海洋活性物质分离纯化-萃取共43页文档
海洋微生物次级代谢产物的分离纯化
姚元江 黄思洋 李艳君 臧兴禹
背景
• 海洋是个大宝库。
• 微生物主要来源于深海，环境特殊，有着 自己独特的代谢方式，从而产生结构新颖、 活性显著的代谢产物。 • 这些产物可作为新药药源。
分离与纯化的一般工艺过程
发酵液
发酵液的 预处理与 固液分离 胞 外 产 物
文献引用
• 1<<海洋微生物次级代谢产物中醌类化合物的 研究进展>> • 2<<海洋微生物次生代谢产物的结构特征和生 物活性的研究进展>> • 3<<海绵来源真菌Aspergillus sp BH4次级代谢产 物的初步研究>> • 4<<海洋微生物低温碱性脂肪酶的纯化与性质 研究>> • 5<<海滨土壤芽胞杆菌次级代谢产物发酵优化、 分离纯化及其性质的研究>>
微生物分离筛选
发酵培养及样品制备
活性筛选
静置培养
氯仿萃取脱脂去除杂蛋白。 超滤浓缩。
分离与纯化的一般工艺过程
发酵液
发酵液的 预处理与 固液分离 胞 外 产 物
沉淀、萃 氯仿萃取脱脂去除杂蛋白。 取、超滤 超滤浓缩。 加热，调 pH，絮凝
预处理
细胞分离
细胞破碎 浓缩、去热 原、干燥
细胞碎片分离
初步纯化
沉淀、萃 取、超滤 加热，调 pH，絮凝
预处理
细胞分离
细胞破碎 浓缩、去热 原、干燥
细胞碎片分离
初步纯化
成品加工 高度纯化
色谱分离 结晶
与已知一般微生物次级代谢产物分 离纯化的主要区别
• 样品来源：生物样品及供培养的海水分别 采自深海。
第四章-海洋生物活性物质的制备技术
双水相萃取 一般萃取技术 萃取 先进萃取技术 多级萃取
超临界萃取
微波萃取 快速溶剂萃取法 反胶束萃取
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1. 双水相萃取
聚丙二醇
高聚物之间的不相溶性
甲基聚丙二醇，聚乙二醇，聚乙烯醇，聚乙烯吡咯 烷酮，羟丙基葡聚糖，葡聚糖
双水相是由两种互不相溶的高分 聚乙二醇 聚乙烯醇，葡聚糖，聚蔗糖
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Ⅱ 蒸馏法
水蒸气蒸馏法：适用于能随水蒸气蒸馏而不被破
坏的成分的提取。适用于 活性物质沸点高（ 多在 100℃以上），与水不相溶或微溶。 这类活性成分一般在约100℃时存一定的蒸气压 。当与水在一起加热时，其蒸气压和水的蒸气压 总和为一个大气压时，液体就开始沸腾，水蒸气 将挥发性物质一并带出。 例如中草药中的挥发油，某些小分子生物碱一 麻黄碱、萧碱、槟榔碱，以及某些小分子的酚类 物质-牡丹酚（paeonol）等，都可应用本法提取 。 Your company slogan
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（二） 海洋生物活性物质的提取
全提取：即设法把生物样品中的有机化合物尽可能多地提 取出来，包括脂溶性、醇溶性和水溶性。需要多种溶剂依 次提取，例如先用非极性溶剂石油醚、苯等提取，干渣再 用乙醇提取；提取后的干渣再用水提取。 特别适合于研究一些未 被研究过及对其药物用 途还不清楚的生物品种 有目的地提取：目标化合物的信息充分，根据其性质设计 具体的提取方法。例如河豚毒素的提取、生物碱的提取。
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4、浸提方法
（1）浸渍法： 将原料用适当的溶剂在常温或温热条件下浸 泡，使有效成分浸出的一种方法。按《中国药典法》规定： 取适当粉碎的原料，臵于有盖的容器中，加入规定量的溶 剂密盖，搅拌或振摇浸渍至规定时间后，倾出上清液、压 榨残渣、合并上清液和压榨液，静臵过滤即可。
海洋生物活性物质的提取及应用研究
