小鼠白介素1βIL-1β试剂盒使用方法
白介素1β(IL1b)检测试剂盒 SEA563Hu使用说明书
![白介素1β(IL1b)检测试剂盒 SEA563Hu使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/7d9c5e0ca8114431b90dd8a2.png)
SEA563Hu96T白介素1β(IL1b)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)适用生物:人使用说明书仅供体外研究使用,不用于临床诊断!第12版(2016年05月修订)[预期应用]本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL1b含量。
[试剂盒内容]试剂名称数量试剂名称数量96孔板(预包被)196孔板覆膜4标准品2标准品稀释液1×20mL检测溶液A1×120μL检测溶液A稀释液1×12mL检测溶液B1×120μL检测溶液B稀释液1×12mLTMB底物1×9mL终止液1×6mL洗涤液(30×)1×20mL使用说明书1[需自备的设备及试剂]1、450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)2、单道或多道微量移液器及吸头3、稀释样品的EP管4、蒸馏水或去离子水5、吸水纸6、盛放洗液的容器7、0.01mol/L(或1×)磷酸缓冲盐(PBS),pH=7.0-7.2[试剂盒的储存及有效期]1、未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20o C,其余试剂请置于4o C保存备用。
2、使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,此外,请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝箔袋装好,并拉紧密封铝箔袋,置于-20o C保存。
注意:试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。
产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。
[标本的采集与保存]1、血清:将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4o C过夜,然后1,000×g离心20分钟,取上清即可,将上清置于-20o C或-80o C保存,避免反复冻融。
白介素-1βELISA定量操作分享
![白介素-1βELISA定量操作分享](https://img.taocdn.com/s3/m/2f00403a0622192e453610661ed9ad51f01d5465.png)
白介素-1βELISA定量操作分享
ELISA常见的标本一般包括:液体类标本(包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等);培养细胞;组织标本。
那么是不是仅仅有了这些标本,就可以开始ELISA实验了呢?这些标本在收集的时间、方法以及保存条件都有一定的要求,划重点:
1.血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原、无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-2Na,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。
避免使用溶血,高血脂样品。
3.组织匀浆:用预冷的匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。
取上清检测。
5.其它生物样品:如固体生物代谢物,按组织样本处理方法操作,悬浮物应离心去除。
以上为样本的实验前处理方法,如果遇到急事不能立刻用这些新鲜的样本来进行实验的话,那么也无妨,接下来跟大家分享,样本处理后的储存方法,在短时间内是可以应急的,但是还是建议新鲜样本最佳:
ELISA方法类型对比
一般ELISA实验类型有四种,竞争法、间接法、双抗体夹心法、双抗原夹心法,这四种方法有哪些不同,以及各自的优缺点是什么?
Abbkine白介素-1β ELISA定量试剂盒特点如下:
1、高效、灵敏、特异的抗体;
2、定量准确稳定的重复性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;。
小鼠白细胞介素2IL
![小鼠白细胞介素2IL](https://img.taocdn.com/s3/m/c91af5a2f121dd36a32d825e.png)
小鼠白细胞介素2(IL-2)试剂盒使用方法检测范围:96T30 ng/L -1200 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2(IL-2)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素2(IL-2)水平。
用纯化的小鼠白细胞介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2(IL-2),再与HRP标记的白细胞介素2(IL-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2(IL-2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素2(IL-2)浓度。
试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品(2400ng/L)0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
1200 ng/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液600 ng/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液300 ng/L 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150 ng/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液75 ng/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
人IL-1β ELISA kit说明书
![人IL-1β ELISA kit说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/28edfde70975f46527d3e181.png)
标本收集: 1. 收集血液的试管应为无热原和内毒素试管。 2. 血浆抗凝剂推荐EDTA。 3. 避免溶血,高血脂标本。 4. 标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
1
5. 标本收集后若不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。 6. 可根据实际情况,将标本做适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数) 。
60分钟。 5. 洗板4次。 6. 除空白孔外,加入酶结合物工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱孵育30分
钟。 7. 洗板4次。 8. 加入显色剂100ul/孔,避光37℃孵箱孵育10--15分钟。 9. 加入终止液100ul/孔,混匀后即刻测量OD450值(5分钟内)。
结果判断: 1. 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。 2. 手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标
灵敏度,特异性和重复性: 1. 灵敏度:最小可测人IL-1β达2pg/ml. 2. 特异性:不与IL-2,3,4,5,6,8,10,12,IFN,TNF及sTNF-RII等反应。 3. 重复性:板内,板间变异系数均<10%.
