CLSI标准血培养推荐指南

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血培养的原则和流程之消毒篇

• 感染性心内膜炎 • 金葡感染菌血症但非感染性心内膜炎相关定义：Blood Culture Set：一套组合的血培养瓶，其接种的是同一来源的标本（同一穿刺）The combination of blood culture bottles or tube into which a single blood specimen is inoculated
样本采集和运输
• 血培养采集部位
• 血培养应被采集自静脉而非动脉 • 采自静脉植入装置如留置导管或留置口的血培养会伴有高的污染率 • 如果血培养是通过静脉植入管道采集的，则不必
• 弃去起始部分的血液，或 • 使用生理盐水冲洗管道以去除残留的肝素或其他抗凝剂
• 在皮肤消毒前，血培养瓶的橡皮塞需使用70%异丙基酒精消毒并干燥 • 采血部位皮肤消毒步骤：
抽取血培养的数量
• • • 最佳的血培养数量是不确定的，但是只抽单瓶的血培养是不够的多套的血培养可以帮助区别血培养假阳性（如皮肤污染等）建议：对于可能的心内膜炎患者，起始采集3套血培养，如果在24小时内仍报告为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一共为5套。
方法和步骤 –影响血液标本中病原菌检出率的重要因素
• 先使用70%异丙基酒精消毒并干燥 • 再进行正式消毒步骤 • 整个过程严格遵从无菌操作，不允许在消毒后按压静脉，除非带有无菌手套
• 许多研究表明采血和接种是否需要换针头并无明显的污染率差异，更换针头会增加针刺伤的风险
定义：污染：血培养中生长的细菌是在样本采集或操作过程中被带入培养的，而非来自病人的血液
样本采集和运输 • 血培养的数量
• 研究表明，采用全自动的血培养系统每套血培养采血20ml时
• 一套检出率：65% • 二套检出率：80% • 三套检出率：96%

静脉采血顺序

静脉血采集顺序是目前在很多检验科还存在争议或困惑的问题。

美国临床和实验室标准协会（CLSI）2010年发布了H3-A6指南，其中对静脉采血顺序给予了指导。

北京协和医院参考该指南，制定《检验样本留取及采集指南》，其中规定的血标本采集顺序如下。

1为血培养管；2为无添加剂管(白帽)，适用微量元素或特殊项目；3为凝血项目管(蓝帽)；4为血沉管(黑帽)；5为血清管(红帽或黄帽)；6为肝素血浆管(绿帽)；7为EDTA 管(紫帽)；8为抑制血糖酵解管(灰帽)。

采血注意事项：（1）特殊情况采用蝶翼方式采血，且无血培养管和微量元素等特殊项目时，第一管应为白帽管，作为丢弃管，也可送检生化免疫项目，其他顺序同直针穿刺采血。

（2）在实际工作中，如患者静脉条件较差，有可能采血不足，血培养优先考虑需氧管，其他管应首先考虑凝血(蓝帽) 和血沉(黑帽) 检测管，因为这2种标本对血量要求最严格，且二者抗凝剂均为枸橼酸钠。

该指南与H3-A6的不同点：H3-A6指南推荐的静脉血采集顺序为：（1）血培养管；（2）凝血管(如蓝帽管)；（3）血清管，有或没有促凝剂，有或没有分离胶(如红帽管)；（4）肝素管，有或没有血浆分离胶(如绿帽管)；（5）EDTA管，有或没有分离胶(如浅紫帽管，珍珠色帽管)；（7）含糖酵解抑制剂管(如灰帽管)。

协和医院采集顺序与指南原文略有出入的地方是，将血沉管排在了凝血管后。

这是基于以下几方面考虑，一为原指南中未推荐血沉管顺序；二为血沉管抗凝剂与凝血管抗凝剂均为枸橼酸纳，只是浓度和量有差异；三为血沉管与凝血管类似，严格要求采样量，故在可能采样量不足的情况下应优先考虑。

另一点不同是，在H3A6指南中未推荐白帽管，也就是无添加剂管的采样顺序。

目前，白帽采血管(无任何添加剂，也可是采血管制造商推荐的任何一种可避免对微量元素检测污染的无添加剂采血管) 在临床实验室中主要用于微量元素，或易受各类抗凝剂或促凝剂干扰的检验项目的血液样本采集。