海洋生物活性物质的提取及应用研究引言随着科技的不断发展，人类对海洋生物的研究越来越深入，逐渐认识到海洋生物的巨大潜力。
从大自然中提取到的活性物质已经被广泛应用于食品、医药、化妆品等领域，而海洋生物源活性物质的研究与开发不仅可以为人类创造出更多的商业价值，同时还能为人类带来更多的健康福祉，具有广泛的市场前景。
海洋生物活性物质的提取方法海洋生物活性物质的提取方法主要分为物理法、化学法和生物法三种。
物理法是采用机械、超声波、微波等物理因素破坏海洋生物细胞结构，使其成分溶于适宜的溶剂或水溶液中，再通过过滤、离心、蒸馏等分离和提纯方法得到目标物质。
物理法提取的活性物质不会受到化学反应的影响，但存在成分不能完全提取、工艺复杂等缺点。
化学法是通过化学反应改变海洋生物的结构，使其成分活性更加突出，然后再通过溶剂萃取、结晶等提纯方法得到目标物质。
化学法可提取出更纯净的活性物质，但常见的缺点是化学反应对环境的影响较大，需要更高的成本和技术保障。
生物法是指通过融合生物学和化学原理，采用酶法、发酵法等方法，使酶或微生物促进合成或降解废弃物质，产生与目标物质相似的活性物质，再通过分离和提纯方法得到目标物质。
这种方法无论是对环境还是对生物都具有更好的适应性，可以更好地利用废弃物资源。
海洋生物活性物质的应用研究海洋生物活性物质的应用已经涉及到诸多领域，如抗癌、降血糖、降血脂、美容、保健等。
海藻多糖是一种来源广泛的海洋生物活性物质，具有免疫调节、抗肿瘤、降低血糖、降低血脂等多种功效。
研究表明，海藻多糖对肝及肝癌细胞的保护作用较强，其抗氧化能力比比较强的化学合成物还要大。
因此，海藻多糖作为一种天然抗癌物质，具有巨大的发展前景。
此外，海洋生物活性物质在美容领域的应用也备受关注。
海洋生物活性物质的提取和应用能够达到抗氧化、美白、滋润、去皱、防晒等功效。
海洋生物活性物质的美容保健应用被认为是一种趋势，而在开发过程中，科学家要求这些保健作用必须与缓解精神压力、改善心理状态等作用相结合，从而提高生活质量。
最新第九章海洋生物活性物质与分离提取教学讲义PPT课件
第二节 药用海洋生物介绍 海洋药用植物
水绵
石花菜
海带
紫菜
衣藻
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海洋药用动物
药用腔肠动物 药用软体动物 药用节肢动物 药用棘皮动物 药用鱼类 药用爬行动物 药用哺乳动物
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
➢药用腔肠动物
数十种,分布于水螅虫纲、钵水母纲和珊瑚虫 纲。
如《本草纲目拾遗》中指出：白皮子(指海蜇 ‘味咸涩,性温,消痰行积,止带祛风”，用于妇女 劳损、积血带下和小儿风疾、丹毒等。柳珊瑚 的前列腺素衍生物，可用于节育、分娩、人工 流产、月经病、胃溃疡和气喘，还有调节血压 和代谢的作用。
角鲨 海龙
海马
➢药用爬行动物
现知数十种，包括海蛇类和海龟类。如玳 瑁为名贵中药。海龟胶有滋阴、潜阳、柔 肝的功效。海蛇类均有药用价值，海蛇肉 能滋补强壮，海蛇胆有行气化痰、清肝明 目等效能，海蛇血能补气血、壮筋骨，海 蛇油用于治疗冻伤、烫伤、皮肤皲裂，海 蛇酒有驱风活血、止痛等作用。
海 龟
药用哺乳动物
鲸目、鳍脚目。中国现知有十多种。如真海豚 的脂肪、 肝、脑垂体、胰、卵巢等均可药用，能 提制抗贫血剂、胰岛素，以及催产素和促肾上腺 皮质激素等多种激素。斑海豹雄性的阴茎和睾丸 入药(即海狗肾),有补肾壮阳、益精补髓的功效， ；脂肪入药（即海狗油）有润滑肌肤、解毒的效 用；肝和胆可治肋膜炎等。
海豚
开发难题
长 的 时 间 隧 道，袅
第九章海洋生物活性物质与分离提取
第一节 概述
由于绝大部分陆生生物活性 成分已获得筛选，科学家转从 海洋生物或原始森林中寻找药 用活性成分。
美国、欧盟等国家已对红海、 地中海等海域的海洋生物进行 药物筛选，对具有开发价值的 活性物质进行专利保护。
