细菌的分离、接种和培养ppt课件
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细菌划线分离与纯培养 PPT
用于细菌计数液体培养基接种法斜面接种法10实验四实验三小结7细菌接种的基本程序灭菌接种环沾取标本接种灭菌接种环杀灭接种环沾染的细菌以免污染标本杀灭接种环沾染的细菌以免污染环境11实验四实验三小结6平板划线分离培养法三段分区法四段分区法12实验四实验三小结分区划线法3区第一区划线灭菌接种环第二区划线灭菌接种环第三区划线灭菌接种环13实验四实验三小结连续划线法1415斜面接种法及接种后菌落生长示意图16实验四实验三小结细菌培养法一般培养需氧培养
”
4
实验三
实验四
小结
“ 3
需氧性细菌分离培养法 1、平板划线分离法 2、倾注平皿分离法 3、芽孢需氧菌分离培养法 4、利用化学药品的分离培养法 5、实验动物分离法 6、琼脂斜面分离法 7、琼脂平板涂布分离法 8、营养肉汤分离法
”
5
实验三
实验四
小结
“ 4
厌氧性细菌分离培养法 1、生物学方法 植物组织（马铃薯、燕麦、发 芽谷物）动物组织（新鲜动物组织、加热的肌 肉） 2、化学方法 焦性没食子酸法、硫乙醇酸钠法 3、物理学方法 利用加热、密封、抽气等物理 方法，驱除或者隔绝环境及培养基中的氧气， 造成厌氧环境。
三、作业
2
3
1.为什么要进行细菌的分离培养？ 2.进行分离培养应注意哪些事项？ 3.细菌分离培养的方法有哪些？（重点叙述 平板划线法）
3
实验四
实验四
小结
“ 1
2
在细菌学检验中，细菌的分离培养是重要的 基本技术之一。从混杂微生物中获得单一菌 株纯培养的方法称为分离。纯培养是指一株 菌种或者一个培养物中所有的细菌都是由一 个细胞分裂、繁殖产生的后代。 分离培养的目的在于从被检的材料中，或 者从众多杂菌中分离出纯的病原菌。 细菌分离培养应先从被检材料或者病料中 分离培养出单个菌落，然后取可疑菌落进 行纯培养，再将纯培养物移植培养。
”
4
实验三
实验四
小结
“ 3
需氧性细菌分离培养法 1、平板划线分离法 2、倾注平皿分离法 3、芽孢需氧菌分离培养法 4、利用化学药品的分离培养法 5、实验动物分离法 6、琼脂斜面分离法 7、琼脂平板涂布分离法 8、营养肉汤分离法
”
5
实验三
实验四
小结
“ 4
厌氧性细菌分离培养法 1、生物学方法 植物组织（马铃薯、燕麦、发 芽谷物）动物组织（新鲜动物组织、加热的肌 肉） 2、化学方法 焦性没食子酸法、硫乙醇酸钠法 3、物理学方法 利用加热、密封、抽气等物理 方法，驱除或者隔绝环境及培养基中的氧气， 造成厌氧环境。
三、作业
2
3
1.为什么要进行细菌的分离培养？ 2.进行分离培养应注意哪些事项？ 3.细菌分离培养的方法有哪些？（重点叙述 平板划线法）
3
实验四
实验四
小结
“ 1
2
在细菌学检验中，细菌的分离培养是重要的 基本技术之一。从混杂微生物中获得单一菌 株纯培养的方法称为分离。纯培养是指一株 菌种或者一个培养物中所有的细菌都是由一 个细胞分裂、繁殖产生的后代。 分离培养的目的在于从被检的材料中，或 者从众多杂菌中分离出纯的病原菌。 细菌分离培养应先从被检材料或者病料中 分离培养出单个菌落，然后取可疑菌落进 行纯培养，再将纯培养物移植培养。
细菌培养基的制备、灭菌及接种、培养技术ppt课件
20
目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从 而获得若干种细菌纯培养技能。 掌握几种接种技术。
21
实验材料
无菌培养皿(直径90mm)10套、无菌移液管1mL2
支、10mL1支。
营养琼脂培养基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶， 无菌稀释水90mL1瓶、9mL5管。 其它：接种环、酒精灯、恒温箱。
22
c. 第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放 在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。
