乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性结果的确认
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1 材料与方法
1.1 仪器及试剂 1.1.1 WELLSCAN K3 酶标仪、anthos fluido 洗板机、 ARCHITECT i2000 SR 全自动免疫分析仪, 分别是 上海雷勃公司、郑州安图生物工程公司、美国雅培公 司产品。 1.1.2 ELISA 法检测 HBsAg 诊断试剂盒购自山东潍 坊三 维生物工程 集团有 限 公 司 , 批 号 :20080501; MEIA 法 HBsAg 诊断试剂盒购自美国雅培公司,批 号:53518HNOO。 1.1.3 4IU/mL 的 HBsAg 参比血清由卫生部临床检验 中心提供,批号:GBW(E)090042。 1.1.4 待确认血清 2006 年 11 月~2008 年 6 月间本 实验室用 ELISA 法检测血清 HBsAg, 初检结果 S/
3 讨论
乙肝表面抗原检测, 灰值区结果的准确性问题 一直困扰着检验医学工作者。近年来,抗病毒药物在 临床广泛应用, 乙肝表面抗原弱反应性结果的比率 也在随之增高, 乙肝表面抗原假有反应性结果对被 检者造成巨大的负面影响,而假阴性结果又会造成 临床误判,延误患者病情,这些情况都要求对乙肝表 面抗原进行 确认。 确认试 验 阳 性 临 界 点 的 设 定[4], ELISA 法检测 HBsAg 结果 S/CO 值允许有一定的变 异,为了减少重复测定中实验误差对确认试验结果 判断的影响, 确认试验阳性临界点应尽可能地远离 允许误差;但各种干扰因素对 ELISA 法检测 HBsAg 结果的影响也较大,尤其是弱反应性结果。所以,将” 样本确认与样本对照比较,S/CO 值被中和下降 50% “设定为确认试验阳性的临界点。
CO 值界于 1~4 的标本;收集血清-40℃保存备检。 1.1.5 阴性对照血清收集 收集 2008 年 6~8 月本室 使用的山东潍坊三维生物工程集团有限公司 HBsAg ELISA 法 诊 断 试 剂 剩 余 阴 性 对 照 血 清 ,4℃ 保 存,使用前混合均匀。 1.1.6 抗-HBs 抗体阳性血清(下称”抗-HBs 血清“)收 集
53
应,和新生儿溶血病,具有现实的临床意义。 MCT 的原理是,通过凝胶的浓度,控制凝胶间
隙的大小,使间隙只能让游离的红细胞通过,从而 使游离的红细胞与聚集红细胞分离,通过离心的红 细胞沉在凝胶管底部,这表明红细胞未凝集(阴性 反应)。 若红细胞在凝胶带上部,则表明红细胞发生 凝集(阳性反应)。该方法已逐渐用于血型鉴定、交叉 配血实验、抗体特异性鉴定,以及抗人球试验等血 清、血型学检查中来。
Biblioteka Baidu
阳性血清中和法检测 187 份待确认血清;随机抽取用此法确认的阳性血清和阴性血清,用 Abbott MEIA 法检测,
用抗原稀释法测定该确认方法的最低确认限。 结果:187 份待确认血清中有 165 份被确认阳性,22 份被确认阴性;
Abbott MEIA 法对照检测的 44 份血清结果 22 份阳性、22 份阴性,与确认结果相同;最低确认限 1.1 IU/mL。 结论:
均值
0.052 2.151 1.18 0.12 10.48%
SD
0.004 0.11 0.12 0.015 0.97%
CV(%)
7.69 5.11 10.02 12.5 9.25
2.4 44 份用 Abbott MEIA 法对照 检测的血清 ,结 果为 22 份阳性、22 份阴性,与抗-HBs 抗体阳性血清 中和法确认结果一致。
湖南师范大学学报(医学版)
50
2010,7(2) J Hunan N ormal Univ(Med Sci)
乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性结果的确认
吴斌
(岳阳市中心血站检验科,湖南岳阳 414000)
【摘要】 目的:建立一种简单、经济、实用的确认乙肝表面抗原弱反应性结果的方法。 方法:采用抗-HBs 抗体
2 结果
2.1 抗-HBs 抗体阳性 血清中和法 确认 187 份 HBsAg 待确认血清, 有 165 份确认试验阳性,22 份确 认试验阴性。 确认试验阳性的 165 份血清,其”(样本 确认 S/CO 值/样本对照 S/CO 值)×100%“值在 10%~ 40%之间。 确认结果阴性的 22 份血清中,有 14 份样 本 对 照 S/CO 值 小 于 1, 另 8 份 样 本 对 照 S/CO 值 1.4~2.6,但其”(样本确认 S/CO 值/样本对照 S/CO 值) ×100%“值在 78.16%~90.34%之间。
to detect red cell antigen-antibody reactions [J]. Transfusion,1990,30(2):109-113.
