药敏试验所需器材
药敏实验实验报告
药敏实验实验报告实验目的：本实验旨在通过药敏实验，对不同细菌对抗生素的敏感性进行测试，从而为临床治疗提供参考依据。
实验材料与方法：1. 实验材料：本实验所使用的材料包括各种抗生素药物、培养基、试管、移液器、细菌培养液等。
2. 实验方法：a. 首先，准备好各种需要测试的抗生素药物，包括青霉素、头孢菌素、庆大霉素等。
b. 将需要测试的细菌培养液均匀涂抹在含有培养基的琼脂平板上。
c. 在琼脂平板上分别滴加不同抗生素药物的溶液。
d. 将处理好的琼脂平板放入培养箱中进行孵育。
e. 观察并记录细菌在不同抗生素药物下的生长情况和抑菌圈直径。
实验结果：通过本次药敏实验，我们得到了以下实验结果：1. 对于细菌A，青霉素表现出较好的抑菌效果，抑菌圈直径为15mm，而头孢菌素和庆大霉素的抑菌效果较差，抑菌圈直径分别为8mm和10mm。
2. 对于细菌B，头孢菌素表现出较好的抑菌效果，抑菌圈直径为18mm，而青霉素和庆大霉素的抑菌效果较差，抑菌圈直径分别为7mm和9mm。
3. 对于细菌C，庆大霉素表现出较好的抑菌效果，抑菌圈直径为20mm，而青霉素和头孢菌素的抑菌效果较差，抑菌圈直径分别为6mm和8mm。
实验分析：通过对实验结果的分析，我们可以得出以下结论：1. 不同细菌对抗生素的敏感性存在差异，同一种抗生素对不同细菌的抑菌效果也会有所不同。
2. 青霉素、头孢菌素和庆大霉素对不同细菌的抑菌效果存在差异，需要根据具体情况选择合适的抗生素进行治疗。
结论与建议：药敏实验结果对临床治疗具有一定的指导意义，可以帮助临床医生选择合适的抗生素进行治疗，从而提高治疗效果。
建议在临床实践中，根据药敏实验结果，结合患者具体情况，选择合适的抗生素进行治疗，以提高治疗效果。
实验报告撰写人：XXX日期：XXXX年XX月XX日。
微生物实验 药物敏感实验
微生物药物敏感实验
⏹一、实验目的
⏹1、熟悉和掌握圆纸片扩散法检测细菌对抗菌药物敏感性的操作程序和结果判断方
法。
⏹2、了解药敏试验在实际生产中的重要意义
二、实验原理
⏹将含有定量抗菌药物的纸片（药敏纸片）贴在已接种待检菌的琼脂平板表面特定部
位。
药物借其分子的扩散力向周围琼脂中扩散，形成了随着离纸片距离加大，琼脂中的药物浓度逐渐减少的梯度浓度。
其纸片周围一定区域琼脂内的药物浓度高于抑制待检菌所需浓度时，则该区域内细胞不能生长，形成透明抑制圈。
抑菌圈的大小可以反映待检对测定药物的敏感程度，抑菌圈愈大，说明该菌对此药物越敏感三、实验器材
⏹1．菌种大肠埃希菌。
⏹2．培养基牛肉膏蛋白胨培养基。
⏹3．试剂无菌生理盐水，抗菌药物纸片：
包括青霉素、氨苄西林、土霉素、链霉素等。
⏹4．其他无菌棉拭子、镊子、毫米尺、接种环。
四、实验方法和步骤
⏹1．菌液制备
菌浓合适，一般为106
⏹2．接种
细菌悬液制备后15min内接种至倒好的牛肉膏蛋白胨培养基平板中，接种量0.1-0.2mL。
涂布均匀。
⏹3．贴药敏纸片
⏹涂布后的平板在室温下干燥3~5min，用纸片分配器或无菌镊子将纸片贴于琼脂表面
并轻压，使纸片与琼脂表面完成接触。
各纸片中心相距应大于24mm，纸片贴上后就不能再移动位置。
⏹4．培养
⏹将平板倒置放入37℃培养箱培养，16~18h读取结果。
五、实验结果
六、思考题
⏹ 1.圆纸片药敏试验操作时应注意什么事项？
⏹ 2. 试述药敏试验的意义。
KB法药敏实验用实验盘
KB法药敏实验用实验盘实验盘是药物敏感性测试中常用的工具，通过其上的纸片或孔板，可以测试细菌对药物的敏感性或抗药性。
KB法是一种常用的药敏实验方法，本文将介绍KB法药敏实验用实验盘的相关内容。
