第一章植物组织培养的基本技术文稿演示

接种室要求干爽安静，清洁明亮。在适当 位置吊装1～2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。 最好安装一小型空调，使室温可控，这样可使 门窗紧闭，减少与外界空气对流。
培养室
主要工作：将接种的材料进行培养生长的场
所。培养室的大小可根据需要培养架的大小、 数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利 用空间和节省能源为原则。
4. 解剖针: 解剖针可深入到培养瓶中，转移细 胞或愈伤组织。也可用于分离微茎尖的幼叶， 可以自制。
5. 接种盘:
三、玻璃器皿及用具
组培瓶（玻璃）---要求透光度好，能耐高压高
温, 以试管、三角瓶、培 养皿等使用较多。
三角锥瓶--- 适用于各种培养（如固体培养、液 体培养、大规模培养或一般培养）。
2．剪刀类(scissors) 可采用医疗五官科用的 中型剪刀。主要用于切断茎段、叶片等。也可 以用弯形剪刀，由于其头部弯曲，可以深入到 瓶口中进行剪切。
3. 解剖刀: 切割较小材料和分离茎尖分生组织 时，可用解剖刀。刀片要经常调换，使之保 持锋利状态，否则切割时会造成挤压，引起 周围细胞组织大量死亡，影响培养效果。
第一章植物组织培养的基本技术文稿演示
一、植物组织培养实验室设计
准备间 缓冲室 无菌室 培养室
实验室设计
在进行植物组织培养工作之前， 首先应对工作目的和规模以及需要 哪些最基本的设备和条件有个全面 的了解，以便因地制宜地利用现有 房屋，或新建、改建实验室。
实验室的大小取决于工作的目的和规模：
1. 以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会 限制生产影响效率。
烘
干热灭菌需保持
箱
150℃ ， 达 1-3h ； 若测定干物重，则
温度应控制在80℃
烘干至完全干燥为
止。
类型：手提式高
高
压灭菌锅
压
灭
立式高压
菌
灭菌锅
锅
作用：培养基、
水和各种器皿
的消毒
❖种类较多，用 于分离微茎尖可 采用双筒实体解 剖镜。解剖镜上 带有照相装置， 根据需要随时对 所需材料进行摄 影记录。
主要设备：培养架、空调机、除湿机、
摇床、培养箱、紫外光源等。
二、设备、仪器
(一)大型设备和仪器
培 养 架
大多由铝合金制成， 一般设5-7层，最低一 层离地高约2Ocm，其 他每层间隔30cm左右， 培养架即高2左右。培 养架长度都是根据日光 灯的长度而设计， 如 采用40W日光灯，长 1.3m，宽度一般为 60cm。
燥、各种药品 贮备、称量、溶解、配制、培 养基分装、培养基的灭菌等。
主要设备：水池、工作台、高压灭菌锅、烘
箱、药品柜、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度 计及常用的培养基配制用玻璃仪器.
缓冲室
具体要求和工作：面积5m2为宜。进入无
菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入 杂菌。缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯，以 照射灭菌。
具体要求：周围墙壁要求有绝热防火的性
能。培养室温度一般保持在20—27℃左右，安 装空调机。由于热带植物和寒带植物等不同种 类要求不同温度，最好不同种类有不同的培养 室。
室内湿度也要求恒定，相对湿度以保持在 70%～80%为好，可安装加湿器。控制光照时 间可安装定时开关钟，一般需要每天光照1016h。
用于植物材 料的培养，其 内有温度感受 器，控制箱内 温度到所调指 标。生化培养 箱还配有光照 装置。
恒温培养箱
用于培养物的无
菌操作（由鼓风
机、Biblioteka Baidu板、操作
超 净
台、紫外灯和照 明灯组成）。
工 作
超净台分水平式
台
和垂直式二种型
号
用于干燥洗净的玻
璃器皿，也可用于
干热灭菌和测定干
物重.用于干燥需保
持80-100℃；进行
(三)、湿度
湿度的影响包括培养容器内湿度的保持 和环境的湿度条件。
第二节 器具洗涤
一、 洗涤液 洗涤液的种类很多，配制方法也不一样，
可根据要求选择经济有效的洗涤液。常用 的洗涤剂主要有肥皂、洗衣粉、洗洁精和 铬酸洗涤液等。洗衣粉、洗洁精和肥皂均 是很好的去污剂，对于带油脂太多的玻璃 器皿，可先用其他洗涤液除污垢再用洗衣 粉水等洗涤。
无菌室
(也叫接种室，操作室)
主要工作：用于植物材料的消毒、接种、培
养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以 及一切需要进行无菌操作的技术程序。
主要设备：紫外光源、超净工作台、显微镜、
解剖镜、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、 解剖刀、接种针）等。
具体要求：
接种室宜小不宜大，一般7～8平方米，要求 地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清 洁和消毒。配置拉动门，以减少开关门时的空 气扰动。
作用：用于称
取大量元素、 微量元素、 维生素、激 素等药品精 确度
0．0001g。
电子天平
作用：测定培养基及酶制剂的ｐＨ值
酸 度 计
作用：低温
保存材料，
存放药品、
培养基母液、
冰
激素、酶制
箱
剂。
一般要保持
在23—27℃
左右，具备
产热装置，
并安装吊式
空
或立式空调 机。
调
机
(二）小型用品
1．镊子类(forceps) 常应用医疗上的镊子。 根据操作需要有各种类型
培养皿--- 适于作单细胞的固体平板培养、胚和 花药培养和无菌发芽。
试管--- 适合于用少量培养基及试验各种不同配 方时选用。
在组织培养中配制培养基，贮藏母液，材料的消 毒等需要各种化学实验用的玻璃器。
包括各种型号的烧杯、量筒、移液管、试剂瓶、 容量瓶、试管以及移液管架、玻璃棒、滴瓶等。
吸耳球、刷子、记号笔、定时钟、手套、封口膜、 脱脂棉、拖鞋、口罩、白大褂、滤纸。
2.在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来 设计
避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。
植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做 到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还 需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。
。
缓冲间
准备室
培 养 室
接种室
准备室
主要工作：完成完成各种器具的洗涤、干
二、各种器具的洗涤
新器皿；新购置的玻璃器皿一般都有游离的碱性 物质，使用前要在1%的盐酸溶液中浸泡24h再清 洗，再用自来水冲洗，最后用蒸馏水洗2～3次彻 底清洁后，烘干备用。
用过器皿；用过后玻璃器皿如烧杯、试管和培养 瓶等要先除去其残渣，清水冲洗后将器皿放入洗 衣粉溶液中浸泡一段时间，然后涮去器皿内污物， 如洗涤效果不好，可增加洗衣粉水浓度或适当加 热，器皿内外都要刷到，再用水冲洗干净，最后 用蒸馏水冲洗一遍，干燥后备用。