虫草素的检测提纯方法及药用价值

虫草素的检测提纯方法及药用价值

提纯方法：1、虫草素的提取方法：以蛹虫草为材料采用超声波水提法、超声波醇提法、水热回流法和醇热回流法4 种提取方法选择虫草素*提取方法,用正交试验方法考察水热回流法中提取温度、提取次数、提取时间、料液比4个因素对虫草素提取效率的影响,确定水热回流法是提取虫草素的*提取方法，其*工艺条件为：用10倍量的水于80℃热回流提取3次每次90 min。

2、虫草素的分离纯化方法：车振明等[26]经过对蛹虫草子实体及培养基的粉碎、石油醚脱脂、80℃～85℃水浴12 h、调节等电点沉淀、732-NH4离子交换树脂的分离、浓缩、4℃下低温结晶，得到一定纯度的虫草素晶体。陈顺志等[27]以蛹虫草人工培养后的发酵物为原料，采用超临界技术萃取核苷类有效成分，并以乙醇等作为夹带剂减压分离获得核苷多组份及单体。Cunnigham等[4]将虫草菌培养液经过滤后用活性炭吸附，再经过洗脱液洗脱和浓缩，得到虫草素晶体。

虫草素的检测方法：1、薄层层析法（TLC）雷帮星等将待虫草素待测样品与标准品点于已活化的薄层板上（1lO℃活化0．5 h ），待溶剂挥干后，在展开剂（氧仿:乙酸乙酯:异丙醇:水=8:2:6:0．3）中展开。挥干展层剂，将其置紫外线分析仪上，254nm显色,计算标准品和样品中各点的相对迁移率Rf。

2、液相色谱法（HPLC）张嘉等以HPLC测定虫草素含量，其色谱条件：Symmetry C18（5 um,4．6×150 mm）色谱柱，流动相：磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（ph=6．8，加1％四氢呋喃），流速1．8 ml／min，检测波长：260 nm，进样量10 ul，灵敏度1．000AUFS，室温。

药用价值：1、免疫调节作用

近年来，研究人员发现虫草素具有免疫调节作用。它能够极大地提高了人外周血液单核细胞IL-10的分泌和IL-10mRNA的表达，同时，虫草素对诱导产生IL-2的植物血球凝集素和外周血液单核细胞扩增都有抑制作用，抗IL-10中性抗体也不能完全阻止虫草素对IL-2产

生的抑制作用。在虫草素作用下，成熟树突状细胞能诱导调节性T细胞增殖，而且还能抑制细胞分裂，促进细胞的分化，改变胞膜上物质结构分布，对T淋巴细胞转化有促进作用，它还可以提高机体单核巨噬细胞系统的吞噬功能,激活巨噬细胞产生细胞毒素直接杀伤癌细胞。

2 、虫草素的抗肿瘤作用

虫草素对肿瘤的抑制作用一直是广大科学家们关注的热点。研究发现，用虫草素皮下注射接种了艾氏腹水癌的小鼠，可使小鼠中位生存期延长到60 d，而对照组仅为19 d，这说明虫草素对小鼠艾氏腹水癌有明显的抑制作用，能明显延长接种艾氏腹水癌小鼠的存活时间。还有研究表明，虫草素对人鼻咽癌KB细胞和人宫颈癌HeLa细胞等皆具有明显的抑制作用。科学家推测虫草素可能有3种抑制肿瘤的机制：一是虫草素的游离羟基可以渗入瘤细胞DNA中而发生作用；二是抑制核苷或核苷酸的磷酸化而生成二磷酸盐和三磷酸盐的衍生物,从而抑制瘤细胞的核酸的合成；三是阻断黄苷酸胺化形成鸟苷酸的过程。

3、虫草素的抗炎作用

经研究发现，虫草素可以拮抗NO产物的生成，这一机制是通过对NO合酶和COX-2基因表达负调控以及对NF-kB活性、AKT和p38磷酸化的抑制来实现的。由此，虫草素很可能成为一种治疗由炎症引起的相关紊乱的药物。

4、虫草素的抗白血病作用

通过体内实验研究发现，虫草素作为一种腺苷脱氨酶抑制剂,对末端脱氧核苷酸阳性白血病细胞（TdT+）的抑制大于对末端脱氧核苷酸阴性白血病细胞（T dT-）的抑制。经过分析其抗TdT+白血病的机理。结果表明，3’-dATP不是3’-dA抗白血病的主要原因，而TdT的活性才是主要原因，并且发现PBM对3’-dA的细胞毒性作用不敏感。其他研究发现虫草素对TdT+的白血病细胞的凋亡诱导与提高蛋白激酶A（PK-A）活性密切相关，并且经虫草素处理L1210白血病细胞，可显著抑制RNA的甲基化。

5、虫草素的抗菌抗病毒作用

虫草素具有广谱抗菌的作用，它能抑制链球菌、鼻疽杆菌、炭疽

杆菌、猪出血性败血症杆菌及葡萄球菌等病原菌的生长。此外，虫草素对石膏样小芽孢癣菌、羊毛状小芽孢癣菌、须疮癣菌等皮肤致病性真菌以及枯草杆菌也有抑制作用。Sugar证明了虫草素具有非常强的抗真菌活性。

虫草素也具有较强的抗病毒活性。研究发现，虫草素有抗疱疹病毒DeJulian-Ortiz和抑制脑炎病毒的功能，对人体免疫缺陷型病毒HIV-I型的侵染及其反转录酶的活性亦有抑制作用。深入研究发现，虫草素可抑制C型RNA致肿瘤病毒的复制,还可以有效抑制病毒的mRNA和多聚腺苷酸的合成，可以阻碍由5-I-2’-脱氧尿苷诱导的BALB/3T3和BALB/K-3T3细胞产生的鼠白血病病毒。