高效液相色谱基础理论测试题(终审稿)
(完整版)高效液相色谱习题及参考答案
高效液相色谱习题及参考答案一、单项选择题1. 在液相色谱法中,按分离原理分类,液固色谱法属于()。
A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2. 在高效液相色谱流程中,试样混合物在()中被分离。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜?A、0.5μmB、0.45μmC、0.6μmD、0.55μm4. 在液相色谱中,为了改变色谱柱的选择性,可以进行如下哪些操作?A、改变流动相的种类或柱子B、改变固定相的种类或柱长C、改变固定相的种类和流动相的种类D、改变填料的粒度和柱长5. 一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为()A、甲醇/水(83/17)B、甲醇/水(57/43)C、正庚烷/异丙醇(93/7)D、乙腈/水(1.5/98.5)6. 下列用于高效液相色谱的检测器,()检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7. 在高效液相色谱中,色谱柱的长度一般在()范围内。
A 、10~30cm B、20~50m C 、1~2m D、2~5m8. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力()A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分9. 在液相色谱中,为了改变柱子的选择性,可以进行()的操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D、改变流动相的流速10. 液相色谱中通用型检测器是()A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11. 在环保分析中,常常要监测水中多环芳烃,如用高效液相色谱分析,应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、紫外吸收检测器12. 在液相色谱法中,提高柱效最有效的途径是()A、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度13. 在液相色谱中,不会显著影响分离效果的是()A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类14. 不是高液相色谱仪中的检测器是()A、紫外吸收检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器15. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了()A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置16. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是()A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置17. 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用()水A.国标规定的一级、二级去离子水B.国标规定的三级水C.不含有机物的蒸馏水D.无铅(无重金属)水18. 高效液相色谱仪与普通紫外-可见分光光度计完全不同的部件是()A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统19. 下列哪种是高效液相色谱仪的通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器20. 高效液相色谱仪中高压输液系统不包括A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器二、判断题:1. 液相色谱分析时,增大流动相流速有利于提高柱效能。
(完整版)高效液相色谱习题及答案
高效液相色谱法习题一、思考题1.从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。
2.液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些? 与气相色谱相比较, 有哪些主要不同之处? 3.在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径是什么?4.液相色谱有几种类型? 5.液-液分配色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?6.液-固分配色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?7.化学键合色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?8.离子交换色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?9.离子对色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?10.空间排阻色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?11.在液-液分配色谱中,为什么可分为正相色谱及反相色谱?12.何谓化学键合固定相?它有什么突出的优点?13.何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱?试述它们的基本原理14.何谓梯度洗提?它与气相色谱中的程序升温有何异同之处?15.高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不同之处?16.以液相色谱进行制备有什么优点?17.在毛细管中实现电泳分离有什么优点?18.试述CZE的基本原理19.试述CGE的基本原理20.试述MECC的基本原理二、选择题1.液相色谱适宜的分析对象是()。
A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物2.HPLC与GC的比较,可忽略纵向扩散项,这主要是因为()。
A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相钻度较小D 柱温低3.组分在固定相中的质量为MA(g),在流动相中的质量为MB(g),而该组分在固定相中的浓度为CA(g·mL -1),在流动相中浓度为CB(g·mL-1),则此组分的分配系数是( )。
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高效液相色谱试题部门姓名得分一、选择题1. 在液相色谱法中,按分离原理分类,液固色谱法属于()A. 分配色谱法 B 排阻色谱法 C. 离子交换色谱法 D. 吸附色谱法2. 在高效液相色谱流程中,试样混合物在()中被分离。
