检验项目标准操作规程-HIV AbAg

检验项目标准操作规程

LIAISON 人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合检测

（HIV Ab/Ag）

(化学发光法，CLIA)

类别信息

用途本产品用于体外定性检测人血清或血浆中的人类免疫缺陷病毒1 型（HIV-1）的P24 抗原，以及两种人类免疫缺陷病毒1 型（M 群和O 群）和/或人类免疫缺陷病毒2 型

（HIV-2）特异性抗体。

此试剂仅用于全自动化学发光免疫分析仪（LIAISON®XL）系列。

临床意义获得性免疫缺陷综合症（艾滋病）的发病原因已被确定为两种类型的逆转录病毒，统称指定为人类免疫缺陷病毒（HIV）。HIV是由HIV感染者之间的性接触、接触到

受污染的血液或者血液制品进行传播的，以及受感染的母亲传染给胎儿或围产期感

染给新生儿。艾滋病患者和HIV感染的无症状个体中可以检测到HIV抗体；通过细胞

培养或者病毒RNA和/或前病毒DNA的扩增后在艾滋病患者和阳性个体中能检测到

HIV病毒感染。

通过系统进化分析HIV-1可以分成M群（主要的或较多的），N群（新的，非-M群，

非-O群），O群（外部的）和P群（Plantier等，Nat. MED. 2009年）。全球艾滋病

的流行主要是由M群的病毒引起的，而N群和O群病毒相对少见，而且是非洲西中部

特有的。然而，已经确定在欧洲和美国存在O群感染。HIV-1 M群由遗传亚型（A，

B，C，D，F，G，H，J和K）组成，而且是循环重组的形式（CRFs）。HIV-1 B

亚型是在美国，欧洲，日本和澳大利亚的主要亚型，但在欧洲新的HIV-1病毒感染的

很大比例是由非B亚型引起的。

与之密切相关但不同类型的免疫缺陷病毒是人类免疫缺陷病毒2型（HIV-2）。人类

免疫缺陷病毒2型与HIV-1在形态结构，基因组组织，细胞嗜性、体外致细胞病变

性，传播途径，以及导致艾滋病的能力方面都是类似的。HIV-2比HIV-1致病性弱

些，相比HIV-1而言，HIV-2从感染到全面爆发有一个较长的潜伏期，疾病进展慢，

病毒滴度较低，垂直和水平传播概率低。HIV-2的西非流行，但在美国，欧洲，亚

洲，非洲等地区感染HIV-2的频率比HIV-1低。

HIV-1和HIV-2之间的血清学交叉反应已经显示出不同样本的高度可变性。这种变异

需要HIV-1和HIV-2两种病毒的抗原来筛选HIV-1和HIV-2的抗体。HIV-1和/或HIV-2

抗体和/或p24抗原在血液中的存在表明潜在感染HIV-1和/或HIV-2。HIV感染后的早

期，但在转阴之前，在血清或血浆标本中可检测HIV抗原。最经常作为抗原血症标记

使用的HIV结构性蛋白是一种核心蛋白，P24。人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合

检测试剂盒（化学发光法）使用HIV P24单克隆抗体检测转阴之前的HIV p24抗原，

从而降低转阴窗口期并提高HIV感染的早期检测。

样本信息样本类型样本管/抗凝剂最小样本量

血清200 µL 标本+ 150 µL 死体积

血浆∙柠檬酸盐

∙EDTA

∙肝素

∙草酸钾

∙ACD

∙CPDA

标本保存样本在收集后7天内检测，可保存在2-8°C 条件下; 否则，标本需要分包装冷冻保存(–20°C 或更低)。如果标本冷冻保存，使用前需要解冻并混匀。

标本的特定要求∙含有颗粒物质、浑浊、脂血或红细胞残片的样本使用前需要过滤或离心。

∙严重溶血或脂血样本以及含有。颗粒物质或明显微生物污染的样本不能用于检

测。

∙检测前检查并去除泡沫。

方法学HIV 特异性抗体的定性测定采用抗原夹心化学发光免疫检测(CLIA)技术。

HIV p24抗原的定性测定采用P24抗原的单克隆抗体夹心化学发光免疫检测(CLIA)技

术。

试剂 1. LIAISON® HIV抗体检测试剂盒

1.1磁微粒：(

2.5mL)包被有HIV-1 gp41（M群和O群）以及HIV-2 gp35重组抗原（两

者都从大肠杆菌中获得）的磁性微粒，BSA，PBS缓冲液，﹤0.1%的叠氮化钠

1.2校准品：(1.8 mL )含有低浓度HIV抗体的人血清/血浆，BSA，PBS缓冲液，

EDTA，0.2％的ProClin®300，惰性黄色染料。校准品的值可溯源到厂家的室内参

考品。

1.3样本稀释液：(11 mL) 绵羊血清，BSA，PBS缓冲液，EDTA，0.2％的

ProClin®300，防腐剂。

1.4 结合物稀释液：(2*21 mL )牛血清，BSA，TRIS缓冲液，0.2％的ProClin®300，

防腐剂。

1.5 结合物：(4.4 mL )HIV-1 gp41（M群和O群）以及HIV-2 gp35重组抗原（两者都

从大肠杆菌获得），与异鲁米诺衍生物结合，BSA，PBS缓冲液，0.2％的

ProClin®300，防腐剂。

2. LIAISON® HIV抗原检测试剂盒

2.1磁微粒：(2.5mL)包被有链霉亲和素的磁性微粒，BSA，PBS缓冲液，<0.1％叠

氮化钠。

2.2校准品：(1.8 mL )低水平HIV p24重组抗原（从大肠杆菌中获得），重组牛抑肽

酶，酪蛋白，PBS缓冲液，0.2％的ProClin®300，惰性黄色染料。校准品的值可溯

源到厂家的室内参考品。

2.3结合物B：(4.4 mL) HIV p24抗原的抗体（单克隆）生物素结合物，人血清/血

浆，非特异性IgG抗体（小鼠多克隆），BSA，PBS缓冲液，0.2％的ProClin®300，

防腐剂。

2.4结合物A：(13 mL )HIV p24抗原的IgG抗体（单抗），与异鲁米诺衍生物结合，

非特异性人IgG，非特异性IgG（小鼠多克隆），BSA，PBS缓冲液，EDTA，

Igepal® 300 CA-630，0.2％的ProClin®300，防腐剂。

3. 试剂盒储存条件

3.1试剂盒必须竖直放置以利于磁微粒的重新悬浮。不能冷冻保存。过效期的试剂盒

不能再使用。

3.2 当试剂盒处于密封和竖直放置的储藏条件下，能够在2-8°C 条件下稳定至效期。

3.3 打开密封膜后，试剂盒可在2-8°C 条件下或仪器试剂区中稳定储藏4周。

4. 试剂有效期

试剂盒的有效期为12 个月。

定标使用试剂盒中包含的校准品定标，分析仪可设置检测项目的临界值（cut-off值）。

每个校准品可定标四次。为了正确测试，检测化验必须定标。

如果出现以下的情况需要重新定标，每次定标需要做3份重复测试:

∙使用新批号的试剂盒或启动试剂。

∙距上次定标时间超过4周。

∙分析仪经过维护。

∙质控结果超出期望范围值。

质量控制分析仪需做质控一次进行分析性能监控，本项目须通过检测人类免疫缺陷病毒抗原及抗体质控品来进行。

(a)使用当天至少一次，