紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例.
实验七 维生素B1片的含量测定
实验七 维生素B 1片的含量测定一、实验目的1、掌握吸收系数法测定药物含量的方法。
2、熟悉紫外-可见分光光度计的原理及操作 二、实验原理维生素B 1结构中的嘧啶环为一芳香杂环，具有紫外吸收。
因此可在其最大吸收波长处测定吸光度，进行含量测定。
三、实验仪器和试剂： 1.仪器：紫外-可见分光光度计、量瓶(100mL)、台秤、量筒(100mL)、烧杯、分析天平、漏斗、铁架台、铁圈、滤纸、剪刀等。
2. 试剂：维生素B 1片、盐酸溶液（9—>1000） 四、实验内容：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B 125mg ），置100ml 量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml ，振摇15分钟，使维生素B 1溶解，加盐酸（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml ，置另一100ml 量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在246nm 处测定吸光度，按C 12H 17ClN 4OS ·HCl 的吸收系数（E 1%1cm ）为421计算，即得。
五、实验数据记录及处理标示量%%1001001%11⨯⨯⨯⨯⨯⨯=-Sm W D V E A cm六、注意事项（一） 仪器的准备1. 开启电源，使仪器预热20分钟。
2. 开机前，先确认仪器样品室是否有东西挡在光路上，以免影响仪器自检。
（二）仪器的操作步骤1. 设置波长（246nm）。
2. 测定。
3. 数据记录与结果处理。
（三）将比色皿洗净装盒，关机（四）填写仪器使用记录，（五）维生素B1的紫外吸收峰随溶液pH的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH值。
七、思考题1.单色光不纯对于测得的吸收曲线有何影响？2.利用邻组同学的实验结果，比较同一溶液在相同仪器上测得的吸光度有无不同，试做解释。
紫外分光光度法测定维生素B12注射液的含量
实验四 紫外分光光度法测定维生素B12注射液的含量一、实验目的1、理解紫外—可见分光光度法定性分析、定星分析的原理。
2、掌握紫外—可见分光光度法测定维生素B12含量的原理。
3、掌握UV—7502PC紫外—可见分光光度计的结构、原理与操作。
二、原理分子中的电子发生跃迁需要的能量约在1~20eV之间，其对应的吸收光的波长范围大部分处于紫外和可见光区域，通常将分子在这一区域的吸收光谱称为电子光谱或紫外—可见吸收光谱。
物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯－比尔（Lambert-Beer）定律，即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。
在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。
1. 紫外-可见分光光度计的基本结构紫外-可见分光光度计由光源、单色器、吸收池、检测器以及数据处理及记录系统组成。
图1 紫外—可见分光光度计基本结构图2.透光率和吸光度如图2所示：入射光强度I0，吸收光强度I a，透过光强度I t， 反射光强度为I r I0═ I a + I t + I r被测溶液和参比的吸收池同样材料和厚度，反射光强度影响相互抵消，上式简化为I0═ I a + I t透光率愈大，溶液对光的吸收愈少；反之，透光率愈小，溶液对光的吸收愈多透光率的负对数称为吸光度，用符号A 表示。
紫外分光光度法测定药片中异烟肼的含量
D eterm ina tion of ison iaz id tablets by UV
LΒ Chang2huai
( S uzhou M un icipa l Institu te of D rug Con trol, S uzhou 234000, Ch ina)
Abstract: A im To establish a methods for the determ ination of isoniazid tablets by UV. M ethod The solvent was water ; determ ined2 wave was 263 nm; determ ined2way was UV. Result The average recovery was 99120% and RSD was 1167%. Conclusion The meth2 od could be used to determ ine the isoniazid accurately. Key words: isoniazid tablets; UV; determ ination
