小鼠常用实验技术-老鼠
小鼠实验的基本技术和方法
小鼠实验的基本技术和方法小鼠实验是生物实验中常用的实验方法之一，主要用于研究生物学、药理学、毒理学等领域。
以下将介绍小鼠实验的基本技术和方法。
一、小鼠的选材与饲养1.小鼠的选材：选取体重相近、同龄、同性的小鼠作为实验对象，并确保其健康状态。
2.小鼠的饲养：小鼠应在洁净、无臭、适温的实验动物房进行饲养。
提供适宜的饲料和清洁的饮水，保持适定的饲养环境，有规律地进行日常护理，确保小鼠的健康和舒适。
二、小鼠实验的基本技术1.注射技术：常用的小鼠注射技术包括静脉注射、皮下注射、腹腔注射等。
操作时应注意选用适当的注射器和针头，避免伤害到小鼠的内脏和组织。
2.静脉采血技术：静脉采血是获取小鼠血液样本的一种常用技术。
通常采用静脉穿刺的方式，先选定采血部位，再使用适当的器具（如针管）进行采血。
3.取脏器技术：小鼠解剖和取脏器是许多实验研究的必要步骤。
这包括心脏、肺、肝脏、脾脏等器官的解剖和获取。
操作时应尽量避免伤害到脏器，确保获取到完整可用的样本。
4.外周血细胞计数：通过采集小鼠的血液样本，使用血细胞计数仪进行细胞计数。
这是评估小鼠免疫功能、全血红细胞计数和血红蛋白浓度的重要方法，有助于评估一些疾病或药物对血液系统的影响。
三、小鼠实验的常用方法1.急性毒性实验：通过给小鼠灌胃或注射一定量的物质来观察其毒性反应，包括死亡率、体重变化、行为异常等。
根据实验设计的需要，可以使用LD50（半数致死量）等指标来评估物质的毒性。
2.慢性毒性实验：将小鼠长期接触一定浓度的物质，观察其对小鼠生理和行为的长期影响。
常用的实验方法包括饮水或饮食添加剂量法、慢性面毒研究等。
3.细胞培养和移植：通过培养小鼠的细胞，观察其在体外的生长和变化。
可以进行细胞增殖、凋亡、分化等方面的研究。
此外，还可以将小鼠的细胞或组织移植到其他物种中，进行异种移植实验。
4.基因改良和基因敲除：通过基因工程技术，改变小鼠基因组的特定基因，观察其对小鼠生理和行为的影响。
小鼠腹透液留取操作流程
小鼠腹透液留取操作流程小鼠腹透液留取操作流程简介小鼠腹透液留取是一种常用的实验技术，用于获取小鼠腹腔内积聚的液体样本。
本文将详细介绍小鼠腹透液留取操作流程。
实验前准备在进行小鼠腹透液留取之前，需要做以下准备工作：1.准备操作台和必要的实验仪器，例如注射器、针头、显微镜等。
2.检查实验仪器是否正常工作，并进行必要的消毒操作。
3.准备所需的实验材料，包括生理盐水、消毒剂、麻醉剂等。
操作流程步骤一：准备小鼠1.选择合适的小鼠，一般选择体重在20-30克之间的小鼠。
2.在实验开始前，确保小鼠处于健康状态，并进行必要的麻醉操作。
步骤二：定位1.将小鼠放置在操作台上，并固定其四肢，使其无法移动。
2.使用消毒剂清洁小鼠腹部，确保操作区域的卫生。
步骤三：麻醉1.用适量的麻醉剂对小鼠进行麻醉，确保小鼠处于无痛觉状态。
2.确保麻醉剂的剂量准确，以避免对实验结果的干扰。
步骤四：穿刺腹腔1.使用消毒的注射器和针头，从小鼠腹部中线向下穿刺腹腔。
2.缓慢注射生理盐水进入腹腔，以促使腹腔内积聚的液体进入注射器。
步骤五：收集样本1.注意观察注射器中是否有透明液体，若有则为腹腔积聚的液体。
2.缓慢将液体倒出至收集容器中，避免污染和样本丢失。
步骤六：处理样本1.将收集到的液体样本转移至离心管中。
2.进行离心操作，以分离样本中的细胞和固体颗粒。
实验后处理完成小鼠腹透液留取操作后，需要做以下处理：1.清洁实验区域，并进行必要的消毒操作。
2.注射器、针头等工具进行顺利处理和丢弃，避免再次使用导致交叉感染。
3.将离心后的样本进行适当的保存，以备后续分析。
注意事项在进行小鼠腹透液留取实验时，需要注意以下事项：1.操作前确保具备相关实验技巧，并遵守实验室安全规范。
2.使用的实验仪器和材料要保持清洁和消毒。
3.严格控制麻醉剂的剂量，避免对实验结果造成影响。
4.操作过程中要注意小鼠的安全和福利，尽量减少对其造成的不适和伤害。
以上就是小鼠腹透液留取操作流程的详细介绍，希望能对你的实验工作有所帮助。
小鼠荧光吞噬实验原理-概述说明以及解释
小鼠荧光吞噬实验原理-概述说明以及解释1.引言1.1 概述小鼠荧光吞噬实验是一种常用的实验方法，用于研究细胞内吞噬过程中的分子运输和代谢。
该实验利用小鼠体内携带的荧光信号标记基因，通过观察和分析小鼠体内特定细胞或组织的吞噬活动，以揭示细胞吞噬机制及其在生物体内功能的调控机制。
小鼠荧光吞噬实验的基本原理是将荧光标记基因导入小鼠体内的特定细胞或组织，并通过特定技术手段使标记基因在细胞内表达。
