酸与钠136g与冰醋酸120mL于500mL容量瓶中，加蒸

馏水定容，摇匀。

五实验设计方案

（一）测定波长的选择

在25mL容量瓶中，加入0.5mL标铁溶液，1.00mL 10%盐酸羟胺溶液、2.00mL 邻二氮菲溶

液，5.00mL醋酸盐缓冲溶液，加蒸馏水定容，摇匀。用1cm的吸收池，以蒸馏水为空白。

分光光度计在440nm ～ 550nm 之间测定吸光度，根据实验数据绘制吸收曲线。 5 0 0 440 450 460 470 480 490 496 498 500 502 503 波长

（nm

)

A

504 505 506 507 508 509 510 520 530 540 550 波长

(nm)

A

绘制曲线（以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，确定最大吸收波长。）

（二）.显色剂用量的选择

在8只50mL容量瓶中,各加入2.00mL标铁溶液和1.00mL 10%盐酸羟氨溶液，再分别加入

0．50mL、1．00mL、1．50mL、2.00mL 、2．50mL、3．00mL、3．50mL、4．00mL 显色

剂，5mL醋酸盐缓冲溶液，加蒸馏水定容，摇匀。显色后在波长为（）nm 处分别测

其吸光度.。

0.5 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00

显色剂体

积（mL)

A

绘制曲线（以显色剂体积为横坐标，吸光度为纵坐标）确定最适宜显色剂体积。

（三）醋酸羟胺的用量选择

在8只50mL容量瓶中,各加入 2.00mL标铁溶液，分别加入

0.40 ,0.60,0.80,1.00,1.20,1.40,1.60,1.80,mL醋酸羟胺溶液，2.00mL邻二氮菲溶液，5mL醋酸

盐缓冲溶液，加蒸馏水定容，摇匀。显色后在波长为（）nm 处分别测其吸光度.。

0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 醋酸羟胺

的体积

（mL)

A

绘制曲线(醋酸羟胺体积为横坐标，吸光度为纵坐标）确定最适宜醋酸羟胺体积

六实验结果

本实验的最佳实验条件是：

1.最大吸收波长为（）nm

2.显色剂的最适用量为（）mL

3.盐酸羟胺的最适用量为（）mL

七．标准曲线的绘制

分别精密量取上述标铁溶液0.00，0.50 ，1.00 ，1.50 ，2.00，2.50mL于25mL的容量瓶

中，依次加入醋酸盐缓冲溶液5mL，盐酸羟胺（）mL ，邻二氮菲（）mL，加蒸馏水定容，摇匀，放置2min。在波长为（）nm处，用1cm的吸收池，以第一份溶液做空白，测定各溶液吸光度。以含铁量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00

C(Fe)ug/

mL

A

求出线性相关方程A=a+bc 相关系数r=

八新血宝中亚铁含量的测定

在50mL的容量瓶中，准确加入20mL新血宝样品溶液，依次加入醋酸盐缓冲溶液5mL，盐酸羟胺（）mL ，邻二氮菲（）mL，加蒸馏水定容，摇匀，放置2min。在波长为（）nm处，用1cm的吸收池，以蒸馏水做空白，测定溶液吸光度A=（）带入线性相关方程求出c值

【参考文献】

[1] 邓丽华. 分光光度法测定饮用水中铁的含量 [J]科技资讯 ,2010:241-242

[2] 李建雄. 自来水中铁含量测定的实验研究 [J]内蒙古石油化工，2011,6:4-6

[3] 张江，汪红军，苏华雷等.原子吸收法测阿胶补血胶囊中铁含量 [J]广州化工，2012,4（2）：101-102

[4] 王彤，赵清泉.分析化学[M].北京：高等教育出版社，2003：300-305.

[5]周晓霞，冯雪，赵亚利.分光光度法测定菠菜中铁的含量[J]河北化工，2011,8（34）

[6]杨威，莎木嘎，杨秋林等.联吡啶分光光度法测定蒙药珍宝丸中铁含量 [J]内蒙古农业大学学报,2011,4(32)

[7] 张江，汪红娟，苏华雷等原子吸收法测阿胶补血胶囊中的铁含量[J]广州化工，2012,1（40）