提取和纯化海洋中的藻类和海草
提取和纯化海洋中的藻类和海草海洋中的藻类和海草在生态系统中扮演着重要的角色，不仅对海洋生物多样性起到支撑作用，还具有很高的应用价值。
然而，在研究和利用过程中，如何高效地提取和纯化海洋中的藻类和海草成为了一个关键问题。
本文将从提取方法和纯化技术两个方面进行探讨，以期为相关领域的研究工作者提供一定的参考。
一、提取方法提取海洋中的藻类和海草是研究和利用它们的前提，合理选择提取方法可以提高提取效率。
下面将介绍几种常见的提取方法。
1. 机械提取法机械提取法是一种简单、快速的提取方法，适用于一些体积较大的海藻和海草。
具体操作步骤为将样品与溶液混合后，通过振荡或研磨等机械方式将目标物质从样品中分离出来。
机械提取法的优点是操作简便，但也存在着对目标物质的破坏和杂质的混入等缺点。
2. 化学提取法化学提取法是利用溶剂来提取目标物质，通过类似溶解、析出、共沉淀等化学方式将目标物质从样品中分离出来。
常用的溶剂有正己烷、乙酸乙酯、乙醇等。
化学提取法的优点在于可选择合适的溶剂对不同种类的藻类和海草进行提取，提取效果较好。
但需要注意的是，选择溶剂时要考虑其对样品的溶解性和选择性。
3. 超声提取法超声提取法是利用超声波的作用来破碎细胞壁，促进目标物质的溶出。
超声提取法操作简单、速度快，对样品的破坏较小，并可提高提取效率。
但超声提取法的功率、时间和温度等参数的选择需要根据不同的藻类和海草进行优化。
二、纯化技术提取藻类和海草后，往往需要对目标物质进行纯化，以获得更纯净的化合物。
下面将介绍几种常见的纯化技术。
1. 薄层层析法薄层层析法是一种常用的分离和纯化技术，可通过不同物质在固定相和移动相之间的差异来进行分离。
薄层层析法操作简单、快速，并具有较高的分离效率和纯化度。
但也存在着样品量较小、操作技巧要求较高等缺点。
2. 柱层析法柱层析法是利用固体填充物对混合溶液进行分离的一种方法，可分为凝胶柱层析、吸附柱层析和离子交换柱层析等多种类型。
4-3甲壳质的提取-海洋生物活性物质的提取解读
二、我国海洋药物资源的研究与开发方向与内容
加强海洋生物的药理筛选工作，以积累我国海 洋生物活性物质的原始资源，全面了解我国有 药用价值的海洋生物资源，加强海洋生物活性 成分的药理学和毒理学研究，探讨临床应用效 果; 发展海洋生物活性物质的提取和合成技术 , 开发 各种新药 ; 研制动、植物生长素与高效封锁残毒杀虫剂等 农用药物添加剂 ;
二、我国海洋药物资源的研究与开发方向与内容 提高海产食品工业下脚料 ( 甲壳、鱼 鳞、 内脏和藻类 ) 的综合利用制药技术水平 , 生产新药品 ; 利用遗传工程技术 , 改变某 些海洋生物的遗传特性 , 促进产生或提高 生物活性成分 ,扩大药用生物资源品种。
二、我国海洋药物资源的研究与开发方向与内容
二、我国海洋药物资源的研究与开发方向与内容
海洋生物技术可以分离产生活性物质的生物基 因，通过基因增扩，建立基因库保存生物活性 物质基因，既为深入研究海洋生物特别是对难 以获得或偶然获得的海洋生物活性物质提供了 方便，更为保存生物活性物质基因多样性，防 止因为物种的灭绝造成基因的丢失提供了保证 。
二、我国海洋药物资源的研究与开发方向与内容
三、天然牛磺酸的提取 牛磺酸的应用:
目前，在美国、日本等一些发达国家， 牛磺酸已被作为一种新型的食品添加 剂广泛应用，如在婴幼儿奶粉、饮料 及保健食品中用作强化剂等。因牛磺 酸对心血管系统具有一系列独特的功 能，主要是加强心室功能，增加心肌 缩力，抗心律失常，防止充血性心力 衰竭和降低血压，抗血乳酸的积累等， 因而被定为运动饮料的成分。
其次，生物技术有助于解决生物活性物质的资源有限问题， 实现可持续发展。