乙酰螺旋霉素糖衣片含量测定方法探讨
汪正宇
(安徽省宿州市药品检验所 ,安徽 宿州 234000)
关键词 :乙酰螺旋霉素 ;含量测定
乙酰螺旋霉素片是用于防治革兰阳性细菌引起的呼吸道 和软组织感染的一类常用的口服抗菌药物 ,含量高低直接影 响用药疗效 ,乙酰螺旋霉素糖衣片的含量测定 [1 ]一般采用分 次研磨 (下称研磨法 )移入溶液 ,再稀释成 1 g·L - 1的溶液后 依照抗生素微生物检定法测定 。在实际工作中发现研磨法麻 烦耗时 ,研磨液易外溢影响结果的准确性 ,而且消耗大量溶剂 乙醇 。为此 ,我们借鉴乙酰螺旋霉素薄膜衣片含量测定方法 (下称称量法 )试验 ,两种方法所测含量基本一致 。该法准确 可靠 ,且有操作简便的特点 ,建议作为含量测定方法 。 1 仪器与试药 1. 1 仪器 CAM 2Ⅲ智能型抑菌圈测量仪 , BS110S电子天 平 , PYX2DHS240X50隔水式电热恒温培养箱 。 1. 2 试药 乙酰螺旋霉素对照品 (中国生物制品检定所供 , 批号 : 034729702;含量 : 9012% ) ; 乙酰螺旋霉素糖衣片 4 批 , 生产厂家 及 批 号 如 下 : A, 江 苏 涟 水 制 药 有 限 公 司 , 批 号 : 040203; B ,江苏恒瑞医药有限公司 ,批号 : 0401140; C,上海 玉安药业有限公司 ,批号 : 030704; D ,浙江佐力药业有限公 司 ,批号 : 20040319 。 2 方法 2. 1 研磨法 取本品 5片 (规格 : 011 g) ,研细 ,加 200 m l乙 醇 (95% )分次转移至 500 m l容量瓶中 ,加灭菌水稀释成 1 g ·L - 1的溶液 ,然后依照抗生素生物检定法操作 [2 ] 。 2. 2 称量法 取本品 10片 ,精密称定 ,研细 ,精密称取适量 (约相当于乙酰螺旋霉素 011 g)置于 100 m l容量瓶中 ,加乙 醇 10 m l左右使溶解 ,再加灭菌水稀释成 1 g·L - 1的溶液 ,接 下操作同研磨法 。 2. 3 效价测定 取出经 14 ～15 h恒温 ( 37℃)培养的双碟 , 通过抑菌圈测定仪测定 ,结果如表 1。 3 讨论表 2 2种方法测定来自烟肼片含量结果 / %样品
紫外分光光度法阿司匹林的含量测定
紫外分光光度法对阿司匹林的含量测定紫外分光光度法对阿司匹林的含量测定紫外--可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好。
波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。
分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
描述物质分子对辐射吸收的程度随波长而变的函数关系曲线，称为吸收光谱或吸收曲线。
紫外-可见吸收光谱通常由一个或几个宽吸收谱带组成。
最大吸收波长（λmax）表示物质对辐射的特征吸收或选择吸收，它与分子中外层电子或价电子的结构（或成键、非键和反键电子）有关。
朗伯-比尔定律是分光光度法和比色法的基础。
即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。
A= lg1/T = εcl (Lambert-Beer定律)紫外-可见分光光度计由5个部件组成：①辐射源。
必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。
②单色器。
它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。
③试样容器，又称吸收池。
供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。
容器的光程一般为0.5～10厘米。
④检测器，又称光电转换器。
常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。
近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。
⑤显示装置。
这部分装置发展较快。
较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
仪器类型有：单波长单光束直读式分光光度计，单波长双光束自动记录式分光光度计和双波长双光束分光光度计。
紫外分光光度法测定维A酸软膏的含量
药物鉴定 ・
Ｄ ｕ ｄ ｎｉｃ ｔ ｎ ｒｇ Ｉｅ ｔｉｅｉ ｆ ｏ
中目茄
Ｃｈｉ ａｒ ｎａ Ｐｈ ｍａｃ ｕ砌 口 ｅ
２１ ０ ２年 １ ２ 月 ０日 第 ２ 卷 第 ２期 ｌ
Ｖｏ． １ Ｎｏ ２ Ｊｎ ａｙ２ ， ０１ １２ ， ． ，ａ ｕ ｒ ０ ２ ２
紫外分光光度法测定维 Ａ酸软膏的含量
２ １ ０ ０ ） ０１１８。２ 方 法 与 结 果 ２ １ 制 备 ．