荧光标记基因通常与特定的信号分子或蛋白质相连，能够精确地标记细胞或组织中的吞噬相关结构或分子。
在荧光吞噬实验中，研究人员可以观察和记录荧光信号在特定细胞或组织中的表达和分布情况，从而了解吞噬过程中的分子运输路径和动力学过程。
通过对比荧光标记与非标记的细胞或组织，可以准确地定位和识别细胞吞噬结构，分析吞噬动力学和运输效率。
实验操作步骤包括小鼠基因导入、标记基因表达检测和分析、吞噬过程观察和定量分析等。
在实验过程中，研究人员需要注意实验材料的选择、实验条件的控制以及数据的准确记录和分析等方面的问题，以确保实验结果的可靠性和科学性。
小鼠荧光吞噬实验在生物医学研究领域具有重要的应用价值。
通过该实验方法，可以揭示细胞吞噬过程中的分子调控机制，探索细胞内代谢途径和信号转导通路的功能和调控方式，为相关疾病的诊断和治疗提供理论基础和实验依据。
同时，该实验方法还可以为其他吞噬相关的生物学研究和应用提供技术支持和实验平台。
综上所述，小鼠荧光吞噬实验是一种有力的实验方法，可以帮助我们深入了解细胞吞噬过程中的分子运输和代谢情况。
通过该实验方法，我们可以揭示细胞内吞噬机制的调控原理，为细胞生物学和生物医学研究提供重要的理论和实验基础。
1.2文章结构1.2 文章结构本文旨在介绍小鼠荧光吞噬实验的基本原理和实验操作步骤，并对实验结果进行分析，探讨实验的意义。
文章将分为三个主要部分。
第一部分是引言，将概述整篇文章的内容，并说明本文的目的。
第二部分是正文，将详细介绍小鼠荧光吞噬实验的基本原理，包括涉及的关键概念和基本原则。
小鼠cgrp elisa说明书
小鼠cgrp elisa说明书
小鼠CGRP ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种用于检测小鼠体
内CGRP（钙调素基因相关肽）水平的实验方法。
CGRP是一种神经肽，对于神经传导、炎症反应和血管舒张等生理过程起着重要作用。
ELISA是一种常用的实验技术，用于定量检测样本中特定蛋白质的
浓度。
该实验通常包括以下步骤：
1. 样本处理，收集小鼠血清或其他组织样本，并进行适当的处理，如离心，以获取清晰的样本液。
2. 样本预处理，将样本加入预先包被有CGRP抗体的微孔板中，使得CGRP能够与抗体结合。
3. 洗涤，洗涤去除未结合的物质。
4. 加入检测试剂，加入与CGRP结合的检测抗体，形成夹心式
结构。
5. 再次洗涤，洗涤去除未结合的检测抗体。
6. 底物反应，加入底物，使得酶与底物发生反应产生可测的信号。
7. 停止反应，加入停止液终止底物反应。
8. 测定光密度，通过光密度测定仪测定反应产生的颜色变化，从而确定CGRP浓度。
通过对比样本的光密度与标准曲线，可以计算出样本中CGRP的浓度。
这种实验方法可以帮助科研人员了解小鼠体内CGRP水平的变化，从而研究其在疾病发生和发展中的作用，以及评估药物对CGRP 水平的影响等。
需要注意的是，操作ELISA实验时需要严格按照说明书提供的步骤和条件进行，以确保实验结果的准确性和可重复性。
同时，实验中应注意生物安全和实验室规范，保护实验人员的安全。
实验小鼠的基本操作
实验⼩⿏的基本操作⼀、⼩⿏的抓取固定正确的抓取固定⼩⿏，是为了不损害⼩⿏健康，不影响观察指标，并防⽌被⼩⿏咬伤，保证实验顺利进⾏。
抓取固定时既要⼩⼼仔细，不能粗暴，⼜要⼤胆敏捷。
⼩⿏性情较温顺，⼀般不会咬⼈，⽐较容易抓取固定。
通常⽤右⼿提起⼩⿏尾巴将其放在⿏笼盖或其它粗糙表⾯上，在⼩⿏向前挣扎爬⾏时，⽤左⼿拇指和⾷指捏住其双⽿及颈部⽪肤，将⼩⿏置于左⼿掌⼼、⽆名指和⼩指夹其背部⽪肤和尾部，即可将⼩⿏完全固定。
在⼀些特殊的实验中，如进⾏尾静脉注射时，可使⽤特殊的固定装置进⾏固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。
如要进⾏⼿术或⼼脏采⾎应先⾏⿇醉再操作,如进⾏解剖实验则必须先⾏⽆痛处死后再进⾏。
⼆、⼩⿏的采⾎1．剪尾采⾎⼿拇指和⾷指从背部抓住⼩⿏颈部⽪肤，将⼩⿏头朝下，⼩⿏保定后将其尾巴置于50°热⽔中浸泡数分钟，使尾部⾎管充盈。
擦⼲尾部，再⽤剪⼑或⼑⽚剪去尾尖1～2mm，⽤试管接流出的⾎液，同时⾃尾根部向尾尖按摩。
取⾎后⽤棉球压迫⽌⾎并⽤6%液体⽕棉胶涂在伤⼝处⽌⾎。
每次采⾎量0.1ml。
2．摘除眼球采⾎左⼿抓住⼩⿏颈部⽪肤，轻压在实验台上，取侧卧位，左⼿⾷指尽量将⼩⿏眼周⽪肤往颈后压，使眼球突出。