直接利用海洋生物为原料提取生物活性物质，受资源本身的限制， 往往无法实现产业化。即使资源比较丰富的，直接利用海洋生物作 为原料，成本也比较高，而且很可能造成对资源的过度开发，危及 可持续发展，满足不了人类的需求。应用生物技术例如转基因技术 等，可以将所需的，产生特定活性物质的海洋生物基因转移到另一 种生物中表达，培育新的海洋药源生物，为人类源源不断地提取海 洋生物活性物质提供资源保证。海洋药物基因工程根据供体基因和 表达系统的不同，可以分为三个方面:一是将海洋药物基因转入陆生 动植物和微生物中表达:二是将来自陆地或人体的药物基因转入海水 养殖生物中表达;三是将海洋药物基因转入海水养殖生物中表达。药 物基因转入高产、稳产的海水养殖生物例如海带等大型海藻中表达 ，也具有广阔的应用。
从海洋生物中提取生物活性物质的研究
从海洋生物中提取生物活性物质的研究海洋是地球上最广阔的领域之一，其中蕴藏着具有丰富多样性的生物资源，是人类改进生活的巨大财富。
近年来，随着生物技术的发展，利用海洋生物提取制备生物活性物质已经成为一个热门领域。
本文将从生物活性物质、海洋生物资源以及海洋生物提取生物活性物质的研究进展等方面探讨这一领域。
生物活性物质是指一类生物分子，具有显著的生物活性和药理活性，可以在一定程度上调节生物体的生理功能和治疗疾病。
海洋生物是具有大量种类和多样性的生物种群，其体内含有多种生物活性物质，比如抗氧化剂、抗肿瘤物质、抗菌素、抗病毒物质、营养素、酶和胶原蛋白等。
这些物质因其来源特殊而具有生物活性强、毒副作用小、难以人工合成等优势，已经成为制备生物医药、化妆品、食品等领域的一种重要资源。
海洋中包含着成千上万种珊瑚、藻类、海藻、有孔虫、贝类、海星、海胆等种类繁多的生物。
其中一些生物具有营养丰富、味道鲜美的特点，比如海鱼、海虾、海螺等属于食品类别，而另一些则具有药材的特性，比如海参、海参皮、海带、紫菜等属于药食同源的食品。
除此之外，海洋生物还有一些极具生物活性的活性成分，比如龙头石斑鱼的皮肤黏液中提取的活性肽可用于治疗炎症等疾病，海绵中提取的化合物可用于抗肿瘤、抗病毒和抗菌等，所以开发海洋生物资源成为提取生物活性物质的重要途径。
提取海洋生物中的生物活性物质需要先获得生物样品，然而这其实是一项复杂而困难的挑战。
由于海水的深度、浓度、温度和盐度变化非常大，导致海洋生物的生物体系非常复杂，生物的分布区域、生态环境等都对提取过程产生影响。
因此存在巨大的困难在于如何清洗、分离、鉴定并提取目标化合物。
提取海洋生物中生物活性物质的方法通常包括化学提取法、酶解提取法、微波辅助提取法、超临界提取法等，基于所需提取的化合物、提取原料的类型、提取效率等不同因素选择不同的方法。
不过，相较而言，酶解提取法深受科研工作者的青睐。
对于海洋生物中生物活性物质的提取，在最初的期间以分离和提炼为主，而随着科技的进步，现在我们已经能够从海洋生物中高效地提取到具有生物活性的物质。
海洋生物活性物质
海洋生物活性物质提取过程
一、海洋生物活性物质的筛选 二、海洋生物活性物质生源材料的培养 三、海洋生物活性物质分离纯化和产品制 备
筛选方法
• 国际：以分子水平的药物模型为基础的 大规模筛选技术 • 美国：利用基因工程受体筛选 • 中国：利用实验动物或其组织器官对某 种化合物或混合物进行逐一的试验 （传 统方法）
• 抗肿瘤物质 例如，从软体动物中分离出来多肽 或蛋白质化合物具有很强的抗肿瘤、抗 白血病作用；鲨鱼粘多糖是很强的抗癌 物质。
• 抗真菌、抗细菌和抗病毒物质 从海泥和单胞藻中分离的代谢物及 从棘皮动物、被囊动物中分离的化合物 具有抗菌作用。海洋真菌的顶头孢菌的 代谢产物可制成头孢菌类的抗菌素。从 被囊动物分离的化合物对病毒则有抑制 作用。
培养方法
• 一是通过人工栽培或养殖富含活性物质 的海洋生物。 • 二是利用生物技术培养生源材料，包括： 基因工程、细胞工程（最新启动）、发 酵工程、酶工程、生化工程等
分离纯化和制备技术