临床微生物血培养操作指南最新版

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(优选)临床血培养的指导原则

皮肤和血培养瓶的消毒方法
美国CLSI推荐皮肤的消毒方法为：
感染性心内膜炎采血方法
血培养采血套数及血量
• CLSI要求每次采集2-3套标本,每套应包括一个需氧培养瓶,一个厌氧培养瓶
• 一个静脉穿刺点只能采集1套血培养，采集第2套血培养应该选择第2 个静脉穿刺点
• 成年病人不能只采1瓶血培养标本，采血量不足和只做1套血培养所得得结果是很难正确解释的
Cockrill2004年报告:163位病人,血培养仪
How reliable is a negative blood culture result?
Australia, 2007
• Adequate blood culture volume
• < 1 month: ≥ 0.5 mL • 1 month – 36 months: ≥ 1.0 mL • ≥ 36 months: ≥ 4.0 mL
采血套数及血量
1套(20ml)
2套(40ml)
检出率
65%
80%
3套(60ml) 96%
血培养在需氧瓶和厌氧瓶中的分配及血量
• CLSI建议常规的血培养应该包括至少一个需氧培养瓶和一个厌氧培养瓶（称“一套”）
• 最近的研究表明：用需氧瓶加厌氧瓶的组合检测出的葡萄球菌，肠杆菌科菌中某些菌和苛氧菌比一对需氧瓶多。
•
对于婴幼儿患者，采血量不超过患者总血量的1％
体重kg
<=1 1.1-2 2.1-12.7 12.8-36.3 >=36.3
总血量ml
50-99 100-200 >200 >800 >2200
第一套取血量ml（第二套取血量ml 占全身血量％）

微生物CLSI文件集锦（你想要的都在这里）

微生物CLSI文件集锦（你想要的都在这里）说起临床微生物的CLSI文件，大家首先想到的就是CLSI M100S——《抗微生物药物敏感性试验的执行标准》。

但是其实，与临床微生物相关的CLSI文件很多，截至2017年7月，已多达43个。

下面，小编就给您简单介绍一下吧。

1、M02-A12:Approved Standard中文：抗菌药敏试验的性能标准英文：Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests内容与解释：介绍药物纸片扩散法的质量控制标准和最新折点标准。

2、M06-A2: Approved Standard中文：脱水MH琼脂的评估程序英文：Protocols for Evaluating Dehydrated Mueller-Hinton Agar内容与解释：略3、M07-A10:Approved Standard中文：需氧菌稀释法抗菌药物敏感性试验英文：Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility T ests for Bacteria That Grow Aerobically内容与解释：描述了肉汤稀释法和琼脂稀释法，而且还包含这些方法的标准化操作流程和CLSI推荐方法的性能，局限性，适应性。

4、M11-A8:Approved Standard中文：厌氧菌抗菌药物敏感性试验英文：Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria内容与解释：在过去的几年内，大部分厌氧菌的耐药表型都发生了很大的改变，导致了许多菌种的经验用药的面临很大的挑战。

对于厌氧菌，琼脂稀释法仍然是参考方法，对于调查研究和科研同样都适用。

而且其他的方法的对比标准也进行了说明，肉汤稀释法也应用于临床实验室，但是现在对脆弱拟杆菌和一些抗生素没有标准。

再谈真空采血管抽血顺序的问题_蜗牛

再谈真空采血管抽血顺序的问题在检验工作中，对于一次采血多管血液分配的顺序一直有一些争议，针对这个问题，在丁香园网站，还有一篇专门针性的文章《7家争言：真空采血管的抽血顺序到底哪个先哪个后》，作者是遵义医学院第五附属（珠海）医院的钟泽填。

文章很全面的搜集了不同教材中的不同标准。

以这篇文章为基础，我想再做一下补充和说明。

我们先分别来看一下不同的教材在这个问题上的说法。

圈里的字可能比较模糊，说明一下。

按照箭头顺序分别是：血培养瓶/管→红头管→浅蓝头管→黑头管→緑头管→紫头管→灰头管→金黄头管。

人卫版教材比较详细，特意区分了真空采血管的材料是玻璃（医用的硼硅玻璃）还是塑料（PET-聚对苯二甲酸乙二醇酯）。

由于玻璃管在安全性能上存有隐患，使用特种塑料PET试管替代玻璃管成为一种趋势，而且塑料拥有运输便捷，防摔的特点也是比玻璃管更胜一筹，由于 PET 试管有着良好的疏水性，很大程度上加大了真空管的生产难度。