一、实验盘的介绍实验盘，也称为药敏试验盘，是由一种特殊材料制成的，内部设有多个小孔或凹槽，用于放置药物溶液或纸片。
实验盘的直径通常为9毫米或6毫米，每个实验盘可以容纳一定量的药物溶液。
二、KB法药敏实验步骤1. 准备工作实验前需要准备好所需的实验盘、培养基、抗生素药物和待测菌株。
2. 制备实验盘将所需的抗生素药物分别制成一定浓度的药液，在实验盘上滴上相应的药液。
3. 接种菌株将待测菌株培养至对数生长期，然后将菌悬液均匀涂在一块培养基上。
4. 放置实验盘用无菌钳将制备好的实验盘放置于涂有菌株的培养基上，然后用无菌的玻璃棒轻轻压实。
5. 培养将含有实验盘的培养基培养于适宜的温度和湿度条件下，通常为37摄氏度。
6. 结果判断观察培养皿中实验盘周围的区域是否出现菌落生长的抑制圈，抑制圈的直径反映了菌株对抗生素的敏感性。
三、KB法药敏实验的优点1. 简便易行：KB法药敏实验操作简单，不需要复杂的设备和特殊技术。
2. 准确性高：KB法可以定量测定细菌对抗生素的敏感性，结果比较准确可靠。
3. 适用范围广：KB法适用于各种类型的细菌和抗生素，可以对不同种类的药物进行药敏性测试。
四、KB法药敏实验的应用领域KB法药敏实验广泛应用于临床医学和科研领域，具体包括以下方面：1. 临床药敏试验：通过KB法药敏实验，可以测试细菌对各种抗生素的敏感性，为临床选择合适的抗生素治疗提供参考。
2. 耐药性监测：KB法药敏实验也可以用于监测细菌耐药性的变化情况，帮助医生及时调整抗生素的使用策略。
3. 抗菌药物研发：在科学研究中，KB法药敏实验可以评价新型抗菌药物的药效和药敏性，为新药的研发提供参考。
4. 食品安全检测：KB法药敏实验还可以用于食品中病原菌污染的检测，对于保障食品安全具有重要意义。
实验七++细菌的药敏试验及耐药性检测
实验七细菌的药敏试验及耐药性检测【目的和要求】1.掌握纸片扩散法（K-B法）、液体稀释法两种药敏试验的原理和方法。
2.熟悉上述两种药敏试验方法的应用。
3.了解几种细菌耐药表型检测的原理、方法及意义。
【试剂与器材】1．培养基：一般需氧和兼性厌氧菌采用水解酪蛋白（M-H）琼脂或M-H液体培养基（pH7.2~7.4）。
对于营养要求高的细菌，则需在M-H培养基中加入其它营养成分。
2．抗菌药物纸片：直径为6.0~6.35mm的滤纸片上，含有一定量的某种抗菌药物。
市场有售，但生产厂家须获得国家食品药品监督管理局（SFDA）批准。
不同种类的待测菌药敏试验选择不同的抗菌药物，药敏纸片的选择见表7-1。
3．待测细菌接种普通营养琼脂经35℃16~18h的纯培养物。
4. 0.5%麦氏比浊管配制方法如下：0.048mol BaCl2 (1.17% W/V BaCl2 . 2H2O) 0.5ml0.18mol H2SO4 (1%, V/V) 99.5ml将二液置冰水浴中冷却后混合，置螺口试管中，放室温暗处保存。
用前混匀。
有效期为6个月。
5.其它：无菌生理盐水、无菌棉签、无菌试管、酒精灯、镊子、生物安全柜、培养箱等。
【实验内容】一、纸片扩散法（K-B法）药敏试验1．原理将含有定量的抗菌药物纸片贴在已接种待测细菌的琼脂平板表面，纸片上的药物随即溶于琼脂中，并沿纸片周围由高浓度向低浓度扩散，形成逐渐减少的梯度浓度。
在纸片周围，一定浓度的药物抑制了细菌的生长从而形成了透明的抑菌环，抑菌环的大小则反映了待测菌对该种药物的敏感程度。
K-B法是由Kirby - Bauer 建立，美国NCCLS推荐，目前为世界所公认的标准纸片扩散法（定性法）。
2．方法（1）培养基的准备：将无菌M-H琼脂加热融化，趁热倾注入无菌的直径90mm平皿中。