[2] Hitzler W, Bauernfeind U, Sch.o.mig -Brekner J,et al. The
gel centrifugation test in serologic compatibility testing [J]. Beitr Infusionsther, 1990,26:358-361. [3] 杨 世 明,崔 颖,张 勇 萍,等.微 柱 凝 胶 法 在 抗 体 筛 查 中 的 应 用 及 其 影 响 因 素 探 讨[J].现 代 检 验 医 学 杂 志 ,2006,21(4): 55-57.
总之,MCT 即便对初学者而言,结果判断上也 比试管法可靠。 且省时、操作简单,试剂消耗少,成 本低,环境污染少。 特别是对输血病人和妊娠妇女 抗体的筛查, MCT 的敏感性更有利于 早期检出这 些抗体。
参考文献: [1] Lapierre Y, Rigal D, Adam J,et al. The gel test: a new way
收集本实验室检测乙肝病毒五项标志物, 抗HBs 抗体强阳性(抗-HBs 抗体 S/CO 值大于 20)的标 本剩余血清,收集期间 4℃保存(五天为一个收集周 期);收集结束将所有血清混合均匀,用 ELISA 法再 次检测, 结果抗-HBs 抗体强阳性 (抗-HBs 抗体 S/ CO 值大于 20),HBsAg 及 HBeAg 阴性;用实时荧光 PCR 法测定 HBV-DNA,结果<1000copies/mL。 完成 后-40℃保存备用。 1.2 方法 1.2.1 抗-HBs 抗体阳性血清中和法确认 187 份 HBsAg 待确认血清, 每份血清均设样本对照和样本确 认,按试剂盒操作说明书进行,临界值(CO)=2.1×N。
抗-HBs 抗体阳性血清中和法确认 HBsAg 结果可靠,可以用于 HBsAg 的确认,且操作简单、经济、实用,能在各级
医疗机构推广应用。
【关键词】 乙肝表面抗原;乙肝表面抗体;中和法;确认试验
【中图分类号】 R331 【文献标识码】A
【文章编号】1673-016x(2010)02-0050-02
在乙型肝炎病毒感染人群中,部分患者血清乙 肝表面抗原(HBsAg)呈低水平表达,随着检测技术不 断改进,HBsAg 弱反应性结果的比率也在升高[1],但 不同方法、不同试剂检测血清 HBsAg,弱反 应性结 果有较大差异[2-3]。为此,我们探讨采用同一厂家试剂 用中和法对 HBsAg 弱反应性结果进行确认。
阳性对照 阳性对照血清 50μL
样本对照 待确认血清 50 μL
样本确认 待确认血清 50 μL
分别 37℃温育 30min,洗板 5 次,吸干
清洗液 100μL
阴性对照血清 100μL
阴性对照血清 100μL
阴性对照血清 100μL 抗-HBs 血清 100μL
分别 37℃温育 30min
清洗液 50μL
2.2 采用抗-HBs 抗体 阳性血清中 和法 确 认 HBsAg 系列浓度血清,最低确认限(灵敏度)为 1.1IU/mL。 2.3 重复性检测结果见表 1。
表 1 对混合血清检测的精密度(重复性)结果(n=20)
血清
阴性对照 OD 值 阳性对照 OD 值 混合血清样本对照 S/CO 值 混合血清样本确认 S/CO 值 样本确认/样本对照
混合血清可以增加抗-HBs 抗体相对于 HBsAg 抗原血清型的多样性,从而能够适用于中和多种血 清型的 HBsAg 抗原,并且混合血清可以相互稀释单 份血清中的干扰物质,而减小干扰 (下转第 53 页)
影响微柱凝胶法筛查血清抗体的因素 左立新
好重复性和敏感性[1]。 Hitzler 等在试管法中加入了 酶试剂[2]。 在抗体筛查的实验研究中,必需对未经选 择的病人血清,用凝胶离心技术与试管法作对比研 究。 本组结果显示,在 2000 例受血者血清中,筛查 出 6 例不规则抗体,都为 Rh 血型系统免疫型抗体 (均有输血史或反复输血史),与杨世明的研究结果 大致相似[3]。 说明受血者的血清中的不规则抗体,绝 大多数是 Rh 血型系统的免疫性抗体,而其它血型 系统的免疫性抗体较少。
确认实验操作步骤如下:
收 稿 日 期 :2009-11-12 作者简介:吴斌(1973-),男,湖南岳阳人,主管技师,主要从事临床检验工作。 E-mail:hbp3517@yahoo.com.cn;
乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性结果的确认 吴 斌
51
空白对照 清洗液 50μL
阴性对照 阴性对照血清 50μL
我国临床输血技术规范记载:凡遇到交叉配血 不合,有输血史、妊娠史或短期内需要多次输血的 病人,必须进行不规则抗体筛选试验。 MCT 检测, 是现今最好、最灵敏的检测方法之一。
在 Rh 血型系统里,D 抗原的抗原性最强,因此 对受血者和献血员进行 RbD 抗原的检测, 是有必 要的。 但是这一检测方法,在国内开展还不是十分 普遍。 正因为如此,Rh 血型系统的其它抗原(E、C、 c、e)也是没有开展。 致使一些 Rh 阴性者,首次输血 时,接受 Rh 阳性血,机体被处于致敏状态 ,当再次 输 入 Rh 阳 性 血 时 ,出 现 免 疫 记 忆 ,导 致 溶 血 性 输 血反应。 而这种免疫产生的抗体必须采用凝聚胺或 抗人体球蛋白试验才能检测出来。 因此,用特异性 强、敏感性高的检验方法,对受血者和孕产妇,在输 血和产前及产妇在输血进行血型免疫性不规则抗 体筛查,和抗体特异性鉴定,对预防溶血性输血反
酶结合物 50 μL
酶结合物 50 μL
酶结合物 50 μL
酶结合物 50 μL
分别混匀,37℃温育 30min,洗板 5 次,吸干,各孔加底物混合液 100μL,37℃避光显色 15 min,各 孔加 终 止 液 50μL,酶 标仪450nm 读取各孔 OD 值,并计算 S/CO 值
结果判断:⑴样本对照 S/CO 值>1,且(样本确 认 S/CO 值/样 本 对 照 S/CO 值 )×100%<50%被 认 为 确认试验阳性;⑵样本对照 S/CO 值、样本确认 S/CO 值均小于 1,或 样本对照 S/CO 值>1,但 (样本确认 S/CO 值/样本对照 S/CO 值)×100%>50%, 均被认为 确认试验阴性。 ⑶样本对照 S/CO 值>18,(样本确认 S/CO 值/样本对照 S/CO 值)×100%>50%时, 需要对 标本稀释后再确认。 1.2.2 灵 敏 度 将 4IU/mL 的 HBsAg 参 比 血 清 用 阴 性 对 照 血 清 精 确 稀 释 为 1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、 0.9、0.8、0.7、0.6、0.5IU/mL 系列浓度血清, 每个稀释 度 3 份,用 1.2.1 确认法检测 0.5~1.5 IU/mL 共 11 个 系列浓度 33 份血清,求各稀释度 S/CO 值的均值,后 按 1.2.1 结果判断方法判断确认结果,判断为确认试 验阳性的 HBsAg 最低浓度被认为是该方法的最低 确认限(灵敏度)。 1.2.3 重复性 将数份确认阳性的血清混合, 制成 S/ CO 大约为 1.2 的混合血清,用 1.2.1 确认法每天检测 1 次 , 共 测 20 天 , 然 后 计 算 其 均 值 (mean )、 标 准 差 (SD)、变异系数(CV)。 1.2.4 Abbott MEIA 法 对 照 检 测 试 验 从 抗-HBs 抗体阳性血清中和法确认 为阳性的 165 份 血清中 随机抽取 22 份及确认为阴性 的全部 22 份血 清用 MEIA 法检测,检测步骤严格按操作说明书进行。
1.1 仪器及试剂 1.1.1 WELLSCAN K3 酶标仪、anthos fluido 洗板机、 ARCHITECT i2000 SR 全自动免疫分析仪, 分别是 上海雷勃公司、郑州安图生物工程公司、美国雅培公 司产品。 1.1.2 ELISA 法检测 HBsAg 诊断试剂盒购自山东潍 坊三 维生物工程 集团有 限 公 司 , 批 号 :20080501; MEIA 法 HBsAg 诊断试剂盒购自美国雅培公司,批 号:53518HNOO。 1.1.3 4IU/mL 的 HBsAg 参比血清由卫生部临床检验 中心提供,批号:GBW(E)090042。 1.1.4 待确认血清 2006 年 11 月~2008 年 6 月间本 实验室用 ELISA 法检测血清 HBsAg, 初检结果 S/