A. 检测器B. 记录器C.色谱柱D. 进样器3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜?()A.0.5 μmB.0.45 μmC.0.6 μ mD.0.55 μm4.在高固定液含量色谱柱的情况下,为了使柱效能提高,可选用( )A. 适当提高柱温B. 增加固定液含量C. 增大载体颗粒直径D.增加柱5.在液相色谱中 , 为了提高分离效率 , 缩短分析时间 , 应采用的装置是( )A. 高压泵B. 梯度淋洗C. 6. 下列用于高效液相色谱的检测器,(贮液器D.加温)检测器不能使用梯度洗脱。
A.紫外检测器B.荧光检测器C. 蒸发光散射检测器D.示差折光检测器7.在高效液相色谱中, 色谱柱的长度一般在( ) 范围内。
A.10-30cmB.20-50cmC.1-2cmD.2-5cm8.在液相色谱中, 为了获得较高柱效能, 常用的色谱柱是( )A. 直形填充柱9.纸色B. 毛细管柱谱的分C. U形柱D.离原理螺旋形柱,与下列哪种方法相似?( )A. 毛细管扩散作用B. 萃取分离C.液- 液离子交换 10. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了() A. 恒温箱 B. 进样装置 C. 程序升温 D. 梯度淋洗装置D.液- 固吸附二、填空题1.高效液相色谱仪一般由、、、、五部分组成。
2.流动相使用前必须先。
3.系统适用性试验包括、、、四个指标。
4. 梯度洗脱有两种实现方式:、。
三、名词解释1.分离度:2.保留时间:四、简答题1.在液相色谱中,色谱柱能在室温下工作,不需恒温的原因是什么?2.简述提高分离度的几种途径?高效液相色谱习题参考答案一、选择题1.D2.C3.B4.A5.B6.D7.A8.A9.B 10.D二、填空题1.输送系统、进样系统、色谱柱系统、检测系统、数据记录处理系统。
高效液相色谱基础理论测试题
高效液相色谱基础理论测试题1、高效液相色谱仪的组成包括什么检测器,柱温箱、四元泵、自动进样器、色谱工作站2、液相色谱条件包括哪些内容样品、色谱柱、流动相、流速、柱温、进样量、检测波长、响应时间、峰宽、极性、狭缝3、Agilent液相色谱为了保护泵内的蓝宝石杆而独有的装置叫做其所用溶剂为在线Seal-wash,90%水+10%异丙醇4、液相色谱柱怎么维护色谱柱绝对不能进蛋白样品、血样,生物样品。
?要注意柱子的PH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。
?长时间不用仪器,应该将柱子取上用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如甲醇)保存,因为纯水易长霉。
柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动; 当柱子和色谱仪联结时,阀件或管路一定要清洗干净;要注意流动相的脱气; 避免使用高粘度的溶剂作为流动相; 进样样品要提纯;严格控制进样量; 每天分析工作结束后,要清洗进样阀中残留的样品;每天分析测定结束后,都要用适当的溶剂来清洗柱; 若分析柱长期不使用,应用适当有机溶剂保存并封闭;1、注意正确地使用和存放色谱柱,不锈钢柱色谱柱可选用以下的溶剂保存:正相柱用烃类溶剂,反相柱用甲醇,离子交换柱用水或甲醇/水。
某些专用分析色谱柱要注意制造商规定的保存条件。
另外,要注意溶液的PH值,一般控制在PH2-8范围内,其硅胶柱PH>8时会发生硅胶溶脱的情况,键合型柱PH<2时会发生键合相断裂。
2、色谱柱污染后可采用合适的溶剂冲洗,使柱效再生。
⑴硅胶柱可以使用正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水按顺序冲洗色谱柱,经过净化的色谱柱必须进行水活化,即按上述相反的顺序冲洗。
柱再生时所需要的有机溶剂要严格进行脱水处理。
⑵反相柱可以用甲醇、氯仿、正庚烷冲洗,键合C18柱一般用甲醇冲洗,必要时可用0.5 M EDTA钠盐溶液冲洗,然后用水冲洗,以达到去除柱内盐类。
⑶键合型的离子交换柱可以用缓冲溶液、水、甲醇冲洗。
高效液相色谱习题及参考答案
高效液相色谱习题及参考答案高效液相色谱习题及参考答案一、单项选择题1. 在液相色谱法中,按分离原理分类,液固色谱法属于()。
A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2. 在高效液相色谱流程中,试样混合物在()中被分离。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜?A、0.5μmB、0.45μmC、0.6μmD、0.55μm4. 在液相色谱中,为了改变色谱柱的选择性,可以进行如下哪些操作?A、改变流动相的种类或柱子B、改变固定相的种类或柱长C、改变固定相的种类和流动相的种类D、改变填料的粒度和柱长5. 下列用于高效液相色谱的检测器,()检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器6. 在高效液相色谱中,色谱柱的长度一般在()范围内。
A 、10~30cm B、20~50m C 、1~2m D、2~5m7. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力()A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分8. 液相色谱中通用型检测器是()A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器9. 在环保分析中,常常要监测水中多环芳烃,如用高效液相色谱分析,应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、紫外吸收检测器10. 在液相色谱法中,提高柱效最有效的途径是()A、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度11. 在液相色谱中,不会显著影响分离效果的是()A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类12. 不是高液相色谱仪中的检测器是()A、紫外吸收检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器13. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了()A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置14. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是()A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置15. 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用()水A.国标规定的一级、二级去离子水B.国标规定的三级水C.不含有机物的蒸馏水D.无铅(无重金属)水16. 高效液相色谱仪与普通紫外-可见分光光度计完全不同的部件是()A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统17. 下列哪种是高效液相色谱仪的通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器18. 高效液相色谱仪中高压输液系统不包括A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器19.. 在液相色谱中。