18
实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法： 不能用加热灭菌的 液体物质（如维生 素、血清），一般 可用细菌过滤器进 行除菌。
19
第二部分 细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求 实验材料 实验程序
9
实 验 程 序2
（培养基的配制方法和步骤） 3. 调pH值：用10％ NaOH调pH至7.6，用精 密pH试纸对照。 4. 分装：将培养基分装于5支试管，其余全部 倒入250mL锥形瓶中，分别塞上棉塞。注意 不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，挂上标签，注明何种培养基。 6. 灭菌备用：培养基灭菌后必须在37℃下恒 温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
实验二
细菌培养基的配制、灭 菌及接种、培养技术
1
第一部分 细菌培养基的制备、灭菌
目的要求 实验材料 实验程序
2
目的要求
熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。 掌握培养基和无菌水的制备方法。 掌握高压蒸气灭菌技术。
3
实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。
高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。 其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻 璃珠等。
目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从 而获得若干种细菌纯培养技能。 掌握几种接种技术。
21
实验材料
无菌培养皿(直径90mm)10套、无菌移液管1mL2
支、10mL1支。
营养琼脂培养基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶， 无菌稀释水90mL1瓶、9mL5管。 其它：接种环、酒精灯、恒温箱。
22
c. 第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放 在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。
18
实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法： 不能用加热灭菌的 液体物质（如维生 素、血清），一般 可用细菌过滤器进 行除菌。
19
第二部分 细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求 实验材料 实验程序
9
实 验 程 序2
（培养基的配制方法和步骤） 3. 调pH值：用10％ NaOH调pH至7.6，用精 密pH试纸对照。 4. 分装：将培养基分装于5支试管，其余全部 倒入250mL锥形瓶中，分别塞上棉塞。注意 不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，挂上标签，注明何种培养基。 6. 灭菌备用：培养基灭菌后必须在37℃下恒 温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
实验二
细菌培养基的配制、灭 菌及接种、培养技术
1
第一部分 细菌培养基的制备、灭菌
目的要求 实验材料 实验程序
2
目的要求
熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。 掌握培养基和无菌水的制备方法。 掌握高压蒸气灭菌技术。
3