型的扁平苔藓 、 毛囊 角化病 、 痤疮 以及其他 角化 异常类皮肤病 ， 疗 效显著 ， 应用广泛ｎ。 目前 ， 其含量测定大多采用较烦琐的高效液相 色谱法 。】极少数 采用薄层扫描法 】本试验建立 紫外分光光度 ， 。
法 测 定 维 Ａ酸 软 膏 的 含 量 ， 报 道 如下 。 现 １ 仪 器 与 试 药 玻 璃 点 样 毛 细管 （ 西 医科 大 学 仪 器 厂 ）硅 胶 板 Ｇ ２ ４ 青 岛 华 ； Ｆ５ （
取维 Ａ酸 １ ， 加液体石蜡 １ｍ ｇ Ｌ研磨成极细糊状 ， 再分 次加 入
吴 畏， 陈 雅， 杨 征 ， 桥 曾
４０４ ） ００ ２ （ 中国人 民解放 军第 三军 医大学大 坪 医院 药剂科 ， 重庆
摘要 ： 目的 建立维 Ａ酸软 膏的含量测 定方 法。 方法 采用 紫外分光光度法测定维 Ａ酸软 膏的含量 ， 检测 波长为 ３ ８ｎ 结果 维 Ａ酸质 量 ３ ｍ。 浓度在 １ ５ ． ｚ ／ Ｌ范 围 内与 吸光度 线性 关 系 良好 ， ． ～５ ５／ ｍ ｇ 线性 回归方 程为 ｃ＝ ． ０ Ａ＋ ．４ ， ＝０ ９ ９９ ＝ ） 平均 回收 率 为 ６ ７ ３３ ０ ０ １１ ｒ ． ９ （ ５ ， １０４ ％ ， Ｓ ０ ．４ Ｒ Ｄ＝０ ８ ％ （ ． ３ ｎ：５ 。 ）结论 该 方法操作简便 、 快捷 ， 结果可靠 ， 可用于 医院制剂的快速检 验。
紫外-可见分光光度法在药物检验中的应用
【主要内容】紫外可见分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定泼 长或一定泼长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。 被测物质的分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近 紫外区（200–400nm）或可见光区（400–760nm）产生吸收。在药品检 验中主要用于药品的性状. 鉴别. 检查和含量测定。 应用原理： ① 已知物质的吸收峰泼长或吸收度比值作为物质的定性鉴别; ② 当被测物质本身在紫外光区无吸收，而杂质在紫外光区有相当强度的吸收, 或杂质的吸收峰处没有被测物质的吸收峰，则可用本法做杂质检查； ③ 可选择被测物质的最大吸收泼长处测出吸收度，再用对照品或吸收系数求 算出被测物质的含量测定。
药物检验论文 论文名称：紫外-可见分光光度法在药物检验中的应用
【摘要】:在药品检验中本法主要用于药品的性状. 鉴别. 检查和含量测定，具有灵敏度高、样品用量少
的优点，实用于微量和痕量物质的分析。测定
时,除另有规定外应以配制拱试品溶液的同批溶 剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池，在规定 的吸收峰泼长±2nm以内测试几个点的吸收度， 以核对供试品的吸收峰泼长位置是否正确,除另有 规定外，吸收峰泼长应在该药品项下规定的泼长
LIGHT SOURCE 出现ok！自检通过
SELFTESTING 狭缝宽度测试 SLIT＝2 OK! 自检通过
SELFTESTING 滤色片测试 FILTER OK! 自检通过
SELFTESTING 自检单色器 MONOCHROMATOR OK!自检通过
546.0 nm BLAKING
546.0 nm0.000A/100﹪T 自检完毕进入测试状态
例，草乌鉴别：取本品粉末0.5g，加乙 醚10ml与氨试液5ml,振摇10min，滤过， 滤液置于分液漏斗中，加0.25mon/l硫酸 溶液20ml，振摇提取，分别取酸液适量， 用水稀释后，照紫外-可见分光度法 （《中国药典》2005版一部附录VA）测 定，在231nm与275nm波长处有最大吸 收，
药物分析含量测定结果计算
药物分析含量测定结果的计算原料药 以实际百分含量表示：片剂 片剂的含量测定结果常用含量占标示量的百分比表示：标示量%═%100⨯标示量每片的实际含量═%100⨯⨯标示量平均片重取样量测得量m m注射液 注射液的含量测定结果一般用实测浓度占标示浓度的百分比表示：1. 原料药含量测定结果的计算 （1）滴定分析法① 直接滴定法：（无空白）T ——滴定度(g/mL)，每毫升滴定液相当于被测组分的克数 V ——滴定时，供试品消耗滴定液的体积（mL ） F ——浓度校正因子W ——供试品的质量 (g)例1：P 93 例题例2：非那西丁含量测定：精密称取本品0.3630g 加稀盐酸回流1小时后，放冷，用亚硝酸钠液（0.1010mol/L ）滴定，用去20.00mL 。
每1mL 亚硝酸钠液（0.1mol/L ）相当于17.92mg 的C 10H 13O 2N 。