⽤眼科弯镊迅速夹去眼球，将⿏倒⽴，⽤器⽫接住流出的⾎液。
采⾎完毕⽴即⽤纱布压迫⽌⾎。
每次采⾎量0.6～0.1ml。
3．⼼脏采⾎⼩⿏仰卧位固定，剪去胸前区被⽑，⽪肤消毒后，⽤左⼿⾷指在左侧第3～4肋间触摸到⼼搏处，右⼿持带有4~5号针头的注射器，选择⼼搏最强处穿刺，当刺中⼼脏时，⾎液会⾃动进⼊注射器。
每次采⾎量0.5～0.6ml。
4．断头采⾎右⼿⽤剪⼑剪断⼩⿏颈部约1/2～4/5，让⾎液流⼊试管。
此法可采⾎0.8～1.2ml。
三、⼩⿏给药1．⽪下注射给药将药液推⼊⽪下结缔组织，经⽑细⾎管、淋巴管吸收进⼊⾎液循环的过程。
作⽪下注射常选项背或⼤腿内侧的⽪肤。
操作时，常规消毒注射部位⽪肤，然后将⽪肤提起，注射针头取⼀钝⾓⾓度刺⼊⽪下，把针头轻轻向左右摆动，易摆动则表⽰已刺⼊⽪下，再轻轻抽吸，如⽆回⾎，可缓慢地将药物注⼊⽪下。
用小鼠做实验的基本知识
用小鼠做实验的基本知识1．实验动物环境可分为：外环境。
是指实验动物设施或动物实验设施以外的周边环境。
如气候或其他自然因素、邻近的民居或厂矿单位、交通和水电资源等。
内环境。
指实验动物设施或动物实验设施内部的环境。
内环境又细分为大环境和小环境。
前者是指实验动物的饲养间或实验间的整体环境状况;后者是指在动物笼具内，包围着每个动物个体的环境状况，如，温、湿度，气流速度，氨及其他气体的浓度，光照，噪音等等。
实验动物环境条件,对动物的健康和质量,以及对动物实验结果有直接的影响，尤其是高等级的实验动物，环境条件要求严格和恒定。
因而，对环境条件人工控制程度越高，并符合标准化的要求，生活这样环境中的动物，就越具有质量上的保证，一致性的程度就越高，动物实验结果就有更好的可靠性和可重复性，也使同类型的实验数据具有可比较的意义。
影响实验动物环境的因素及其控制：气候因素。
包括有温度、湿度、气流和风速等。
在普通级动物的开放式环境中，主要是自然因素在起作用，仅可通过动物房舍的建筑座向和结构、动物放置的位置和空间密度等方面来作有限的调控。
在隔离系统或屏障、亚屏障系统中的动物，主要是通过各种设备，对上述的因素予以人工控制。
在国家制定的实验动物标准中，对各质量等级动物的环境气候因素控制，都有明确的要求。
理化因素。
包括有光照、噪音、粉尘、有害气体、杀虫剂和消毒剂等。
这些因素可影响动物各生理系统的功能及生殖机能，需要严格控制，并实施经常性的监测。
普通级动物要在适当的范围内，采取有效的措施，对此予以监控;尤其是清洁级以上等级的动物，应通过实验动物设施内的各种设备，按国家颁布的各个等级标准，严格予以控制。
生物因素。
是指实验动物饲育环境中，特别是动物个体周边的生物状况。
包括有动物的社群状况、饲养密度、空气中微生物的状况等。
例如，在实验动物中许多种类，都有能自然形成具有一定社会关系群体的特性。
对动物进行小群组合时，就必须考虑到这些因素。
不同种之间或同种的个体之间，都应有间隔或适合的距离。
小鼠实验基本操作方法
小鼠实验基本操作方法
小鼠实验的基本操作方法包括以下步骤：
1. 前期准备：清洁实验室，准备所需实验材料、设备和药物。
2. 选用适龄小鼠：根据实验要求，选择适龄、健康、性别一致的小鼠。
3. 给小鼠标记：在小鼠身上标记或剪耳通以区分实验组。
4. 麻醉小鼠：根据实验需要使用合适的麻醉方法使小鼠进入无痛觉状态。
5. 采集样本：根据实验要求，采集小鼠的血液、组织或骨髓等样本。
6. 给予处理：根据实验设计，给予小鼠不同的药物、生物制剂或手术处理。
7. 观察现象：在实验过程中，观察小鼠的行为、生理指标等相关现象。
8. 数据统计：根据实验需要，利用合适的工具进行数据处理、统计和分析。
9. 处理小鼠：实验结束后，根据实验需要给予小鼠适当的处理措施，如恢复麻醉状态或进行安乐死。
10. 清洁消毒：将实验室、设备、材料等进行清理和消毒，确保实验环境的卫生和安全。
小鼠悬尾实验报告
小鼠悬尾实验报告
小鼠悬尾实验报告
小鼠悬尾实验是一种老鼠行为学研究常用的试验方法，主要测量老鼠身体活动、体力状况和性能水平。
它通常被用来衡量老鼠利用自身体力悬挂在不断增加重量或其他外力的悬架上的时间，以及持续悬挂的时间之后的表现的行为。
实施小鼠悬尾实验的步骤主要包括：
（1）安定：老鼠应置入专业品质的小室内，使用固定设备将其彻底安定；
（2）训练：将一种负重设备放置在小室内，教导老鼠抓取负重设备，通过多
次联系训练其负重能力；
（3）测定：将老鼠连接到负重设备并量测老鼠悬挂时间；
（4）观测：观察老鼠悬挂时间之后的表现，并记录老鼠的行为情况。