高效液相基础知识考核试题
高效液相基础知识考核(总分100分)部门:姓名:得分:一.填空(每空1分,共30分)1 紫外光区的波长范围是、可见光区波长范围是。
2实验所用的液相色谱柱上标有“C184.6mm×200mm×5um,其中“C18”代表:,“4.6mm”代表:,“200mm”代表:,“5um”代表:。
3 正相分配色谱可用于分析极性化合物样品,被分离组分分子极性越强,在柱中停留的时间越。
4 高效液相根据流动相与固定相极性分为:和。
5 常用的高效液相色谱检测器主要是、、、、等。
6正相分配色谱适用于分离化合物、极性的先流出、极性的后流出。
7 高压输液泵是高效液相色谱仪的关键部件之一,按其工作原理分为和两大类。
8 色谱法是利用混合物中各组份在不同的两相中、、等化学作用性能的差异,当两相作相对运动时,使各组分在两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。
9 高压输液泵应具有、、、等特性。
10色谱系统的适应性实验通常包括、、、和灵敏度五部分组成。
二名词解释(每题4分,共20分)1 峰面积(Peak Area):2 基线飘移(Baseline Drift):3 基线噪声(N)N)(Baseline Noise):4 死时间(t0)(Dead time):5 色谱法:三问答题(每题10分,共50分)1 色谱系统主要分为几部分,并简单绘制低压四元泵系统流路2中国药典2015版通则0512高效液相色谱法中内标法公式及公式中字母代表什么?3 绘制六通阀进样及准备两种状态4高效液相色谱仪流动相脱气的目的5 以LC-05为例简诉开机至仪器准备就绪过程。
高效液相考试题及答案
高效液相考试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 高效液相色谱法(HPLC)中,流动相的组成通常不包括以下哪种物质?A. 有机溶剂B. 缓冲液C. 离子对试剂D. 蛋白质稳定剂答案:D2. 在HPLC中,分离效果主要取决于哪种因素?A. 柱温B. 流动相的流速C. 固定相的性质D. 检测器的类型答案:C3. 以下哪种检测器不适合用于HPLC?A. UV检测器B. 荧光检测器C. 质谱检测器D. 核磁共振检测器答案:D4. 在HPLC分析中,样品的进样量通常是多少?A. 1-20微升B. 1-20毫升C. 1-20毫克D. 1-20克答案:A5. 以下哪种色谱柱适用于分析极性化合物?A. C18柱B. C8柱C. 苯基柱D. 氨基柱答案:D6. 在HPLC中,反相色谱法通常使用的流动相是:A. 纯水B. 纯有机溶剂C. 水和有机溶剂的混合物D. 缓冲溶液答案:C7. 高效液相色谱法中,哪种类型的色谱柱对温度变化最敏感?A. 硅胶基质柱B. 聚合物基质柱C. 金属氧化物柱D. 碳纳米管柱答案:B8. 在HPLC分析中,以下哪种物质通常用作色谱柱的固定相?A. 硅胶B. 活性炭C. 氧化铝D. 聚四氟乙烯答案:A9. 以下哪种检测器对样品的检测灵敏度最高?A. UV检测器B. 荧光检测器C. 电化学检测器D. 质谱检测器答案:D10. 在HPLC中,梯度洗脱法的主要优点是:A. 缩短分析时间B. 提高分离效率C. 减少样品损失D. 降低操作成本答案:B二、填空题(每空1分,共10分)1. 高效液相色谱法中,柱效的高低通常用______来衡量。
答案:塔板数2. 在HPLC分析中,样品的分离主要依靠固定相和流动相之间的______作用。
答案:相互作用3. 流动相的pH值对HPLC分析结果有显著影响,因为pH值的变化会影响样品的______。
答案:电荷状态4. 为了提高HPLC分析的灵敏度和选择性,常常在流动相中添加一定量的______。
高效液相色谱考题(一)
高效液相色谱考题(一)第一章高效液相色谱法练习一.判断对错1)液液色谱流动相与被分离物质相互作用,流动相极性的微小变化,都会使组分的保留值出现较大的改变。
()2)正相分配色谱的流动相极性大于固定相的极性。
()3)反相分配色谱适合于非极性化合物的分离。
()4)液相色谱固定相通常粒度为5-10微米。
()5)示差折光检测器是属于通用型检测器,适于梯度洗脱。
()6)在液相色谱中为避免固定相的流失,流动相与固定相的极性差别越大越好。
()7)液相色谱的流动相又称为淋洗液,改变淋洗液的组成、极性可显著改变组分分离效果。
8)在液相色谱中,流动相的流速变化对柱效影响不大。
()9)色谱归一化法只能适用于检测器对所有组分均有响应的情况。
()10)检测器性能好坏将对组分分离产生直接影响。
()二.填空题1)高效液相色谱中的技术类似于气相色谱中的程序升温,不过前者连续改变的是流动相的,而不是温度。
2)在液液分配色谱中,对于亲水固定液采用流动相,即流动相的极性固定相的极性称为正相分配色谱。
3)以ODS键合固定相,甲醇-- 为流动相时,该色谱条件为色谱。
4)在液相色谱中,为改善分离度并调整出峰时间,可通过改变流动相和______的方法达到。
5)在正相色谱中,极性组分先出峰,极性组分后出峰。
三、选择题1)液相色谱适宜的分析对象是()A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所以有机化合物D 所有化合物2)液相色谱中,为了改善分离的选择性,下列措施()是有效的。
A 改变流动相的种类B 改变固定相的类型C 增加流速D 改变填料的粒度3)在液相色谱中,梯度洗脱适用于分离()A 异构体B 沸点相近,官能团相同的化合物C 沸点相差大的试样D 极性变化范围宽的试样4)用ODS柱分析一有机弱酸混合物样品,以某一比例甲醇—水为流动相时,样品的容量因子较小,若想使容量因子适当增加,较好的方法是()A 增加流动相中甲醇的比例B 增加流动相中水的比例C 流动相中加入少量HAcD 流动相中加入少量的氨水5)如果样品比较复杂,相邻两峰间距离太近或操作条件不易控制稳定,要准确测定保留值是有一定的困难时,可选择一下方法()定性。
高效液相色谱基础理论测试题(答卷)
戴安公司高效液相色谱基础理论测试题(答卷)一.填空题1. 高效液相色谱是一种以液体作流动相和固体微粒作固定相,待测组分在柱内的两相之间进行高速分配和高效分离的柱液体色谱方法。
2. 在一定的色谱条件下,组分最大浓度点的洗脱时间(柱保留时间)是一定的,可作为色谱法组分定性的依据。