计算非那西丁的含量为（E ）A. 95.55%B. 96.55%C. 97.55%D. 98.55%E. 99.72%%100⨯=WTVF百分含量%72.99%1003630.0101.01010.000.2092.17%3=⨯⨯⨯⨯=-非那西丁%100⨯=取样量测得量百分含量m m %100%⨯=标示实测标示量c c 标准实际c c F =② 剩余滴定法 （做空白）V 0——滴定时，空白消耗滴定液的体积（mL ） 其他符号的意义同直接滴定法含量计算公式例1：P 94 例题例2：精密称取青霉素钾供试品0.4021g ，按药典规定用剩余碱量法测定含量。
先加入氢氧化钠液(0.1mol/L)25.00mL ，回滴时消0.1015mol/L 的盐酸液14.20mL ，空白试验消耗0.1015mol/L 的盐酸液24.68mL 。
求供试品的含量，每1mL 氢氧化钠液(0.1mol/L)相当于37.25mg 的青霉素钾。
（2）紫外分光光度法① 吸收系数法例——P 122：（1）对乙酰氨基酚的含量测定方法为：取本品约40mg ，精密称定，置250mL 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50mL 溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5mL ，置100mL 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10mL ，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm 的波长处测定吸收度，按C 8H 9NO 2的吸收系数( )为715计算，即得。
紫外分光光度法测定琥乙红霉素分散片中的含量
紫外分光光度法测定琥乙红霉素分散片中的含量【摘要】目的建立紫外分光光度法测定琥乙红霉素分散片中琥乙红霉素含量的方法。
方法琥乙红霉素在0.5 mol/L的氢氧化钾溶液中,在235 nm波长处测定吸收度,计算含量。
结果琥乙红霉素浓度20.08～101.04 μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.999 8,n=5),平均回收率为99.92%,RSD为0.21%(n=5)。
结论本法简便、准确,适用于快速测定琥乙红霉素分散片中琥乙红霉素的含量。
【关键词】紫外分光光度法;琥乙红霉素;含量测定【Abstract】Objective To establish a method to determine the content of Erythromycin Ethylsuccinate dispersible tablets by UV-Spectrophotometry. Methods Erythromycin Ethylsuccinate was hydrolyzed to be unsaturated ketones by 0.5 mol/L potassium hydroxide solution, and determined absorbance wave-length at 235 nm, then the content was calculated. Results Erythromycin Ethylsuccinate had a good linear in the concentration range of 20.08 μg/mL~101.04 μg/mL.The average recovery was 99.92% and RSD was 0.21% (n=5).Conclusion The present method was accurate, rapid, simple and especially suitable for the determination of Erythromycin Ethylsuccinate dispersible tablets.【Key words】UV-Spectrophotometry;Erythromycin Ethylsuccinate;Determination琥乙红霉素(Erythromycin Ethylsuccinate)系大环内酯类抗生素,为红霉素的衍生物,广泛用于治疗各种感染性疾病。
紫外分光光度法测定维生素B1片的含量
紫外分光光度法测定维⽣素B1⽚的含量项⽬五紫外分光光度法测定维⽣素B1⽚的含量（2学时）⼀实验⽬的1 掌握紫外分光光度法测定维⽣素B1⽚含量的实验⽅法和操作技能；2 掌握⽚剂的取样⽅法，并正确计算⽚粉的取样范围；熟悉样品前处理⽅法；3 学会采⽤紫外分光光度计测定药物含量的操作⽅法和注意事项。
⼆实验原理维⽣素B1分⼦中具有共轭双键结构，在紫外光区有特征吸收。
在pH2时，最⼤吸收在246nm处,据此，可⽤紫外分光光度法测定维⽣素B1⽚的含量。
