弹性纤维染色液
Lycra T-400弹性纤维的染色
问题的发 生, 预精炼是必要的。
洗浴 :
1g ea W ah M - /L S r s RK ;
可 以较 好 地 实 现 单 一 组 分 同 色 深 浅效 应的 染色 , 并不 会 明 显地 损 失 拉伸 回复 性能 。
有更高的弹力和拉伸 回复。这种 现象是由于单一组分 的不 同化学 结构造成的 , 这也导致不同的技术
艺 。LcaT4 0是 来 自英 威 达 (ni a 的 一 种 新 型 弹 性 纤 维 , 采 用 双 组 分 yr -0 Iv t) s 它 纤 维技 术 , 这种 技 术赋 予针 织 物 和 机 织 物 更 好 的舒 适 感 、 感 、 皱 性 和 免 烫 手 抗
的特点 。 6 ℃ 2 n 0 0 mi o
的外 观 。 L caT4 0的 这 些 优 点 yr -0
图 1 L ca T一 0 yr 4 0
应用于各类 男装、 女装和童装 中;
其 中主 要 的 应 用 范 围 是 轻 薄 的 机 织物 和针织 物 , 包括衬 里 。
1 前 处 理
纤维制 备 用的化 学 药 品 、 软 柔
2 染 色
LcaT40一 般 在 10 高 yr -0 3% 温下 染 色 ( l 。在 这 个 温 度 下 图2 )
关键词 : 性纤 维, 组分 , 色, 弹 双 染 染料
双 组 分 纤 维 中单 一 组 分 不 同 的收缩 特性 导 致 了 LcaT4 0在 yr -0 精炼 和 染 色 时 比传 统 的 聚 酯 纤 维
剂和络丝油剂会在染浴中沉淀 , 并
在成 品 上 产 生 污 点 。 避 免 这 些 为
5 0
图 2 染 色曲 线
国际纺 织导 报 2 0 0 6年第 8期
病理学特殊染色技术:Gomori醛品红染色法(弹性纤维、肥大细胞)
病理学特殊染色技术:Gomori醛品红染色法(弹性纤维、肥
大细胞)
Gomori醛品红染色法
(弹性纤维、肥大细胞)
试剂:
①醛品红液:酸性品红0.5克,70%酒精99毫升,三聚乙醛(副醛)1毫升
将酸性品红溶于70%酒精,加入鹴2和三聚乙醛,充分溶解,室温放24 48小时自然成熟,溶液呈紫色,4摄氏度冰箱保存2~3朋
②橘黄G液:橘黄G 0.5克,磷钨酸2克,95%酒精100毫升
③Lugol碘液:碘化钾2克溶于蒸馏水20毫升,再加碘1克,完全溶解后,加蒸馏水80毫升
方法:
⑴石蜡切片常规脱蜡至水
⑵碘液5~10分钟,水洗2~3分钟
⑶5%硫代硫酸钠水溶液5分钟,流水冲洗3~5分钟
⑷70%酒精稍洗
⑸醛品红液5~10分钟
⑹70%酒精洗至弹性纤维清晰,水洗2~3分钟
⑺橘黄G液10~20秒,水洗2~3分钟
⑻各级酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片
结果:
弹性纤维深紫色;
黏液紫色;
肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、脑垂体腺细胞同时着色;
背景黄色。
特殊染色
结缔组织染色法Mallory三色染色法:胶原和网状纤维蓝色,软骨、淀粉样变物质淡蓝色,神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒红色,髓鞘和红细胞橘红色。
2.Masson三色染色法:胶原纤维绿色,肌纤维红色,红细胞橘红色。
鉴别胶原纤维和肌纤维最宜采用的方法。
3.三联染色法:胶原纤维红色,网状纤维黑色,弹性纤维绿色,肌肉和红细胞淡黄色。
二.胶原纤维染色1.Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法:胶原纤维鲜红色,肌纤维、细胞质和红细胞黄色,胞核蓝褐色。
与胶原纤维染色相比的缺点是:易褪色和对比度差。
2.天狼星红(Sirius Red)苦味酸染色法:胶原纤维红色,细胞核绿色,其他黄色。
在偏光显微镜下可见4种胶原纤维。
三.网状纤维染色:包括:Gomori和James。
Gomori银氨染色法:网状纤维黑色,胶原纤维红色。
鉴别诊断中的应用:1)癌和肉瘤的鉴别。
2)恶性淋巴瘤和组织细胞肉瘤。
3)血管内皮细胞瘤和外皮细胞瘤。
4)黏液纤维瘤和黏液肉瘤。
四.弹性纤维染色:效果最好的固定液是:甲醛生理盐水。
Gomori醛复红染色法:弹力纤维深紫色,黏液紫色(肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、垂体B细胞均能同时着色),背景不同程度的黄色。
1)配制后需在室温静置1-2日。
2)是碱性品红加入三聚乙醛和盐酸配制而成。
3)醛复红所谓的成熟是颜色为深紫色。
3)可使胃主细胞着色。
5)应放置在冰箱内保存。
五.显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法:维多利亚蓝+丽春红S:弹性纤维蓝绿色,胶原纤维红色,背景淡黄色。
六.横纹肌组织染色:Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH):胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、横纹肌等均蓝色;胶原、网状纤维、骨基质及骨黄色或玫瑰红色。
1)要在室温下成熟。
2)可使用高锰酸钾促使PATH成熟。
3)乙醇分化时要保存一定的红色。
4)染色后用无水乙醇快速脱水,冷风稍干燥后封固。
七.糖类染色:过碘酸的作用是氧化。