组分的洗脱浓度正比于色谱峰的峰高或峰面积,这是色谱法定量分析的依据。
3.正常色谱峰为对称形的正态分布曲线,不对称色谱峰有两种:前延峰和拖尾峰4. 液相色谱中的相平衡参数为:分配系数(K );容量因子(k );选择性因子(α)二.名词解释及常用公式:1. 保留时间 :色谱流出峰浓度最大点的时间。
2.基线噪音: 基线起伏的最大波幅3.基线漂移: 基线在一定时间内的变化幅度4.检测限(敏感度)D (写出计算公式):基线噪音的二倍 D=2·N/S5. 理论塔板数(并写出计算公式):组分在塔板之间瞬间达到分配平衡时其分配等温线与溶液浓度关联的热力学公式为:6.色谱峰的对称因子(并写出计算公式):7. 容量因子(K ’)计算公式k= tR-t0/t08. 分离度(R) 计算公式:三. 判断题:a. 确基线噪音和漂移是检测器稳定性的主要技术指标( √ )b. 灵敏度是检测器的主要性能指标(√)c. 检出限与噪音无关(×)d. 要提高柱的分离效能,必须:增加柱长L(增加n),增加选择性α,调节流动相的组成,控制容量因子k(√)e. 溶解于流动相中的气体在色谱分离的过程中不会影响流动相的流速和检测器的稳定性(×)f. 分析一个k′值范围很宽的复杂混合物,恒溶剂洗脱是不能令人满意的。
可在分离的过程中连续改变流动相的组成,即所谓梯度洗脱( √)注:(正确-----√;错误----×)四.选择题:i.反相色谱柱,如C18键合相的功能团是:( c )a.极性的b. 中极性的c.非极性的2.两相邻组分要达到完全分离,其分离度R s 必须:(c)a. R s<< 1.0b. R s =1.0c. R s >1.03.紫外-可见光检测器是:(b)a.通用型检测器b. 选择性检测器4.反相色谱方法开发过程中流动相的洗脱强度(有机相在溶剂中的比例):a. 洗脱强度从大逐渐变小(有机相在溶剂中的比例从多逐渐变少)b. 洗脱强度从小逐渐变大(有机相在溶剂中的比例从少逐渐变多)五.简答题:1.液相色谱柱子所用的化学键合相填料主要有哪些类型?答:㈠极性键合相(正相色谱)㈡非极性键合相(反相色谱)㈢键合离子交换剂(离子交换色谱)2.反相色谱应用最广泛的流动相和固定相是哪些种类?:答:流动相:H2O(高极性纯水)→n-C6(正己烷) 最常用乙腈,甲醇和水固定相:C2→C18烷烃(R)键合相(疏水性)最常用C18柱3.什么类型的样品需要采用梯度洗脱方法?答:分析一个k′值范围很宽(即分析时间很长)的复杂混合物4.用过缓冲盐流动相后,系统应作如何清洗?答:先用5%甲醇的水溶液冲洗20倍柱体积(15cm柱子60ml,25cm柱子80ml)再用100%甲醇冲洗30mim(参照清洗程序)。
高效液相色谱法考试答案
高效液相色谱仪试卷满分100分一、填空题共52分,每空2分1、高效液相色谱仪由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统等五大部分组成.2、拖尾因子T用于评价色谱峰的对称性,除另有规定外,T应在0.95-1.05之间.3、梯度洗脱装置分为两类:一类是外梯度装置又称低压梯度流动相在常温常压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台泵即可.安捷伦液相,另一类是内梯度装置高压梯度.将两种溶剂分别用泵增压后,按电器部件设置的程序,注入梯度岛津液相.4、如色谱柱需长期保存,反相柱可以贮存于甲醇或乙腈中,正相柱可以贮存于经脱水处理后的正己烷中.保存时要旋紧柱堵头防止有机溶剂挥发导致色谱柱填料干裂、脱落.5、气泡空气会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡.6、高效液相色谱进样针:应选用液相专用的平头针.流动相pH值应控制在2-8之间.7、将吸滤头分别放入脱气后的流动相中,旋转排液阀,排液5min;排液结束后应先更改低流速再旋紧排液阀,避免压力过大冲坏色谱柱.8、以硅胶为载体的键合固定相的使用温度通常不超过40°C,为改善分离效果可适当提高色谱柱的使用温度,但不宜超过60°C.9、亲水性固定液常采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定相的极性,称为正相液液色谱法,极性柱也称正相柱.若流动相的极性大于固定液的极性,则称为反相液液色谱,非极性柱也称为反相柱.组分在两种类型分离柱上的出峰顺序相反.10、高效液相色谱法常用的检测器类型有紫外检测器、示差折光检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器、光电二极管阵列检测器等.任意写4种二、名词解析共16分,每空4分1、基线:是在操作条件下,没有组分流出时的流出曲线.2、保留时间:是从进样到某组分在柱后出现浓度极大时的时间间隔,即从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔.3、色谱流出曲线:是由检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线,又称为色谱图4、梯度洗脱:就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例,从而使流动相的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化,达到提高分离效果,缩短分析时间的目的.三、选择题共16分,每空2分1、当流动相使用含有缓冲盐时,关机之前应对流路如何进行的清洗BA、不需要清洗,直接关机B、先用10%甲醇水冲60min,再用100%甲醇冲洗30min以上,最后进行关机C、先用100%甲醇冲洗60min以上,再用10%甲醇水冲30min后关机D、使用90%甲醇冲洗60min后关机2、在液相色谱法中,提高柱效最有效的途径是DA、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度3、在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是BA、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置4、在液相色谱中,某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力CA、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分5、下列用于高效液相色谱的检测器,D检测器不能使用梯度洗脱.A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器6、液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜BA、0.5μmB、0.45μmC、0.6μmD、0.55μm7、在液相色谱中,不会显着影响分离效果的是BA、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类8、在高效液相色谱流程中,试样混合物在C中被分离.A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器四、简答题共16分,每空8分1、反相色谱柱的冲洗方法.