常见传染病的试验室检查共35页文档
常见性病实验室检测
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我国主要流行的性传播疾病（性病）
50-60年代 经典性病 梅毒 淋病 软下疳 性病性淋巴肉芽肿 80-90年代 监测性病 梅毒 淋病 软下疳 性病性淋巴肉芽肿 非淋菌性尿道炎 生殖器疱疹 尖锐湿疣 HIV/AIDS
目 前 传染法报告病例 监测性病
梅毒 淋病
梅毒 淋病 沙眼衣原体感染
生殖器疱疹 尖锐湿疣
梅毒螺旋体抗体试验临床意义
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初
筛阳性标本的确证试验。
梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA等梅毒螺旋
体抗体试验试验仍可阳性，故TPPA等试验阳 性不能作为疗效观察的指标。 TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染， 应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行
诊断。
0.876
结
试剂简称 科美发光 万泰ELISA 新创ELISA 丽珠ELISA 华大ELISA 科华ELISA 现代ELISA 金豪ELISA 万泰RT 英科RT 艾康RT
果
(梅毒螺旋体抗原血清学试验)
敏感性(%) 特异性(%) 功效率 (% ) Kappa值 100.0 100.0 97.6 96.7 96.7 100.0 100.0 99.2 100.0 96.7 91.1 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 98.9 98.3 98.3 99.4 99.4 99.4 100.0 100.0 99.0 98.7 98.7 99.3 99.0 98.7 99.7 98.3 96.0 1.000 1.000 0.979 0.972 0.972 0.986 0.979 0.972 0.993 0.965 0.916
2010.10.05 2010/09/09
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测-20150602
ELISA的试剂
• 固相载体：常用聚苯乙烯 • 固相载体形状主要有三种：微量滴定板、小珠和 小试管。 以微量滴定板最为常用，专用于EILSA的产品称 为ELISA板，国际上标准的微量滴定板为8×12 的96孔式。
ELISA的试剂
• 结合物（酶标记的抗体或抗原） • 常用的酶： 辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP) 碱性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP)
艾滋病实验室检测
HIV简介
HIV是什么东西？
•
•
逆转录病毒科慢病毒属
单股正链的RNA病毒，电镜下可见一致密的圆锥状 核心，20面体，具有包膜（被膜）
•
HIV-1和HIV-2，目前我省也检测出HIV-2。
HIV
包膜蛋白（ env ）：gP160、gP120、gP41 核心蛋白（ gag ）：P17、P24、P55
洗涤
• 各种试剂盒的洗液不要混用。按要求稀释，洗液 如果结晶应待其融解后配制。 • 孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好， 手工洗板防止洗液在孔内形成气泡。
显色与终止
• 显色剂不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB 显色剂不可用 • 加终止液时应避免产生气泡。如产生较多气泡， 则会导致假阳性。 • 不允许肉眼判读结果