Elabscience 未包被小鼠白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
![Elabscience 未包被小鼠白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/633fd1b39f3143323968011ca300a6c30c22f1c5.png)
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-UNEL-M0064产品规格:96T*5/96T*15Elabscience®未包被小鼠白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Uncoated Mouse IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆样本中IL-1β浓度。
试剂盒组成及保存试剂体积以实际发货版说明书为准。
相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
其他所需试剂ELISA辅助组分试剂盒(Ancillary Reagent Kit,货号:E-ELIR-K001):包含完成96T*5规格ELISA实验的全套辅助试剂。
或有其他实验需求,可单独购买以下辅助试剂产品:或自行配制指标通用性辅助试剂。
(注:下列配方均为各试剂的基础组分,可根据实验需求和实验结果对配方进行优化)●包被液:1xCBS●封闭液:1xPBS,保护性蛋白●洗涤液:3%Tris●样本稀释液:1xPBS, 保护性蛋白●抗体/酶结合物稀释液:1xPBS, 保护性蛋白●终止液:5%硫酸试验所需自备物品1.酶标仪(450 nm波长滤光片)2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL3.37℃恒温箱4.双蒸水或去离子水5.吸水纸6.加样槽样品收集方法(具体处理方法可参考官网:/List-detail-241.html) 1.血清:全血样品于室温放置1小时或2-8℃过夜后于2-8℃,1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书
![白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/d275b9ca5022aaea998f0fde.png)
白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书kit规格:48孔配置/96孔配置标准品稀释液:1.5ml×1瓶酶标试剂:3ml×1瓶(48)/6ml×1瓶(96)【白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书】本试剂仅供研究使用计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒组成:封板膜:2片(48)/2片(96)说明书:1份密封袋:1个标准品:2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存【白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书】实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人铁蛋白(FE) 水平。
用纯化的人铁蛋白(FE) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入铁蛋白(FE) ,再与HRP标记的铁蛋白(FE) 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的铁蛋白(FE) 呈正相关。
碧云天生物技术 Human IL-1β ELISA Kit 说明书
![碧云天生物技术 Human IL-1β ELISA Kit 说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/f693a672f011f18583d049649b6648d7c1c70821.png)
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-168-3301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号Human IL-1β ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI305Human IL-1β ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IL-1β ELISA Kit (Human Interleukin-1β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白细胞介素1β酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的IL-1β的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为2.2pg/ml ,与人IL-1r α、IL-1sRII 、IL-1sRI 、小鼠IL-1α、小鼠IL-1β等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
IL-1即白细胞介素-1(简称白介1),其家族由IL-1α(也称IL-1F1)、IL-1β(也称IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist, 简称IL-1RA, 或IL-1F3)及IL-18、IL-33和IL-1F5~F10组成。
IL-1主要由巨噬细胞产生,此外几乎所有的有核细胞,如B 细胞、NK 细胞、体外培养的T 细胞、角质细胞、树突状细胞、星形细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、内皮细胞以及平滑肌细胞均可产生IL-1。
正常情况下只有皮肤、汗液及尿液中含有一定量的IL-1,绝大多数细胞在受到外来抗原或细菌内毒素刺激后才能合成和分泌IL-1。
IL-1β在免疫和炎症反应、骨重建(bone remodeling)、发烧、碳水化合物代谢等生理、病理过程中都有重要作用。
小鼠白细胞介素10(IL-10) 酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)
![小鼠白细胞介素10(IL-10) 酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)](https://img.taocdn.com/s3/m/e2e57a55767f5acfa0c7cd0a.png)
仅供科研使用,不得用于临床检验。