• 超临界流体萃取、双液相萃取、灌注层析、分 子蒸馏、膜分离等现代分离技术，提高化合物 活性的分子修饰、组合化学技术，加速药物研 制的计算机辅助药物设计技术等 • 超临界CO2萃取技术已用于海洋生物中脂类和 高度不饱和脂肪酸的分离提取，分子蒸馏技术 已经在海洋鱼油制品的生产中得到了应用；以 分子修饰提高天然产物的生理活性应用则更多
我国研究和开发中存在的主要 问题
• 活性物质筛选等基础性工作薄弱 • 活性物质的分离、纯化等技术与国外存在较大 差距，设备落后，质量差，速度慢 • 利用基因工程、细胞工程、酶工程、生化工程 等生物技术手段，进行海洋生物活性物质开发 更是刚刚起步，大部分项目还是处于研究的初 期 • 产业化水平低
海洋生物活性物质的 研究与开发
海洋生物活性物质
海洋生物活性物质在化妆品领域的应用
海洋生物活性物质种类繁多，如胶原蛋白、透明质酸等，具有保湿、抗衰老等功效。
海洋生物活性物质在化妆品中应用广泛，如面霜、精华液、面膜等，能够改善皮肤状态， 提高皮肤弹性。
海洋生物活性物质在化妆品中的安全性较高，不会引起过敏等不良反应。
海洋生物活性物质在化妆品中的生产工艺成熟，能够保证产品的质量和稳定性。
糖类：具有免疫调节、抗肿 瘤等作用
蛋白质：具有多种生物活性， 如酶、激素等
生物碱：具有抗菌、抗病毒 等作用
萜类：具有抗炎、抗氧化等 作用
海洋生物毒素：如河豚毒素、 石房蛤毒素等，具有强烈的 毒性作用
海洋生物活性物质的分类
海洋生物多糖类物质：如海藻多糖、海绵多糖等，具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒 等多种生物活性。
海洋生物活性物质的纯化技术
提取技术：根据 海洋生物活性物 质的性质和特点， 采用不同的提取 方法，如溶剂提 取、超声波提取、 微波提取等。
分离技术：通过 各种分离技术， 如沉淀、离心、 过滤、萃取等， 将海洋生物活性 物质从混合物中 分离出来。
纯化技术：采用 色谱技术、电泳 技术、膜分离技 术等纯化方法， 进一步提高海洋 生物活性物质的 纯度和纯度。
加强监管与宣传：加强监管 力度，提高公众对海洋生物 活性物质的认识和保护意识
海洋生物活性物质保护与可持续利用的挑战与机遇
挑战：海洋生物活性物质的保护面临诸多挑战，如过度捕捞、污染、气候变化等，这些因素都可能 导致海洋生物活性物质的减少和丧失。
机遇：尽管面临挑战，但海洋生物活性物质的保护与可持续利用也带来了许多机遇。通过科学研 究和合理利用，可以开发出具有重要价值的海洋生物活性物质，为人类健康和经济发展做出贡献。
海洋活性物质分离纯化-萃取共45页文档
ห้องสมุดไป่ตู้谢谢！
1、不要轻言放弃，否则对不起自己。
2、要冒一次险!整个生命就是一场冒险。走得最远的人，常是愿意 去做，并愿意去冒险的人。“稳妥”之船，从未能从岸边走远。-戴尔．卡耐基。
梦 境
3、人生就像一杯没有加糖的咖啡，喝起来是苦涩的，回味起来却有 久久不会退去的余香。
海洋活性物质分离纯化-萃取 4、守业的最好办法就是不断的发展。 5、当爱不能完美，我宁愿选择无悔，不管来生多么美丽，我不愿失 去今生对你的记忆，我不求天长地久的美景，我只要生生世世的轮 回里有你。
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
第九章海洋生物活性物质与分离提取-文档资料
角鲨
海马
海龙
药用爬行动物
现知数十种，包括海蛇类和海龟类。如玳 瑁为名贵中药。海龟胶有滋阴、潜阳、柔 肝的功效。海蛇类均有药用价值，海蛇肉 能滋补强壮，海蛇胆有行气化痰、清肝明 目等效能，海蛇血能补气血、壮筋骨，海 蛇油用于治疗冻伤、烫伤、皮肤皲裂，海 蛇酒有驱风活血、止痛等作用。
海
龟
药用哺乳动物
海洋生物活性物质的功能
Ⅰ 保健 Ⅱ 制药
Ⅰ 保健功能