二、人卫版《临床基础检验学技术》（全国高等学校医学检验专业第六轮暨医学检验技术专业第一轮规划教材）这个顺序也是BD公司（世界上最大的生产和销售医疗设备，医疗系统和试剂的医疗技术公司之一）推荐的采血顺序。

三、《全国临床检验操作规程》（第四版）这里有个“凝血项管”，注意不要和“凝血管（也叫“血清管”，不含抗凝剂）”混淆了。

凝血项管是指凝血项目检查的管，一般情况下指的就是含枸橼酸钠的蓝头管。

护理学对这个问题没有深入细致的说明，只保证了基本的原则。

五、卫生部行业标准你发现卫生部的行业标准其实就是把《临床基础检验技术》中的第2个和第3个“圈儿”换一下顺序。

六、日本标准日本标准推荐的采血管顺序：1.培养血液用采血；2.采集血清用采血；3.柠檬酸采血；4.肝素采血；5.EDTA 采七、美国 CLSI（美国临床及实验室标准化委员会）标准H3-A6 2003 美国（CLSI）标准推荐的采血管顺序：1.血培养管；2.血凝管；3.血清管；4.肝素管；5.EDTA 管；6.糖酵解抑制剂管。

血培养原则(CLSI)

血培养的时机
菌血症的菌量
寒颤
血培养
体温
0
30
60
时间(分)
血培养的数量
• 2004年Cockerill’s研究表明：当每套血培养采血20 mL ，且使用自动化血培养系统时
• 一套检出率：65％ • 二套检出率：80％ • 三套检出率：96％ • 感染性心内膜炎第一套检出率90％％ • 血培养的数量 • 目前的指南推荐采集2-3套血培养 • 成年病人单一套的血培养从不被建议操作，因为这是不合适的数量， • 培养结果将很难做出临床解释 • 在采取血培养后的2-5天内，不需要再重复采取血培养，因为进行治 • 疗后的2-5天血液中的感染细菌不会马上消失 • 大部份细菌或真菌血症感染的移除，是以临床的症状表现来评估， • 唯有两个例外 • 感染性心内膜炎 • 金葡感染菌血症但非感染性心内膜炎相关
• 碘酊、次氯酸和洗必太的消毒效果要优于碘伏 • 碘酊和洗必太的消毒效果大致相当 • 碘酊需作用30秒以发挥杀菌效能
• 碘伏需作用1.5-2分钟以发挥杀菌效能 • 洗必太发挥杀菌效能的作用时间和碘酊一样， • 但是由于没有伴随的过敏反应，所以使用后不必擦去；但不能被用于小于2个月的婴儿皮肤消毒
血培养采集部位
采血量在需氧和厌氧瓶中的分配
• 对于常规的血培养，建议采取包括需氧和厌氧的一套血培养瓶；将采集的血液等量分配于需氧和厌氧血培养瓶中
• 当采血量不能满足推荐的血培养瓶需求血量时，首先应进行接种需氧血培养瓶，其余血量再接种厌氧血培养瓶
• 菌血症病源菌常见为需氧菌及兼性厌氧菌
血培养之皮肤消毒和污染的预防
因为该商业化培养基中添加其他成分以结合或去活化血液中抑制物质的作用多种商业化的肉汤培养基配方可用于人工及自动化血培养系统遵循clsim22指南血培养用培养基添加剂菌与酵母菌的检出?血培养的孵育条件阴性的血培养常规或盲传于是?必要的血培养的培养方法压?变化真菌和分枝杆菌血培养方法动血培养系统血培养的特殊话题crbsi导管相关性血?感染crbsi3少见细菌及苛养菌婴幼儿血培养儿童的采血?为?超过总血容?的1导管相关性血?感染crbsi1如果两套血培养为阴性而导管末梢培养为阴性?是crbsi导管相关性血?感染crbsi2如果两套血培养为阴性?是crbsi导管相关性血?感染crbsi3如果两套血培养为阴性而导管末梢培养为阴性?是crbsi感染性心内膜炎阴性则继续采集2套血培养全部培养一共5套已接受抗生素治疗的病人目前的研究表明接受抗生素治疗后的血培养检出?会有所下?也有研究表明在血培养瓶中添加的树脂或活性碳可以吸附或中和抗生素检出?比标准血培养瓶会有所提升但是在血培养瓶中添加的树脂或活性碳时污染菌的分离?亦会增加产品?贵少见细菌及苛养菌弯曲菌campylobacter转种时需微嗜氧环境孵育至少48小时才可见菌落少见细菌及苛养菌慢生长转种需要用支原体培养基sp4葡萄?培养基ph45结果报告药敏试验结果报告阳性血液培养的早期报告使用适当抗微生物制剂治疗避免抗药性菌株产生及?低病患死亡?提供适当次培养培养基及孵育环境结果报告其他结果报告初步报告结果与最终结果?吻合必须在书面报告上注明并提供详情污染问题对于有疑问的培养结果的临床意义判读如果是没有第二套同一个病人的血培养中发现同样的细菌判断血培养污染其它辅助检查的情况阳性血培养的判断真性菌血症truebacteremia