小鼠白细胞介素10(IL-10 )酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)说明书黄石市艾恩斯生物科技有限公司【产品名称】通用名称:小鼠白细胞介素10(IL-10 )酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)英文名称:Mouse Interleukin 10(IL-10 )ELISA KIT【包装规格】48人份/盒,96人份/盒【预期用途】仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中小鼠白细胞介素10(IL-10 )的浓度。
【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。
在预包被抗小鼠白细胞介素10(IL-10 )抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入小鼠白细胞介素10(IL-10 )校准品和待测样本,再加入另一株HRP标记的抗小鼠白细胞介素10(IL-10 )抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。
加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中小鼠白细胞介素10(IL-10 )的浓度正相关。
拟合校准品曲线,可以计算出样本中小鼠白细胞介素10(IL-10 )的浓度。
【主要组成成分】主要成分校准品检测范围:15.6-1000pg/ml。
校准品已经通过测试,结果表明HBs抗原阴性,HIV1、HIV2和HCV抗体阴性,由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质,本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。
2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
小鼠白介素1βIL-1βELISA试剂盒使用方法
![小鼠白介素1βIL-1βELISA试剂盒使用方法](https://img.taocdn.com/s3/m/a0598045783e0912a2162a94.png)
小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒使用方法检测范围:96T2.5ng/L-80ng/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素1β (IL-1β)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素1β (IL-1β)水平。
用纯化的小鼠白介素1β (IL-1β)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素1β (IL-1β),再与HRP标记的白介素1β (IL-1β)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素1β (IL-1β)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白介素1β (IL-1β)浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
用ELISA试剂盒检测人白介素1β IL-1b 方法步骤
![用ELISA试剂盒检测人白介素1β IL-1b 方法步骤](https://img.taocdn.com/s3/m/eb0b8d7d7fd5360cba1adbb2.png)
双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度。
IL-1β捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的IL-1β会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
当加入生物素化的抗人IL-1β抗体后,抗人IL-1β抗体与IL-1β接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。
生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
最后加入显色剂,若样本中存在IL-1β将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。
通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,IL-1β浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中IL-1β浓度。
标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作:A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可;B.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;C.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测;D.标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;3.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除;4.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
注:正常人血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。
注意事项:1.试剂盒请保存在2~8℃。
2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶,请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
3.若标准品复溶后,请在三天内用完。
4.底物请勿接触氧化剂和金属。
5.加样时,请及时更换枪头,避免交叉污染。
6.严禁混用不同批号的试剂盒组份。
7.充分混匀对保证反应结果的准性很重要,在加液后请轻轻叩击边缘以保证混匀。
8.室温反应,请严格控制在25~28℃。
免疫组化il-1β实验步骤
![免疫组化il-1β实验步骤](https://img.taocdn.com/s3/m/908d607def06eff9aef8941ea76e58fafab045c4.png)
免疫组化il-1β实验步骤免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)是一种用来检测组织中特定蛋白质表达的方法。
IL-1β是一种重要的细胞因子,它在免疫和炎症过程中发挥着重要作用。
进行IL-1β的免疫组化实验需要严格遵循一系列步骤,以确保实验结果的准确性和可靠性。
1. 样本处理,首先,需要准备组织样本,可以是组织切片或细胞培养物。
对于组织样本,需要进行固定、脱水和包埋等处理,以保持样本的完整性和稳定性。
