植物病菌回接实验

植物病菌回接实验

一、实验仪器：

微量移液器；灭菌锅；烘箱；恒温恒湿培养箱；超净工作台。

二、实验材料：

实验菌种：番茄灰霉病菌、番茄早疫病菌、黄瓜枯萎病菌、黄瓜炭疽病菌、黄瓜菌核病菌、黄瓜白粉病菌、黄瓜霜霉病菌等。

三、实验方法：

制备培养基：

1、马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA培养基）。

马铃薯（去皮），200g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000mL，pH 值自然。

2、马铃薯蔗糖琼脂培养基（PSA培养基）。

马铃薯（去皮），200g，蔗糖20g，琼脂20g，水1000mL，pH值自然。

以上两种培养基具体制作方法是：将200g马铃薯去皮，去芽眼，切成小条放入铝锅中，加入1000mL水，煮沸20-30分钟左右至马铃薯软而不烂时，用6~8层纱布过滤，取滤汁于锅中，补水至1000mL，加入琼脂熔化，再加入糖搅拌均匀，趁热分装于锥形瓶中。

3、灭菌：

将制好的培养基，包好的培养皿，放入灭菌锅中，于121℃下灭菌30min。

4、在超净工作台上将灭过菌的培养基分别倒在培养皿中，制成平板。

5、接菌。用接种环在提前准备好的菌种上挑取菌丝，在平板上划Z形线接菌，用封口膜包好，然后将它们放在26℃恒温恒湿培养箱中培养，观察菌的长势。