三材料与仪器盐酸溶液（9→1000）、电⼦天平、紫外分光光度计、研钵、维⽣素B1⽚四实验内容取本品20⽚，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维⽣素B125mg），置100ml 量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约7ml，振摇15分钟使维⽣素B1溶解，加盐酸溶液（9→1000）稀释⾄刻度，摇匀，⽤⼲燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另⼀100ml量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释⾄刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A）。
在 246nm的波长处测定吸光度，按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系数（E1cm1%）为421计算，即得。
本品含维⽣素B1应为标⽰量的90.0%~110.0%。
五注意事项1 ⽚剂取样量的计算：取样量=（1±10%）×主药规定量×平均⽚重/每⽚标⽰量2 结果计算式中 A-------供试品溶液的吸光度；E 1cm 1%-------供试品溶液的百分吸收系数；标⽰量（%）=W×100%标⽰量A ×1%×D ×VE1cm 1%×L×WL--------吸收池的厚度；D--------供试品的稀释倍数；V--------供试品溶液的体积；W--------供试品的取样量；W--------⽚剂的平均⽚重。
2 ⽚剂中不溶性辅料对测定有⼲扰，需滤过消除辅料的⼲扰；3 本法采⽤吸收系数法定量，所⽤的分光光度计应经过严格检定，特别是波长准确度和吸光度精度要进⾏校正。
药物分析-含量测定结果计算
第四节 含量测定结果计算
22.10 × 8.806×1.025 标示量 = % ×100% = 99.7% 0.1 4 × ×1000 2
习题： 习题： 安乃近注射液含量测定方法如下，精密量取本品（ 安乃近注射液含量测定方法如下，精密量取本品（规 格为1ml:0.25g 10ml， 100ml量瓶中 加乙醇80ml 1ml:0.25g） 量瓶中， 80ml， 格为1ml:0.25g）10ml，置100ml量瓶中，加乙醇80ml， 再加水稀释至刻度，摇匀，立即精密量取10ml 10ml， 再加水稀释至刻度，摇匀，立即精密量取10ml，置锥 形瓶中，加乙醇20ml 20ml， 6.5ml与甲醛溶液0.5ml， 与甲醛溶液0.5ml 形瓶中，加乙醇20ml，水6.5ml与甲醛溶液0.5ml，放 分钟，加盐酸溶液（9→1000）1.0ml，摇匀， 置1分钟，加盐酸溶液（9→1000）1.0ml，摇匀，用碘 滴定液（0.1mol/L， =1.010）滴定， 滴定液（0.1mol/L，F =1.010）滴定，至溶液所系显 的淡黄色在35秒内不腿，消耗碘滴定液（0.1mol/L） 35秒内不腿 的淡黄色在35秒内不腿，消耗碘滴定液（0.1mol/L） 14.09ml， 1ml的碘滴定液 0.1mol/L） 的碘滴定液（ 14.09ml，每1ml的碘滴定液（0.1mol/L）相当于 17.57mg的 17.57mg的C13H16N3NaO4S H2O。计算本品注射液中安乃 近（C13H16N3NaO4S H2O）含量相当于标示量的百分含 的百分数（标示量% 的百分数（标示量%）
第四节 含量测定结果计算
平均片重 V × T × F ×平均片重 标示量%= 标示量%= W ×标示量 21.95× 21.95×18.02/1000 ×0.9850 ×10.2114/20 = 1.0321 ×0.2 =96.4% ×100 ×100
紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例
紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例药物A的含量可以通过紫外可见分光光度法来测定。
下面是一种计算实例，以帮助理解该方法的操作流程以及计算原理。
假设我们有一批药物A的试样，需要测定其中药物A的含量。
我们首先需要准备一定浓度的标准品溶液，用于构建工作曲线。
标准品溶液的浓度可以根据药物A的理论含量来确定。
操作步骤如下：1. 首先，我们准备标准品溶液。
假设药物A的理论含量为100mg/mL，我们可以准备一系列含量递增的标准品溶液，如10mg/mL，20mg/mL，30mg/mL等等。
可以根据需求自行决定浓度的范围和递增量。
2.准备工作曲线。
我们将取一定量的每个标准品溶液，利用紫外可见分光光度计进行测定，测定吸光度值。
通常选择药物A在紫外可见光谱范围内的最大吸收波长（波峰）进行测定。
得到一系列标准品溶液浓度与吸光度值的对应关系。
通过得到的数据，我们可以得到一个工作曲线，在浓度与吸光度之间建立线性关系。
3.测定药物A的样品。
我们将取一定量的待测样品溶液，利用紫外可见分光光度计进行测定，测定样品的吸光度值。
4.根据工作曲线，将样品的吸光度值代入，同时参考工作曲线上对应吸光度值的浓度，可求得样品的浓度。