琼脂厚为4mm（约23~25ml培养基），琼脂凝固后塑料包装放4℃保存，在5日内用完，使用前应在37℃培养箱放置30min使表面干燥。
水产动物药敏实验操作流程
药敏实验操作流程1.器材准备解剖盘、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、接种环、乳胶手套、培养皿、烧杯、量筒、锥形瓶、电子天平、超净工作台、高压灭菌锅、恒温箱、显微镜2.实验步骤2.1 培养基制备（1）用量筒量取300ml纯净水，倒入锥形瓶中。
（2）用电子天平称取脑心浸液（BHI）肉汤培养基、技术琼脂粉，倒入锥形瓶中摇匀后放入高压灭菌锅灭菌处理。
（3）取出灭菌后的液体培养基，在超净工作台开始倒平板，准备好的20个培养皿，每个倒15ml。
（4）待冷却凝固后放入4℃冰箱保存备用。
2.2 细菌分离（1）取出制备好的培养基，标注好信息：鱼体来源、实验时间，将平板划分为4个区域，一般肝脏、脾脏、肾脏、腹水。
（2）取出待解剖的新鲜死鱼或濒死鱼，用酒精棉擦拭鱼体表，防治外部细菌影响，解剖之前剪刀、镊子用酒精擦拭消毒后再用酒精灯灼烧，在肛门前端开始解剖，防治剪破肠道细菌感染。
（3）接种前接种环用酒精灯灼烧发红，不可用手接触组织，接种环垂直插入组织取出组织液。
（4）将取出的组织液在平板标记位置开始划S线，划线时需在酒精灯前操作，防治空气中杂菌污染。
（5）将涂好的平板放入28℃恒温箱细菌培养，一般分离出细菌在12h后在划线位置可形成细菌菌落。
2.3 药敏实验（1）取出备用的培养基，标注好信息。
（2）用接种环将分离出的不同组织的细菌挑取接种到平板上，横、竖、30°多方位划线，划满整个平板。
（液体涂布法：1.5ml EP管装0.5ml生理盐水或液体培养基，勾取细菌放入EP管搅匀，用移液枪吸200ul，将菌液打在空白平板上，用消毒、灼烧、冷却后的涂布棒均匀涂抹。
）（3）用镊子在酒精灯灼烧后，取出药敏片，将有字一面朝下，均匀放在平板上，用镊子轻轻按压，每取一个药敏片，都要用酒精擦拭、消毒，一般一个平板帖5片药敏片，贴好后背面标注要药敏片信息。
（4）贴好后放入恒温箱培养12h，平板上形成直径不同的抑菌圈，根据抑菌圈大小判断药物敏感程度，选择合适的药物进行治疗。
纸片扩散法
四、实验内容与步骤
（二）药物敏感试验（纸片琼脂扩散法） ① 取100-200μl菌液均匀涂布平板； ②用无菌镊子将纸片贴于含菌琼脂表面，每面贴
3~4个纸片，放置15分钟。为了使药敏片与培养基紧密 相贴，可用镊子轻按几下药敏片。
③倒置在28℃培养箱中培养24h观察结果。 ④用尺量包括纸片直径在内的抑菌环最大直径，判 定结果（敏感、中度敏感、耐药）。
一、实验目的
1、掌握细菌纯化再培养的方法 2、掌握人工药敏实验方法
1
二、药敏试验常用方法
1. 纸片扩散法（Disk Diffusion Test）： Kirby-Bauer法（K-B纸片琼脂扩散法）
和直接纸片药敏法 2. 稀释法（Dilution Test）：
包括琼脂稀释法（药物混合在培养基中） 和肉汤稀释法（抗生素梯度稀释） 3. 抗生素浓度梯度法-E 试 验（E-test）
7Leabharlann 药物敏感实验判定标准抑菌圈直径（毫米）
敏感度
20以上
极敏
15-20
高敏
10-14
中敏
10以下
低敏
0
不敏
* 具体对于不同的菌株，及不同的抗生素纸 片需参照NCCLs的标准或者CLSI标准。
四、思考题
1、药敏试验常用方法有哪几种？ 2、影响药敏结果的因素有哪些？
10
2
二、实验原理
将含有一定量抗菌药物的纸片或药片， 平贴于已接种被检细菌的琼脂培养基上，纸 片或药片中的药物即呈梯度向周围扩散，敏 感菌株在纸片或药片的周围生长受到抑制， 而形成抑菌圈。根据抑菌圈的大小，可判断 细菌对抗菌药物的敏感性。