通过这一实验，就可以大致了解一个老鼠的身体活动状况，也可用来衡量其体力、精力和抗逆性能。
相比定点法和行星轨道转动试验，悬尾实验记录结果速度更快，可以更便捷有效地发现老鼠行为改变的原因，是老鼠行为研究的老鼠选择。
小鼠dc细胞提取原理
小鼠dc细胞提取原理小鼠DC细胞提取是一种常用的实验技术，用于研究小鼠的树突状细胞（Dendritic Cell，简称为DC细胞）。
DC细胞是免疫系统中重要的抗原呈现细胞，具有调节和激活免疫反应的功能。
以下是小鼠DC细胞提取的原理和步骤。
1. 小鼠准备：选择适合的小鼠品系，根据需要的DC细胞类型进行选择。
小鼠可以通过麻醉和牺牲来收集组织。
2. 组织切割：使用无菌器械将收集的小鼠组织切割成小块，并将其转移到称重器皿中，以便进一步分类和处理。
3. 组织消化：将组织块置于含有适当酶解酶的消化液中（如胰蛋白酶），并在37摄氏度的恒温搅拌条件下进行消化。
消化时间根据组织类型和实验需求而定。
4. 细胞分离：经过适当的消化时间后，将消化液过筛或过滤，并使用无菌操作将细胞转移到离心管中。
离心操作可分离细胞悬浮液和残留的组织碎片。
5. 密度梯度离心：为了分离出DC细胞，可以将细胞悬浮液进行密度梯度离心，以分离不同细胞类型。
常用的密度梯度离心介质有离心液（如Ficoll）。
6. DC细胞纯化：通过离心梯度离心后，可以通过其他细胞纯化方法（如磁分选或流式细胞术）进一步纯化DC细胞，以获得更纯的细胞群体。
7. DC细胞检测：通过染色或使用特定的抗体标记方法，可以对提取的DC细胞进行检测和鉴定。
这可以包括对DC细胞特异标志物的检测，如CD11c、CD11b、CD80和CD86等。
小鼠DC细胞提取原理涉及多个步骤，从选择小鼠到最后的细胞检测，每一步都至关重要。
正确操作和技术的运用将有助于获得高质量、纯净的小鼠DC细胞用于后续的实验研究。
小鼠的基本实验操作
小鼠的基本实验操作小鼠是最常用的实验动物之一，其体型较小、繁殖能力强、生命周期短、易于饲养和管理，因此被广泛用于生物医学研究中。
以下是小鼠实验的基本操作。
一、小鼠的选育与管理1.小鼠的品系选择：选择适合研究目的的小鼠品系，例如常用的C57BL/6、BALB/c等。
2.饲养环境控制：为小鼠提供适宜的饲养环境，包括控制温度、湿度、光照和气流等。
3.饲料和水的供给：提供适宜的饲料和清洁的饮用水，确保小鼠的正常营养摄入。
二、小鼠的配对与繁殖1.配对：选取性成熟健康的雄性和雌性小鼠，进行自然配对或人工配对。
2.孕期管理：雌性小鼠受孕后，需要监测妊娠情况，并做好相应的饮食和环境管理。
3.胚胎获取：根据需要，可以选择在特定生理时期采集小鼠胚胎，用于后续的胚胎移植或体外培育等实验。
三、小鼠手术操作1.解剖手术：通过解剖手术，可以获取特定组织或器官的标本，从而进行病理学和生理学研究。
2.移植手术：如肾移植、心脏移植等，用于研究器官功能和移植排斥反应等问题。
3.慢性操作：如植入插管或取样等，用于定期获取生理参数的连续监测。
四、小鼠的药物处理1.静脉注射：通过静脉注射给小鼠药物，用于研究药物的药理学和药效学等。
2.腹腔注射：通过腹腔注射给小鼠药物，多用于给予抗肿瘤药物、化疗和免疫细胞的移植等。
3.给药途径选择：根据研究目的和药物性质，选择合适的给药途径，如口服、皮下注射等。
五、小鼠的行为测试1. 空间记忆测试：如Morris水迷宫，用于评估小鼠的空间记忆能力。
2.暗箱测试：用于评估小鼠的焦虑状态和厌恶反应。
3.Y型迷宫测试：用于评估小鼠的学习和记忆能力。
六、小鼠的标本采集和检测1.组织标本采集：根据研究需要，取出小鼠的特定组织，如血液、脑组织等。
2. 分子生物学检测：如PCR、Western blot等，用于检测基因表达和蛋白质水平的变化。
3.组织病理学检测：用于观察和评估小鼠组织病变情况，如光镜下观察和组织染色等。
动物实验PPT课件
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注意点： 抓取小鼠时动作要 迅速，要轻 防止被小鼠转过头 咬，抓其颈后皮肤要 多 如果被பைடு நூலகம்，应立即 挤出血液，清水冲洗
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2、性别的判定
未成熟鼠：生殖器发 育不明显，肛门与生 殖器之间的距离来区 分。远——♂、近— —♀。
成年鼠：雄性卧位可 见睾丸，雌性可见腹 部有5对乳头。