通过浓度和待测样品溶液的体积，可以计算出药物A的含量。
标准品溶液浓度：10mg/mL，20mg/mL，30mg/mL，40mg/mL，50mg/mL对应的吸光度值：0.5，1.0，1.5，2.0，2.5待测样品溶液吸光度值：1.8根据工作曲线，将待测样品溶液吸光度值代入，找到对应的浓度。
从工作曲线可以看出，吸光度值1.8对应的浓度在30mg/mL和40mg/mL之间，我们可以利用线性插值法来估算浓度。
(1.8-1.5)/(2.0-1.5)=(C-30)/(40-30)C=((1.8-1.5)/(2.0-1.5))*(40-30)+30C = 36mg/mL假设我们测量的样品溶液体积为10mL，根据浓度和体积计算，可得到样品中药物A的含量为 36mg/mL * 10mL = 360mg通过以上计算，我们得到样品中药物A的含量为360mg。
紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
三、实验内容
（5）结果计算
百分含量%
标示量% =
A
E1% 100 ×D ×平均片重 1cm
W × 标示量(g/片）
×100%
Thank you
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
三、实验内容
对乙酰氨基酚片含对乙酰氨基酚 (C8H9NO2 ） 应为标示量的95.0%-105.0%。
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
三、实验内容
（1）线性与范围：
对乙酰氨基酚对照品, 照分光光度法，在λ257nm测定吸收度 线性回归方程：y=a+bx, r≥0.999 线性范围:3.2-16μg/ml
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
三、实验内容
（2）精密度试验：
计算片剂含量相当于标示量的百分数
6份测定结果的相对标准偏差(RSD )≤1%
RSD SD 100 % X
n
(Xi X )2
i 1
n 1 100 % X
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
三、实验内容
（3）回收率试验
已知含量的对乙酰氨基酚片适量，共9份 对乙酰氨基酚对照品高、中、低 3个浓度
回收率 %
总值 - 本底值 加入量
100%
RSD (n=9)≤2%
本底值=百分Biblioteka 量%×Wi实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
三、实验内容
（4）样品测定
对乙酰氨基酚片 10片， 照分光光度法，在λ257nm测定吸收度
紫外分光光度法对阿司匹林肠溶片含量测定
研究报告紫外分光光度法对阿司匹林肠溶片含量测定班级：学号：姓名：紫外分光光度法对阿司匹林肠溶片含量测定阿司匹林属常用解热镇痛药, 小剂量可用于防治心脑血管疾病。
近年来, 随着人们预防保健意识增强, 小剂量阿司匹林肠溶片的生产和使用逐年增长, 其质量不合格的现象也屡有发生。
小剂量阿司匹林肠溶片 (以下简称阿肠片) 含量测定地方标准采用酸碱滴定法[ 1], 后改为紫外分光光度法[ 2]。
2002 年11 月份颁布的国家标准 (化学药品地方标准上升国家标准)[ 3]仍为酸碱滴定法。
然而我们在实际检验工作中发现采用酸碱滴定法测定结果严重偏高, 有多批检品含量高至 110% ~ 120% ( 含量限度为 950% ~ 105%) ; 而采用紫外分光光度法测定, 结果为98%~ 100% [4]。
1 仪器与试药药品：阿司匹林肠溶片（25㎎×100片，临汾宝珠有限制药公司，100301）试剂：阿司匹林储备液（2.012mg／ml）蒸馏水仪器：紫外分光光度计（日本岛津），石英比色皿（1cm）2个，25ml容量瓶，移液管，分析天平（Sartorius BS110S，北京赛多利斯天平）等。
2 方法与结果2.1 标准系列溶液的配置2.1.1贮备液的制备取原贮备液（2.012mg／ml）0.7ml置25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，要匀即可，该贮备液浓度为56.34µg／ml。
2.1.2对照品溶液的制备取上述贮备液（56.34µg／ml）5ml置25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度摇匀即可，扫该溶液(C=11.268µg／ml)紫外光谱图，判断阿司匹林紫外可见的最大吸收峰λmax=225 nm、λmax=262 nm。
测得当λmax=225 nm时吸光度A=0.335。
如图一图一阿司匹林对照品溶液紫外吸收光谱2.1.3标准系列浓度的配置取6只25ml容量瓶，分别加入4.00，5.00,6.00,7.50,9.00,10.00ml浓度为56.34µg／ml贮备液，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