对于反相色谱柱,如使用缓冲液或含盐溶液作为流动性,在试验结束后,应用10倍柱体积如150mm柱长,约15ml的低浓度甲醇/乙腈-水溶液10%-20%冲洗,使色谱柱内的盐完全溶解洗脱出,再用较高浓度的甲醇/乙腈-水溶液50%冲洗,最后用高浓度的甲醇/乙腈-水溶液80%-100%冲洗,使色谱柱中的强吸附物质冲洗出来.如流动相中没有盐溶液,只是甲醇/乙腈-水溶液小于80%,可直接用高浓度的甲醇/乙腈-水溶液80%-100%冲洗.2、为什么作为高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤、脱气若流动相中所含有的空气不除去,则流动相通过柱子时其中的气泡受到压力而压缩,流出柱子进入检测器时因常压而将气泡释放出来,造成检测器噪声增大,使基线不稳,仪器不能正常工作,这在梯度洗脱时尤其突出.。
《高效液相色谱法》考核试题
《高效液相色谱法》考核试题满分:100分考试日期:姓名:部门:一、填空题(1-4题每空3分,共33分,第5-8题每空4分,共20分;填空题共53分)1、高效液相色谱法系采用将规定的流动相泵入装入填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。
2、高效液相色谱仪基本由泵,,,和组成。
3、定量测定时,对照品溶液和供试品溶液均应分别配制份。
供试溶液在注入色谱仪前,一般应经适宜的滤膜滤过。
4、色谱系统的适用性试验通常包括、、和等四个指标。
5、无论是定性鉴别还是定量分析,均要求待测峰与其他峰、内标峰或特定的杂质对照峰之间有较好的分离度。
除另有规定外,定量分析时分离度应大于。
6、色谱柱的理论板数按n= 计算。
7、重复性测定中,取各品种项下的对照溶液,连续进样5次,除另有规定外,其峰面积测定值的相对标准偏差应不大于。
8、为保证分离效果和测量精度,应检测待测峰的拖尾因子是否符合各品种项下的规定。
除另有规定外,峰高法定量时T应在~之间。
二、判断题(每题5分,共25分)1、在梯度洗脱装置中,两个泵通过一个“T”型接口接到柱子上,这样不同的溶剂就能按照标准中规定的进行混合。
整个梯度洗脱过程由梯度控制器控制。
()2、外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量,测量对照品溶液和供试品溶液中待测成分的峰面积(或峰高),按下式计算含量:()3、面积归一化法一般也宜用于微量杂质的检查,方法是测量各杂质峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的色谱峰面积,计算各峰面积及其之和占总峰面积的百分率。
()4、对所有的反相柱,先用高比例水相的脱盐流动相至少冲洗30分钟,流速同检测时的流速,然后用水:甲醇=50:50冲洗,最后用甲醇。
()5、使用的流动相应与仪器系统的原保存溶剂能互溶,如不互溶,则先取下上次的色谱柱,用异丙醇冲洗过渡,进样器和检测器的流通池也注入异丙醇进行过渡,过渡完毕后,接上相应的色谱柱,换上本次使用的流动相。
()三、问答题(共22分)如果系统适应性指标不符合要求,应对柱子进行哪些检查?《高效液相色谱法》试题答案满分:100分一、填空题(1-4题每空3分,共33分,第5-8题每空4分,共20分;填空题共53分)1、高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装入填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。
高效液相色谱知识培训测试题
安捷伦液相色谱知识培训试题姓名:成绩:一、选择题(每题至少有一个正确答案)(每题2分,共10分)1.以下哪种溶剂一般不作为反相色谱的流动相使用()。
A 甲醇;B正己烷;C 二氯甲烷;D 乙腈2.影响液相色谱分离度的因素有()。
A 流动相;B色谱柱;C 进样器;D 检测器3.以下哪种检测器的通用性比较好()。
A VWD;B DAD;C FLD;D RID4.以下哪些项目属于色谱的“系统适应性试验”的内容()。
A. 重复性B. 理论塔板数C. 分离度D.对称因子5.液相色谱适宜的分析对象是()。
A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物二、填空题(每题2分,共20分)1.液相色谱常用的检测器有(至少答出四种)、、、。
2. 目前常用的液相泵有、、。
3.一台完整的液相色谱主要由、、、、组成。
4.液相色谱根据流动相和固定相的极性可分为和。
5.配有自动进样器的一台高效液相色谱仪,其进样量的准确性主要由来决定。
6.泵头密封垫冲洗装置Seal Wash一般用作为溶剂。
7.采用VWD检测中药的有效成分,其检测波长一般设置在。
8.在液相反相色谱中,流动相极性增大,色谱峰保留时间。
9. 不对称峰有两种:T小于0.95为,T大于1.05为。
10. VWD检测器所使用的光源为。
三、是非题:(每题2分,共20分)1.序列属于方法的一部分。
()2.色谱柱的理论塔板数越多代表柱效越高。
()3.DAD和FLD均可以采集一个化合物的光谱图。
()4.温度对液相色谱结果影响较小,因此可以不对液相色谱进行控温。
()5.四元泵可以同时控制四种不同的溶剂进行梯度洗脱,其性能要优于单元泵和二元泵。
()6. 流动相使用之前需先脱气。
()7. 死体积是由进样器至检测器的流路中被流动相占有的空间。
()8.为能获得较高的柱效,节约分析时间,采用较小的流速,通常内径4.6mm的色谱柱,多用50ml/min 的流量。
高效液相试题及答案(终审稿)
高效液相试题及答案文稿归稿存档编号:[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-高效液相色谱基础知识测试一、填空题1、我们公司所用的高效液相色谱仪的品牌是:安捷伦1260 。
高效气相色谱仪的型号是安捷伦 7890 。
2、高效液相色谱系统由恒温器、四元泵、进样器、色谱柱、检测器和分析系统组成。
3、本公司所用的高效液相,为防止压力过大导致柱内填料空间发生变化,影响分离效果。
一般采用C18(十八烷基硅烷键合硅胶)填料的色谱柱,最高工作压力为400 bar。
4、高效液相根据流动相与固定相极性分为:正相高效液相色谱和反相高效液相色谱。
5、开机步骤:接通电源,依次开启不间断电源、真空脱气机、四元泵、检测器,待泵和检测器自检结束后,打开电脑显示器、主机,最后打开色谱工作站。
6、高效液相的维护:最后一次进样完成后,应用流动相冲洗20分钟,以保证洗脱完全,若流动相中含有无机盐类,应用高纯水冲洗30分钟,。
7、进样器的保养:每次分析结束后,要反复冲洗进样口,防止样品的交叉污染。
8、气相色谱仪常用的检测器有热导检测器,氢火焰检测器,电子捕获检测器和火焰光度检测器。