• 第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若 干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、 容器的材料要易于消毒处理。 • 第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外 层包装箱。外面要贴上醒目的标签，注明数量、 收样和发件人及联系方式，同时要注明“小心轻 放、防止日晒、小心水浸、防止重压”等字样， 还应易于消毒。 • 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下 运送。用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定的样品 应在室温下（18～25℃）或4℃（特殊要求时） 运送。用于病毒载量检测的样品应在-20℃以下 运输。DBS样品应在室温下（18～25℃）运送。 每一件包装的体积以不超过50mL为宜。 • 运送样品必须有记录。 • 特殊情况下经有关部门批准可以用特快专递邮寄 样品，但必须按三层包装，将样品管包扎好，严 禁使用玻璃容器。
常见疫病实验室检测方法
常见疫病实验室检测方法目录常见疫病实验室检测方法 (1)目录 (1)常见ELISA操作方法 (2)亚洲1 型口蹄疫抗体液相阻断ELISA 检测试剂盒 (2)猪瘟抗原检测试剂盒 (5)口蹄疫结构蛋白检测方法（3ABC-I-ELISA） (11)犬细小病毒抗体酶免测定试剂盒说明书 (13)犬瘟热病毒抗体酶免测定试剂盒说明书 (15)常见PCR操作方法 (17)猪伪狂犬病毒PCR诊断试剂剂盒 (17)猪圆环病毒PCR诊断试剂盒 (20)常见R T-PCR操作方法 (23)口蹄疫病毒分子检测诊断试剂盒 (23)H5亚型禽流感病毒RT-PCR检测试剂盒说明书(20次) (25)新城疫病毒RT-PCR 检测试剂盒 (27)猪瘟病毒RT-PCR诊断试剂盒 (30)凝集、血凝实验操作方法 (33)弓形虫间接血凝试验(lHA)试剂使用说明书 (33)伪狂犬病乳胶凝集试验试剂盒 (34)猪细小病毒病乳胶凝集试验〈LAT〉诊断试剂盒使用说明书 (35)猪传染性萎缩性鼻炎乳胶凝集试验〈LAT〉操作程序 (36)猪瘟正向间接血凝试验试剂使用说明书及实验操作程序 (37)高致病性禽流感血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验程序 (40)琼脂扩散试验 (42)鸡马立克氏病 (42)禽流感琼脂凝胶免疫扩散试验 (44)荧光抗体检测 (46)猪瘟荧光抗体试验操作程序 (46)对狂犬病疑似动物脑组织的直接免疫荧光(dFA)检测 (47)血清学诊断检测常用试剂配方 (49)禽流感HA和HI试验用溶液的配制 (49)补充实验 (52)猪流感病毒H1亚型Hl试验抗原与阴、阳性血清说明书 (52)猪流感病毒RT-PCR检测 (55)猪瘟病毒RT-PCR诊断试剂盒猪繁殖与呼吸综合症（Nsp2 1594~1680变异株）RT-PCR检测实验 (57)布鲁氏菌病试管凝集试验抗原与阴、阳性血清 (60)常见ELISA操作方法亚洲1 型口蹄疫抗体液相阻断ELISA 检测试剂盒一试剂盒内含物.说明书亚洲 1 型口蹄疫阳性对照血清( 己稀释浓度为 1:8) .96 孔 ELISA 板亚洲 1 型口蹄疫阴性对照血清.液体稀释槽 3% 双氧水.U 型96孔抗原抗体反应板 25×PBST洗涤液(稀释时准确量取).封板膜豚鼠抗血清稀释液.灭活亚洲Ⅰ型口蹄疾病毒抗原 (用冰决包裹 ) 终止液.亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒兔抗血清包被缓冲液(碳酸盐)胶囊.亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒豚鼠抗血清底物 (柠檬酸 -磷酸盐)缓冲液片剂.兔抗豚鼠血清IgG-辣根过氧化物酶结合物 OPD 片剂二器材准备 ( 需用户自备 )1.移液器:5-50µl移液器、0.2—10µl移液器、50—200µl移液器、50—300µl 12道移液器各一把。
常见病实验室检查.pdf