紫外分光光度法测定复方磺胺嘧啶片的含量
C
N N NH2
NH2
C. TMP + SD. 溶剂：盐酸溶液
（9 → 1000）
H2N
磺胺嘧啶(SD)
甲氧苄啶(TMP)
A
SD 和TMP分子结构中均有共轭双键，显紫外 吸收特征。 在盐酸溶液（9→1000）中，SD的 λmax = 308 nm，而此波长处TMP无吸收，所以可直接 测定SD的含量。
吸光度； 另取 SD 对照品适量 (0.2g) ，精密称定，加 0.4 % 氢氧化钠溶液使 SD 溶解，并用 0.4% NaOH 稀释至 100 ml ；精密量取该溶液 2 ml ， 置另一 100 ml 量瓶中，加盐酸溶液（9 → 1000）稀释至刻度，得 每 1 ml 中约含 40 g 的溶液，同法测定。
14
五、思考题
武汉大学药学实验教学中心
1．双波长分光光度法测定复方磺胺嘧啶片中TMP含量 的主要误差来源是什么？
2．简述差示分光光度法消除干扰吸收、测定组分含量 的基本原理。
15
计算分光光度法
比色法
吸光度后，按下式计算供试品溶
液中待测物的浓度：
C供试
A供试 A对照
C对照
5
二、实验原理 一、中心建设简况
武汉大学药学实验教学中心
（三）双波长分光光度法消除干扰吸收、测定含量的原理
ab ab a b a b A A A ( A A ) ( A A 2 1 1 2 2 ) 1
100 100 W 5 AR W
△AX 和△AR——供试液和对照液在测定波长（λ2）和参比波长（λ1）处测得吸光度之差值
CR ——对照品溶液（1）的稀释液的浓度，mg/ml
W ——称样量，g
紫外分光光度法阿司匹林的含量测定
紫外分光光度法对阿司匹林的含量测定紫外分光光度法对阿司匹林的含量测定紫外--可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好。
波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。
分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
描述物质分子对辐射吸收的程度随波长而变的函数关系曲线，称为吸收光谱或吸收曲线。
紫外-可见吸收光谱通常由一个或几个宽吸收谱带组成。
最大吸收波长（λmax）表示物质对辐射的特征吸收或选择吸收，它与分子中外层电子或价电子的结构（或成键、非键和反键电子）有关。
朗伯-比尔定律是分光光度法和比色法的基础。
即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。
A= lg1/T = εcl(Lamber t-Beer定律)紫外-可见分光光度计由5个部件组成：①辐射源。
必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。
②单色器。
它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。
③试样容器，又称吸收池。
供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。
容器的光程一般为0.5～10厘米。
④检测器，又称光电转换器。
常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。
近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。
紫外分光光度法测定维生素C的含量
附件2：江苏省职业学校技能大赛化学检验技术项目操作技能竞赛实施细则第一部分实验方案实验一、紫外分光光度法测定水杨酸的含量1.仪器1.1紫外分光光度计(755B型)；1.2石英比色皿(1cm)：2个；1.3容量瓶(100mL)：1只；容量瓶(50mL)：6只；1.4吸量管(10mL)： 1支；移液管(10mL):1支。
2.试剂2.1水杨酸标准溶液(1mg/mL)；2.2水杨酸试样：浓度约为8～12μg/mL。
3.实验操作3.1标准溶液的配制准确吸取10mL水杨酸标准溶液(1mg/mL)于100mL容量瓶中，配制成100μg/mL水杨酸标准溶液；再分别吸取0、2、4、6、8、10mL水杨酸标准溶液(100μg/mL)于6个50mL容量瓶中，稀释成一系列不同浓度的标准溶液（0～20μg/mL）。
3.2 吸收曲线的绘制用8μg/mL或12μg/mL浓度的标准溶液，以蒸馏水为参比，于波长210～350nm范围内测定吸光度，制作吸收曲线，从曲线上查得最大吸收波长（230nm附近），吸收曲线参见附图。
注：波长间隔在210～350nm范围内每隔5nm测定一个数值，在最大吸收波长±5nm范围内每隔1nm测定一个数值。
3.3 标准曲线的绘制于最大吸收波长处分别测定标准溶液的吸光度，然后以浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