2. 抗体处理,选择合适的IL-1β抗体,确保其特异性和敏感性。
将样本切片或细胞培养物与IL-1β抗体孵育,使抗体与目标蛋白结合。
3. 洗涤,将样本进行洗涤,去除未结合的抗体和其他杂质。
4. 二抗处理,加入与IL-1β抗体结合的二抗,如辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗,以增强IL-1β的检测信号。
5. 显色反应,加入适当的显色底物,使IL-1β呈色反应产生,常用的底物包括DAB(二氧化苯胺)或VIP(维克罗尼亚紫)。
6. 停止反应,在IL-1β显色适当程度后,通过停止反应来终止显色过程,常用的方法是将样本浸入脱离液中。
7. 脱水和封片,对样本进行脱水、透明化处理,并最终封片,以便于显微镜观察和图像获取。
需要注意的是,在整个实验过程中,需要严格控制实验条件,包括温度、时间、试剂浓度等,以确保实验的重复性和可比性。
此外,还需要进行负对照和阳性对照实验,以验证实验结果的准确性和特异性。
总之,IL-1β的免疫组化实验是一个复杂而精细的过程,需要熟练的操作和严谨的态度。
通过严格遵循上述步骤,可以获得准确可靠的IL-1β表达情况,为相关研究提供重要的实验数据支持。
ELISA 检测试剂盒 说明书
![ELISA 检测试剂盒 说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/abb832c0c0c708a1284ac850ad02de80d4d806a4.png)
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断小鼠小鼠((MouseMouse))肿瘤坏死因子可溶性受体肿瘤坏死因子可溶性受体ⅠⅠ(TNFsR-TNFsR-ⅠⅠ)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书
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癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
达优人 IL-1β ELISA 试剂盒说明书
![达优人 IL-1β ELISA 试剂盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/4014a15b640e52ea551810a6f524ccbff121cac8.png)
产品信息和操作指南Human IL-1β预包被 ELISA kit Cat# : DKW12-1012-048 / DKW12-1012-096本试剂盒专用于科研,而非用于诊断Human IL-1βDKW12-1012目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒提供的试剂 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (5)操作过程 (7)结果分析 (9)试剂盒的保存 (9)操作步骤一览表 (10)参考文献 (11)ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法 (12)预包被ELISA 试剂盒系列产品 (15)1、产品简介:达优®人IL-1β ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术,体外定量检测人血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的IL-1β,可同时检测天然的和重组的IL-1β。
本试剂盒为预包被板,“夹心一步”完成,整个过程孵育时间不超过4小时,洗涤6次,操作时间大大减少。
本试剂盒专用于科研,而非用于诊断。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分,若有任何疑问请与达科为生物工程有限公司联系,E-mail:*************.检测范围:500-15.6 pg/mL灵敏度:5 pg/mL重复性:板内、板间变异系数均<10%。
2、知识背景:白细胞介素-1(Interleukin-1,IL-1)家族蛋白包括IL-1α、IL-1β和IL-1受体拮抗物。
除了皮肤角质化细胞、一些上皮细胞和中枢神经系统的一些细胞之外,IL-1并不在健康个体的未经刺激的细胞中分泌。
生理条件下IL-1的浓度仅在10-12-10-14M之间。
然而,为了应对刺激(如炎症物质、感染、细菌性内毒素),巨噬细胞和各种其它类型的细胞的IL-1分泌量将大大增加(1-4)。
3、试剂盒提供的试剂:试剂规格配制Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状,按瓶上说明操作Biotinylated antibody 2/1瓶* 1:50用Dilution buffer R(1×)稀释Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1:100用Dilution buffer R(1×)稀释Dilution buffer R(1×) 3/2瓶* 即用型Washing buffer(50×)1瓶 150∶用蒸馏水稀释TMB 1瓶即用型Stop solution 1瓶即用型Precoated ELISA plate 8×12或8×6*即用型封板膜 2/1张* 即用型说明书1份*:96/48 Tests4、需要实验者自行准备的试剂与仪器:1.酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)2.微量加液器及吸头:P10,P50,P100,P200,P1000 3.蒸馏水或去离子水4.全新滤纸5.旋涡振荡器和磁力搅拌器5、注意事项:1.试剂应按瓶上标签说明储存,使用前室温平衡20-30分钟。
白介素1β_人白介素1β_Human IL-1β使用说明书
![白介素1β_人白介素1β_Human IL-1β使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/d86673091711cc7931b716e5.png)
GMP级重组人白介素1β(冻干粉)Recombinant Human IL-1β(interleukin-1β)作用机理:IL-1β是一种在多种细胞中产生的促炎细胞因子,包括单核细胞、组织巨噬细胞、角质形成细胞和其他上皮细胞。
IL-1α和 IL-1β与同一受体结合,具有相似的生物学特性。
这些细胞因子具有广泛的活性,包括通过诱导 IL-2 释放促进胸腺细胞增殖、B 细胞成熟和增殖、成纤维细胞生长因子样活性、滑膜细胞释放前列腺素和胶原酶等。
然而,IL-1β是一种分泌型细胞因子,而 IL-1α主要是一种细胞相关的细胞因子。