一、健脑益智功能 二、预防肿瘤功能 三、预防心脑血管疾病 四、调节血压功能 五、调节血糖功能 六、抑菌、抗病毒功能 七、免疫调节功能 八、抗衰老功能 九、抗疲劳功能 十、其它方面功能
Ⅱ 海洋生物的药用价值
大环内酯类 聚醚类化合物 肽类化合物
C15乙酸类化合物 前列腺类化合物
基 围 虾
竹节虾
花 蟹
红棘馒头蟹
药用棘皮动物
现知数十种,主要分布在海参纲、海胆纲和海 星纲中。如刺参 有补肾壮阳益气补阴、通肠 润燥、止血消炎等功能。紫海胆有制酸止痛 、清热消炎的功效。由陶氏太阳海星和罗氏 海盘车 制成的海星胶代血浆，效用很好。
海参纲
石笔海胆
海 星 纲
药用鱼类
现知数百种圆口纲、软骨鱼纲和硬骨鱼纲均有。 已知中国有 200种以上。如海洋鱼类普遍含有廿 碳五烯酸（Eicosapentaenoic acid），现已证实它 具有防治心血管疾病的功用。鲨鱼中的角鲨烯有 抗癌的用途。 海马、海龙是早已闻名的中药，具 有补肾壮阳、散结消肿、舒筋活络、止血止咳等 功能，主治神经衰弱、妇女难产、乳腺癌、跌打 损伤、哮喘、气管炎、阳痿、疔疮肿毒、创伤流 血等。
第九章 海洋生物活性物质 与分离提取技术
第一节 概述
海洋生物药理活性化合物分离纯化研究实例描述
1、中国南海细薄星芒海绵抗肿瘤活性成分研究 ---张红军等. 药学服务与研究, 2004, 4(2):104-106
细薄星芒海绵(Stelletta tenui Lindgren)
Stelletta grubii Schmidt
星芒海绵素 A 抗肿瘤活性异马拉巴烷型三萜
样品1O～20 m潜水采集。
样品标本保存于第二军医大学长征医院海洋药物 实验室，编号为HNll2O一1，种属由中科院海洋 研究所李锦和研究员鉴定
寻常海绵纲的海绵易于采集，而且往往含有很多 结构罕见的具有抗癌或抗病毒活性的次生代谢产 物，因此一直是海洋天然产物化学家首选的海洋 生物研究对象
新鲜样品50kg
石油醚萃取 淡水洗涤（除盐） 90％甲醇水相萃余物 石油醚萃取物1.5kg
活性检测 采用纸片扩散法，将稻瘟病菌的孢子悬液均匀涂 布于土豆汁固体培养基上，取直径为6 mm无菌 滤纸片轻贴于检测平板上，滴加10mL待测样品/ 纸片，28℃下培养24 h后，测量抑菌圈直径。每 个样重复3次取平均值。
发酵液
上清液
HPLC分析 HPLC半制备 活性追踪
分析条件为： 流动相为甲醇-水，甲醇由30％在20 min内 线性升到60％，然后再20 min线性升到100 ％，流速1 ml/min，检测波长220 nm。
活性物质
(结构待定)
根据分析条件确定Waters Delta Prep4000半制备液相色谱 仪对各组分进行制备的流动相条件为： waters Nova．Pak C18 (25 mmx200 mm,6 mm)； 流动相为甲醇-水，甲醇由35％保持15 min后，15 min内线 性升到90％，然后再保持10 min，流速15ml/min，检测波长 220nm，室温。
超临界萃取技术在海洋生物活性物质提取中的应用
超临界萃取技术在海洋生物活性物质提取中的应用随着生物技术的不断发展，海洋生物活性物质的提取技术也得到了显著的改善。
超临界萃取技术就是其中的一种，在海洋生物学的研究领域中有着广泛的应用。
本文将就超临界萃取技术在海洋生物活性物质提取中的应用做一个简要介绍。
第一部分：超临界萃取技术的原理和优点超临界萃取技术（Supercritical Fluid Extraction, SFE）是指在高温和高压条件下，将液态溶剂转变为相应的超临界流体，并利用超临界流体的渗透和溶解能力，从样品中提取目标物质的一种分离技术。
该技术的优点在于：1.高效性。
超临界萃取技术所用的超临界流体或反应溶剂，在超临界状态下，具有较高的溶解能力和扩散性能，因此可以快速提取目标物质。
2.无毒性。