血培养标本采集导管相关性血流感染

母婴垂直传播的绒膜炎、慢性口腔或鼻窦感染、蜂窝组织炎（特别是肛周及骶骨）、腹部感染体征、咬伤、破伤风、脓毒性静脉炎、接受类固醇治疗的儿童。
接下来的问题，送几套呢？
精选课件
14
血培养套数与阳性检出率（％）
100 90 80 70 65％ 60 50 40 30 20 10 0 1套
Cockerill, CID 2004
精选课件
16
双抽四瓶
所以，至少“双抽四瓶”---即成人的血培养应至少两套（四瓶），两个穿刺点，每个穿刺点分别抽取需氧瓶和厌氧瓶各一瓶。这样可以有效增加血培养阳性率。需要备注 “左侧”“右侧”
绝对不能只抽一瓶。儿童根据年龄或体重来选择
精选课件
17
儿童血培养采集规范
8～
新生
13
儿
Kg
13～ 27
CLSI前身是NCCLS【美国临床实验室标准化委员会】，英文名称为 National committee for clinical laboratory。
美国CLSI的抗微生物药物敏感性试验操作方法和判断标准，是国内临床细菌检验遵循的标准。由于制订该项标准需要投入大量的人力、财力和物力，所以大多数国家包括中国都还没有能力建立自己的标准而依赖CLSI的方法和标准。CLSI标准每年更新！
血流感染时血培养采血时机
细菌浓度 0
30 时间 (分钟)
精选课件
体温 60
10
采集血培养样本的最佳时间
尽可能在寒战或开始发热时采血在接受抗生素治疗前采血如已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血
培养
精选课件
11
一套血培养指的是什么？
“一套”：成人“一套” 血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个

血培养操作规程

血培养检测规范化操作（世上最全基本操作流程）2016-08-22来源:南方检验医学网阅读: 1291次【字号:大中小】导读：一、血培养检测采血指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养,患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征： 1．发热（38℃)或低温（36℃）。

2．寒战。

3．白细胞增多（1010 9/L，特别有核左移未成熟的或带状的白细胞一、血培养检测采血指征:对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液培养,患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征：1．发热(≥38℃）或低温（≤36℃）。

2．寒战。

3．白细胞增多(〉10×10 9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多。

4．粒细胞减少（成熟的多核白细胞〈1×10 9/L）。

5．血小板减少。

6．皮肤粘膜出血.7．昏迷。

8．多器官衰竭。

或同时具备上述几种体征时应采血培养。

在评估可疑新生儿败血症时,除发热或低烧外，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养.肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是2岁以下的幼儿）一般多见于门诊，常伴有明显发热(≥38。

5℃）和白细胞增多（≥20×109/L）.老年菌血症患者,可能不发热或不低热,如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要指征.血培养检测皮肤消毒程序：血培养为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂（碘酊或碘伏）对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。

感染性心内膜炎，特别是心脏瓣膜修复术的感染，可能由皮肤寄生的微生物引起(例如：表皮葡萄球菌或棒杆菌属）.因此，在采集过程中血培养的污染一定要减小至最低程度.用做培养的血液均不应该在静脉或动脉的导管中抽取，除非静脉穿刺无法得到血液或用来评价与导管感染相关性指标。