过碘酸-Schiff(PAS)染色法:糖原及其他PAS反应阳性物质红色,细胞核蓝色。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色:胶原和网状纤维淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色:髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色,显示胶原纤维,A组排列规则1.2.Masson三色染色法绿色:胶原纤维红色:肌纤维橘红色:红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3.显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色:胶原纤维黑色:网状纤维绿色:弹性纤维淡黄色:肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2.Van Gieson〔V.G〕苦味酸-酸性品红法鲜红色:胶原纤维黄色:肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色:胞核图表 E 2.胶原纤维,Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法 图 心肌堵塞 myocardial infarction :心肌堵塞后2个月,van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替,黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红〔Sirius red 〕苦味酸染色法(参照上图)红色:胶原纤维 绿色:细胞核黄色:其他三、网状纤维染色3.1 Gordon-Sweets 银氨染色法 〔梅花开枝图,金色伴树枝〕黑色:网状纤维红色:胞核〔核固红复染〕 黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质〔红液复染〕图表 F 3.Gordon-Sweets 氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori 氏银氨液配制法图表 GGomori 氏银氨液配制法四、弹性纤维染色Gomori 醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最正确图表 H4.GOMORI 醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维 红色:胶原纤维 黄色:背景图表 I 4.Weigert 间苯二酚法六、肌肉组织染色△ 横纹肌组织染色Mallory 磷钨酸木精染色法〔PTAH 〕蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌 黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨 微紫色:粗弹性纤维〔有时〕天狼星红苦味酸染色法:〔偏光显微镜〕 Ⅰ型:强双折光性,呈黄色或红色纤维 Ⅱ型:弱双折光,呈多种色彩疏网状分布 Ⅲ型:弱双折光,呈绿色的细纤维 Ⅳ型:弱双折光的基膜,呈淡黄色紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌图表 J 6.1.磷钨酸木素法图表 K 6.1.磷钨酸木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法〔1974年〕红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色〔光学显微镜, ×200〕2.Poley显示缺氧心肌染色法〔1964年〕红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff〔PAS〕染色法红色:糖原及其他PAS反响阳性物质蓝色:细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质〔黏多糖〕染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫〔ABPAS〕染色法〔1956〕红色:中性黏液物质蓝色:酸性黏液物质紫红色:混合性黏液物质图表 M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表 N 8.1.胃粘膜组织 AB-PAS染色 40×:2.爱先蓝〔PH2.5〕法蓝色:唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色:胞核不着色:强硫酸化黏液物质图表 O 8.2.爱先蓝〔PH2.5〕染色液图表 P 8.2.爱先蓝法图表 Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝〔PH1.0〕法蓝色:含硫酸黏液物质不着色:非硫酸化酸性黏液物质红色:复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒红色:胶原纤维浅黄色:背景图表 R9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色:黑色素浅绿或不着色:背景黄色:肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue〔普鲁士蓝〕反响显示三价铁蓝色:含铁血黄素浅红色:其他组织图表 S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞。
弹性纤维染色过程经验探讨和临床应用价值
弹性纤维染色过程经验探讨和临床应用价值摘要:在临床病理诊断中,HE染色常用于疾病的诊断,但对于一些特殊类型的组织结构中需要被准确的鉴别出来还需要加入一定的特殊染色方法,比如弹性纤维染色,通过弹性纤维染色,能将弹性纤维分布情况表达出来,比如在肺癌的诊断中对于肿瘤是否突破肺膜浸润周围组织及浸润深度需要做出一个精准的判读,我科经过了一段时期的临床实践摸索,将弹性纤维染色过程中的一些注意事项和临床应用价值的一些经验和体会总结如下。
关键词:弹性纤维染色;注意事项;应用;一、弹性纤维的分布和染色机制(一)分布:弹性纤维广泛分布于全身的各个部位,尤其是呼吸系统,皮肤系统和循环系统为多,在肺组织中,弹性纤维能够对肺泡的结构和功能起到一定的作用,是肺进行呼吸运动的结构基础,但是,HE染色后细胞核为蓝色,其它成分均染成深浅不同程度的红色,难以分辨弹性纤维和胶原纤维,通过弹性纤维染色,能够将弹性纤维分布情况表达出来,在肺癌不同病理亚型的诊断中提供强有力的支撑。
