[课件]第三章、基因工程常用受体细胞PPT

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(二)缺点:
1、生长相对细菌缓慢 2、对有些生物活性蛋白仍无法表达或正确修饰, 比如蛋白超糖基化
三、哺乳动物细胞表达特点


是表达哺乳动物基因(如人基因)的最好受体细 胞。
优点: 1、能识别和剪切内含子并加工为成熟的mRNA,既可表达 cDNA又可表达基因组DNA; 2、表达产物具有正确地高级结构和糖基化、磷酸化等修饰。 3、表达产物可分泌到培养液中,纯化容易。
缺点:
1、细胞生长慢,培养条件刻苛,大规模培养工艺 复杂、费用高 2、培养液中产物浓度较小 3、转化细胞筛选麻烦
主要基因工程表达体系比较

(二பைடு நூலகம்缺点
1、不能识别剪切内含子,不能表达基因组DNA, 只能表达cDNA; 2、缺乏真核生物的蛋白质加工修饰系统,不能进 行蛋白酶解、糖基化、磷酸化、乙酰化、硫酸化、 酰胺化等修饰作用;
蛋白酶解作用:从蛋白前体中切去一段氨基酸序列,从 而获得功能性分子 糖基化意义: 赋予蛋白独特的结合性并增强稳定性
3、不具备真核生物的蛋白质复性系统(如蛋白二 硫键异构酶),不能进行真核蛋白的正确折叠;
二、酵母(yeast)表达体系特点


酵母菌是最简单的真 核单细胞生物; 是外源真核基因最理 想的表达体系。
(一)优点:
1、全基因组测序,基因表达调控机理比较清楚, 遗传操作简便 2、具有原核生物无法比拟的蛋白翻译后加工修 饰系统。对表达的蛋白可进行正确折叠和糖基化、 磷酸化等修饰; 3、安全:不含特异病毒、不产生毒素,美国FDA 认定为安全的 4、繁殖迅速(倍增期约2小时 ),要求条件低, 大规模发酵工艺简单,成本低廉; 5、能外分泌
第三章、基 因工程常用 受体细胞
宿主细胞分类及特点

分类:
原核细胞(大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、
链霉菌等) 真核细胞(酵母细胞、哺乳动物细胞、 昆虫细胞)
一、原核表达系统的特点
(一)优点: 1、 结构简单,基因组成及功能相对清楚, 易于遗传操作及转化 2、生理代谢途径及表达调控机制相对清楚, 便于表达调控 3、生长迅速,要求条件低(大肠杆菌倍增 时间为17分钟),易于大规模培养。
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