实验一徒手切片法

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70%、85%,95%,100%)、1/2二甲苯 +1/2纯酒精,二甲苯,1%番红水溶液,1%苯胺蓝 的95%酒精溶液,加拿大树胶。
三、实验步骤
1. 取材:选择发育正常,有代表性的幼茎或叶片,用刀片从植株上割下,立即 进行切片或保存在水中以防萎蔫;
2. 切片:取茎的一小段长约1-2cm (如果是叶片等较为柔软的材料用胡萝卜 或土豆等作为支持物,叶片大小为1×1cm),以左手的拇指、食指和中 指夹住材料(要求材料突出在指尖上面约2-3mm),用右手握住刀片, 刀口向内,以均匀的动作做横切面切片(切片时刀口和材料表面都要经常 湿水,使之滑润),多切,掌握技巧,切片放入培养皿清水中充分展开;
注意:
刀片由左前方向右后方一次切下,中途不要停顿,切记拉锯式切割和用力过猛。 切片时两只手不要紧靠身体或压在桌面上,动作要求使用臂力而非腕力。 切片厚度不要太厚,否则最后封片时盖玻片盖不上,一边会翘起来。
材料和夹持物
切取的 标本
三、实验步骤(续)
3. 固定:切得的薄片选择较薄且透明和相对完整的切片移入70%的酒精中,使 材料固定;
气泡。
滴水 加盖盖玻片
放置标本 叶的横切
四、实验结果
切片充分且透明,细胞重叠不明显,在显微 镜下能清楚地观察茎或者叶片的各部分横切 面的内部结构;
木质化细胞壁呈红色;纤维素细胞壁呈蓝色; 细胞质呈淡蓝色。
五、作业
实验完毕,每人交制好的玻片标本1片,在 标签纸写上玻片名称及自己的姓名和日期;
实验报告(姓名和日期)
实验报告内容
实验名称 实验目的 实验材料及用品 实验步骤(可简化) 实验结果(主要是制片质量结果,不需要绘
图) 实验中出现的问题、分析原因及解决办法。
练习徒手切片法进行制片; 学习番红-苯胺蓝二重染色方法; 观察双子叶植物幼茎和叶片的横切面结构 。
二、实验材料及用品
实验材料:海桐花幼茎和叶片。 实验用具:单、双面刀片;载、盖玻片;显微镜;镊
子;培养皿;胡萝卜块(2cm×1cm×0.3cm)等。 实验药品:蒸馏水、各级浓度的酒精(35%,50%,
4. 观察:将材料置于载玻片上,在低倍显微镜下观察,如内部结构清晰即可进行 下面步骤;
5. 复水:将70%AL倒出 50%AL(5min) 蒸馏水(5min) 6. 染色:用1%番红水溶液染色30min-1h(染色时番红尽可能时间长些) 7. 冲洗:用蒸馏水冲去表面红色染料; 8. 脱水: 50%,70%、85%,95% AL各5min; 9. 对染:用1%苯胺蓝染液染色30s-5min; 10. 用95%AL溶液快速冲去多余染料; 11. 100%AL脱水两次,每次5min; 12. 透明: ½纯酒精+ ½二甲苯(5min) 二甲苯(5min); 13. 封片:用加拿大树胶封藏,封片时镊子先呈45°角放置盖玻片,后轻放,忌
实验一 徒手切片法
Fra Baidu bibliotek 徒手切片法
利用刀片或有柄剃刀徒手将材料切成薄片后置于载玻 片上进行活体观察,或经过一系列药品处理,制成永 久片子。
此法既可做临时制片,必要时也可作成永久制片。 方法简便、快速,要求设备简单。 徒手切片技术要求熟练,才能切出符合要求的薄片,
切片厚度为20-25um。
一、实验目的
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