交叉配血试验

注 意 事 项
1.洗涤要迅速，中途不能停，洗彻底。 1.洗涤要迅速，中途不能停，洗彻底。 洗涤要迅速 2.严格把握离心速度和时间。 严格把握离心速度和时间 2.严格把握离心速度和时间。 3.观察结果时 观察结果时， 轻摇。 3.观察结果时，须轻摇。 4.冷凝集素 脐血有网织红细胞、洗涤不充分、 冷凝集素、 4.冷凝集素、脐血有网织红细胞、洗涤不充分、抗人球 蛋白血清中含有抗运铁蛋白 可使红细胞凝集。 抗运铁蛋白， 蛋白血清中含有抗运铁蛋白，可使红细胞凝集。 5.先盐水观察， 溶血标本弃用 先盐水观察 弃用。 5.先盐水观察，有溶血标本弃用。 6.加阳性 阴性对照。主侧次侧交叉结束后， 加阳性、 6.加阳性、阴性对照。主侧次侧交叉结束后，加1滴阳性 对照细胞，离心后应有红细胞凝集，若不凝需重做。 对照细胞，离心后应有红细胞凝集，若不凝需重做。 7.抗人球试验费时 繁琐， 灵敏度好、特异性强。 抗人球试验费时、 7.抗人球试验费时、繁琐，但灵敏度好、特异性强。
实验二 交叉 掌握凝聚胺交叉配血法的原理、方法。 原理 红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺 溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞 表面的负电荷，缩短红细胞之间的距离，使 红细胞产生非特异性的集聚。悬浮液具有中 和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性 凝集散开，试验结果为阴性；如果红细胞被 相应的抗体致敏，则凝集就不会散开，试验 结果为阳性。
思考题
1、哪些因素可影响抗人球蛋白交叉 配血试验结果。 2、比较抗人球蛋白和凝聚胺交叉配 血试验的原理、方法和异同点。
镜、离心机、37℃水浴箱。 37℃水浴箱 37℃水浴箱
试剂 抗人球试剂（多抗）、生理盐水。 标本 静脉血。
操 作
1.标记试管 标记试管，标明主侧、次侧 标记试管 2.加样 加样 主侧管：供血者3～5%悬红1滴+受血者血清2滴 主侧管 + 次侧管：受血者3～5%悬红1滴+供血者血清2滴 次侧管 + 3.离心15秒,观察是否凝集 离心15 离心15秒 4.混匀，37℃水浴30min，盐水洗涤3次（快）， 扣干。 5.加抗人球蛋白试剂1滴，混匀，离心15秒。 6.轻摇 轻摇，观察结果。 轻摇
注意事项
1.肝素治疗患者，多加几滴聚凝胺以中 和肝素。 2.试剂使用前请放置至室温平衡后再行 操作。 3.天冷时，冷凝集素会干扰交叉配血。 4.按说明书操作。 5.先盐水观察，再做聚凝胺法。
二、抗人球蛋白法配血试验
目的 掌握抗人球法原理、方法 原理 检查有无IgG抗体 记号笔、显微 器材 小试管、滴管、试管架、记号笔 记号笔
器材 小试管、滴管、试管架、记号笔、 显微镜、离心机。 试剂 凝聚胺试剂盒。 标本 静脉血。
操 作
1. 标记试管：取试管两支，分别标明主侧次侧， 标记试管：取试管两支，分别标明主侧次侧， 加样: 2. 加样: 主侧管：供血者3 悬红1 受血者血清2 主侧管：供血者3～5％悬红1滴+受血者血清2滴 次侧管：受血者3 悬红1 供血者血清2 次侧管：受血者3～5％悬红1滴+供血者血清2滴。 3.离心15秒 离心15 3.离心15秒,观察是否凝集 4.各加LIM溶液0.65ml，混匀后，再各加Polybrene溶液2 各加LIM溶液0.65ml Polybrene溶液 4.各加LIM溶液0.65ml，混匀后，再各加Polybrene溶液2 混匀。 滴，混匀。 3000r/min离心15秒 然后把上清液倒掉，不要沥干， 离心15 5. 3000r/min离心15秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让 管底残留约0.1ml液体。 管底残留约0.1ml液体。 0.1ml液体 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集， 6. 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必 须重作。 须重作。 最后加入Resuspending2 Resuspending2滴 轻轻转动试管混匀1min 1min内观 7. 最后加入Resuspending2滴，轻轻转动试管混匀1min内观 察结果，看凝集是否散开。 察结果，看凝集是否散开。