(二)染色机制:带负电荷的弹性蛋白与带弱正电荷的燃料通过非极性吸附上色,维多利亚蓝的主要成分为含有丰富的二硫键的糖蛋白,强嗜酸性易与染色液中的碱基结合,特异性着色弹性纤维,胶原纤维一般不着色。
二、染色过程(一)材料:使用广州安必平医药科技股份有限公司弹性纤维染色液配套试剂盒。
(二)染色过程及注意事项:组织送到病理科后及时的切开固定是关键的第一步,保证充足的固定时间后,取材(厚度控制在3mm以内),脱水,包埋,切片,放入65℃烤箱烘烤1h,此时我们应该准备两个脱蜡缸,缸内准备好新鲜的二甲苯,每缸浸入5min即可,然后放入新鲜无水酒精内浸泡1分钟脱二甲苯,缓慢流水冲洗两分钟;0.5%高锰酸钾水溶液氧化5min;水洗30s;亚硫酸氢钠5滴1min;75%乙醇冲洗,然后浸入维多拉亚蓝染液中8-24h;75%酒精冲洗快速洗脱多余的染液;流水冲洗1min;滴染核固红染液10min,无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
弹性纤维染色
弹性纤维染色弹性纤维主要由弹性蛋白(一种黄*色硬蛋白,它是黄*色弹性纤维组织的主要成分,干燥时易脆,而湿润时呈弯曲并富弹性)构成。
它广泛分布于全身的各个部位,尤以循环系统,呼吸系统和皮肤系统为甚。
新鲜时它呈黄*色,固又称为黄*色纤维。
弹性纤维较细,直径0.2-1.0um,有分支,不成束。
但可交织成网。
它富有弹性,容易拉长,但不能拉到超过它的极限,外力除去后又恢复原状。
弹性纤维与胶原纤维交织在一起,在HE染色的标本上,含量少时不易与胶原纤维区别,含量多时呈折光性强的淡粉红色。
由弹性蛋白构成弹性纤维的鞘,并非完全的密封,在其周围有许多微细孔,这些微细孔可作为营养物及排除废物的场所。
弹性纤维主要来源于带有平滑肌特征的间胚叶细胞,少量可由脉管的内皮细胞产生,先形成前——弹性蛋白(pro-elastin),这时在电镜下可见到直径为200nm的电子密度微纤维,在成熟的弹性纤维蛋白,电密度减少或丧失,较为均匀一致。
弹性纤维与胶原纤维,网状纤维不同,它极难容于有机或无机的溶液里。
一、弹性纤维的变形和病理变化随着年龄的增长,特别是到了老年的时候,弹性纤维可发生生理性的变化,这时可观察到弹性纤维的纵行分裂,断成碎片,最后成为颗粒,这些变化同时也伴有化学变化,氨基酸和钙的含量有所增加,这些变化在皮肤是最明显的。
当有病变的时候,我们便可在切片观察到有的弹性纤维增生,有的被破坏,断裂、崩解,失去弹性。
如主动脉瘤,就可见到瘤壁上的弹性纤维已经失去了弹性。
这是由于主动脉壁的弹性纤维受到内压的不断冲击,弹性纤维过度牵拉,超过它的极期,再也恢复不了原状,因此在切片标本上(特殊染色)只能见到其痕迹或反应物。
二、弹性纤维的染色方法(一).Weigert氏雷锁辛品红法(1898)(Weigerts resorcin-fuchsin method)试剂的配制:Wergert氏雷锁辛品红液:碱性品红 2g雷锁辛 4g蒸馏水 200ml30%三氯化铁 25ml取500ml的烧瓶加入蒸馏水和雷锁辛,用玻棒搅拌均匀,加热直至沸腾,持续1-2min,再加入30%的三氯化铁水溶液继续搅拌直至煮沸2-3min后,此时溶液的颜色变为紫罗蓝色,冷却后过滤。
弹力纤维染色检测及临床应用
弹力纤维染色检测及临床应用摘要】弹力纤维具一定的弹性,对酸、碱、沸水有抵抗性,但可被胃、胰酶消化。
在HE染色标本中,弹力纤维与其他纤维的区别,需用特殊染色方法确认,其中最重要的Weigert型技术为弹力纤维的特异性染色方法。
在病理过程中,很多疾病都可以引起弹性纤维的显著变化。
观察皮肤组织中弹力纤维的变化,有助于诊断皮肤组织病变。
显示与判断心血管疾病,如鉴别心内膜弹力纤维增生症与心内膜心肌纤维化,在动脉硬化、主动脉炎时,观察动脉壁破坏情况等。
显示组织内弹力纤维断裂、变性等病变,如慢性支气管炎、肺气肿等。
显示与鉴别肿瘤组织,如弹力纤维瘤、乳腺早期导管浸润癌等。
弹性纤维的破坏、增生、断裂与崩解,对于研究组织、器官的病变程度有一定的价值。
【关键词】弹力纤维染色;检测;临床应用【中图分类号】R44 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2015)22-0048-02弹力纤维多分布于皮肤、血管壁、肺泡壁、韧带、声带、气管、耳廓软骨及某些腺体导管。
弹力纤维由两种成分组成,即集合成束的弹力微原纤维(由糖蛋白形成)和均质状的弹力蛋白。
弹力纤维具一定的弹性,对酸、碱、沸水有抵抗性,但可被胃、胰酶消化。
在HE染色标本中,弹力纤维与其他纤维的区别,需用特殊染色方法确认,其中最重要的Weigert型技术为弹力纤维的特异性染色方法。
目前,此染色原理尚不明了,间苯二酚品红液(即碱性品红的铁间苯二酚色淀形成的复合物)与弹力纤维结合并将其染成蓝黑色。
现对间苯二酚品红法的实际操作分析如下。
1.材料与方法1.1 材料来自我院病理科手术后送检的血管组织。
1.2 试剂间苯二酚品红液:①碱性品红2.0g,②间苯二酚4.0g,③蒸馏水200mL,④30%三氯化铁25mL,⑤浓盐酸4mL;①+②+③加热溶解,玻棒搅拌煮沸后慢慢加入④,继续搅拌煮沸3~5min,冷却过滤;滤液倾去不用,将滤纸和沉淀物一起放回烧杯内,温箱中烘干;取出后加95%乙醇200mL,隔水煮至沉淀物完全溶解后取出滤纸,冷却后过滤;补足蒸发的乙醇,最后加入⑤,4℃冰箱保存。
弹性纤维和胶原纤维
弹性纤维染色液说明书【产品名称】弹性纤维染色液【包装规格】货号:DC0064单瓶包装规格分别为:20ml、100ml、250ml;每套/盒包装规格分别为:3×20ml/盒、3×100ml/盒、3×250ml/盒。
【预期用途】用于组织细胞学染色从而定性检测组织切片中的弹性纤维。
【检验原理】弹性纤维 (Elastic Fiber)又称弹力纤维主要分布于人体的动脉壁、肺泡壁、皮肤,新鲜时呈黄色,折光性强,常用的弹力纤维染色法有Gomori醛品红法、间苯二酚碱性品红法、地衣红法、维多利亚蓝法、铁碘苏木素法等。