与传统溶剂提取技术不同，超临界萃取技术所用的溶剂无毒、无味、易于回收、无环境污染。
3.易回收。
溶剂回收简单方便，减小了化学废物的产生，符合要求的溶剂可以在反应中循环使用，减少了成本。
第二部分：海洋生物活性物质提取中的应用在海洋生物活性物质提取中，超临界萃取技术有以下应用：1.油类提取。
海洋生物中常存在含脂类化合物的油泡，这些油泡通常是超临界萃取技术的一个重要目标。
油泡提取准确地描述了将藻类、蟹类、贝类、鱼类中的油脂分离出来的过程。
2.糖类提取。
海洋生物中的糖多数具有多糖化结构。
糖的分离纯化极具挑战性，因为糖的多糖化结构复杂，相对分子质量大，并且容易被化解。
超临界流体可以将多糖化合物从海洋生物组织中有效地提取出来。
3.蛋白质类提取。
海洋生物中的蛋白质具有丰富的生物活性和医药价值，因此从生物组织中提取海洋蛋白质极具重要意义。
超临界萃取技术可以将蛋白质在不破坏结构和生物活性的情况下，高效地提取出来。
第三部分：总结超临界萃取技术在海洋生物活性物质提取中具有明显的优势，尤其是对于复杂海洋生物多糖类化合物的提取有重要实际意义。
超临界萃取技术的应用将有助于海洋生物学的发展，加速海洋生物活性物质的研究和应用，为生物制药、抗肿瘤等现代医学领域的发展贡献力量。
海洋生物活性物质提取
螺旋藻多糖研究综述螺旋藻多糖研究综述摘要：螺旋藻多糖是从螺旋藻体、螺旋藻培养液中提取分离出来的一类具有促进细胞生长、提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化、对核酸内切酶活性和DNA修复合成有增强作用等功能的重要天然生物活性物质，也是国内外海洋药物研究开发的热点。
本文对螺旋藻多糖的药理作用进行了相关综述。
关键词：螺旋藻多糖；生物活性；抗癌Abstract:Spirulina polysaccharide from Spirulina body, spirulina culture liquid extraction and separation out of a class of functions to promote cell growth, enhance immunity, anti-tumor, anti-oxidation, enhance the role of the endonuclease enzyme activity and DNA repair synthesisan important natural biologically active substances, domestic and international marine drug research and development of hot spots. In this paper, the pharmacological effects of Spirulina polysaccharide relevant reviews.Key words: Spirulina Platensis Polysaccharide；biological activity；Anti-tumor1.前言螺旋藻是一种生长于30亿年前的多细胞丝状蓝藻,地球上最早进行光合作用的植物之一,还保持许多古代原始藻类的一些特点。
其结构简单,没有原核,个体成丝状,因缠绕成螺旋状而得名。
海洋生物活性物质提取与利用技术设计
海洋生物活性物质提取与利用技术设计海洋生物活性物质提取与利用技术设计摘要：海洋生物活性物质是一种具有很强的药用价值与人体健康保健功能的天然物质，其提取与利用对于推动海洋生物资源的开发利用具有重要意义。
本文通过综合分析目前的研究成果与技术进展，设计了一种通过超声波辅助酶法提取海洋生物活性物质的技术方案，并探讨了该方案在生产实践中的应用前景。