实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。
高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。 其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻 璃珠等。
细菌分离培养、接种技术及培养方法-精品医学课件
革兰染色法
Gram staining
临床微生物与免疫学检验教研室
一、实验目的
1.掌握细菌涂片制作方法； 2.掌握革兰染色法和细菌的基本形态； 3.了解革兰染色法的临床意义。
二、革兰染色原理
原理
细胞壁学说 等电点学说 化学学说
革兰阳性菌 细胞壁肽聚糖形成网状 结构，乙醇处理时，脱水 引起网状结构孔径变小， 通透性降低，结晶紫-碘 复合物不易脱去
实验步骤和方法
1)连续划线分离法：①将接种环火焰灭菌，待冷后取标 本少许；②左手持平板，五指固定平皿盖边缘，向外反 转手掌，装有培养基的平板于手掌内用拇指、小指和 无名指固定，并将平板边缘稍微提高呈现30～45度角， 置酒精灯前上方5～6cm；③右手持已取材的接种环， 先在平板一端涂布，然后快速大幅度左右来回以密而 不重的曲线形式作连续划线接种，使整个平板布满曲 线④划线完毕，将平板作好标记，置35℃孵育18-
革兰阴性菌
细胞壁肽聚糖含量低， 脂类物质含量高，乙醇处 理时，脂类物质溶解，细 胞壁的通透性增加，结晶 紫-碘复合物易脱去
三、实验器材和试剂
1.标本 ：金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的培养物。 2.试剂 ：革兰染液。 3.其他 ：载玻片、生理盐水、接种环、酒精灯、显微镜。
四、操作步骤
1. 细菌涂片制备 ⑴涂片：取洁净载玻片一张，按无菌的方法取1~2环生 理盐水于载玻片上，按无菌的方法各取葡萄球菌和大肠埃 菌 培养物少许，在生理盐水中均匀研磨，涂好的菌膜直径 1cm左右。 ⑵干燥：室温下自然干燥或于酒精火焰半尺高处烘干。 ⑶固定：火焰加热法。目的是杀死细菌，并使菌体与载 玻片粘附牢固，染色时不致于被染液和水冲掉。
培养方法
2 二氧化碳培养法 (1)二氧化碳孵箱：能自动调节二氧化碳的含量和温度， 使用较为方便。 (2)烛缸法：取有盖磨口标本缸或玻璃干燥器，在盖及磨 口处涂以凡士林。将接种细菌的培养基放入缸中，点燃 缸内蜡烛，加盖密封。当蜡烛燃烧时会消耗缸内氧气并 产生CO2，随着缸内氧气的逐渐减少，蜡烛会自行熄 灭，此时缸内CO2浓度约为5％左右。 (3)化学法(重碳酸钠一盐酸法)：（自学）
细菌的分离、培养和鉴定ppt课件
请大家自觉维持实验室的卫生和秩序！
Hale Waihona Puke 病料在接种培养基后，经过一段时间，应检查其 生长状况。首先用肉眼检查有无细菌生长；若有， 则需进一步检查菌落是否纯一。形态特征包括： 大小、形状、突起或扁平、凹陷、边缘（光滑、 波形、锯齿状、卷发状等）、颜色（红色、灰白 色、黄色等）、表面（光滑、粗糙等）、透明度 （不透明、半透明、透明等）和粘度等
细菌的分离、培养与鉴定
王欣欣
一、细菌的分离
1、从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的 方法称为分离。 2、分离的目的在于从被检材料中、或者从 污染的众多杂菌中分离出纯的病原菌。
1)病料采集
病料：疑似细菌性疾病的水产养殖动物 以鱼为例，常见症状：体色发黑，体表溃 烂、充血、粘液增多，鳃、鳍破损，内脏 红肿，腹水，眼球凸出或浑浊，肛门红肿 等等。 活体病料→应考虑病原在疾病发展过程中 的部位（上述症状） 病料死后→应立即采集，越早越好
生化鉴定管
各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养 基质的分解能力也不一样，因而代谢产物 或多或少地各有区别，可供鉴别细菌之用
ATB Expression：自动化微生物鉴 定和药敏分析系统
分子生物学技术