苯二酚碱性品红染色(又称Weigert酚复红染色)主要用于弹性纤维染色,可能机制是弹性纤维中某些部分与间苯二酚的酚基形成氢键而使弹力纤维被染成蓝色至蓝黑色,适用于显示弹性纤维和肝炎表面抗原,可以显示皮肤组织中弹力纤维的变化,如弹力纤维痣、皮肤环状肉芽肿、硬度病等;显示与判定心内膜及动脉的病变,观察某些病变中是击伴有弹力纤维的增生或破坏;还可鉴别肿瘤组织成分如弹力纤维瘤,从而协助诊断,尤其适用于显示成熟的弹性纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、间苯二酚品红染色液间苯二酚、品红2、酸性分化液盐酸3、Van Gieson染色液品红【储存条件及有效期】5~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为12个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后3个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】l、组织片常规脱蜡至95%乙醇;2、入间苯二酚品红染色液,加盖室温浸染1~3小时或56℃孵育1小时,稍水洗;3、95%乙醇分化到无染色液脱下为止(去除细胞浆背景着色),如果分化效果不佳,可以用酸性分化液分化2~3秒;4、流水充分冲洗5~10分钟;5、入Van Gieson染色液30~60秒,倾去染色液;6、不经水洗,95%乙醇迅速分化数秒;7、无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
弹力纤维染色方法
弹力纤维染色方法一、弹力纤维染色的重要性。
1.1 弹力纤维在人体组织中的作用可不容小觑。
它就像建筑中的钢筋一样,为组织提供支撑和弹性。
比如说在血管壁中,弹力纤维能让血管在血液流动的压力下有伸缩的能力,要是没有它,血管就容易出问题。
在皮肤里,弹力纤维能让皮肤保持紧致和有弹性,就像给皮肤装了个小弹簧。
1.2 对弹力纤维进行染色就如同给这些隐藏在组织中的“小弹簧”打上标记。
这有助于医生和研究人员在病理检查等情况下,清楚地看到弹力纤维的分布、形态以及是否存在病变等情况。
就好比在一堆乱麻里找到特定的丝线,染色后的弹力纤维能让我们在显微镜下一眼就把它识别出来。
2.1 地衣红染色法。
这种方法算是比较经典的。
它的原理呢,有点像给弹力纤维穿上一件特殊颜色的衣服。
地衣红这种染料会特异性地和弹力纤维结合,然后让弹力纤维在显微镜下呈现出紫红色。
操作起来也不是特别复杂,不过就像做菜一样,各种试剂的浓度、染色的时间都得拿捏得恰到好处。
要是时间短了,可能染色就不够深,看不清楚;时间长了,又可能会有一些非特异性的染色,就像画蛇添足,干扰我们的观察。
2.2 维多利亚蓝染色法。
这个方法也是很常用的。
维多利亚蓝就像一个精准的小工匠,能准确地附着在弹力纤维上。
染出来的颜色是蓝色,在显微镜下看起来非常清晰。
它的优点是染色效果比较稳定,就像一个老实可靠的朋友,不会轻易出岔子。
但是呢,它对试剂的要求也比较高,就像好马配好鞍,试剂的质量要是不好,那染色效果也会大打折扣。
2.3 醛品红染色法。
醛品红和弹力纤维之间就像是有一种特殊的缘分。
它能让弹力纤维染上深紫色,这种颜色对比非常强烈,就像黑夜中的紫星一样醒目。
不过这个方法在操作过程中需要注意一些细节,比如甲醛的处理等。
要是处理不好,就可能像捅了马蜂窝一样,出现各种问题。
三、弹力纤维染色的注意事项。
3.1 样本的处理是关键。
样本就像要被雕琢的璞玉一样,得处理得干净、合适。
如果样本在前期固定的时候没做好,就像地基没打好的房子,后续的染色肯定会受到影响。
改良Weiger弹力纤维染色液
染色结果:
弹力纤维 胶原纤维 肌纤维和红细胞
蓝色至紫黑色 红色 黄色
LeБайду номын сангаасgene。com
北京雷根生物技术有限公司
注意事项:
1、 如仅显示成熟的弹性纤维,可省上述去氧化和漂白步骤。
2、 酸性分化液主要使切片背景清晰,分化稍长一些对染色无损害。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Leagene。com
北京雷根生物技术有限公司
改良 Weigert 弹力纤维染色液
简介:
间苯二酚碱性品红染色液主要用于弹力纤维染色,又称 Weigert 树脂酚复红染色液。 Van Gieson 胶原纤维染色法的染色原理不阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。改良 Weigert 弹力纤维染色液染色原理在于间苯二酚品红不铁离子形成 Lake 复合物,其游离的 氨基不弹力纤维内的氢键牢固结合呈黑色。较常规 Weigert 间苯二酚品红弹力纤维染色多 了氧化和漂白过程,适用于显示各种弹力纤维。
50ml 4℃ 避光
试剂(D): 酸性分化液
50ml RT
试剂(E): 改良
E1: 丽春红 S 溶液
5ml RT 避光
VG 染色液
E2: PA 溶液
45ml RT 避光
操作步骤(仅供参考):
1、 组织固定于 10%的福尔马林中,常规脱水包埋。 2、 切片厚 4μm,常规脱蜡至水。 3、 用配制好的 Weigert 氧化剂氧化。稍水洗。 4、 用 Weigert 漂白剂漂白。流水冲洗。 5、 切片入装有 Weigert 间苯二酚品红染色液的染色缸(加盖)中染色。 6、 用酸性分化液分化至无染液脱下。流水冲洗。 7、 VG 染色液复染。急速用水洗一下,立刻用 95%的乙醇快速分化和脱水。 8、 常规脱水透明,中性树胶封固。
冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森(MASSON)染色试剂
冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森(MASSON)染色试剂盒产品说明书(中文版)主要用途冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森(MASSON)染色试剂是一种旨在使用标准化的化学脱蜡方法和伟郝夫(Verhoeff)苏木素以及三色染料(trichrome),分析和区分冰冻组织切片中的弹性纤维的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。
广泛用于结缔组织、肌肉组织和纤维蛋白的研究等。
产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。
技术背景弹性纤维(elastic fiber),又称为黄色纤维(yellow fiber),是固有结缔组织(Connective tissue proper)细胞外基质的成分之一,由平滑肌细胞和成纤维细胞产生弹力蛋白质(elastin)、原纤维蛋白(fibrillin;FBN)等构成。
弹性纤维具有可伸展性。
存在于皮肤、肺、动脉、静脉、弹力软骨、牙周韧带(periodontal ligament)、脂肪组织中。
弹性纤维缺失导致皮肤松弛症(cutis laxa)、威廉姆斯综合征(Williams Syndrome)等疾病。
基于摩罗利(mallory)首次应用三色系统的方法,马森(masson)进行了改良,在三色复合染料体系中,使用苯胺篮(aniline blue)替代绿篮。
同时使用伟郝夫(Verhoeff)苏木素选择性染色弹性纤维,三色复合染料帮助区别其它包括肌肉、胶原纤维、纤维蛋白(fibrin)等组织成分。
马森方法操作复杂,可以细致区分多种组织成分。
产品内容清理液(Reagent A)200毫升固着液(Reagent B)10毫升韦格液(Reagent C)100毫升祛色液(Reagent D)20毫升岑克液(Reagent E)100毫升范氏液(Reagent F)10毫升比氏液(Reagent G)10毫升酸性液(Reagent H)10毫升染色液(Reagent I)10毫升修正液(Reagent J)10毫升脱水液A(Reagent K)10毫升脱水液B(Reagent L)10毫升透明液(Reagent M)10毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里,避免光照;试剂具有腐蚀性,注意安全;有效保证6月用户自备小型玻璃染色缸:用于组织或切片处理的容器培养箱或烘箱:用于样品反应孵育微波炉:用于样品反应孵育处理中性树脂:用于切片封片光学显微镜:用于切片染色后观察分析实验步骤一、样品固着处理1.准备好5微米厚的冰冻切片2.小心加上200微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面3.室温下孵育2分钟4.小心移去切片上的清理液(Reagent A)5.小心加上200微升固着液(Reagent B)在切片上,铺满整个切片样品表面6.室温下孵育5分钟7.小心移去切片上的固着液(Reagent B)8.小心加上200微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面9.室温下孵育2分钟10.小心移去切片上的清理液(Reagent A)二、样本染色处理操作一:标准染色1.小心加入1毫升韦格液(Reagent C)在切片上,铺满整个切片样品表面2.放进60℃恒温培养箱孵育60分钟3.小心移去韦格液(Reagent C)4.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟5.小心移去切片上的清理液(Reagent A)6.小心加入200微升祛色液(Reagent D)在切片上,铺满整个切片样品表面7.室温下孵育5分钟8.小心移去祛色液(Reagent D)9.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟10.小心移去切片上的清理液(Reagent A)11.小心加入1毫升岑克液(Reagent E)在切片上,铺满整个切片样品表面12.放进60℃恒温培养箱孵育60分钟13.小心移去岑克液(Reagent E)14.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟15.小心移去切片上的清理液(Reagent A)16.小心加入200微升范氏液(Reagent F)在切片上,铺满整个切片样品表面17.室温下孵育30分钟18.小心移去范氏液(Reagent F)19.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟20.小心移去切片上的清理液(Reagent A)21.小心加入200微升祛色液(Reagent D)在切片上,铺满整个切片样品表面22.室温下孵育5分钟23.小心移去祛色液(Reagent D)24.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟25.小心移去切片上的清理液(Reagent A)26.小心加入200微升比氏液(Reagent G)在切片上,铺满整个切片样品表面27.室温下孵育5分钟(注意:可以延长至15分钟,增强染色效果)28.小心移去比氏液(Reagent G)29.小心加入200微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面30.小心移去切片上的清理液(Reagent A)31.重复实验步骤29至30二次32.小心加入200微升酸性液(Reagent H)在切片上,铺满整个切片样品表面(注意:可以孵育15分钟,增强染色效果)33.小心移去切片上的酸性液(Reagent H)34.小心加上200微升染色液(Reagent I)在切片上,铺满整个切片样品表面35.室温下孵育5分钟,避免光照(注意:可以延长至15分钟,增强染色效果)36.小心移去切片上的染色液(Reagent I)37.小心加上200微升修正液(Reagent J)在切片上,铺满整个切片样品表面38.室温下孵育2分钟39.