肠出血性大肠杆菌O157：H7的快速可视化检测

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本方法最低检出限约为１００拷贝／反应管，高于普通ＰＣＲ；检测特异性高，仅ＥＨＥＣ０１５７：Ｈ７反应管ＨＮＢ颜色由紫罗兰变成天蓝色，而肠产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）、肠致病性大肠杆菌（ＥＰＥＣ）、肠侵袭性大肠杆菌（ＥＩＥＣ）、肠聚集性大肠杆菌（ＥＡＥＣ）、宋内志贺菌、福氏志贺菌均不发生变色反应；体系的扩增效率高于普通ＰＣＲ，４０ｍｉｎ内出结果。结论建立的基于颜色判定的ＥＨＥＣ０１５７：Ｈ７ＬＡＭＰ检测方法具有特异、灵敏、设备要求简单等特点，适用于ＥＨＥＣ０１５７：Ｈ７现场快速检测。［关键词］肠出血性大肠杆菌０１５７：Ｈ７；可视化检测；环介导等温扩增；羟基萘酚蓝［中图分类号］Ｒ３７８．２［文献标志码］Ａｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２ — ２７１Ｘ．２０１３．０４．００１
来自百度文库
ＬＶＨｅｎｇ，ＺＨＡＮＧｆｉｎ一ｎ，ＧＵＨａｉ — ｔａｏ，ＷＡＮＧＰ
，ＷＡＮＧＣｈａｎｇ￣ｕｎ，ＷＡＮＧＹｕ — ｂａｎｇ．１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈ，Ｎａｎｊｉｎｇ
东南国防医药２０１３年７月第１５卷第４期Ｍｉｌｉｔａｆｙ！Ｉｃ
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３２１・
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论
著・
肠出血性大肠杆菌０１５７＂Ｈ７的快速可视化检测
吕恒ｒ，张锦海，顾海涛，王平，王长军，王玉邦
ｂｌｕｅ，ＨＮＢ）指示剂建立肠出血性大肠杆菌（ＥＨＥＣ）０１５７：Ｈ７快速可视化检测方法。方法件，根据ＨＮＢ的颜色变化进行结果判定，并评价检测方法的特异性和灵敏度。结果
基因ｒｆｂＥ保守区设计ＬＡＭＰ引物及环引物，反应体系加入染料ＨＮＢ作为ＬＡＭＰ扩增的指示剂，结合ＬＡＭＰ浊度仪优化扩增条
ＥｎｔｅｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７．ＭｅｔｈｏｄｓＡｓｅｔｏｆｓｉｘｓｐｅｃｉｉｆｃｐｉｍｅｒｒｓｓｐｅｃｉｉｆｃｔｏｅｉｇｈｔｒｅｇｉｏｎｓｏｆｒｆｂＥｇｅｎｅｗｅｒｅｄｅ —
ＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ２１００２９，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｅｎｔｅｒｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎｏｆＮａｎｇＭｉｌｉｔａｒｙＣｏｍｍａｎｄ，Ｎａｎ —
ｉｒｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ２１０００２，Ｃｈｉｎａ
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＡｌｏｏｐ — ｍｅｄｉａｔｅｄｉｓｏｔｈｅｒｍａｌａｍｐｌｉｉｆｃａｔｉｏｎ（ＬＡＭＰ）ａｓｓａｙｗａｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄｆｏｒｒａｐｉｄｖｉｓｕａｌｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆ
ｓｉｇｎｅｄ．Ｔｈｅｒｅａｃｔｉｏｎｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｉｎａｓｉｎｇｌｅｔｕｂｅａｔ６３℃ ｗｉｔｈｔｈｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｆｈｙｄｒｏｘｙｎａｐｈｔｈｏｌｂｌｕｅ（ＨＮＢ）ｄｙｅｐｉｏｒｒｔｏａｍｐｌｉｆｉｃａ —
ＡｑｕｉｃｋｅｒａｎｄｖｉｓｕａｌｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｎｇＥｎｔｅｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７
［摘要］目的应用环介导等温扩增（１ｏｏｐ — ｍｅｄｉａｔｅｄｉｓｏｔｈｅｒｍａｌａｍｐｌｉｉｆｃａｔｉｏｎ，ＬＡＭＰ）技术和羟基萘酚蓝（Ｈｙｄｒｏｘｙｎａｐｈｔｈｏｌ针对ＥＨＥＣ０１５７：Ｈ７脂多糖编码