常见病的辅助检查一、呼吸系统：Lab辅检：1、普通感冒：⑴血常规：病毒性感染白细胞计数多为正常或偏低，淋巴细胞比例升高。
细菌性感染有白细胞计数与中性粒细胞增多和核左移现象。
⑵病原学检查：可用免疫荧光法、酶联免疫吸附检测法、血清学诊断和病毒分离鉴定等方法确定病毒德类型，区别病毒和细菌感染。
细菌培养可判断细菌类型并做药物敏感试验以指导临床用药。
2、急性气管-支气管炎：⑴血常规：白细胞计数和分类多无明显改变，细菌感染较重时，白细胞总数和中性粒细胞增多。
痰培养可发现致病菌。
⑵X线胸片：多表现正常或仅有肺纹理增粗。
3、肺炎：大叶性肺炎：X线显示节段性片状密度增高影。
小叶性肺炎：X线显示沿肺纹理分布的融合性斑点状阴影间质性肺炎：X线显示为一侧或双侧肺下部的不规则条索状密度增高阴影。
⑴血常规：WBC升高，N>80%，并有核左移或中毒颗粒；⑵痰涂片：革兰染色阳性及荚膜染色阳性；痰培养及血培养：可以确定病原体；PCR和荧光标记抗体检测。
⑶胸部X线检查：早期：肺纹理增粗或受累肺段，肺叶稍模糊；实变期：实变阴影中可见支气管气道征，肋膈角可有少量胸腔积液征；消散期：炎症逐渐吸收，可有片状区域吸收较快，呈现“假空洞”征；多数3～4周后才完全消散。
4、肺脓肿⑴血常规：白细胞计数升高，中性粒细胞比例在90％以上，慢性病人可稍增高或正常。
⑵胸片：大片浓密模糊浸润阴影，边缘不清，可检圆形透亮区及液平面。
痰培养加药敏试验，需要做需氧菌和厌氧菌培养。
纤维支气管镜检查：有助于治疗和发现病因，还可行肺泡灌洗术，协助局部引流。
5、肺结核⑴胸片：可确定病灶部位、范围、性质，是否典型的浸润型病灶，纤维钙化病灶及空洞等。
⑵血常规：可有贫血，白细胞计数正常。
血沉加快。
肝功能是否正常。
⑶痰涂片、痰培养、痰聚合酶联免疫反应（PCR－TB－DNA）。
痰找抗酸杆菌即结核分枝杆菌阳性。
结核菌素试验阳性。
⑷胸部CT：可发现微小或隐匿病变。
⑸支气管或肺泡灌洗液：检出抗酸分枝杆菌。
常见病实验室检查【范本模板】
常见病的辅助检查一、呼吸系统：Lab辅检：1、普通感冒：⑴血常规：病毒性感染白细胞计数多为正常或偏低，淋巴细胞比例升高。
细菌性感染有白细胞计数与中性粒细胞增多和核左移现象。
⑵病原学检查:可用免疫荧光法、酶联免疫吸附检测法、血清学诊断和病毒分离鉴定等方法确定病毒德类型，区别病毒和细菌感染。
细菌培养可判断细菌类型并做药物敏感试验以指导临床用药.2、急性气管-支气管炎：⑴血常规：白细胞计数和分类多无明显改变，细菌感染较重时，白细胞总数和中性粒细胞增多。
痰培养可发现致病菌。
⑵X线胸片：多表现正常或仅有肺纹理增粗.3、肺炎：大叶性肺炎:X线显示节段性片状密度增高影。
小叶性肺炎：X线显示沿肺纹理分布的融合性斑点状阴影间质性肺炎:X线显示为一侧或双侧肺下部的不规则条索状密度增高阴影。
⑴血常规：WBC升高，N〉80%，并有核左移或中毒颗粒;⑵痰涂片：革兰染色阳性及荚膜染色阳性；痰培养及血培养：可以确定病原体；PCR和荧光标记抗体检测。
⑶胸部X线检查：早期：肺纹理增粗或受累肺段，肺叶稍模糊;实变期：实变阴影中可见支气管气道征，肋膈角可有少量胸腔积液征；消散期：炎症逐渐吸收，可有片状区域吸收较快，呈现“假空洞"征；多数3～4周后才完全消散。
4、肺脓肿⑴血常规：白细胞计数升高，中性粒细胞比例在90％以上，慢性病人可稍增高或正常.⑵胸片：大片浓密模糊浸润阴影,边缘不清，可检圆形透亮区及液平面。
痰培养加药敏试验,需要做需氧菌和厌氧菌培养。
纤维支气管镜检查：有助于治疗和发现病因,还可行肺泡灌洗术，协助局部引流。
5、肺结核⑴胸片：可确定病灶部位、范围、性质,是否典型的浸润型病灶，纤维钙化病灶及空洞等。
⑵血常规：可有贫血，白细胞计数正常。
血沉加快。
肝功能是否正常。
⑶痰涂片、痰培养、痰聚合酶联免疫反应（PCR－TB－DNA）。
痰找抗酸杆菌即结核分枝杆菌阳性。
结核菌素试验阳性。
⑷胸部CT：可发现微小或隐匿病变。
⑸支气管或肺泡灌洗液：检出抗酸分枝杆菌。
艾滋、梅毒、乙肝的临床实验室检查
艾梅乙的临床实验室检查一、艾滋病艾滋病的诊断必须根据流行病学接触史、临床表现和实验室检查结果，综合分析。