二、选择题1.在液相色谱法中,提高柱效最有效的途径是( D )A.提高柱温B.降低板高C.降低流动相流速D.减小填料粒度2. 在高固定液含量色谱柱的情况下,为了使柱效能提高,可选用 ( A )A.适当提高柱温B.增加固定液含量C.增大载体颗粒直径D.增加柱长3. 在液相色谱中, 为了提高分离效率, 缩短分析时间, 应采用的装置是 ( B )A. 高压泵B. 梯度淋洗C. 贮液器D. 加温4. 在液相色谱中, 最通用型检测器是 ( A )A.示差折光检测器B.极谱检测器C.荧光检测器D.电化学检测器5. 在液相色谱中, 为了获得较高柱效能, 常用的色谱柱是 ( A )A.直形填充柱B.毛细管柱C.U形柱D.螺旋形柱6. 实验室常用气相色谱仪的基本组成是( B )。
戴安公司高效液相色谱基础理论测试题1
戴安高效液相色谱基础理论测试题公司名称:_________________________________ 姓 名:________ 性 别:_______一、选择题1.分离高沸点有机物,高分子和热稳定性差的化合物以及生物活性物质,应选用 (A)A HPLCB GC2.紫外-可见光检测器是: (B)A 通用型检测器 B. 选择性检测器3. 反相色谱柱,如C18键合相的功能团是:(C)A 极性的B 中极性的C 非极性的4.两相邻组分要达到完全分离,其分离度R s 必须:(C )A R s<< 1.0B R s =1.0C R s >= 1.55.提高分离度最有效的方法是(B)A 增加色谱柱柱长(增加N)B 更换不同固定相类型的色谱柱(提高选择性α)6.流动相初始比例ACN/H2O=30/70 (V/V),配制样品溶剂采用(B)A 100%ACNB ACN/H2O=30/70C ACN/H2O=50/507.流动相:甲醇/水=50/50(V/V)的正确配制方法(B)A 在量筒中先量取50ml甲醇,再加水至100ml刻度B 用量筒量取50ml甲醇倒入试剂瓶中,再用量筒量50ml水倒入该试剂瓶中8.15cmC18柱为例,用过缓冲盐流动相,关机前清洗色谱柱和系统的正确方法(A)A 先用含5-10%有机相的水溶液冲洗60分钟左右,在2分钟内改为100%有机相继续清洗30分钟B 先用含5-10%有机相的水溶液冲洗30分钟左右,再用50%的有机相冲洗30分钟,最后用100%有机相继续清洗30分钟二、判断题:1.基线噪音和漂移是检测器稳定性的主要技术指标( T )2.灵敏度是检测器的主要性能指标(T)3.检出限与噪音无关(F)4.溶解于流动相中的气体在色谱分离的过程中不会影响流动相的流速和检测器的稳定性(F)5.要提高分离效能必须:增加柱子的n,增加选择性α,调节流动相的组成控制容量因子k(T )6.反相色谱用流动相其洗脱强度从大到小次序为:水>甲醇>乙腈>四氢呋喃 (F)7. 离子型化合物分离,一般采用离子抑制色谱法;离子对色谱法;离子交换色谱法 (T)8.分析一个k′值范围很宽的复杂混合物,可以采用梯度洗脱(T)9.开发方法时,组分要求在210nm低波长区检测,选用甲醇/水走梯度 (F)10.4.6mm 内径的色谱柱采用1ml/min 流速;改用同样长短3.0mm 内径柱只需0.4ml/min 流速(T)11.进样量相同,3.0mm 内径柱比4.6mm 内径柱灵敏度高2.5倍 (T)。
高效液相色谱理论测试卷及答案
一、名词解释1.分离度:2.保留时间:3.基线噪音:4.基线漂移:5.检测限(敏感度)D(写出计算公式):二、判断题1.高效液相色谱分析中,固定相极性大于流动相极性称为正相色谱法。
( )2.高效液相色谱中,流动相过滤采用普通的快速滤纸。
( )3.高效液相色谱中流动相不变、流速不变,更换更长的色谱柱,有利于改善分离度。
( )4.反相键合相色谱柱长期不用时,必须保证柱内充满甲醇流动相。
( )5.色谱分析中高分子微球耐腐蚀,热稳定性好,无流失,适合于分析水、醇类及其他含氧化合物。
( )6.离子对色谱法使用的是反相色谱柱。
( )7.水的洗脱强度大于甲醇。
( )8.高效液相色谱分析法中的流动相的方向应与色谱柱的箭头方向一致。
( )9.高效液相色谱分析法中的灵敏度越高,检测器性能越好。
( )10.高效液相色谱仪中,紫外-可见光检测器属于通用型检测器。
( )11.液相色谱分离实验结束后,无需冲洗,可直接关机。
( )12.按衍生化的方法分类,衍生化技术可分为柱前衍生和柱后衍生。
( )13.进行液相色谱分析时,增加流动相中乙腈的量,可减小被分离组分的保留值。
( )14.液相色谱的梯度洗脱可分为线性梯度和阶梯梯度。
( )15.色谱分离度大于1就表明两相邻组分完全分开。
( )三、简答题1.遇到系统压力高,如何分步检查找出原因并排除故障?2.简述提高分离度的几种途径?3.简述高效液相色谱仪的组成。
4.液相色谱柱子所用的化学键合相填料主要有哪些类型?5.用过缓冲盐流动相后,系统应作如何清洗?答案:名词解释:6.分离度:相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。
7.保留时间:从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间间隔,即从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。
8.基线噪音:基线起伏的最大波幅9.基线漂移:基线在一定时间内的变化幅度10.检测限(敏感度)D(写出计算公式):基线噪音的二倍 D=2·N/S判断题答案依次为:正确、错误、正确、正确、正确、正确、错误、正确、错误、错误、错误、错误、正确、正确、错误、简答题1.答:断开泵出口到进样器管路;断开进样器到色谱柱子的管路;断开柱尾到检测器中流动池的管路;一步步检查并观察泵压,找出堵的地方进行排除故障。
高效液相色谱法-考试习题
高效液相色谱法(总分60,考试时间90分钟)一、单项选择题1。
欲测定聚乙烯的分子量及分子量分布,应选用下列( ).A 液—液分配色谱B 液—固吸附色谱C 键合相色谱D 凝胶色谱答案:D2。
分离下述化合物,宜采取以下哪些方法?( )(1)聚苯乙烯分子量分布(2)多环芳烃(3) Ca2+、Ba2+、Mg2+A (1)分配色谱(2)反相色谱(3)阴离子色谱B (1)凝胶色谱(2)反相色谱(3)阴离子色谱C (1)凝胶色谱(2)反相色谱(3)阳离子色谱D (1)凝胶色谱(2)正相色谱(3)阳离子色谱答案:C3。
下列哪对固定相/流动相可用来分离溶液中的Ca2+、Mg2+、Cl—和?( )答案:B4。
在液-液分配色谱中,下列哪对固定相/流动相的组成符合正相色谱形式?( )A 甲醇/石油醚B 氯仿/水C 石蜡油/正己烷D 甲醇/水答案:C5。
高效液相色谱仪上清洗阀(放空阀)的作用是().A 清洗色谱柱B 清洗泵头与排除管路中的气泡C 清洗检测器D 清洗管路答案:B6。
用液-固色谱法分离极性组分,应选择的色谱条件是( )。
A 流动相为极性溶剂B 吸附剂的含水量小些C 吸附剂的吸附活性低些D 用非极性溶剂做流动相答案:D7。
离子交换色谱适用于()分离。
A 无机物B 电解质C 小分子有机物D 大分子有机物答案:A8。
大多数情况下,为保证灵敏度,高效液相色谱常选用哪种检测器?()A 荧光检测器B 二极管阵列检测器C 紫外—可见检测器D 蒸发光散射检测器答案:C9。