分子生物学鉴定目前比较流行的主要是核 酸检测技术, 包括基因测序、指纹图谱技术、 基因探针技术、聚合酶链反应( PCR)、GC 含量测定等。
培养基的种类 ① 基础培养基：含有一般细菌生长繁殖需要的基本营养物
质；可作为一些特殊培养基的基础成分（普通营养琼脂） ② 加富培养基：在基础培养基中加入某些特殊营养物质
（如血液/血清、酵母浸膏或生长因子等）；用以培养对 营养要求高的微生物（2216E） ③ 选择培养基：利用细菌对某种或某些化学物质的敏感性 不同；在培养基中加入这类物质，利于所需分离的细菌生 长，而抑制不需要的细菌生长，从而达到分离某种微生物 的目的。（中国科学院海洋研究所专利：一种定量检测鳗弧 菌的选择性培养基及其制备）【利用鳗弧菌对氨苄青霉素的抗性 】 ④ 鉴别培养基：是一类含有某种特定化合物或试剂的培养 基。某种细菌在这种培养基上培养后，产生某种代谢产物， 能与这种特定化合物或试剂发生某种明显的特征性反应； 从而达到区分不同的微生物。（TCBS）
Hale Waihona Puke 病料在接种培养基后，经过一段时间，应检查其 生长状况。首先用肉眼检查有无细菌生长；若有， 则需进一步检查菌落是否纯一。形态特征包括： 大小、形状、突起或扁平、凹陷、边缘（光滑、 波形、锯齿状、卷发状等）、颜色（红色、灰白 色、黄色等）、表面（光滑、粗糙等）、透明度 （不透明、半透明、透明等）和粘度等
细菌的分离、培养与鉴定
王欣欣
一、细菌的分离
1、从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的 方法称为分离。 2、分离的目的在于从被检材料中、或者从 污染的众多杂菌中分离出纯的病原菌。
1)病料采集
病料：疑似细菌性疾病的水产养殖动物 以鱼为例，常见症状：体色发黑，体表溃 烂、充血、粘液增多，鳃、鳍破损，内脏 红肿，腹水，眼球凸出或浑浊，肛门红肿 等等。 活体病料→应考虑病原在疾病发展过程中 的部位（上述症状） 病料死后→应立即采集，越早越好
生化鉴定管
各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养 基质的分解能力也不一样，因而代谢产物 或多或少地各有区别，可供鉴别细菌之用
ATB Expression：自动化微生物鉴 定和药敏分析系统
分子生物学技术
分子生物学鉴定目前比较流行的主要是核 酸检测技术, 包括基因测序、指纹图谱技术、 基因探针技术、聚合酶链反应( PCR)、GC 含量测定等。
培养基的种类 ① 基础培养基：含有一般细菌生长繁殖需要的基本营养物
质；可作为一些特殊培养基的基础成分（普通营养琼脂） ② 加富培养基：在基础培养基中加入某些特殊营养物质
（如血液/血清、酵母浸膏或生长因子等）；用以培养对 营养要求高的微生物（2216E） ③ 选择培养基：利用细菌对某种或某些化学物质的敏感性 不同；在培养基中加入这类物质，利于所需分离的细菌生 长，而抑制不需要的细菌生长，从而达到分离某种微生物 的目的。（中国科学院海洋研究所专利：一种定量检测鳗弧 菌的选择性培养基及其制备）【利用鳗弧菌对氨苄青霉素的抗性 】 ④ 鉴别培养基：是一类含有某种特定化合物或试剂的培养 基。某种细菌在这种培养基上培养后，产生某种代谢产物， 能与这种特定化合物或试剂发生某种明显的特征性反应； 从而达到区分不同的微生物。（TCBS）
微生物-细菌ppt课件
3、VP试验： 4、吲哚试验：
大肠杆菌和产气肠杆菌均能发酵葡萄糖，产酸 产气。
有些细菌能分解培养基中的色氨酸生成吲哚。
5、硫化氢试验： 有些细菌含硫氨基酸，生成硫化氢。
2023/12/30
3.细菌合成代谢产物
1.维生素 2.抗生素 3.细菌素 4.毒素 5.热原质 G- 菌产生的一种脂多糖物质，将其注入人和
2023/12/30
第二节 细菌的生理
一、细菌的化学组成
水分
（70％－90％）
游离水 结合水
细菌的 化学组成
固形物
（10％－30％）
有机物 无机物
2023/12/30
蛋白质 核酸 糖类 脂类 其它有机物
二、细菌的营养类型
自养菌 自养菌具有完备的酶系统，合成能力较强，