如果抽取了导管血，也应同时在其他部位穿刺获取非导管内静脉血液进行血培养。

皮肤消毒严格按以下步骤进行：1．首先用70％酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。

血流感染诊断的金标准正确的血培养

N=96例
鲍曼不动杆菌 39%
N=51例
70%的患者在入住ICU时已入院≥48h 患者在入住ICU时取鼻腔、口腔、直肠拭子培养，≥1个部位细菌培养阳性为定植
痰培养出的不动杆菌可能为定植菌
*
1.汪复等.实用抗感染治疗学.人民卫生出版社.2005年第一版 9.陈丽丹等.中华医院感染学杂志.2010 ; 20 (8 ):1091-1093
存在中心静脉插管(CVC):中心静脉及外周血管同时取血
无CVC：2个不同部位取血若患者体重<40kg，采血体积应<总血容量的1%（一般人体血容量为70ml/kg）
CLSI指南对血培养次数及采血体积的推荐 CLSI指南推荐：菌血症的患者行4次血培养，且每次采血量为10ml，可获得90-95%的阳性检出率当血培养次数增加到6次时，阳性率可增加至95-99%
采血量是影响灵敏度最关键因素
要采集多少血液?
采血量（ml）与检出率的关系
Overall/Mayo
培养皿孵化时间越长，血培养阳性率越高
5.F. R. Cockerill III et al. Clinical Infectious Diseases 2004; 38:1724–30
研究显示，血培养时培养皿的孵化时间为72h时，可获得96%的阳性率；当孵化时间延长至5-6天时，可获得100%的阳性率
痰标本易受口咽部菌群的污染1
对ICU患者鲍曼不动杆菌分布的调查结果显示，体表定植鲍曼不动杆菌的患者中，73.7%痰培养结果显示为鲍曼不动杆菌阳性9 该研究认为同一患者在同一部位两次分离到同一细菌则为定植, 患者4 个体表部位(鼻前庭、额头、腋窝、腹股沟)任1 个有定植均认为有定植
01
02
判断不动杆菌定植抑或感染的思路

静脉血标本采集顺序

C L S I推荐的静脉血标本采集顺序下图为美国临床及实验室标准研究院(CLSI)[原美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）]推荐采血顺序，在实际工作中，如患者静脉条件较差，有可能采血不足，则应首先考虑凝血1（蓝帽）和血沉（黑帽）检测管，因为这两种样本对血量要求最严格。

血液标本的采集1.静脉血标本静脉血标本是医护人员采用一次性注射器（推荐使用真空采血技术），从患者肘静脉或其它部位的静脉取血。

在取得静脉血标本时应注意：●●在肌肉注射或静脉输含有葡萄糖或电解质（含钾、钠、氯离子）的液体时，建议3小时以后采集静脉血标本进行这些项目的检验，以防止上述检验项目因输液引起的假性升高。

如因抢救等原因需要在输液同时采血的，一定要在输液对侧采集标本，医生应正确评价检测结果。

禁止从中心静脉插管、肝素帽等保留的治疗通道中采集血液标本。

●●止血带使用时间应少于1分钟（建议在针头穿刺进入血管后即放松止血带），以免引起血液淤滞，局部组织缺氧，造成血液某些成分的改变，特别是测定乳酸时不可使用止血带，否则结果偏高。

●●血标本应防止溶血。

引起溶血的原因有①注射器采血时抽吸力太大；②血液与抗凝剂比例失调；③混匀标本时过度振荡；④注射器或盛血容器带水或容器污染；⑤全血放置时间长或突然受冷或受热；⑥注射器中的血沫注入试管；⑦真空采血时如未采满至相应刻度，可由于残存负压造成红细胞破裂；⑧不拔针头直接注入采血管；⑨标本离心时离心力过大等等。

因血液中红细胞内外成分有很大差异，溶血可造成红细胞内的物质向细胞外转移，如K+、Mg2＋和某些酶类（LD、AST、ALT、ACP）；另外，溶血还可干扰某些化学项目（如TBil、DBil、TC等）的测定，严重影响结果的准确性。