规格参数:货号:TL-513 规格:100ug产品信息:表达宿主:人 HEK293 细胞同源名称:Catabolin, Lymphocyte-activating factor (LAF), Endogenous Pyrogen (EP), Leukocyte Endogenous Mediator (LEM), Mononuclear Cell Factor (MCF), IL1B,IL-1BETA,IL1F2,IL-1β蛋白序列:DNA 序列编码人 IL-1β(GenBank: AAA72849.1)表达带有 His 标签在 C 末端分子量:重组人 IL-1β包含 159 个氨基酸,预测理论分子量为 18.2kd纯度:≥95%采用 SDS-PAGE 凝胶和高效液相色谱分析内毒素:≤0.01EU/ug(凝胶法)纯化方式:层析纯化性状:白色疏松体保存温度:2-8℃有效期:24 个月生产厂家:同立海源生物使用说明:稳定性和储存:冻干的样本的可以在4℃保存 24 个月,溶解后的液体可以于-20℃保存 6-12 个月,并且避免反复冻融。
相关产品推荐:Human IL-2、Human IL-15、Human IL-12、Human IL-6、Human IL-18、Human IL-21、Human IFN-γ。
人白介素1β (IL-1β)操作流程
![人白介素1β (IL-1β)操作流程](https://img.taocdn.com/s3/m/ca58a94669eae009581bec53.png)
人白介素1β(IL-1β)酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号:1910221本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中白介素1β(IL-1β)含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗IL-1β抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-1β抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-1β呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板:一块(96孔)2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,000 pg/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别稀释1,000 pg/ml,500 pg/ml,250 pg/ml,125 pg/ml,62.5 pg/ml,31.2 pg/ml,15.6 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制500 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)1,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml。
4. 检测稀释液A:1×10ml。
5. 检测稀释液B:1×10ml。
6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
Mouse Interleukin 1β (IL-1β) ELISA Kit(说明书翻译)
![Mouse Interleukin 1β (IL-1β) ELISA Kit(说明书翻译)](https://img.taocdn.com/s3/m/90c87100640e52ea551810a6f524ccbff121caf6.png)
Mouse Interleukin 1β (IL-1β) ELISA KitCatalog Number. CSB-E08054mFor the quantitative determination of mouse interleukin 1β (IL-1β) concentrations in serum, plasma, cell culture supernates, tissue homogenates.用于定量测定血清,血浆,细胞培养上清,组织匀浆中小鼠白介素1β(IL-1β)的浓度。
This package insert must be read in its entirety before using this product.使用本产品前,必须完整阅读本包装说明书。
In order to obtain higher efficiency service, please ready to supply the lot number of the kit to us (found on the outside of the box).为了获得更高效率的服务,请准备好向我们提供套件的批号(位于包装箱的外部)。
PRINCIPLE OF THE ASSAYThis assay employs the quantitative sandwich enzyme immunoassay technique. Antibody specific for IL-1β has been pre-coated onto a microplate. Standards and samples are pipetted into the wells and any IL-1β present is bound by the immobilized antibody. After removing any unbound substances, a biotin-conjugated antibody specific for IL-1β is added to the wells. After washing, avidin conjugated Horseradish Peroxidase (HRP) is added to the wells. Following a wash to remove any unbound avidin-enzyme reagent, a substrate solution is added to the wells and color develops in proportion to the amount of IL-1β bound in the initial step. The color development is stopped and the intensity of the color is measured.该测定采用定量夹心酶免疫测定技术。
大鼠白介素-1ELISA试剂盒说明书
![大鼠白介素-1ELISA试剂盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/5b5fea1552d380eb62946d38.png)
导致试验失败。
-1-
本试剂盒只作为实验室研究使用,不得作为临床诊断的依据
Enzyme Linked Immunosorbent Assay [ELISA]
大鼠白细胞介素 1β[IL-1β]酶联免疫分析试剂盒使用说明书
5 该试剂盒内不包含有传染性试剂。 6 不要混用不同指标不同批号的试剂和包被微孔板。 7 试验过程中试剂和待测样品均应充分混匀。 8 包被微孔板应放置 2-8℃干燥保存,避免受潮。 9 如有剩余试剂请放置 2-8℃冷藏保存。 10 试验过程要严格按照说明书操作,先后顺序不得颠倒。 11 如果样品量较大应注意加样时间,避免加样过慢或间隔时间过长。 12 使用和贮存底物Ⅱ时应注意避光。 13 终止液含有酸性成分具有腐蚀性,勿将其溅落到皮肤或衣服上。如有该情况发生应