无论处于哪一期的HIV感染，都必须要有抗HIV抗体阳性或HIV抗原阳性的实验室诊断为依据。
HIV的实验室检测方法包括：抗体检测、抗原检测、病毒分离培养、病毒核酸检测、病毒载量检测。
我国现阶段HIV实验室检测主要为HIV抗体检测，HIV抗体检测需要通过初筛和确认实验。
HIV初筛试验可以选择酶联免疫吸附试验（ELISA）、明胶颗粒凝集实验（PA）、免疫荧光法（IF）、免疫酶法（IE）、乳胶凝集实验（LA），还有临床普遍应用的快速诊断试剂。
初筛实验结果阳性后在做确认实验。
常用的确认实验为免疫印迹法。
确认试验阳性才能确定为HIV感染。
1、初筛试验由于系统性红斑狼疮和风湿病者体内的自身抗体和HIV-1型的某些抗原决定簇有交叉反应性，不同厂家及同一厂家不同批次试剂的敏感性和特异性村存在一定差异，故初筛试验呈阳性。
对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测，如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认（1）胶体金（或胶体硒）快速试验：以硝酸纤维膜为载体，区别在于不用酶标记抗体，而代之以红色的胶体金（或胶体硒）A蛋白，用渗滤法作为洗涤方法。
试剂稳定，可室温长期保存。
试验时不需任何设备，迅速、简便、特异性较好，敏感性约相当于中度敏感的ELISA，适用于应急检测、门诊急诊个体检测。
一般可在10～30min内判读结果。
（2）是酶联免疫试验（ELISA）：目前国内外主要使用第三代（双抗原夹心法）试剂，少数使用第二代试剂。
血源筛查仍以第三代ELISA为主，国际上有些国家和地区已将线性免疫酶测定（第四代ELISA试剂）用于血源筛查。
第四代ELISA试剂是最近发展起来的HIV 抗原抗体联合测定试剂，可同时检测P24抗原和抗HIV-1/2抗体。
性传播疾病的实验室检测
单纯疱疹病毒
•由于在感染急性期 发生水疱性皮疹即所 谓单纯疱疹而得名， 包括两个血清型： HSV-1 HSV-2
单纯疱疹病毒
致病特点
• HSV-1主要引起生殖器以外的皮肤、粘膜和器官感
染
• HSV-2则主要引起生殖器疱疹
临床表现
• 潜伏期3～14天，平均3-5天 • 临床表现多样 • 原发性：外生殖器或肛门周围有群簇或散在的小 水疱， 2～4 天后破溃形成糜烂或溃疡，自觉疼痛 • 复发性：较原发性全身症状及皮损轻，病程较短 复发多出现在原发感染后1～4个月 • 亚临床感染
传播途径
• 性接触 • 血液 • 胎盘（胎传梅毒） • 产道（新生儿淋菌性眼炎、衣原体性结膜炎） • 污染的生活用具
流行趋势
Ø 全球：WH0报告，每年约有4亿新病例
经治疗的STD年发病数为3.33亿
Ø我国：1949年，全国性病病人约1000万
上海性病患病率 达10% 1964年，基本消灭性病 1977年，再次报告新发性病病例 2001年，首次出现下降趋势 目前国内呈现上升趋势
沙眼衣原体感染特点
•约70％女性和50％男性为无症状或微症状 •大部分人群不寻求治疗造成持续感染和高流行 •并发症严重 •依赖实验室诊断
沙眼衣原体筛查的意义
1.流行率高：利于早发现、早治疗，提高生活质量 2.无症状，不治疗，传染给性伴侣：便于疾病控制和管理 3.严重并发症治疗费用高：减轻经济负担 4.治愈后的判断 5.减少其它性传播疾病，例如淋病、艾滋病感染风险。有报道感染CT可增 加淋球菌、HIV、HBV等风险，是正常人群的6～8倍 6. 目前英国、荷兰等国家正在推行全民每年常规筛查CT感染。CT感染是男 女不孕不育的主要病因之一，在西方国家已把CT感染作为不孕不育、
儿科传染病常见实验室检查
儿科传染病常见实验室检查一、概述儿科传染病是儿童时期常见的一类疾病，主要包括病毒性、细菌性和寄生虫性传染病。
由于儿童免疫系统尚未完全发育成熟，抵抗力较弱，因此容易受到传染病的侵袭。
实验室检查在儿科传染病的诊断、治疗和预防中起着至关重要的作用。
本文将对儿科传染病常见实验室检查进行详细介绍，以帮助儿科医生更好地掌握实验室检查的方法和意义。