3.4 样品测定于最大吸收波长处测定试样的吸光度，从标准曲线上查出试样的浓度，平行测定两次。
实验二、可见分光光度法测定水中的铁离子1.仪器1.1可见分光光度计(722N型)；1.2比色皿(1cm)：4个；1.3容量瓶(50mL)：8只；1.4吸量管(1mL、2mL、10mL)：各1支；吸量管(5mL)：2支。
2.试剂2.1铁标准溶液(20μg/mL)；2.2盐酸羟胺，100g/L；2.3邻二氮菲，1.5g/L；2.4醋酸钠溶液，1.0mol/L；2.5铁试样：浓度约为16～24μg/mL。
紫外分光光度法测定布洛芬片含量
实验一紫外分光光度法测定布洛芬片含量一、目的要求1.掌握紫外－可见分光光度计（UV-Vis Cintra10）的原理和使用方法。
2.掌握用紫外分光光度法测定药物含量的基本方法（标准曲线、样品测定和数据处理）。
二、基本原理具有不饱和结构的有机化合物，如芳香族化合物，在紫外区（200-400nm）有特征的吸收，为有机化合物的鉴定提供了有用的信息。
布洛芬分子结构中含有苯环，在264nm和272nm处有最大吸收，因272 nm处吸收度值小，而264nm处吸收度值在0.3－0.7之间，故选264 nm作为测定波长。
布洛芬为消炎镇痛药，主要用于关节痛、肌肉痛、神经痛、头痛、牙痛等。
其原料与片剂的含量测定方法在中国药典收载的是以中性乙醇为溶剂的中和滴定法，操作较为繁琐。
本实验以氢氧化钠溶液为溶剂，采用紫外分光光度法测定布洛芬片的含量，方法简便，结果准确。
三、仪器与试剂1. UV-Vis Cintra10型紫外可见分光光度计，1cm带盖石英吸收池。
2.布洛芬对照品3.布洛芬片剂4.氢氧化钠分析纯四、实验方法1.选择测定波长精密称取布洛芬对照品适量，加0.4%氢氧化钠溶液适量，制成每lml中含布洛芬0.25m g的溶液，在230一300nm范围内绘制吸收光谱。
在264nm和272nm处有最大吸收。
取布洛芬片除去薄膜衣，研细，精密称取适量，加0.4%氢氧化钠溶液适量制成每lm l含布洛芬0.25mg的溶液，在230一300nln范围内绘制吸收光谱。
2. 绘制标准（工作）曲线精密称取布洛芬对照品适量，加0.4%氢氧化钠溶液，制成0.10，0.20，0.25，0.40，0.50mg·ml-1的溶液，在264nm处测定吸收度A。
以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，绘制标准曲线。
根据标准曲线的斜率计算k。
3.测定样品含量供试品溶液的制备:取本品20片，除去包衣，精密称定，精密称取适量(相当于布洛芬25mg)，置100 ml量瓶中，加0 .4%氢氧化钠溶液，溶解并稀释至刻度，摇匀滤过。
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(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
A 1 V D
含量%
E 1% 1cm
100
100 %
m
0.582 1 250 100
715 100
5 100% 99.05%
0.0411
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度 ，摇匀，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度， 摇匀。照紫外-可见分光光度法，在271nm波长处测定吸光度为 0.420。另取甲氧苄啶对照品适量0.05134g，置25ml量瓶中，用 稀醋酸稀释至刻度，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸稀 释至刻度，摇匀。在271nm波长处测定吸光度为0.416，计算甲 氧苄啶标示量百分含量。
Байду номын сангаас
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
标示量%
cR
Ax AR
D
每支容量
100%
S
0.05134 0.420 25 100 2 25100 0.416 1 1 100% 103.7%
0.1
药物分析/药物的含量测定
紫外可见分光光度 法测定药物含量的 计算实例
制作人：谭韬
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
精密称取对乙酰氨基酚0.04110g，置250ml量瓶中，加 0.4%氢氧化钠溶液50ml，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml， 置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇 匀。依照分光光度法，在257nm波长处测得吸收度为0.582。 按C8H9NO2的百分吸收系数为715计算对乙酰氨基酚的百分含 量