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3、小鼠的给药操作
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1、抓取和固定： 抓取：习惯用右手者，
首先用右手从笼盒内将 小鼠尾中部或基部抓住 (不可抓尾尖)，并提起或 放在左手上。
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固定
先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台向后拉。 7
在鼠向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳 和颈部皮肤。
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将小鼠置于左手掌心，无名指和小指夹其背部皮
肤和尾部，即可将小鼠完全固定。
（1）灌胃
左手固定小鼠使其头部向上，右 手持灌胃器。头后仰使口腔与食 道成一直线，将灌胃针沿一侧口 角进针，紧贴咽后壁慢慢插入食 道滑入动物的胃内，进针2/3后灌 生理盐水0.5ml。
注意事项：
抓取老鼠时应是鼠成竖直线
灌胃成功时，所遇阻力较小。若感到阻 力或动物挣扎时，应立即停止进针或将 针拔出，以免损伤或穿破食道以及误入 气管。
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穿刺前，碘伏消毒眼周皮毛，左手固定小鼠，右手穿刺。固 定小鼠的方式如照片所示：应让眼球凸出，这样才能保证在 穿刺时不会使小鼠致盲，同时达到压迫阻止静脉回流的目的。
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事先准备好毛细玻璃管（用手折断，我个人习惯用4厘米长左右的），玻璃管 平端先沿着鼻侧眼角慢慢滑动至眼球正下方的眼皮内，此时左手微微顺时针旋 转，使小鼠头部相对位置微向右下偏转，即相当于玻璃管刺入时是对着口腔方 向的，这样做可进一步避免小鼠失明。如上操作时，右手及毛细管保持不动。 当小鼠头部位置调整妥当时，毛细玻璃管刺入，这个动作应稳且迅速。一般情 况下，即会有血液流出，此时可快速拧搓毛细管，进一步破坏内眦静脉丛，加 26
小鼠心脏灌注原理
小鼠心脏灌注原理
小鼠心脏灌注是一种常用的实验技术，用于研究心脏的生理和病理过程。
它通过将液体药物或染料注入小鼠心脏，以模拟人类心脏的功能和疾病，从而帮助科学家更好地了解心脏的结构和功能。
小鼠心脏灌注的原理是将一种特定的液体通过导管或注射器注入到小鼠的心脏中。
这种液体可以是生理盐水、染料或药物溶液。
在实验进行之前，需要先将小鼠麻醉，然后进行剖腹手术，将心脏暴露出来。
在注射液体之前，需要先找到适当的注射位置。
一般来说，可以选择在主动脉或者心室的特定位置进行注射。
这个位置通常是在心脏的左侧，靠近心尖的地方。
当找到合适的位置后，可以使用注射器或导管将液体缓慢、均匀地注入心脏。
为了确保注射的准确性和稳定性，可以使用显微镜或其他放大设备进行观察和控制。
在注射液体的过程中，需要注意注射速度和注射压力，以避免对心脏造成损伤。
注射液体的速度通常是缓慢而稳定的，以确保液体能够充分地进入心脏血管系统。
注射完成后，可以通过观察心脏的颜色变化或染料在心脏中的分布情况来评估注射的效果。
这些观察结果可以提供关于心脏结构和功能的重要信息，有助于科学家研究心脏疾病的发生机制和治疗方法。
小鼠心脏灌注技术在科学研究中起着重要的作用。
通过模拟人类心脏的功能和疾病，科学家们可以更好地了解心脏的生理和病理过程，为心脏疾病的诊断和治疗提供更有效的方法和手段。
同时，小鼠心脏灌注技术也为药物研发和毒性测试提供了重要的工具和平台。
综合实验小鼠实验指导书 (1)
实验指导书教学单位：化学与生物工程学院课程名称：实验动物综合实验面向专业：生物类专业电子科技大学中山学院2010年4月实验指导书实验名称：实验一实验动物伦理及综合技术简介学时安排：3学时实验类别：演示性实验要求：必做一、实验目的和任务1、对实验动物的伦理和福利有一个初步认识。
2、对实验动物的饲养相关技术的掌握。
3、学习小鼠性别的鉴定。
二、实验原理介绍在动物福利和伦理理论的指导下，对实验动物进行合理管理。
三、实验设备及材料介绍1、小白鼠（中国杂交种、昆明鼠），SPF级老鼠（带菌少、且菌种明确）。
2、小鼠饲料：普通的实验动物饲料。
3、小鼠垫料：来自木材的木屑，再灭菌、干燥。