小心移去切片上的修正液(Reagent J)40.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟41.小心移去切片上的清理液(Reagent A)42.(选择步骤)小心加上200微升脱水液A(Reagent K)在切片上,铺满整个切片样品表面(注意:如果比氏液(Reagent G)染色过深,建议使用由此步骤开始的选择步骤,并快速操作)43.(选择步骤)小心移去切片上的脱水液A(Reagent K)44.(选择步骤)小心加上200微升脱水液B(Reagent L)在切片上,铺满整个切片样品表面45.(选择步骤)小心移去切片上的脱水液B(Reagent L)46.(选择步骤)小心加上200微升透明液(Reagent M)在切片上,铺满整个切片样品表面47.(选择步骤)小心移去切片上的透明液(Reagent M)48.放上盖玻片或封片(中性树脂)49.即刻在一般光学显微镜下观察:弹性纤维――呈现黑色细胞核――呈现黑色细胞质――呈现红色肌纤维――呈现红色角蛋白――呈现红色胶原纤维――呈现蓝色操作二:热处理染色1.准备3个50毫升烧杯或小型染色缸,分别加入50毫升清理液(Reagent A)、韦格液(Reagent C)和岑克液(Reagent E)2.小心放进上述固着处理的切片到50毫升韦格液(Reagent C)小型染色缸里3.放进微波炉(600瓦)加热45秒4.小心移去切片上的韦格液(Reagent C)5.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟6.小心移去切片上的清理液(Reagent A)7.小心加入200微升祛色液(Reagent D)在切片上,铺满整个切片样品表面8.室温下孵育5分钟9.小心移去祛色液(Reagent D)10.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟11.小心移去切片上的清理液(Reagent A)12.小心将切片置入50毫升岑克液(Reagent E)小型染色缸里13.放进微波炉(600瓦)加热60秒14.小心移去岑克液(Reagent E)15.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟16.小心移去切片上的清理液(Reagent A)17.小心加入200微升范氏液(Reagent F)在切片上,铺满整个切片样品表面18.室温下孵育30分钟19.小心移去范氏液(Reagent F)20.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟21.小心移去切片上的清理液(Reagent A)22.小心加入200微升祛色液(Reagent D)在切片上,铺满整个切片样品表面23.室温下孵育5分钟24.小心移去祛色液(Reagent D)25.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟26.小心移去切片上的清理液(Reagent A)27.小心加入200微升比氏液(Reagent G)在切片上,铺满整个切片样品表面28.室温下孵育5分钟(注意:可以延长至15分钟,增强染色效果)29.小心移去比氏液(Reagent G)30.小心加入200微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面31.小心移去切片上的清理液(Reagent A)32.重复实验步骤30至31二次33.小心加入200微升酸性液(Reagent H)在切片上,铺满整个切片样品表面34.室温下孵育10分钟(注意:可以延长至15分钟,增强染色效果)35.小心移去切片上的酸性液(Reagent H)36.小心加上200微升染色液(Reagent I)在切片上,铺满整个切片样品表面37.室温下孵育5分钟,避免光照(注意:可以延长至15分钟,增强染色效果)38.小心移去切片上的染色液(Reagent I)39.小心加上200微升修正液(Reagent J)在切片上,铺满整个切片样品表面40.室温下孵育1分钟41.小心移去切片上的修正液(Reagent J)42.室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟43.小心移去切片上的清理液(Reagent A)44.(选择步骤)小心加上200微升脱水液A(Reagent K)在切片上,铺满整个切片样品表面(注意:如果比氏液(Reagent G)染色过深,建议使用由此步骤开始的选择步骤,并快速操作)45.(选择步骤)小心移去切片上的脱水液A(Reagent K)46.(选择步骤)小心加上200微升脱水液B(Reagent L)在切片上,铺满整个切片样品表面47.(选择步骤)小心移去切片上的脱水液B(Reagent L)48.(选择步骤)小心加上200微升透明液(Reagent M)在切片上,铺满整个切片样品表面49.(选择步骤)小心移去切片上的透明液(Reagent M)50.放上盖玻片或封片(中性树脂)51.即刻在一般光学显微镜下观察:弹性纤维――呈现黑色细胞核――呈现黑色细胞质――呈现红色肌纤维――呈现红色角蛋白――呈现红色胶原纤维――呈现蓝色注意事项1.本产品为50次操作2.操作时,须戴手套3.试剂具有腐蚀性,注意操作安全4.建议使用玻璃染色缸5.每次更换试剂溶液时,保持切片面基本晾干6.试剂溶液在切片表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满切片表面7.整个操作,在避光状态下进行8.染色完成后,即刻进行光学显微镜观察9.样品染色后保存,避免光照10.本公司提供系列特定组织染色试剂产品质量标准1.本产品经鉴定性能稳定2.本产品经鉴定显色清晰。
常用弹力纤维染色方法
常用弹力纤维染色方法显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法【试剂配制】(1)维多利亚蓝染色液维多利亚蓝(Victoria blue)2g糊精0.5g间苯二酚4g蒸馏水200ml 将上述物质混合后加热煮沸,边煮边搅拌,约5min。