能以简单的无机碳化物作为碳源，合成菌体所需 的有机物质。
2023/12/30
四、细菌的生长繁殖：
（一）细菌生长繁殖的条件
人工培养细菌，除需提供充足的营养物质外，尚需合 适的酸碱度、适宜的温度及必要的气体环境。
营养物质
五种营养成分
温度
最适生长温度37℃
PH 渗透压
最适PH为7.2-7.6 多在等渗条件下
2023/12/30
气体
根据细菌呼吸类型
（二）细菌的繁殖方式和速度 细菌的繁殖方式是简单的二分裂。 1、生长曲线的概念
2023/12/30
第三节 细菌的生化试验
一、概念：
各种细菌对营养物质分解能力不一致，代谢 产物亦不尽相同，据此可以设计特定的生化反应 为，作为鉴定细菌。
2023/12/30
2023/12/30
（3）异染颗粒：是某些细菌细胞浆中一种特 有的酸性小颗粒，他们对碱性染料的亲和性特 别强，用美蓝染色，它们呈红紫色。菌体其他
《细菌分离与纯培养》课件
《细菌分离与纯培养》 PPT课件
在这个PPT课件中，我们将介绍细菌分离与纯培养的方法，并讨论其应用与意 义。
背景和目的
了解细菌的分离与纯培养的重要性及其在科学研究和应用领域的应用。
1 科学研究
帮助分离和观察不同类型的细菌，为研究其 特性和功能提供基础。
2 应用领域
为制药、食品工业以及环境监测等领域提供 重要的技术支持。
总结与展望
细菌分离与纯培养是微生物学重要的基础实验技术。随着科学技术的进步， 我们将不断改进和创新这些技术，为细菌研究和应用领域带来更多的机遇和 挑战。
实验结果与讨论
我们成功分离了多个细菌菌株，并进行了进一步观察和鉴定。实验结果显示 了不同菌株的形态特征和生长规律。通过讨论分析，我们揭示了细菌在不同 培养条件下的适应性和变异能力。
应用与意义
细菌分离与纯培养技术在医学、环境保护和食品安全等领域具有广泛的应用。通过研究细菌的特性和功能，我 们可以开发新的药物、改善食品质量，并有效控制环境中的细菌传播。
细菌分离的方法
1
无菌操作
保证实验环境和仪器器皿的洁净，避免
菌落计数法
2
外部细菌的污染。
通过分离不同菌落形态，识别细菌的类
型和数量。基的特性，选择适宜的培 养条件来分离细菌。
纯培养的方法
液体培养
在含有营养物质的液体培养基中培养细菌，方便进 行进一步实验和观察。
固体培养
使用含有琼脂的固体培养基，利用菌落形成的特点， 分离出单一细菌。
在这个PPT课件中，我们将介绍细菌分离与纯培养的方法，并讨论其应用与意 义。
背景和目的
了解细菌的分离与纯培养的重要性及其在科学研究和应用领域的应用。
1 科学研究
帮助分离和观察不同类型的细菌，为研究其 特性和功能提供基础。
2 应用领域
为制药、食品工业以及环境监测等领域提供 重要的技术支持。
总结与展望
细菌分离与纯培养是微生物学重要的基础实验技术。随着科学技术的进步， 我们将不断改进和创新这些技术，为细菌研究和应用领域带来更多的机遇和 挑战。
实验结果与讨论
我们成功分离了多个细菌菌株，并进行了进一步观察和鉴定。实验结果显示 了不同菌株的形态特征和生长规律。通过讨论分析，我们揭示了细菌在不同 培养条件下的适应性和变异能力。
应用与意义
细菌分离与纯培养技术在医学、环境保护和食品安全等领域具有广泛的应用。通过研究细菌的特性和功能，我 们可以开发新的药物、改善食品质量，并有效控制环境中的细菌传播。
细菌分离的方法
1
无菌操作
保证实验环境和仪器器皿的洁净，避免
菌落计数法
2
外部细菌的污染。
通过分离不同菌落形态，识别细菌的类
型和数量。基的特性，选择适宜的培 养条件来分离细菌。
纯培养的方法
液体培养
在含有营养物质的液体培养基中培养细菌，方便进 行进一步实验和观察。
固体培养
使用含有琼脂的固体培养基，利用菌落形成的特点， 分离出单一细菌。
《细菌分离培养》课件
在工业领域的应用
食品工业
在食品工业中，细菌分离培养用 于检测食品中的病原菌，保障食
品安全。
生物能源
利用细菌发酵产生生物燃料，如乙 醇、生物柴油等，替代化石燃料。
生物降解
某些细菌能够降解污染物，对环境 保护和治理具有重要意义。
06
展与未来发展方向