3 讨论
乙肝表面抗原检测, 灰值区结果的准确性问题 一直困扰着检验医学工作者。近年来,抗病毒药物在 临床广泛应用, 乙肝表面抗原弱反应性结果的比率 也在随之增高, 乙肝表面抗原假有反应性结果对被 检者造成巨大的负面影响,而假阴性结果又会造成 临床误判,延误患者病情,这些情况都要求对乙肝表 面抗原进行 确认。 确认试 验 阳 性 临 界 点 的 设 定[4], ELISA 法检测 HBsAg 结果 S/CO 值允许有一定的变 异,为了减少重复测定中实验误差对确认试验结果 判断的影响, 确认试验阳性临界点应尽可能地远离 允许误差;但各种干扰因素对 ELISA 法检测 HBsAg 结果的影响也较大,尤其是弱反应性结果。所以,将” 样本确认与样本对照比较,S/CO 值被中和下降 50% “设定为确认试验阳性的临界点。
CO 值界于 1~4 的标本;收集血清-40℃保存备检。 1.1.5 阴性对照血清收集 收集 2008 年 6~8 月本室 使用的山东潍坊三维生物工程集团有限公司 HBsAg ELISA 法 诊 断 试 剂 剩 余 阴 性 对 照 血 清 ,4℃ 保 存,使用前混合均匀。 1.1.6 抗-HBs 抗体阳性血清(下称”抗-HBs 血清“)收 集
53
应,和新生儿溶血病,具有现实的临床意义。 MCT 的原理是,通过凝胶的浓度,控制凝胶间
隙的大小,使间隙只能让游离的红细胞通过,从而 使游离的红细胞与聚集红细胞分离,通过离心的红 细胞沉在凝胶管底部,这表明红细胞未凝集(阴性 反应)。 若红细胞在凝胶带上部,则表明红细胞发生 凝集(阳性反应)。该方法已逐渐用于血型鉴定、交叉 配血实验、抗体特异性鉴定,以及抗人球试验等血 清、血型学检查中来。
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阳性血清中和法检测 187 份待确认血清;随机抽取用此法确认的阳性血清和阴性血清,用 Abbott MEIA 法检测,
用抗原稀释法测定该确认方法的最低确认限。 结果:187 份待确认血清中有 165 份被确认阳性,22 份被确认阴性;
Abbott MEIA 法对照检测的 44 份血清结果 22 份阳性、22 份阴性,与确认结果相同;最低确认限 1.1 IU/mL。 结论:
均值
0.052 2.151 1.18 0.12 10.48%
SD
0.004 0.11 0.12 0.015 0.97%
CV(%)
7.69 5.11 10.02 12.5 9.25
2.4 44 份用 Abbott MEIA 法对照 检测的血清 ,结 果为 22 份阳性、22 份阴性,与抗-HBs 抗体阳性血清 中和法确认结果一致。
湖南师范大学学报(医学版)
50
2010,7(2) J Hunan N ormal Univ(Med Sci)
乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性结果的确认
吴斌
(岳阳市中心血站检验科,湖南岳阳 414000)
【摘要】 目的:建立一种简单、经济、实用的确认乙肝表面抗原弱反应性结果的方法。 方法:采用抗-HBs 抗体
2 结果
2.1 抗-HBs 抗体阳性 血清中和法 确认 187 份 HBsAg 待确认血清, 有 165 份确认试验阳性,22 份确 认试验阴性。 确认试验阳性的 165 份血清,其”(样本 确认 S/CO 值/样本对照 S/CO 值)×100%“值在 10%~ 40%之间。 确认结果阴性的 22 份血清中,有 14 份样 本 对 照 S/CO 值 小 于 1, 另 8 份 样 本 对 照 S/CO 值 1.4~2.6,但其”(样本确认 S/CO 值/样本对照 S/CO 值) ×100%“值在 78.16%~90.34%之间。
to detect red cell antigen-antibody reactions [J]. Transfusion,1990,30(2):109-113.