然后用另一容器取30%三氯化铁水溶液25ml,另行加热煮沸后慢慢倒入上述混合液中,继续煮沸3min,不断搅拌溶液呈胶体状。
去火冷却过滤,将滤纸上的残渣连同滤纸放在60℃恒温箱中烤干。
残渣呈深蓝色细颗粒状粉末,再溶于400ml 的70%乙醇液中。
然后加浓盐酸4ml和苯酚5g,放置至成熟后使用。
(2)丽春红S染色液0.5%丽春红15ml苦味酸饱和水溶液(1.22%)85ml。
【染色方法】(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(2)切片入70%乙醇中洗2分钟。
(3)将切片浸入盛有维多利亚蓝液中染0.5~2小时。
(4)直接入95%乙醇中分色数秒钟。
(5)浸入蒸馏水洗2分钟。
(6)用丽春红S液滴染切片5分钟。
(7)直接用无水乙醇冲洗多余染色液2次。
(8)将切片在空气中或冷风干燥。
(9)二甲苯透明,中性树胶封固。
【结果】弹性纤维呈蓝绿色,胶原纤维呈红色,背景呈淡黄色。
【注意事项】(1)维多利亚蓝液可每次反复使用效果不减,溶液在室温中保存可用数年,染色时还可以缩短时间。
(1)维多利亚蓝液在乙醇中分色后,要立即浸入水中,此后在镜下观察纤维的深浅度,如果较深可以再分色。
丽春红液染色后要用无水乙醇从切片一端快速冲洗,并将切片斜放,稍干燥即透明封固,防止过于干燥使切片产生黑色颗粒。
病理科弹力纤维染色-概述说明以及解释
病理科弹力纤维染色-概述说明以及解释1.引言1.1 概述病理科弹力纤维染色是一种用于观察和评估活体组织样本中弹力纤维的特殊染色技术。
弹力纤维是由弹性蛋白构成的细线状结构,主要存在于皮肤、血管、肺泡壁等组织中,具有重要的生理功能。
通过对弹力纤维的染色,可以更好地了解组织的结构与功能,并为病理学疾病诊断提供重要的参考依据。
病理科弹力纤维染色的原理是利用特定染料对组织切片中的弹力纤维进行选择性染色。
常用的染料有奥尔西红染、维氏染色和伊红染等。
这些染料能与弹性纤维特异性结合,通过染色反应来显示出弹力纤维的位置、形态和数量。
染色方法通常包括以下步骤:组织切片预处理、染色溶液制备、切片染色、显微镜下观察和结果分析。
预处理步骤可以包括脱脂、脱水和除蜡等处理,以保证组织样本的质量。
染色溶液的配制需根据染料的要求和实验室的需求进行调配。
切片染色是关键的步骤,需要掌握好染料的浓度和染色时间,以保证染色效果的准确性和稳定性。
最后,在显微镜下观察和分析染色切片,通过比对正常组织和病变组织的染色结果,可以得出结论。
弹力纤维染色在病理科中有着广泛的应用。
它可以帮助病理学家判断组织中弹力纤维的形态和分布情况,从而诊断和评估多种疾病,如弹力纤维异常增生、退变和破坏等。
此外,弹力纤维染色还可以用于研究组织的生理和病理过程,探索疾病的发生机制和病变的发展规律。
然而,弹力纤维染色也有其局限性。
由于弹性蛋白的结构特殊性,染色方法相对复杂,操作难度较大。
同时,染色结果的解读需要经验丰富的病理学家进行判断,存在一定的主观性和复杂性。
此外,由于组织切片的质量和保存条件会对染色结果产生影响,因此在实验过程中需要严格控制和管理。
总之,病理科弹力纤维染色作为一种重要的组织学技术,可以提供丰富的信息和可靠的依据,用于研究和诊断多种疾病。
然而,仍需要进一步完善和发展该技术,以提高染色效果和可靠性,促进其在临床实践中的应用。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以如下所示:文章结构:本文分为引言、正文和结论三个部分。
显示胶原纤维和弹性纤维的组合染色
5 i, n 显微镜镜检 两种 纤维 颜 色对 比。9 乙 醇逐级 脱水 、 a r 5 二 甲苯透 明, 树胶 封固。( )Va eo 2 nGi n染色 : nGi o s jVa e n染液 s
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解剖学杂志
21 第 3 00年 3卷 第 4 期
显 示 胶 原 纤 维 和 弹 性 纤 维 的 组 合 染 色
赵 荧 张栩胤
109) 0 11
( 京 大 学 医学 部 基 础 医学 院组 织 学 与 胚 胎 学 教 研 室 , 京 北 北 日常 组 织 染 色 中 , 需 同时 显 示 两 种 纤 维 , 常 即胶 原 纤 维 和 弹
2 染 色结 果 见 表 1图 1 图 3 , ~ 。
G moi o r醛品红Ⅲ弹性 纤维 染色 : 石蜡 切 片二 甲苯 脱蜡 , 逐
级 乙醇 下 行 至 蒸 馏 水 。1 高 锰 酸 钾 2 5ri, 馏 水 稍 洗 , ~ n蒸 a 5 草酸 漂 白至 组 织 无 色 。流水 冲洗 3mn 7 乙醇 浸 洗 2 n 醛 i,0 。 mi 品红 ( 性 品红 1 , 聚 乙醛 1 , 盐 酸 1 ,0 乙醇 1 0 l 碱 三 g 浓 m1 7 ml 0 , m
式观察纤维的形态结构 、 数量变化 以及与其 他结构 的相互 关系 , 但有可能受到制片技术或染 色操 作等 因素 的作用 , 尤其 染色后
的分 色程 度 的控 制 , 使 显 微 镜 下 被 观 察 对 象 间存 在 一 定 差 异 致
病理技术专业知识
(一)单纯固定液甲醛:1.浓度:40%,气体2.渗透力强,固定均匀,组织收缩小,3.不能使白蛋白和核蛋白沉淀4.保存脂类,必须用冷冻切片。
是糖的保护剂5.可固定高尔基体,线粒体重铬酸钾1.浓度:1%-3%水溶液,有毒,橘红色结晶2.穿透速度快,几乎不收缩,经乙醇脱水后明显收缩,3.未酸化的重铬酸钾不能使蛋白质沉淀,但可使蛋白质变为脂溶剂。
酸化后可使蛋白质沉淀,此时染色体可被保存,但线粒体破坏。
4.固定高尔基体和线粒体有良好效果。
5.酸性染料着色好,碱性染料着色差6.固定的组织需经流水冲洗12-24h,或用亚硫酸盐洗涤。
苦味酸1.黄色结晶体,是一种强酸,易燃易爆,配成饱和溶液储藏2.穿透慢,组织收缩明显,无明显硬化。
3.能沉淀一切蛋白质4.对脂肪和类脂无固定作用。