新技术的开发与应用
基因编辑技术
人工智能与机器学习
《细菌分离培养》 PPT课件
• 细菌分离培养概述 • 细菌分离技术 • 细菌培养技术 • 细菌的鉴定与分类 • 细菌分离培养的应用 • 展望与未来发展方向
目录
01
细菌分离培养概述
细菌分离培养的定义
细菌分离培养是指从混合菌群中分离 出单一菌种的过程，通过选择性培养 基和特定的培养条件，使目的菌种得 以繁殖并从其他微生物中分离出来。
高了分离效率。
03
细菌培养技术
培养基的种类与制备
固体培养基
用于细菌分离和纯化， 制备时需添加琼脂作为
凝固剂。
液体培养基
用于大量繁殖细菌，制 备相对简单。
选择性培养基
加入特定成分抑制某些 细菌生长，突出所需分
离的细菌。
鉴别培养基
根据细菌代谢产物不同 ，通过指示剂变化鉴别
不同细菌。
培养方法
01
02
05
04
菌种分离
将样品中的微生物接种到选择好的培 养基上，通过培养得到单一菌落。
02
细菌分离技术
划线分离法
总结词
通过在固体培养基上划线，使细菌分散生长的方法。
详细描述
划线分离法是最早的细菌分离技术之一，通过在固体培养基表面划线，使细菌 在划线区域内生长繁殖，形成单个菌落。该方法适用于细菌的纯培养分离。
《细菌的培养与分离》课件
充分理解和应用培养技巧能够确保实验数据 的准确性和可靠性。
《细菌的培养与分离》 PPT课件
本课件将介绍细菌的培养与分离的重要性和方法，包括常规和非常规培养方 法、筛选法和稀释法等。正确的培养技巧能够获得高质量的实验数据。
细菌的培养与分离
概述
介绍细菌培养的意义和目的，同时列举常用的 菌种及其特点。
细菌的分离
介绍筛选法、稀释法和选择性培养基法等细菌 分离的技术。
培养方法
常规培养方法
讲解液体培养、平板培养和筛 选培养等常用的细菌培养方法。
非常规培养方法
介绍厌氧培养、微生物电解池 和组织培养等细菌培养方法的 创新性应用。
培养基的选择
探讨不同细菌菌种对培养基需 求的差异，并重点介绍选择性 培养基的设计与应用。
细菌的分离
1
筛选法
详细阐述直接筛选法、交叉筛选法等方法，用于分离目标细菌或筛选抗生素产生论如何选择 合适的培养基。
培养技巧
讲解消毒操作、均匀涂布法、悬液法以及培养 温度和pH等的控制方法。
概述
1 细菌培养的意义和目的
了解细菌的培养有助于深入研究微生物学，并应用于医学、环境保护等领域。
2 常用的菌种及其特点
介绍常见的细菌菌种，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等，及其特性和研究价值。
悬液法
探讨液体培养和悬液 传代的操作步骤和注 意事项。
培养温度、pH 等控制
讲解如何控制培养温 度和pH值，以适应不 同菌种的生长要求。
结论
1 细菌的培养和分离是微生物学研究
的基础
细菌培养和分离技术的掌握对于深入研究微 生物学和开展相关应用具有重要意义。
2 采用正确的方法和技巧能够获得高
质量的实验数据
《细菌的培养与分离》 PPT课件
本课件将介绍细菌的培养与分离的重要性和方法，包括常规和非常规培养方 法、筛选法和稀释法等。正确的培养技巧能够获得高质量的实验数据。
细菌的培养与分离
概述
介绍细菌培养的意义和目的，同时列举常用的 菌种及其特点。
细菌的分离
介绍筛选法、稀释法和选择性培养基法等细菌 分离的技术。
培养方法
常规培养方法
讲解液体培养、平板培养和筛 选培养等常用的细菌培养方法。
非常规培养方法
介绍厌氧培养、微生物电解池 和组织培养等细菌培养方法的 创新性应用。
培养基的选择
探讨不同细菌菌种对培养基需 求的差异，并重点介绍选择性 培养基的设计与应用。
细菌的分离
1
筛选法
详细阐述直接筛选法、交叉筛选法等方法，用于分离目标细菌或筛选抗生素产生论如何选择 合适的培养基。
培养技巧
讲解消毒操作、均匀涂布法、悬液法以及培养 温度和pH等的控制方法。
概述
1 细菌培养的意义和目的
了解细菌的培养有助于深入研究微生物学，并应用于医学、环境保护等领域。
2 常用的菌种及其特点