[2] Hitzler W, Bauernfeind U, Sch.o.mig -Brekner J,et al. The
gel centrifugation test in serologic compatibility testing [J]. Beitr Infusionsther, 1990,26:358-361. [3] 杨 世 明,崔 颖,张 勇 萍,等.微 柱 凝 胶 法 在 抗 体 筛 查 中 的 应 用 及 其 影 响 因 素 探 讨[J].现 代 检 验 医 学 杂 志 ,2006,21(4): 55-57.
总之,MCT 即便对初学者而言,结果判断上也 比试管法可靠。 且省时、操作简单,试剂消耗少,成 本低,环境污染少。 特别是对输血病人和妊娠妇女 抗体的筛查, MCT 的敏感性更有利于 早期检出这 些抗体。
参考文献: [1] Lapierre Y, Rigal D, Adam J,et al. The gel test: a new way
收集本实验室检测乙肝病毒五项标志物, 抗HBs 抗体强阳性(抗-HBs 抗体 S/CO 值大于 20)的标 本剩余血清,收集期间 4℃保存(五天为一个收集周 期);收集结束将所有血清混合均匀,用 ELISA 法再 次检测, 结果抗-HBs 抗体强阳性 (抗-HBs 抗体 S/ CO 值大于 20),HBsAg 及 HBeAg 阴性;用实时荧光 PCR 法测定 HBV-DNA,结果<1000copies/mL。 完成 后-40℃保存备用。 1.2 方法 1.2.1 抗-HBs 抗体阳性血清中和法确认 187 份 HBsAg 待确认血清, 每份血清均设样本对照和样本确 认,按试剂盒操作说明书进行,临界值(CO)=2.1×N。
抗-HBs 抗体阳性血清中和法确认 HBsAg 结果可靠,可以用于 HBsAg 的确认,且操作简单、经济、实用,能在各级
医疗机构推广应用。
【关键词】 乙肝表面抗原;乙肝表面抗体;中和法;确认试验
【中图分类号】 R331 【文献标识码】A
【文章编号】1673-016x(2010)02-0050-02
在乙型肝炎病毒感染人群中,部分患者血清乙 肝表面抗原(HBsAg)呈低水平表达,随着检测技术不 断改进,HBsAg 弱反应性结果的比率也在升高[1],但 不同方法、不同试剂检测血清 HBsAg,弱反 应性结 果有较大差异[2-3]。为此,我们探讨采用同一厂家试剂 用中和法对 HBsAg 弱反应性结果进行确认。
阳性对照 阳性对照血清 50μL
样本对照 待确认血清 50 μL
样本确认 待确认血清 50 μL
分别 37℃温育 30min,洗板 5 次,吸干
清洗液 100μL
阴性对照血清 100μL
阴性对照血清 100μL
阴性对照血清 100μL 抗-HBs 血清 100μL
分别 37℃温育 30min
清洗液 50μL
2.2 采用抗-HBs 抗体 阳性血清中 和法 确 认 HBsAg 系列浓度血清,最低确认限(灵敏度)为 1.1IU/mL。 2.3 重复性检测结果见表 1。
表 1 对混合血清检测的精密度(重复性)结果(n=20)
血清
阴性对照 OD 值 阳性对照 OD 值 混合血清样本对照 S/CO 值 混合血清样本确认 S/CO 值 样本确认/样本对照
混合血清可以增加抗-HBs 抗体相对于 HBsAg 抗原血清型的多样性,从而能够适用于中和多种血 清型的 HBsAg 抗原,并且混合血清可以相互稀释单 份血清中的干扰物质,而减小干扰 (下转第 53 页)
影响微柱凝胶法筛查血清抗体的因素 左立新
