角膜内皮细胞镜

眼视光特检技术四

2007-06-15 08:42 A.M.

第四章角膜内皮细胞镜

学习提要：角膜内皮细胞正常值、角膜内皮镜的临床应用和操作。

第一节概述

角膜内皮细胞镜也称角膜内皮显微镜或角膜内皮镜，它是利用镜面反射的原理，观察角膜内皮细胞形态和密度的改变并进行分析处理的一种仪器。由于角膜内皮细胞和房水屈光指数不同，两者之间形成了界面；当一窄光束聚焦在这一界面上时引起反射，内皮细胞各部分反射程度的差异显示出细胞的边界。利用显微镜放大观察并照相，便可取得内皮细胞大小形态和密度等客观资料。

角膜内皮镜的用途是：通过观察角膜内皮细胞大小形态、密度（细胞数量）及计算分析，以确定病因及发病机制、了解病情、判断手术和治疗对角膜内皮细胞的影响。

目前，临床上角膜内皮镜有两种类型，非接触型和接触型。

1.非接触型角膜内皮镜（如日本KONAN公司生产的NONCON ROBO）包括照明装置和显微放大光路，在分光显微物镜中照像与观察光路以一定的角度固定。它不接触受检者角膜，能自动对焦并照像，能安全、舒适、方便地进行测量，临床上对难以配合的儿童、老人及角膜术后不久的患者均较便利。因放大倍率较低，图象分辨率稍差，但能满足临床需要，见图4-1。

2、接触型角膜内皮镜：其照明和显微放大装置与非接触型角膜内皮镜相同。不同之处是在物镜前面装上一个锥型的玻璃压平角膜镜，此镜与压平眼压计的压平镜类似。需要在角膜表面麻醉下进行角膜检查。因检查时眼球相对固定，可排除眼球轻微震颤的干扰，焦点不易移动，图象清楚，分辨率好，为临床和科研提供了更为精确的资料，但检查操作相对较难。

第二节操作技术

一、非接触型角膜内皮镜(以KONAN非接触角膜内皮镜为例)

1. 接通电源，打开机器后，屏幕上显示主菜单。

2. 鼠标（或控制板控制）左击ID框输入患者姓名（字母）或编号（数码），完成后左击END。

3. 时间设置，左击TIME框设置正确的时间,完成后左击END。

4. 点击R或L框选择左右眼。

5. 鼠标左击RECORD框（或控制板按REC钮）执行自动摄像。若进行区域摄像，用鼠标左击屏幕上所示的区域，然后该圆框将显亮。

6．调整受检者位置并使之配合检查：

（1）如对左眼摄像，让受检者下颌放在右下颌架上。反之，对右眼摄像时让病人下颌放在左下颌架上。如果下颌没有放好位置，屏幕上的R/L键将闪烁。

（2）调整下颌架高度使受检眼在屏幕上可见，其瞳孔中心居于屏幕中央位置。

（3）请受检者注视仪器内的固视灯，睁大眼睑直到摄像完成。在固视灯闪烁时，不要眨眼。7．摄像时，左击RECORD框或按REC钮，机器将自动摄像。此时即可见角膜内皮细胞图象显示在屏幕上。图象可存储两张，左右眼各一张。在摄像不能进行或病人下颌没有放好在下颌架上时，机器将有一提示音。

8．选择一个清晰的图象来进行细胞记数，点中所有需要的细胞的中央，不要略去中间的细胞，至少要记数50个细胞，最多输入200个细胞。输入完成后，点击END框，出现检查资料。

二、接触型角膜内皮镜(以TOPCON角膜内皮检查仪为例)

1. 接通电源，开启计算机显示器、主机及打印机开关。

2. 注意显示幕中检查日期，需要时调整到正确的日期。

3. 在显示幕上输入受检者姓名、性别、年龄、眼别及诊断等资料。

4. 检查前滴用眼部表面麻醉剂2～3次。

5. 固定受检者额部，调整眼位。

6. 调节旋钮，让仪器镜头从正前方缓慢接触受检者角膜，当仪器发出一提示音时，表示已接触角膜，轻微调整焦点距离使图象清晰。

7. 选择清晰图象4幅进行打印。

8．按鼠标，退出程序，检查完毕关机。

9．棉签沾75%酒精，轻轻地擦拭镜头，然后再用棉签沾生理盐水轻轻擦洗一次。

第三节参数分析及临床应用

角膜内皮镜可以观察角膜各部位的内皮细胞，一般以观察角膜中央部分为主。角膜内皮细胞图象分析主要包括定量分析（内皮细胞密度、细胞面积等）及定性分析（内皮细胞形态）。一、正常角膜内皮细胞形态及密度

为一单层扁平细胞，呈六角形、紧密镶嵌、大小均等、排列整齐，对维持角膜透明和相对脱水状态有极为重要作用。正常人的角膜内皮细胞密度（每平方毫米内皮细胞的数量）随年龄增长而降低：1 10岁最高，20 50岁相对稳定，60岁后明显下降。一般认为维持正常角膜内皮屏障功能所需最低临界密度为700个/mm2。

二、角膜内皮细胞图象定性分析

1.内皮细胞形态正常的内皮细胞呈六边形，大小相等、均匀规则、边界清晰，细胞边界的交叉角为120°，随著年龄增长尤其在60岁以后或某些眼病时，可见细胞形态发生变化，大小不等、形态不规则，细胞平均面积增大。

2.内皮细胞边界正常角膜内皮细胞的边界呈清晰的暗的直线，有时也可见几个细胞出现双边，就是细胞边界线内又出现一条平行于边界的暗线，这可能是光学上的阴影现象，并无病理学意义。在正常状态下，由于细胞呈六边形镶嵌排列，细胞之间的连接呈均一状态，以三个相等的120°对顶角相连接，如果内皮细胞受损或发生移行，这个角度即发生改变。

3.暗结构及角膜后表面的形态在角膜内皮镜检查时，在相邻细胞之间可以发现大小不等的暗结构（暗区）或亮结构，小的比一个细胞还小，大的可以成片。暗区表明该处的角膜内皮细胞已不出现，较大的暗结构，多发生在角膜内皮病变时如后弹力膜结节，少数原因不明。亮结构的临床意义不太清楚，有可能为内皮细胞核的反光。

4.角膜内皮后表面这是内皮细胞与前房水相接触的分界线，呈一暗色的带行，内皮细胞表面光滑，镜下呈直线形。当内皮细胞受损时，其表面失去光滑而产生不规则的暗的分界线，呈波浪型或锯齿形。

三、角膜内皮图象定量分析

近年来新一代的角膜内皮镜已配置有计算机，角膜内皮图象检查完毕后即可打印，内皮细胞数及内皮细胞面积等参数经过计算和处理，给诊断带来极大方便。

角膜内皮细胞检查时，包括细胞密度和细胞面积，还有六边形细胞百分数及细胞面积变异系数（CV,即标准差/平均细胞面积）、各种形态细胞所占百分数等参数。正常人角膜内皮细胞密度随年龄增加而相应下降，细胞平均面积增加，多形性细胞增多，六边形细胞所占比例下降。KONAN SP-8000非接触型角膜内皮镜的有关参数见图4-2。

图4－2 上层图象：表示各种形状的细胞所占百分比；下层图象：表示各种大小面积（以100 m2为单位）的细胞所占百分比。

其中：

CD(cell density):表示细胞密度（以细胞数/mm2为单位）

一般CD正常值为2899±410.16个/mm2。随著年龄的增大，CD逐渐减少，其关系可见表4－1。表4－1 年龄与CD的关系

年龄 31-40 41-50 51-60 61-80 80以上