下列检测器中,系列答案中两个都属于通用型检测器的是()A PDA、RIB RID、ELSDC UV-Vis、PDAD FD、UV—Vis答案:B10。
在液相色谱中,范第姆特方程式的哪一项对柱效能的影响可以忽略?()A 涡流扩散项B 分子扩散项C 移动流动相的传质阻力D 滞留流动相的传质阻力答案:B11.衡量色谱柱对分离组分选择性的参数是( )。
A 调整保留值B 相对保留值C 保留值D 分配比答案:B12。
高效液相色谱仪培训测试题
高效液相色谱仪培训测试题一、名词解释1.分离度:相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。
2、保留时间:从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间间隔,即从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。
二、填空题1.高效液相色谱仪一般由输送系统、进样系统、色谱柱系统、检测系统、数据记录处理系统五部分组成。
2.不对称峰有两种:T小于0.95为前延峰、T大于1.05为拖尾峰。
3、流动相使用前必须先脱气。
4.系统适用性试验包括理论板数、分离度、重复性、拖尾因子四个评指标。
5.在色谱条件中,固定相的种类、流动相组成、检测器类型不得改变,其余如流动相流速、混合流动相各组成的比例、柱温、梯度洗脱程序中的时间长短、色谱柱的内径、长度、填料粒度、检测器的灵敏度等均可适当改变。
6.梯度洗脱有两种实现方式:低压梯度、高压梯度。
三、问答题简述提高分离度的几种途径?答:(1)增加塔板数。
(2)增加选择性。
A、改变流动相的组成;B、改变柱温;C、改变固定相。
(3)改变容量因子,主要是改变流动相的配比、PH值、离子强度等,或改用梯度淋洗。
气相色谱仪培训测试题1.气相色谱仪由气路系统、进样系统、柱分离系统、数据采集系统、数据处理系统、控制系统六个系统组成。
2.气相色谱法所能直接分离的样品应是可挥发、热稳定的物质,沸点一般不超过500度。
3、常用的载气有氦气、氮气、氢气或混有甲烷的氩气。
4、我公司的气相色谱仪所安装的检测器有火焰离子化检测器、电子捕获检测器两种。
5、各品种项下规定的条件中色谱柱种类、固定相的极性和检测器类型不得任意修改。
6、气相色谱仪主要是利用物质的沸点、极性、吸附性质的差异来实现混合物的分离。
7、气化温度可比样品中最高沸点组份的沸点高30~40度。
8、色谱柱使用一段时间后,基线会出现波动或鬼峰,解决此问题的办法是老化。
9、新色谱柱安装后,都要在进样前进行老化,具体办法是:先接通载气,然后将柱温从60度左右以5~10度/分钟的速度程度升温到色谱柱的最高使用温度以下30度或者实际分析操作温度以上30度,并在高温时保持30到120分钟,直到所记录的基线稳定为止。
液相色谱考试试题及答案
液相色谱考试试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 液相色谱法中,固定相通常是:A. 气体B. 液体C. 固体D. 离子答案:C2. 高效液相色谱(HPLC)中,常用的检测器是:A. 紫外检测器B. 荧光检测器C. 质谱检测器D. 所有选项答案:D3. 下列哪项不是液相色谱的分离机制?A. 分子大小B. 溶解度C. 电荷D. 折射率答案:D4. 液相色谱中,流动相的流速增加,会导致:A. 分离时间增加B. 分离时间减少C. 分离效率增加D. 分离效率减少答案:B5. 液相色谱中,柱温升高,通常会导致:A. 分离时间增加B. 分离时间减少C. 分离效率增加D. 分离效率减少答案:B6. 液相色谱中,柱效的提高可以通过:A. 增加柱长B. 增加柱径C. 减少柱压D. 减少柱温答案:A7. 液相色谱中,样品的保留时间主要取决于:A. 样品的分子量B. 样品的溶解度C. 样品的电荷D. 样品的折射率答案:B8. 液相色谱中,样品的分离度可以通过以下哪种方式提高?A. 增加柱长B. 减少柱压C. 增加柱温D. 减少流动相流速答案:A9. 液相色谱中,样品的检测通常是通过:A. 样品的重量B. 样品的体积C. 样品的浓度D. 样品的折射率答案:C10. 液相色谱中,样品的洗脱顺序通常是:A. 极性大的先出B. 极性小的先出C. 分子量大的先出D. 分子量小的先出答案:B二、填空题(每题2分,共20分)1. 在液相色谱中,色谱柱的填充物被称为________。
答案:固定相2. 液相色谱中,样品的分离是通过________来实现的。
答案:色谱柱3. 液相色谱中,________是影响分离效率的关键因素之一。
答案:柱效4. 液相色谱中,流动相的组成会影响样品的________。
答案:保留时间5. 在液相色谱中,________是用来检测样品的设备。
答案:检测器6. 液相色谱中,样品的分离度可以通过调整________来优化。
高效液相色谱习题及参考答案
高效液相色谱习题及参考答案一、单项选择题1. 在液相色谱法中,按分离原理分类,液固色谱法属于(? )。
A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2. 在高效液相色谱流程中,试样混合物在(? )中被分离。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜?A、0.5μmB、0.45mC、0.6μmD、0.55μm4. 在液相色谱中,为了改变色谱柱的选择性,可以进行如下哪些操作?A、改变流动相的种类或柱子B、改变固定相的种类或柱长C、改变固定相的种类和流动相的种类D、改变填料的粒度和柱长5. 一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为(? )A、甲醇/水(83/17)B、甲醇/水(57/43)C、正庚烷/异丙醇(93/7)D、乙腈/水(1.5/98.5)6. 下列用于高效液相色谱的检测器,(? )检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7. 在高效液相色谱中,色谱柱的长度一般在(? )范围内。
