兽医流行病学 刘文博 第十一章 血清流行病学

分析性超速离心
100mg
免疫电泳
5～10mg
免疫结合
5～10mg
单向辐射扩散
<1～2mg
琼脂双扩散
<1mg
电泳免疫扩散(火箭电泳)
<0.5mg
一维双电泳免疫扩散(对流免疫电泳)
<0.1mg
浊度计
0.1mg
补体结合试验
1μg
凝集试验
1μg
酶免疫测定（ELISA）
<1μg
定量免疫荧光
<1pg
放射免疫测定
细胞病变 单层数
完整单层数
阳性比例 （P)
1-P
1/1
0.0
0
5
1.00
0.00
1/2
-0.3
0
5
1.00
0.00
1/4
-0.6
0
5
1.00
0.00
1/8
-0.9
1
4
0.80
0.20
1/16
-1.2
1
4
0.80
0.20
1/32
Baidu Nhomakorabea
-1.5
3
2
0.40
0.60
1/64
-1.8
4
1
0.20
0.80
1/128
以隐性感染为主的疾病，除了进行发病分 布研究外，同时检测相应抗体或抗原进行 分析研究。
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3
2、寻找与病因相关的因素
• 追溯诊断：收集发病早期和康复期双份 血清，抗体效价升高4倍以上。
• 在肝癌病人血清中HBsAg和抗HBe的检 出率明显高于对照组。
• 血脂、胆固醇与冠心病的关系。
• 高水平免疫球蛋白与慢性病的关系。
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4
3、评价防制措施的效果 评价生物制品接种效果。 4、疾病监测和疫情预报 了解动物群体对某病易感和免疫水平的动态变 化。群体中易感动物比例越大，流行强度越大。
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5
三、方法 （一）调查方法
1、短期调查 确定是否存在疾病。
2、长期调查 监测抗体水平和疾病流行的动态变化。
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6
ED50 =1/25.1
即
0.1ml血
清含有
25.1个
ED50
，医学则PPT1ml
血
清含
有
251个
ED50
。
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标准误（e.s.e）
e.s.e(log10ED50)= d p1p/n1
n为每一组中的试验重复数。
log10 e.s.e =0.3 (0 .8 0 .2 0 .8 0 .2 0 .4 0 .6 0 .2 0 .8 )/5 (1 ) =0.13 因此，滴度可以表示为每0.1ml含101.4±0.13ED50，
-2.1
5
0
0.00
1.00
医学PPT
12
Spearman- Kärber法
log10ED50=L - d (Σp- 0.5) L=显示全部阳性结果的最高稀释度对数 d=稀释系数的对数 ∑p=从显示全部阳性结果的最高稀释度开始的各稀释度试
验阳性比例总和
L= - 0.6
d=log102=0.3
Σp=1.00+0.80+0.80+0.40+0.20 =3.20
（二）检测方法
凝集试验(HA)、血球凝集抑制试验(HI)、 葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集试验、间接 血 球 凝 集 试 验 (IHA) 、 琼 脂 扩 散 沉 淀 试 验 (AGP) 、 补 体 结 合 试 验 (CF) 、 免 疫 荧 光 试 验(IF)、酶联免疫吸附试验 (ELISA)、放射 免疫试验(RIA)
第十一章 血清流行病学
用血清学（免疫学）的方法进行流行病 学调查分析，以阐明疾病在群体中的分 布和原因，检验疾病防制措施的效果。
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1
第一节 概 述
血清可测量物质及疾病相关指标： 矿物质、微量元素、酶和激素、特异抗体
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2
二、用途
1、阐明疾病的分布规律 特异抗体可以提供畜群是否暴露于传染病 病原体的证据。
特异性：实际未感染而按诊断标准被判定为未 感染的百分率。
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敏感性和特异性的关系
特异性
假阳性
阴性动物分布 1-p
假阴性
敏感性
阳性动物分布 p
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20
检测抗原和抗体的试验的相对敏感性
方法
近似敏感性(每dl)
用双缩或折射仪测定血清总蛋白质
100mg
血清蛋白质电泳(区带电泳)
100mg
几何平均滴度
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9
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10
二、抗体测定
• 单系列稀释测定
每一稀释度测一次，抗体滴度是区间滴度
• 多系列稀释测定
每个稀释度测定几次，50%终点测定
抗体滴度：50%试验组成员产生特定后果的血清
稀释度，用半数有效量(ED50)表示
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血清抗体50%终点测定
血清稀释度
Log10稀 释度
或每毫升含102.4±0.13ED50。
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三、畜群中血清抗体水平的估计和比较
1、检测抗体的存在
对畜群作抽样调查
2、抗体水平的比较
• 不同畜群的比较
✓ 根据抗体存在与否比较两个畜群，可用卡方检验
✓ 比较两群体中抗体的频率分布，可用参数检验
•
同一畜群不同估计值的比较 医学PPT
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第三节 血清学试验的解释
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23
系列（串联）试验
当误诊会造成严重后果时，几个指标均为阳性 才能诊断。
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7
（三）分析方法
筛检（screening）试验： ✓ 快速简便、早期发现可能有病动物。 ✓ 筛检出的可疑或阳性病畜均需进一步确诊。
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第二节 血清抗体的测定
一、抗体量的表示法
滴度—产生试验反应的血清最高稀释度
（阳性、阴性、阳转）
✓ 滴度的对数转换（适合于正态分布检验）
对数平均滴度
一、精密性 不同的流行菌株、毒株存在抗原差异。
随着单克隆抗体的出现，检测病原体细微抗原 差异的能力已大大提高，有助于感染起源和流 行范围的确定。
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二、准确性
阳性结果
真阳性 — 确定遭受该病病原体的感染 交叉反应，同一群病原体或相
关病原体之间的交叉反应
假阳性 双重感染，而其中只有一种是临
床发病的病原体
非特异性反应，非特异抑制剂、
非特异凝集素
技术误差 医学PPT
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阴性结果
真阴性—确定未遭受该病病原体的感染 标本采集时间不当 试验选用不当
假阴性 抗生素诱导的抗体产生受到抑制 不完全或封闭抗体存在 自然或诱发的免疫耐受 技术误差
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三、敏感性和特异性
敏感性：实际感染而按诊断标准被判定为感染 的百分率。
<1pg
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平行（并联）试验
当漏掉一个病例后果严重或再进行筛检比较 困难时，要尽量减少漏诊率。
试验1 + + -
试验2 + + -
判断结果 + + + -
几个指标中有一个阳性即诊断为阳性。灵敏度提高，
但特异度降低。
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例如 流产奶牛布鲁氏菌病检查
阴道拭子细菌培养、血清的虎红平板试验和乳 汁环状试验，任一试验阳性就认为感染。 在发生疫情要求迅速作出判定时，常常采用平 行试验。