●●正确选择采血管。

通常情况下临床检验多采用血清为标本（不抗凝），但一些特殊检验项目需要使用抗凝剂时，应注意选择合适的抗凝剂并注意抗凝剂与血液的比例，以防止标本凝血或红细胞形态的改变；抗凝血标本采集后立即轻轻摇匀（上下颠倒8次），以防凝血发生。

clsi血培养推荐指南教学课件ppt

根据质量改进方案，制定详细的实施计划和时间表，明确各项任务的责任人和完成时间。
06
clsi血培养的临床应用
1
临床应用概述
2
3
CLSI血培养临床应用旨在提供准确、快速、有效的检测方法，以帮助医生早期诊断和治疗血流感染（BSI）。
BSI是一种严重的感染性疾病，具有较高的死亡率和并发症发生率，而血培养是诊断BSI的金标准。
CLSI血培养临床应用在提高检测准确性和缩短检测时间方面具有重要优势，有利于医生及时做出诊断和制定治疗方案。
一名患者因持续发热和白细胞计数升高入院，医生采集血液样本进行CLSI血培养检测。检测结果显示，患者感染了革兰氏阴性杆菌，医生根据检测结果制定了相应的治疗方案，患者的病情得到了有效控制。
案例一
CLSI血培养推荐指南旨在为实验室提供有关血培养检测的标准化和优化方法，提高检测质量和患者诊治水平。
指南涵盖了血培养采样、实验室检测、结果解读和报告等方面的推荐意见。
指南概览
1
指南细节
2
3
针对不同年龄段、病情的疑似感染患者，建议最佳的采样时机和采血量。
采样指征
详细规定了样品处理、增菌培养、自动化检测和手工操作等步骤的标准化操作流程。
clsi血培养常见问题及解决方案
血培养操作不规范
采样方法不当，培养基选择不当
血培养采样不当
采样前未充分准备，采样量不足或过多
血培养结果不准确
培养基污染，培养过程中出现假阳性或假阴性
常见问题分析
充分准备，适量采样，注意采样方法和时间
血培养采样改进
血培养操作优化
血培养结果验证
选择合适的培养基和采样方法，规范操作流程
02
与传统血培养方法相比，CLSI血培养的临床应用可提高检出率、减少假阳性率、缩短检测时间，并降低漏检率。

血培养采集的方法及注意事项2017

（儿童采血量少，更应注意颠倒混匀）
细菌是干死的，不是淹死的
蝶翼针采血程序
1
2
3
皮肤消毒 4
培养瓶消毒
标注采血量
5
6
准备采血针
静脉穿刺
负压采血
血培养采血注意事项
血培养建议从外周静脉采血，不建议采动脉血常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血注射器采血，采好后注入血培养瓶之前不需要更换针头标本采集部位：从两侧上肢静脉采血“双瓶双侧”，必要时从下肢
❖ it is recommended that routine blood cultures include paired aerobic/anaerobic blood culture bottles.50-52
❖ When less than the recommended volume of blood is drawn for culture, the blood should be inoculated into the aerobic vial first; any remaining blood should then be inoculated into the anaerobic vial.
血培养采集的方法及注意事项
2017-05-22
血培养的概念
血培养是一项实验室检查，是采集患者血液标本并接种到培养瓶，用以发现、识别导致患者感染的病原微生物
是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义
血培养的目的
证实有感染性的病原体鉴定病原体，做药敏试验指导抗菌药物的使用
0
0
采集1套无法判断是病原菌还是污染菌
2－3套血培养，有助于污染的判断

clsi药敏试验标准2023

CLSI药敏试验标准2023一、药敏试验定义药敏试验（Antimicrobial Susceptibility Testing，AST）是一种实验室方法，用于测定细菌对各种抗菌药物的敏感性或耐药性。

药敏试验可以帮助医生选择最合适的抗菌药物来治疗感染，提高治疗效果并减少耐药性的传播。

二、试验规则1.试验方法：CLSI推荐使用微量稀释法（microdilution method）进行药敏试验。

该方法通过在试管或微孔板中加入细菌悬液和不同浓度的抗菌药物，测定细菌生长情况，从而判断细菌对药物的敏感性。

2.试验菌种：CLSI推荐使用临床分离的细菌菌种进行药敏试验，包括革兰阳性菌、革兰阴性菌、非发酵菌等。

3.药物浓度：药敏试验中使用的抗菌药物浓度应符合CLSI标准，以保证试验结果的准确性。

4.孵育时间：孵育时间应根据菌种和药物特性确定，一般为16-20小时。

5.结果判定：根据细菌生长情况，药敏试验结果可分为敏感（S）、中介（I）和耐药（R）三种类型。

三、质量控制1.室内质控：每次试验应包括阴性对照（无菌生长）和阳性对照（细菌生长），以验证试验的准确性。

2.室间质控：参加CLSI组织的室间质控计划，以确保不同实验室之间的结果具有可比性。

四、抗生素敏感性试验1.常规抗生素：包括β-内酰胺类（如青霉素类、头孢菌素类等）、氨基糖苷类（如链霉素、庆大霉素等）、氟喹诺酮类（如环丙沙星、左氧氟沙星等）等多种抗生素。