二、儿科传染病常见实验室检查项目1. 血常规检查血常规检查是儿科传染病的基本检查项目，主要包括白细胞计数及分类、红细胞计数、血红蛋白、血小板等。
血常规检查有助于判断病原体的类型，如细菌感染时白细胞计数升高，病毒感染时白细胞计数正常或降低。
此外，血常规检查还可以评估患儿的病情严重程度和监测治疗效果。
2. 尿常规检查尿常规检查是诊断泌尿系统感染的重要手段，主要包括尿液颜色、透明度、比重、蛋白、糖、红细胞、白细胞等。
尿常规检查有助于鉴别细菌性和病毒性泌尿系统感染，为治疗方案的选择提供依据。
3. 粪常规检查粪常规检查是诊断肠道感染的重要手段，主要包括粪便颜色、性状、红细胞、白细胞、脂肪滴等。
粪常规检查有助于判断病原体类型，如细菌性痢疾时粪便中可见大量白细胞，病毒性肠炎时粪便中可见红细胞。
4. 生化检查生化检查主要包括肝功能、肾功能、心肌酶、电解质等。
生化检查有助于评估器官功能受损情况，指导临床治疗。
5. 病原体检测病原体检测是诊断传染病的关键，主要包括病毒、细菌和寄生虫等。
病原体检测方法有：（1）病毒检测：聚合酶链反应（PCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光法等。
（2）细菌检测：细菌培养、药物敏感试验、革兰染色等。
（3）寄生虫检测：粪便显微镜检查、血液涂片检查等。
6. 免疫功能检查免疫功能检查主要包括免疫球蛋白、补体、细胞免疫指标等。
免疫功能检查有助于评估患儿的免疫力，指导临床治疗。
三、儿科传染病实验室检查注意事项1. 标本采集：标本采集要严格按照操作规程进行，确保标本质量。
常见传染病的实验室检查
HBV等肝炎病毒、 EHFV、CMV、EBV等； 恙虫病 结核病、伤寒
其它重要技术
免疫组织化学 免疫电镜； 原位PCR；
( IHC )；
定量检测
主要传染病的实验检查项目及意义
病毒性肝炎
临床诊断 病原诊断
病理诊断
临床常规肝功能试验项目
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基因诊断
适用几乎所有传染病 技术建立简便
敏感、快速适用于早期诊断
传染病的实验室检查
● 抗-HBs为保护性抗体 其出现标志着HBV感染进入恢复期
● 抗-HBs对相同HBsAg亚型的HBV再感染有免疫力，
但对不同亚型的HBV保护力不完全。
（3）HBeAg
HBV C基因
乙 肝
从前C基因开始编码的蛋白质经加工分泌到细胞外即为HBeAg
前C区 C区
表 达
前C / C 蛋白 切割、加工
HBeAg
乙 肝
（6）HBV DNA
是病毒复制和传染性的最直接证据
检测方法：斑点杂交法、PCR法
（7）DNAP（DNA多聚酶）：是逆转录酶
是直接反应病毒复制的指标之一
（8）HBxAg：
HBxAg具有反向激活作用，可调控病毒基因转录水平， 并对宿主癌基因可能有激活作用。
●介绍三个概念： ① “两对半”
② 血清转换：HBeAg消失，出现HBeAb
抗HDV-IgG：既往感染的标志
HDVRNA是诊断HDV感染最直接依据
五、戊型病毒性肝炎
戊 肝
● HEV为单股正链 RNA病毒, 有2个以上的基因型。
HEVAg主要定位于细胞浆，血清中检测不到。
● 抗-HEV：
抗HEV-IgM：是近期内HEV感染的标志，有早期诊断价值 抗HEV-IgG：HEV感染后可长期存在，可用于流行病学调查
乙 肝
● HBsAg有抗原性而无传染性
HBsAg HBV S 基因 整合 肝细胞 DNA 持续表达
●HBsAg 的亚型
长江以北
adr
adw ayr
长江以南
新疆、西藏、内蒙等
ayw
乙 肝
（2）抗-HBs ● 出现时间：急性感染后期或HBsAg消失后
窗口期： HBsAg已消失，抗-HBs未出现， 只检出抗HBc和抗HBe
常见传染病的试验室检查共37页
46、我们若已接受最坏的，就再没有什么损失。——卡耐基 47、书到用时方恨少、事非经过不知难。——陆游 48、书籍把我们引入最美好的社会，使我们认识各个时代的伟大智者。——史美尔斯 49、熟读唐诗三百首，不会作诗也会吟。——孙洙 50、谁和我一样用功，谁就会和我一样成功。——莫扎特