4、小鼠水：蒸馏水。
5、小鼠饮水瓶。
6、小鼠笼子。
四、实验内容和步骤1、选取一个干燥洁净的小鼠笼子。
2、在笼子里放适量的垫料备用（无恒温条件的实验室，应根据温度来定垫料的量）。
3、把小白鼠一只一只的捉到刚准备好的笼子里，抓小鼠时应捉鼠尾部后1/3的部位，中等力度。
4、性别鉴定：雄性♂，睾丸突出，阴茎距肛门比较远。
雌性♀，有阴道孔，且离肛门较近，腹部能明看到有5对乳头。
5、把小鼠一只一只放进干净的笼子里后，盖好笼盖，把小鼠饮水瓶中水作倒掉，把饮水瓶洗干净，然后向瓶内加3/4左右的自来水。
6、称取饲料为大约每只老鼠3-4g，放在笼子的饲料槽中，放好小鼠笼。
7、倒掉上次鼠笼里垫料，洗净笼子，吹干。
8、做好实验台清洁，给小鼠一个优雅的生活环境。
五、实验结果记录小鼠饲料的称取重量六、注意事项和要求1、抓小鼠一定要按照科学的方法，对于较活泼的小鼠应给予适当的处理，若不谨被小鼠咬了，最好在6小时内打疫苗。
2、在换小鼠笼的过程中，若有小鼠跑出笼子外，不要惊慌，应及时做出处理。
七、作业及预习要求预习下次实验并完成预习报告。
八、参考书目窦如海. 《实验动物与动物实验技术》, 山东科学技术出版社, 2006杨萍. 《简明实验动物学》, 复旦大学出版社，2003魏伟, 吴希美, 李元建.《药理实验方法学》(第4版)，人民卫生出版社，2010九、思考题谈谈你对实验动物的初步认识？对于教师讲解后对实验动物的认识有何新的体会和变化？十、感想实验指导书实验名称：实验二实验动物的养育及管理技术学时安排：3学时实验类别：操作性实验要求：必做一、实验目的和任务1、初步掌握实验动物的抓取及固定。
老鼠实验浓度设定
老鼠实验浓度设定首先要选对小鼠，一般小白鼠出生4周左右，体重18-22克，太大太小都不适合试验。
给药方式一般为口服、腹腔注射和尾静脉注射，口服和腹腔药液量为100ul/10g，尾静脉注射总量控制在50ul，给药剂量为治疗剂量，如果不知道治疗剂量，就按照该药物LD50的十分之一量给药，如果要设高中低剂量组，则按30%增减，同时要设一个明确药效的阳性对照组和一个不给药的阴性对照组，给药周期按治疗需要，所有组每组需6-8只小鼠，最后指标取平均值并做T检验，大致就是这样。
槲皮素肺、心含量的测定1. 药动物学试验实验鼠（150g~200g，265±？？g表达准确些）给药前禁食12h，自由饮水。
用0.5%的羧甲基纤维素钠溶液分别将橙皮素和甘草次酸制成悬浮液，高浓度（溶液组成：槲皮素+0.5%羧甲基纤维素钠）灌胃给药（橙皮素）20mg.kg-1，低浓度（溶液组成：槲皮素+0.5%羧甲基纤维素钠+甘草次酸）灌胃给药槲皮素)10mg.kg-1。
空白对照组实验鼠灌胃0.5%羧甲基纤维素钠。
将实验鼠按三雄三雌随机分组，每组共6只。
按要求给药，根据分布相、平衡相、消除相分别在给药后1.5小时、3小时、4小时、空白组为灌药后1小时宰杀实验鼠，迅速取出肺、心组织，用生理盐水冲洗，置于冻存管中（放置分别是1雌、1雄、2雌、2雄共4支离心管），于冰箱中冷冻保存。
2.溶液的配制槲皮素储备液：精密称取橙皮素25mg，置于50ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容，制得500ug.ml-1的橙皮素贮备液，使用时用甲醇稀释至所需浓度。
橙皮素内标液：配制橙皮素浓度为0.2mg.ml-1溶液50ml，即0.2 mg.ml-1*50ml=10mg，槲皮素百分含量97%，则将M槲皮素=10mg/97%=0.0103g溶解于甲醇中配制成浓度为0.2mg.ml-1的橙皮素内标液.3. 组织样品的处理从冰箱中取出肺、心组织样，解冻，将组织先剪成几大片，剔除组织周围其他杂质成分如血块等，再剪碎，滤纸吸干。
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Subcutaneous Injection in Mouse
The most common method for immunology studies
Tools for Subcutaneous Injection in Mouse
75% alcohol cotton ball for surface disinfection 25G 1 “ needle with 1 ml syringe for injection
Approximate 100 microliters can be collected