好重复性和敏感性[1]。 Hitzler 等在试管法中加入了 酶试剂[2]。 在抗体筛查的实验研究中,必需对未经选 择的病人血清,用凝胶离心技术与试管法作对比研 究。 本组结果显示,在 2000 例受血者血清中,筛查 出 6 例不规则抗体,都为 Rh 血型系统免疫型抗体 (均有输血史或反复输血史),与杨世明的研究结果 大致相似[3]。 说明受血者的血清中的不规则抗体,绝 大多数是 Rh 血型系统的免疫性抗体,而其它血型 系统的免疫性抗体较少。
确认实验操作步骤如下:
收 稿 日 期 :2009-11-12 作者简介:吴斌(1973-),男,湖南岳阳人,主管技师,主要从事临床检验工作。 E-mail:hbp3517@yahoo.com.cn;
乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性结果的确认 吴 斌
51
空白对照 清洗液 50μL
阴性对照 阴性对照血清 50μL
我国临床输血技术规范记载:凡遇到交叉配血 不合,有输血史、妊娠史或短期内需要多次输血的 病人,必须进行不规则抗体筛选试验。 MCT 检测, 是现今最好、最灵敏的检测方法之一。
在 Rh 血型系统里,D 抗原的抗原性最强,因此 对受血者和献血员进行 RbD 抗原的检测, 是有必 要的。 但是这一检测方法,在国内开展还不是十分 普遍。 正因为如此,Rh 血型系统的其它抗原(E、C、 c、e)也是没有开展。 致使一些 Rh 阴性者,首次输血 时,接受 Rh 阳性血,机体被处于致敏状态 ,当再次 输 入 Rh 阳 性 血 时 ,出 现 免 疫 记 忆 ,导 致 溶 血 性 输 血反应。 而这种免疫产生的抗体必须采用凝聚胺或 抗人体球蛋白试验才能检测出来。 因此,用特异性 强、敏感性高的检验方法,对受血者和孕产妇,在输 血和产前及产妇在输血进行血型免疫性不规则抗 体筛查,和抗体特异性鉴定,对预防溶血性输血反
酶结合物 50 μL
酶结合物 50 μL
酶结合物 50 μL
酶结合物 50 μL
分别混匀,37℃温育 30min,洗板 5 次,吸干,各孔加底物混合液 100μL,37℃避光显色 15 min,各 孔加 终 止 液 50μL,酶 标仪450nm 读取各孔 OD 值,并计算 S/CO 值
结果判断:⑴样本对照 S/CO 值>1,且(样本确 认 S/CO 值/样 本 对 照 S/CO 值 )×100%<50%被 认 为 确认试验阳性;⑵样本对照 S/CO 值、样本确认 S/CO 值均小于 1,或 样本对照 S/CO 值>1,但 (样本确认 S/CO 值/样本对照 S/CO 值)×100%>50%, 均被认为 确认试验阴性。 ⑶样本对照 S/CO 值>18,(样本确认 S/CO 值/样本对照 S/CO 值)×100%>50%时, 需要对 标本稀释后再确认。 1.2.2 灵 敏 度 将 4IU/mL 的 HBsAg 参 比 血 清 用 阴 性 对 照 血 清 精 确 稀 释 为 1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、 0.9、0.8、0.7、0.6、0.5IU/mL 系列浓度血清, 每个稀释 度 3 份,用 1.2.1 确认法检测 0.5~1.5 IU/mL 共 11 个 系列浓度 33 份血清,求各稀释度 S/CO 值的均值,后 按 1.2.1 结果判断方法判断确认结果,判断为确认试 验阳性的 HBsAg 最低浓度被认为是该方法的最低 确认限(灵敏度)。 1.2.3 重复性 将数份确认阳性的血清混合, 制成 S/ CO 大约为 1.2 的混合血清,用 1.2.1 确认法每天检测 1 次 , 共 测 20 天 , 然 后 计 算 其 均 值 (mean )、 标 准 差 (SD)、变异系数(CV)。 1.2.4 Abbott MEIA 法 对 照 检 测 试 验 从 抗-HBs 抗体阳性血清中和法确认 为阳性的 165 份 血清中 随机抽取 22 份及确认为阴性 的全部 22 份血 清用 MEIA 法检测,检测步骤严格按操作说明书进行。