分析过程
实验前处理步骤
1 试验前将试剂和待测样品放置室温下平衡[20-25℃]充分混匀。并确定好本次检测 所需的酶标板孔数目,将所需要的微孔放置到配套板架上。
2 按照要求用蒸馏水或纯净水来稀释浓缩清洗液,充分混匀后备用。 3 将本次实验所需微孔做好相应标记,[如有需要做空白对照孔可预留一孔作为空白
对照孔备用],最好采用双孔平行加样。
大鼠白细胞介素 1β[IL-1β]酶联免疫分析试剂盒使用说明书
试剂盒各项性能指标综述
1 最低检测限:1.0pg/mL。 2 板内批间差异:≤ 6% 3 以标准品浓度及其测定吸光度值拟合出线性回归曲线的相关系数 r≥0.98 4 失效期限:6 个月[具体日期以试剂盒外盒标签为准] 5 由于现有的科学和条件我们还不能对所有原材料进行更全面的鉴定和分析,故本产品可
四正柏生物 人IL-1β ELISA试剂盒说明书
![四正柏生物 人IL-1β ELISA试剂盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/a7abea8288eb172ded630b1c59eef8c75fbf9597.png)
REV20190716仅供研究,不用于临床诊断。
客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱: **************公司官网: 目录简介 ......................................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................................. - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................................. - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................................. - 5 -其他实验材料 ......................................................................................................................................................... - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................................. - 5 -样本收集处理及保存方法 ..................................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................................. - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................................. - 8 -操作流程图 ............................................................................................................................................................. - 8 -操作要点提示 ......................................................................................................................................................... - 9 -结果判断 ................................................................................................................................................................. - 9 -结果重复性 ........................................................................................................................................................... - 10 -灵敏度 ................................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ................................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ............................................................................................................................................................... - 10 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
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小鼠白介素1β (IL-1β)试剂盒使用方法
检测范围:96T
2.5ng/L-80ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素1β (IL-1β)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素1β (IL-1β)水平。
用纯化的小鼠白介素1β (IL-1β)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素1β (IL-1β),再与HRP标记的白介素1β (IL-1β)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素1β (IL-1β)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白介素1β (IL-1β)浓度。
试剂盒组成
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好
控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。