2.特殊抗生素：针对某些特定感染，如结核病、真菌感染等，需使用特殊的抗结核药物或抗真菌药物进行药敏试验。

五、抗菌药物分组CLSI将抗菌药物分为五个组别，分别为：β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、抗真菌药和其他抗菌药物。

药敏试验时应根据抗菌药物的分组选择相应的药敏试验方法。

六、选药流程1.根据感染部位和临床诊断，选择可能有效的抗菌药物。

2.根据细菌培养和药敏试验结果，调整抗菌药物的选择。

3.根据患者个体差异（如年龄、肾功能等）和药物相互作用，选择最合适的抗菌药物。

血培养的原则和规程;批准指南的解读

血培养的原则和规程；批准指南的解读
中国医科大学附属盛京医院孙继梅
内容提纲
抗菌药物临床应用国家新政策血培养批准指南的引用临床微生物检验血培养采集指征血培养的原则和规程

合理应用抗菌药物

全球细菌耐药现状我国细菌耐药现状国家的法律法规临床抗菌药物应用指导原则抗菌药物临床应用专项整治活动抗菌药物临床应用管理办法
实验室与临床沟通是关键
医生
检验人员
护士
微生物与临床密不可分
抗感染之路任重道远
抗菌药物敏感试验方法

纸片扩散法抑菌圈直径稀释法最小抑菌浓度（MIC）肉汤稀释法（常量、微量）琼脂稀释法 E-test法仪器法肉汤稀释法优点：操作简便、快速，结果准确、灵敏专家系统：罕见耐药表型的提示缺点：阈值药敏，流行病学调查和比较

明确抗菌药物临床应用管理责任制开展抗菌药物临床应用基本情况调查建立完善抗菌药物临床应用技术支撑体系严格落实抗菌药物分级管理制度建立抗菌药物遴选和定期评估制度，加强抗菌药物购用管理加大抗菌药物临床应用相关指标控制力度定期开展抗菌药物临床应用监测与评估
专项整治动重点内容

加强临床微生物标本检测和细菌耐药监测
正确评价细菌培养结果

引起人类感染的微生物种类繁多，生物学特性各异没有一种检测方法能检测所有的微生物，更没有一种培养基能解决临床所有问题主动了解患者病史，根据临床症状和初步诊断选择适当的检测方法，才能更好地为临床提供服务检验与临床的合作和交流非常重要! 根据药敏试验结果合理选择抗菌药物
正确评价细菌培养结果

北京协和医院参考CLSI(H3-A6)制定静脉血推荐采集顺序

中华临床复验室管理电子杂志２０１５年５月第３卷第２期ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＬａｂＭｇｔ（ＥｌｅｃｔｒｏｎｉｃＥｄｉｔｉｏｎ），Ｍａｙ２０１５，Ｖｏ１．３，Ｎｏ．２
管，也就是无添加剂管的采样顺序。目前，白帽采血管（无任何添加剂，也可是采血管制造商推荐的
时，如果第一管是凝血项目管，在其之前应首先
采集 “ 丢弃管” ， “ 丢弃管 ”可以是无添加剂管（目前本实验室内采用的是白帽管）或凝血项目管， “ 丢弃管” 无需采满，其目的是避免血量不准，造成抗凝剂和血液比例不恰当。因为蝶翼采血针有一
一
指南中虽未特别提及蝶翼采血针适用范围，但对蝶翼采血针安全使用提出了非常高的要求，这其中包括了应使用安全设备防锐器损伤，使用中必须
连接持针器等。但笔者更关注的在综合医院中凝血
项目检测频次高，且在实际操作中很少将血培养与其他管同时抽，所以按上述推荐顺序凝血管多为第管，而此时如果使用蝶翼针则必然要求抽 “ 丢弃
酸钠。
二、北京协和医院检验科推荐静脉血采集顺序
与Ｈ３Ａ６指南的不Fra bibliotek同点管前加了１支血清管，也是基于符合老版Ｈ３，考虑将穿刺过程的影响 “ 引流”在这支 “ 丢弃管”中；同时由于考虑促凝剂不会立刻溶解，故携带污染
可能不明显，这在当时是权宜之计。从Ｈ３．Ａ５版本
段软连接管（图２），管中的空气在真空采血的过程中会消耗真空采血管中的负压，俗称 “ 死腔”，而最终造成采血体积不准。

