实验六家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用观察

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离体小肠平滑肌生理特性及药物 作用的观察
遵义医学院 药理学教研室
实验目的
1.学习一种离体组织器官实验方法。 2.观察乙酰胆碱、阿托品、去甲肾上腺素、酚妥拉明、 Ca2+、温度、酸碱度等对离体小肠平滑肌的作用。 3.观察并分析平滑肌活动的生理特性及理化环境改变 对它的影响。
实验原理
1.消化道平滑肌的生理特性
2. 取肠时为什么采用击昏家兔而不在麻醉下进行? 3. 为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化?其机理是什么?
下次课内容:氨在肝性脑病发病中的作用(第一实验室)
NA(-)运动、分泌
激动α受体——抑制肠道平滑肌收缩
副交感神经
Ach(+)运动、分泌
激动M受体——兴奋肠道平滑肌收缩
实验动物
家兔 体重?Kg 雌/雄
实验材料
1. 器材
恒温平滑肌槽、BL-420N系统、张力换能器、手术剪、眼科剪、 眼科镊、小烧杯、污物杯、平皿、丝线
2.试剂和药品
台氏液、0.0来自百度文库%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、 0.01%阿托品溶液、0.1%酚妥拉明溶液、0.01%盐酸溶液、 10-3M氢氧化钠溶液
实验步骤
1.准备工作
1)外面大槽中添 加自来水;
2)内部4个小槽均 添加台氏液;
3)调节温度至 38℃,加热,备用。
实验步骤
2.标本制备
1)取十二指肠及其邻近上 段小肠(约20-30cm),温 热台氏液洗净肠管内容物。
2)将肠段分为10段(菱形), 每段约3-4cm,每组取一段 至于温热台氏液中。
①兴奋性较低,收缩缓慢。 ②自动节律性,但频率慢且节律不稳定。 ③紧张性。 ④较大伸展性。 ⑤对电刺激不敏感,但对机械牵张、温度和化学刺激 特别敏感。
实验原理
2. 消化道的神经支配
肌间神经丛
内在神经
(壁内神经丛) 粘膜下神经丛
控制消化道运动
消化道腺体分泌、肠内物 质吸收、局部血流控制
外来神经
交感神经
实验步骤
4)观察氯化钙对肠段收缩的影响 无钙台氏液 (第6张图)
台氏液
先恢复相对正常的波形,在将 其中的台氏液换成无钙台氏液
无钙台氏液
截图 并清
洗3 遍
4.观察项目
实验步骤
5)观察温度对肠段收缩的影响 室温台式液 (第7张图)
先恢复相对正常的波形,在将 其中的台氏液换成室温台氏液
截图 保存
台氏液
室温台氏液
4. 药物应滴在肠管附近,各药用量系参考剂量,若效果不明显, 可以增补加药,但不可一次过多,以免引起不可逆反应。
5. 每次加药出现反应后,必须立即放掉含药液的台氏液,并冲 洗至少三次,以免引起不可逆反应。待肠管恢复稳定活动后, 再观察下一项目。
思考题
1. 哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良好状态需具备哪些基 本灌流条件?
实验步骤
3.仪器的连接与设置
1)两端用细线结扎,一端系于通 气管的挂钩上,另一端与张力换能 器相连。
2)启动计算机,在“实验模块”中 选择“消化”中“消化道平滑肌生理 特性”项,调节参数,开始记录。
4.观察项目
实验步骤
1)自动节律收缩
2)观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 乙酰胆碱;阿托品后乙酰胆碱
3)观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 去甲肾上腺素;酚妥拉明后去甲肾上腺素
4)观察氯化钙对肠段收缩的影响 无钙台氏液
5)观察温度对肠段收缩的影响 室温台式液
6)观察酸碱度对肠段收缩的影响 盐酸后氢氧化钠
4.观察项目
实验步骤
1)自动节律收缩(第1张图)
2)观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 乙酰胆碱(第2张图) ;阿托品后乙酰胆碱(第3张图)
+乙酰胆碱
截图并 清洗3遍
+阿托品
+乙酰胆碱
不洗
截图
并清 洗3 遍
4.观察项目
实验步骤
3)观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 去甲肾上腺素(第4张图); 酚妥拉明后去甲肾上腺素(第5张图)
+去甲肾上腺素
截图并 清洗3遍
+酚妥拉明 不洗
+去甲肾上腺素 截图 并清
洗3 遍
4.观察项目
即要有
正常+处理因素
图2.阿托品后乙酰胆碱对家兔离体小肠平滑肌收缩曲线的影响
两部分组成
注意事项
1. 穿线系肠管时,速度要快,结扎牢固,应在温热台氏液中进 行。
2. 肠管勿牵拉过紧或过松,与张力换能器的连线必须垂直,不 得与浴槽管壁、通气塑料管接触,以免磨擦。
3. 浴槽中液体的量以高过肠段为准,并保持液面高度恒定。
4.观察项目
实验步骤
6)观察酸碱度对肠段收缩的影响 盐酸后氢氧化钠 (第8张图)
+HCl
+NaOH
不洗
截图并 并存
实验结束 后将恒温 平滑肌槽 内的液体 倒掉并清 洗实验槽 三次以上
实验结果
要求:共截图8张,有图序和图题。
举例: 1.一个处理因素的,如右图 2.两个处理因素的,如下图
图1.乙酰胆碱对家兔离体小肠平滑肌收缩 曲线的影响
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