A 、10~30cmB、 20~50mC 、1~2mD、2~5m8. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力(? ? )A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分9. 在液相色谱中,为了改变柱子的选择性,可以进行(? )的操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D、改变流动相的流速10. 液相色谱中通用型检测器是(? )A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11. 在环保分析中,常常要监测水中多环芳烃,如用高效液相色谱分析,应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、紫外吸收检测器12. 在液相色谱法中,提高柱效最有效的途径是(? )A、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度13. 在液相色谱中,不会显着影响分离效果的是(? )A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类14. 不是高液相色谱仪中的检测器是(? )A、紫外吸收检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器15. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了(? )A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置16. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是(? )A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置17. 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用(? )水A.国标规定的一级、二级去离子水B.国标规定的三级水C.不含有机物的蒸馏水D.无铅(无重金属)水18. 高效液相色谱仪与普通紫外-可见分光光度计完全不同的部件是(? )A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统19. 下列哪种是高效液相色谱仪的通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器20. 高效液相色谱仪中高压输液系统不包括A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器1. 液相色谱分析时,增大流动相流速有利于提高柱效能。
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高效液相色谱基础理论
测试题
文稿归稿存档编号:[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-
高效液相色谱基础理论测试题
1、高效液相色谱仪的组成包括什么
检测器,柱温箱、四元泵、自动进样器、色谱工作站
2、液相色谱条件包括哪些内容
样品、色谱柱、流动相、流速、柱温、进样量、检测波长、响应时间、峰宽、极性、狭缝
3、Agilent液相色谱为了保护泵内的蓝宝石杆而独有的装置叫做其所
用溶剂为
在线Seal-wash,90%水+10%异丙醇
4、液相色谱柱怎么维护
色谱柱绝对不能进蛋白样品、血样,生物样品。
要注意柱子的PH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。
长时间不用仪器,应该将柱子取上用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如甲醇)保存,因为纯水易长霉。
柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动; 当柱子和色谱仪联结时,阀件或管路一定要清洗干净;要注意流动相的脱气; 避免使用高粘度的溶剂作为流动相; 进样样品要提纯;严格控制进样量; 每天分析工作结束后,要清洗进样阀中残留的样品;每天分析测定结束后,都要用适当的溶剂来清洗柱; 若分析柱长期不使用,应用适当有机溶剂保存并封闭;
1、注意正确地使用和存放色谱柱,不锈钢柱色谱柱可选用以下的溶剂保存:正相柱用烃类溶剂,反相柱用甲醇,离子交换柱用水或甲醇/水。
某些专用分析色谱柱要注意制造商规定的保存条件。
另外,要注意溶液的PH值,一般控制在PH2-8范围内,其硅胶柱PH>8时会发生硅胶溶脱的情况,键合型柱PH<2时会发生键合相断裂。
2、色谱柱污染后可采用合适的溶剂冲洗,使柱效再生。
⑴硅胶柱可以使用正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水按顺序冲洗色谱柱,经过净化的色谱柱必须进行水活化,即按上述相反的顺序冲洗。
柱再生时所需要的有机溶剂要严格进行脱水处理。
⑵反相柱可以用甲醇、氯仿、正庚烷冲洗,键合C18柱一般用甲醇冲洗,必要时可用0.5 M EDTA钠盐溶液冲洗,然后用水冲洗,以达到去除柱内盐类。
⑶键合型的离子交换柱可以用缓冲溶液、水、甲醇冲洗。
3、对污染严重的色谱柱在冲洗无效时,需将柱内填料取出进行处理或更换新的填料,还可以用更换柱头填料的方法即将柱头入口处的被
污染的填料取出,重新补装和柱内同类型的填料,然后在改变柱流向进行再生。
这种逆流再生柱的方法,可以救活大部分柱子。
4、注入色谱柱的溶剂、标液、样品溶液都必须严格过滤,以去除杂质,防止堵塞色谱柱。
当用反冲洗方法无效时,可将柱口过滤装置取下,用弱酸溶液处理,去除污物或定期更换。
5、建议:为了保护色谱柱,避免给分析带来不必要的麻烦,请使用保护柱!!
5、操作液相时发现压力很小,可能的原因是什么;操作过程若发现压
力非常高,可能的原因是什么如何解决
压力很小:排气阀没有完全关闭、色谱柱没有连接不良、系统管件连接有漏、泵的单向阀闭锁不全、泵腔有气泡
压力过高:管路已堵、色谱柱赌赛、
6、对于流动相含有缓冲盐的,进样完后如何进行冲洗
1、先用100%的纯水冲洗,打开排放阀,用3~5ml/min的流量,洗二十分钟左右后停泵。
此举主要是针对吸液系统、泵头、进出口单向阀等体积较大的空间的清洗
2、再用5:95的甲醇/水清洗整个系统,关闭排放阀,用1ml/min的流量,洗30~60分钟后停泵。
此举主要是用水清洗整个系统中的盐,用5%的甲醇主要是为了保护色谱柱。
3、最后用100%的甲醇清洗整个系统,用1ml/min的流量,洗2分钟左右,然后关机。
7、平衡色谱柱一般需要多长时间
不同的柱子柱体积不一样,所以平衡需要的时间也不一样,原则是用10到15倍柱体积的流动相过柱子就行。
如果使用离子对试剂,离子对试剂是要上到色谱柱上面去的,平衡时间大概要在2h左右才能保证啊
8、为了延长氘灯的寿命应该如何操作
在每天的使用过程中不要频繁开关灯,频繁开关灯会缩短氘灯的使用寿命。
一般情况下,我们应该在早上打开氘灯开始一天的分析工作,一天的工作完成后,冲仪器之前可以关闭氘灯,中间如果不进行分析工作也不要关灯,即一天一开一关;间隔4小时以上可以关灯,否则不需关灯。
不要让检测池长期保存在缓冲液体系中,用纯水冲洗,保存在甲醇中。
9、样品在进样前需要进行的处理是
除去微粒,减少杂质干扰,如采用高速离心、过滤超滤、选择性沉淀、衍生反应、液-固萃取,液-液萃取,SPE等手段进行净化,上机前采用合适的滤膜过滤。
另外还要注意样品的溶剂与流动相的极性关系。
10、运行过程中自动停泵可能的原因是什么
每台泵都有压力上限,系统达到预定值时会自动停泵,在梯度洗脱中应考虑因流动相的变化而引起的压力变化,避免上限压力过低造成中途停泵。
在贮器中流动相被抽干或严重渗漏时会自动停泵。
有时下限压力设在0也会自动停泵。
系统出现其他故障时可能停泵,。