Flex the foot of the mouse to reduce the flow of blood back to the puncture site
A cotton ball is applied to the puncture site to stop further bleeding
Blood Collection From Tail in Mouse
For collection of small amount of blood (Approximate 0.1 ml )
Tools for Blood Collection from Tail
75% alcohol cotton ball for surface disinfection Small plastic bottle with 1/2 cm diameter holes in both ends as mouse restrainer Scissors Pipetteman and tips A vial for blood collection
Laboratory Animal Handling Technique
- Mouse - Rat - Rabbit
Objective
To comply with the Animal Welfare Ordinance and avoid mishandling of animal in research To provide basic concepts of animal handling technique to new animal user While offering our concept and techniques to our animal user, we also encourage comments from experienced animal users. By doing so, we would enrich our knowledge in the field of laboratory animal research on both sides and further benefit animal welfare as well as the credibility of research result in our university
Pick up a nude mouse and spin it’s tail to put it in a faint condition
Grasp the loose skin on the back of the mouse from ears along the legs and restrain the legs with your ring finger and little finger
Place a mouse on a cage lid and grasping the loose skin behind the ears with your thumb and forefinger
As soon as the mouse’s head is restrained, the mouse can be picked up and the tail secured within your ring finger and little finger
This method is used of multiple samples are taken in the course of a day It can also be applied on rats, hamsters, gerbils and guinea-pigs
Tools for blood collection from Saphenous vein in mice
Laboratory Animal Handling Technique Mouse
A. Blood collection from tail vein B. Blood collection from orbital sinus C. Blood collection from cardiac puncture D. Blood collection from saphenous vein E. Intraperitoneal injection F.Subcutaneous injection G. Oral Feeding H. Sexing