关键词：海洋生物活性物质，提取技术，利用技术，超声波辅助酶法，应用前景一、引言海洋生物是地球上一类独特而丰富的生物资源，其中包含了许多具有独特活性的物质。
这些活性物质具有多种生物活性，包括抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗菌、降血压、降血糖等功能，对于人类的健康具有重要的保健和药用价值。
目前，提取和利用海洋生物活性物质的技术已经取得了显著的进展。
其中，超声波辅助酶法是一种有效的提取技术，已经被广泛应用于海洋生物活性物质的提取过程中。
该技术具有非常明显的优势，如提高了提取效率，减少了提取时间，保持了活性物质的稳定性等。
因此，本文将针对海洋生物活性物质的提取与利用技术进行设计，以超声波辅助酶法为主要手段，探讨其在生产实践中的应用前景。
二、超声波辅助酶法提取技术超声波辅助酶法是一种利用超声波的机械振动作用与酶的催化作用相结合的提取技术。
其主要原理为超声波的振动能量可以促进酶的活化，加快分子间的扩散速率，提高反应速率。
该提取技术的操作步骤主要包括以下几个方面：1. 获取海洋生物样品并进行初步处理：收集海洋生物样品，如藻类、生物海绵、海胆等，并进行初步处理，去除杂质和沉积物。
2. 准备提取液：根据目标活性物质的特点，选择适当的提取液，常见的有乙醇、酮类等。
根据不同的提取物，可以选择不同浓度的提取液。
3. 设定工艺参数：根据实际情况，设定超声波处理的功率、时间和频率等参数。
不同样品的特点和要求也可能需要调整相应的超声波处理参数。
4. 超声波辅助提取：将处理好的海洋生物样品与提取液加入容器中，然后进行超声波处理。
海洋活性物质分离纯化-液相色谱
3.示差折光检测器（RI）
属于通用型检测器。其检测原理是液体 都有折光指数，很少有两种液体具有相同的 折光指数，所以 化合物都可用这种检测器 检出。当流动相恒定地流过检测池时，其折 光指数不变，仪器得到一条基本平直的基线。 当有组分峰流过检测池时，折光指数发生变 化，记录仪记下这信号，即为色谱图。其缺 点：灵敏度较少低，检出下限为10-7g/mL； 易受温度和流速的影响；不能进行梯度洗脱。
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一般流程及分离原理
一、简介 1.与经典的液相柱色谱法相比 (1)柱内径↓，填充剂粒度↓、均匀性↑，新 型固定相的问世 → 分离效率↑。 (2)柱长↓，填充剂机械强度↑，供液压力和 进样压力↑，流动相流速↑（1~5ml/min）→分 离速度↑（7~8个峰/10min）。 (3)采用光学原理的检测器→灵敏度↑。
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这种检测器是示差折光检测器的理想替代 品。其检测原理是：将流出色谱柱的流动相及 组分先引入已通气体的蒸发室，加热，使流动 相蒸发而除去；样品组分在蒸发室内形成气溶 胶，而后进入检测室；用强光或激光照射气溶 胶产生光散射，测定散射光强而获得组分的浓 度信号。
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5.化学发光检测器 化学发光检测器是近年来发展起来的高选 择性及高灵敏度的新型检测器，其设备简单， 自身发光，不需光源，价格便宜，是一种有发 展前途的检测器，可用于药物代谢分析及免疫 研究。其检测原理是：将流出色谱柱的组分与 发光试剂混合，产生化学发光反应，光辐射可 用光导纤维传输，由光电倍增管检测，从而获 得信号。
样品 固定相
吸附 解吸
样品 固定相
＋ Z个
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计量置换模型的数学表达式为：
lgK′=lgI-Zlg[D0] • 式中K′为容量因子；lgI为常数；Z为配基础与样