5. 可软化皮肤和火棉胶,不宜用火棉胶包埋6. 固定时间不宜超过24h,7. 固定的组织应尽快放入70%乙醇,滴加饱和碳酸锂或浓氨水,有助于除去苦味酸固定产生的黄色。
升汞1. 浓度为5%-7%的水溶液,针状结晶2.穿透力低,只宜固定薄片组织,单独应用组织收缩明显3, 对蛋白质有固定作用,4. 对类脂和糖类无固定作用5. 临用时加冰醋酸醋酸1. 刺激性气味的无色液体,低于15℃为冰醋酸5%的醋酸PH为2-8,可抑制细菌和酶的活性,可防止自溶。
2. 穿透力强3 不能沉淀白蛋白,球蛋白,但能沉淀核蛋白4 不能固定脂肪和内酯,不能保存糖5 .固定线粒体和高尔基复合体不能用高浓度的醋酸,可较好的保存染色体6, 缺点是组织膨胀明显,尤其对于胶原纤维和纤维蛋白铬酸1.为三氧化铬的水溶液,浓度%-1%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合2 穿透力弱,一般组织需固定12-24h,固定的组织有收缩,3 能沉淀蛋白质,核蛋白固定良好。
4 对脂肪无固定作用5 固定线粒体和高尔基复合体6. 宜避光保存,以防蛋白质溶解。
7. 必须彻底流水冲洗(≥24h)。
锇酸(四氧化锇)1.淡黄色结晶,剧毒,浓度1%-2%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合2. 渗透力极弱,易使组织变硬,延长固定时间,组织的脆性增加,对染色不利。
弹性纤维染色
弹性纤维染色
1.切片脱蜡至入蒸馏水;
2.先用间苯二酚复红液染弹性纤维,在37℃温箱内30min-1h;
3.蒸馏水速洗;
4.浸入苏木精染胞核,3-10min;
5.普通水洗净;
6.经0.5%HCL酒精分色10-20s;
7.普通水洗净使胞核变蓝;
8.以复染液复染,3-5min;
9.蒸馏水速洗;
10.95%及100%酒精分色脱水各1-3min;
11.入二甲苯透明2分钟,中性树胶封片。
染色结果:弹性纤维蓝黑色,胶原纤维红色,胞核深蓝色。
注明:间苯二酚复红液(三氯化铁,间苯二酚,碱性复红配置);复染液(苦味酸饱和液90ml+1%酸性复红10ml,临用时混合,煮沸2-3分钟后应用)
染液配法
1.间苯二酚复红液:
碱性复红1g+间苯二酚2g+蒸馏水100ml加热煮沸+29%三氯化铁12.5ml,用玻璃棒搅匀继续煮沸2-5分钟,冷却过滤,倒掉滤液,将滤纸和沉渣一起放入玻皿中,在温箱中烤干,然后将其放入烧杯中,加95%酒精100ml,隔水加温溶解染料,取出滤纸,冷后过滤,并补充因加热失去的乙醇,再加入HCL2ml,即可应用,密封可存数月。
2.复染液:苦味酸饱和90ml+1%酸性复红10ml。
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弹性纤维染色液说明书
【产品名称】
弹性纤维染色液
【包装规格】
货号:DC0064
单瓶包装规格分别为:20ml 、100ml 、250ml ;
每套/盒包装规格分别为:3×20ml/盒、3×100ml/盒、3×250ml/盒。
【预期用途】
用于组织细胞学染色从而定性检测组织切片中的弹性纤维。
【检验原理】
弹性纤维 (Elastic Fiber)又称弹力纤维主要分布于人体的动脉壁、肺泡壁、皮肤,新鲜时呈黄色,折光性强,常用的弹力纤维染色法有Gomori 醛品红法、间苯二酚碱性品红法、地衣红法、维多利亚蓝法、铁碘苏木素法等。
苯二酚碱性品红染色(又称Weigert 酚复红染色)主要用于弹性纤维染色,可能机制是弹性纤维中某些部分与间苯二酚的酚基形成氢键而使弹力纤维被染成蓝色至蓝黑色,适用于显示弹性纤维和肝炎表面抗原,可以显示皮肤组织中弹力纤维的变化,如弹力纤维痣、皮肤环状肉芽肿、硬度病等;显示与判定心内膜及动脉的病变,观察某些病变中是击伴有弹力纤维的增生或破坏;还可鉴别肿瘤组织成分如弹力纤维瘤,从而协助诊断,尤其适用于显示成熟的弹性纤维。
【主要组成成分】
【储存条件及有效期】
5~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为12个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后3个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】
组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】
l 、组织片常规脱蜡至95%乙醇;
2、入间苯二酚品红染色液,加盖室温浸染1~3小时或56℃孵育1小时,稍水洗;
3、95%乙醇分化到无染色液脱下为止(去除细胞浆背景着色),如果分化效果不佳,可以用酸性分化液分化2~3秒;
4、流水充分冲洗5~10分钟;
5、入Van Gieson 染色液30~60秒,倾去染色液;
6、不经水洗,95%乙醇迅速分化数秒;
7、无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
【检验结果的解释】
弹性纤维呈蓝色至蓝黑色,胶原纤维呈红色,细胞核呈黄色。
【检验方法的局限性】
仅限于病理组织内容物染色观察。
【注意事项】
1、大多数固定液均可,但含有铬盐的固定液固定后,染色较浅且容易弥散。
2、Weigert 间苯二酚碱性品红染色液若不加热,时间可适当延长。
3、需要酸性分化液脱去背景着色时,时间要短,仅几秒钟。
试剂组成 主要成分
1、间苯二酚品红染色液 间苯二酚、品红
2、酸性分化液 盐酸
3、Van Gieson 染色液 品红
4、Van Gieson染色液染色后,不可经水洗,否则切片上的颜色会减弱或洗脱。
5、产品仅用于体外诊断,应由专业人士使用及进行结果的判读。
6、使用前应详细阅读说明书,并做好个人卫生防护,在有效期内使用,生产日期、生产批号和失效日期见包装。
7、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称:安徽雷根生物技术有限公司
住所:淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。