Placing a mouse on a cage lid and grasping the loose skin behind the ears with your thumb and forefinger
Place the mouse in the restainer
Pull out the leg and removed the hair by a assistant
Amputate the tip of the mouse tail by scissors
Massage the tail and collect blood by pipetteman
Blood Collection From Orbital Sinus in Mouse
Should apply anesthetic before blood withdraw A convenience and easy apply method for blood collection in mouse Collect amount up to 0.5 ml
Anesthetize a mouse by intraperitoneal injection of Hypnorm
Disinfect the thorax area with 75% alcohol cotton ball
Search for the maximum heart palpitation with your finger
Tools for Blood Collection from Orbital Sinus in Mouse
75% alcohol cotton ball for surface disinfection Hypnorm for general anesthetic 27 G needle with 1 ml syringe for injection Glass capillary tube and vial for blood collection
Tools for Cardiac puncture in Mouse
75% alcohol cotton ball for surface disinfection Hypnorm used as anesthetic 27G needle with 1 ml syringe for injection 24G needle with 3 ml syringe for blood withdraw
Anesthetize a mouse by intraperitoneal injection of Hypnorm
Use a sharp end glass capillary tube to penetrate the orbital conjunctiva and rupture the orbital sinus
Use a 24 G 1” needle to puncture the vein and release blood from the saphenous vein
Use a Microvette or a pipetteman with tip to collect blood from the saphenous vein
Insert a 24G 1” needle through the thoracic wall at the point of maximum heart palpitation
Withdraw blood slowly by your right hand
Blood Collection From Saphenous Vein in Mouse Nhomakorabea
75% alcohol cotton ball for surface disinfection 50 ml syringe tube with small holes at the end as restrainer a scalpel and shaver for remove of hair 24 G 1 “ needle for release of blood tips and pipetteman for blood collection
Placing a mouse on a cage lid and grasping the loose skin behind the ears by the thumb and forefinger