clsi血培养推荐指南

06
clsi血培养指南未来发展及展望
未来发展
提升检测灵敏度和特异性通过改进培养技术、优化培养基等方法，提高血培养的检测灵敏度和特异性，减少假阴性或假阳性结果。
拓展培养基和方法研究新的培养基和方法，以适应更多种类的病原体培养和检测。
缩短培养时间研究缩短培养时间的方法，以便更及时地检测到病原体，缩短患者诊断和治疗的时间。
血培养的常见问题
血培养的阳性率受到多种因素的影响，如患者用药情况、采血时
机、培养基质量进行综合分析，以确定感染的病原体
种类和感染部位。
血培养结果阴性不能排除感染的存在，需要结合其他检查结果进
行综合判断。
03
clsi血培养指南
成人血培养指南
clsi血培养推荐指南
汇报人：日期:
• 引言 • 血培养概述 • clsi血培养指南 • clsi血培养指南应用及效果 • clsi血培养指南与临床实践 • clsi血培养指南未来发展及展望
01
引言
目的和背景
目的
为了提高血培养的检测灵敏度和特异性，减少漏检和误诊，以及优化实验室操作流程，CLSI（临床和实验室标准化研究所）制定了血培养标准化操作指南。
个性化治疗将成为趋势
基于基因组学、免疫学等领域的进展，未来的血培养将更加注重个性化治疗，为患者提供更加精准的治疗方案。
THANK YOU
菌的检出率。
对于接受抗菌药物治疗的患者，建议在更换新抗菌药物前采集血液样本，以监测病原菌是否对当
前抗菌药物产生耐药性。
对于疑似血流感染的患者，建议在患者发热期间或使用抗菌药物前采集血液样本，以增加病原菌
的检出率。
04
clsi血培养指南应用及效果

美国临床和实验室标准协会

美国临床和实验室标准协会编辑锁定同义词CLSI一般指美国临床和实验室标准协会本词条缺少概述、名片图，补充相关内容使词条更完整，还能快速升级，赶紧来编辑吧！中文名美国临床和实验室标准协会外文名Clinical and Laboratory Standards Institute属性协会所在地区美国目录.1美国临床和实验室标准协会.2全国语言学暑期高级讲习班.▪第十一届全国语言学暑期高级讲习班.▪第十届全国语言学暑期高级讲习班美国临床和实验室标准协会美国临床和实验室标准协会编辑CLSI是美国【临床实验室标准化协会】的英文缩写，英文名为Clinical and Laboratory Standards Institute。

CLSI前身是NCCLS【美国临床实验室标准化委员会】，英文名称为National committee for clinical laboratory。

美国CLSI的抗微生物药物敏感性试验操作方法和判断标准，是国内临床细菌检验遵循的标准。

由于制订该项标准需要投入大量的人力、财力和物力，所以大多数国家包括中国都还没有能力建立自己的标准而依赖CLSI的方法和标准。

CLSI标准每年更新！CLSI的部分标准及指南如下：1. AST2-A，床旁（Point-of-Care）体外诊断(IVD)检测：批准指南（1999）。

本文件为临床实验室以外的体外诊断（IVD）设备的用户提供产生可靠结果的指南。

2. C12-A，血气和pH分析相关的量和换算的定义：批准标准（1994）。

C12-A讨论特定的术语并给出血气和pH分析计算的统计解释（参见相关出版物C25-A和C27-A）。

3. C21-A，测量血样品pO2和pCO2设备的性能特征：批准标准（1992）。

由美国国家标准研究院（ANSI）批准。

C21-A探讨了为测量血中CO2和O2部分压力而设计仪器的性能和方法学（参见相关出版物C27-A）。

4. C24-A2，定量测定统计质量控制：原理和定义：批准指南（1999）。