介绍常见的细菌菌种，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等，及其特性和研究价值。
悬液法
探讨液体培养和悬液 传代的操作步骤和注 意事项。
培养温度、pH 等控制
讲解如何控制培养温 度和pH值，以适应不 同菌种的生长要求。
结论
1 细菌的培养和分离是微生物学研究
的基础
细菌培养和分离技术的掌握对于深入研究微 生物学和开展相关应用具有重要意义。
2 采用正确的方法和技巧能够获得高
质量的实验数据
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纯化（平板划线法） 倒平板——划线——培养——挑菌落——纯种（纯培养）
平板划线分离的方法 1.斜线法 2.曲线法 3.方格法 4.放射法 5.四格法
五、微生物实验技术操作规范示例 （一）斜面接种无菌操作技术 （二）倒平板及平板划线接种
（一）斜面接种无菌操作技术
(二）倒平板及平板划线接种
（三）平板划线接种：
六、作 业
1. 简述无菌操作过程中的注意点。 2. 拟出从土壤中分离细菌的主要实验步骤。 3. 如何检验平板上某个单菌落是不是纯培养？ 4. 培养时为什么要将培养皿倒置培养？
• 一、视频演示 • 二、取自己做的培养皿，观察，并作图 • 三、挑取菌落，进行革兰氏染色，初步判别革兰
（二）稀释涂布平板法
此法与稀释混合平板法基本相同，无菌操作也一样， 所不同的是先将牛肉膏蛋白胨培养基融化，在火焰旁注入 培养皿，摇匀后制成平板，然后用三支1ml无菌吸管分别 由10-4、10-5、10-6三管土壤稀释液中各吸取0.2ml对号放入 已写好稀释度的平板中，用无菌玻璃涂棒在培养基表面轻 轻地涂布均匀，然后分别倒置于37℃温箱中培养后，再挑 取单个菌落，直至获得纯培养。
实验五 细菌的分离、接种 和培养
一．目的要求 二．实验原理 三．实验材料 四．实验步骤 五．操作规范示例 六．作 业
一、目的要求
掌握从环境（土壤、水体、活性污泥等）中分离和纯化 微生物的方法和原理；
倒平板； 细菌纯种分离：稀释混合平板分离法、稀释涂布平板
分离法和平板划线法； 接种技术； 无菌操作技术；
二、实验原理
在自然界中，不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一 起的，为了生产和科学研究的需要，当我们希望获得某一种微生 物时，就必须从混杂的微生物类群中分离出它，以得到只含有这 一种微生物的纯培养物，这种获得纯培养物的方法称为微生物的 分离与纯化。
为了获得纯种的微生物，一般根据该微生物营养或培养特点 (微生物对营养、酸碱度、氧等条件)，或对某种抑制剂的耐受性不 同，或对某种环境条件要求不同，从而制作或设置一些选择性培 养基，或选择性培养条件，再用稀释涂布平板法或稀释混合平板 法或划线法分离，纯化该微生物，直至得到该纯种菌株。
三、实验试剂与器材 ① 土壤样品（环境样品） ② 牛肉膏蛋白胨培养基； ③ 无菌试管、无菌三角瓶、无菌玻
璃涂棒、无菌吸管、接种环、无 菌培养皿； ④ 超净工作台
四、实验步骤 （一） 稀释混合平板法
3. 培养与移植
待平板完全冷凝后，将平板倒置37℃恒温箱中培养 24～48小时，检查分离结果。将培养后长出的单个菌落 分别挑取接种到牛肉膏蛋白胨培养基的斜面上，然后置 于37℃恒温箱中培养，待菌苔长出后，检查菌苔是否单 纯，也可用显微镜涂片染色检查是否是单一的微生物， 若有其它杂菌混杂，就可再一次进行分离、纯化，直至 获得纯培养。
氏阴性或阳性菌 • 四、将自己的培养皿、试管清洗干净，放入抽屉 • 五、作业：从土壤中分离细菌的主要实验步骤。
（三）平板划线分离法
制备土壤稀释液
倾注2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接 种锄 8.小解剖刀
移接斜面
常用的接种方法 划线接种 点接种 穿刺接种 涂布接种 液体接种 注射接种
斜面接种时的无菌操作 (1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