3
影响药敏结果的因素
一、培养基：应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注 平板时，厚度合适（约5-6mm），不可太薄，且培养基 内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质，如钙、镁离子。 二、细菌接种量：细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈 变小。 三、药物浓度：药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的 结果，需精确配制。 四、培养时间：一般在37℃下培养18-24小时。
细菌药敏试验
【试验意义】
2 药敏试验的意义 • 1. 可预测抗菌治疗的效果 • 2. 指导临床选择使用抗生素。 • 3. 提供所选择药物的依据； • 4. 监测耐药性，分析耐药菌的变迁，掌握
耐药菌感染病的流行病学，控制和预防耐 药菌感染的发生和流行。
【实验材料 】
1.菌种：大肠杆菌肉汤培养物 1 管/组
2.各种药敏片：市售商品药敏片（或自制）1套 （4～5种）/人。
[问题与思考]
• 1.纸片药敏试验操作时应注意哪些事项? • 2.试述纸片扩散法药敏试验的原理及临床
意义。 • 3.纸片药敏试验的步骤及结果判定是什么？
≥18
≤14
15～17
≥18
≤12
13～17
≥18
≤13
13-15
≥18
≤12
13～14
≥15
【注意事项 】
• 影响因素药敏试验结果的因素 1、培养基：培养基质量和pH值。pH过低会导致
氨基糖苷类，大环内酯类失效，而青霉素活 力增强 。 2、药敏纸片的质量，含药量和保存方式 3、接种菌量。 4、试验操作质量：接种细菌后贴片时5～15 分钟； 5、培养时间：不超过24 h 。
细菌药敏试验 （纸片扩散法）
【学习目标】
1.掌握药敏试验的基本原理。 2.掌握药敏试验-纸片法的操作方法及判定。
3.了解药敏试验在实际生产中的指导意义。
【试验原理】
• 1 纸片扩散法原理
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的 琼脂平板上。纸片中所含有的药物吸取琼脂中的水 分溶解后便不断地向纸片周围区域扩散形成递减的 梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生 长被抑制，从而形成透明的抑菌圈。 抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度。 并与该药对测试菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关 关系，即抑菌圈愈大，MIC愈小。
细菌药敏试验
细菌药敏试验实训细菌的药物敏感性试验教学⽬标使学⽣掌握细菌药物敏感性试验的操作⽅法，能够利⽤本试验⽅法选择敏感药物治疗兽医临床常见的细菌性传染病。
材料准备1．器材：温箱、天平、打孔机、滤纸、⽆菌试管及吸管、镊⼦、接种环、酒精灯等。
2．试剂：蒸馏⽔。
3．培养基：普通琼脂平板。
4．菌种：⾦黄⾊葡萄球菌及⼤肠杆菌的固体培养物。
5．药品：链霉素、⾦霉素、新霉素、红霉素等抗菌药物。
6．硫酸钡标准管：取1%~1.5%氯化钡0.5ml加1%硫酸溶液99.5ml，充分混匀即成，⽤前充分振荡。
⽅法步骤将抗菌药物置于接种待检菌的固体培养基上，抗菌药物通过向培养基内的扩散，抑制敏感细菌的⽣长，从⽽出现抑菌环。
由于药物扩散的距离越远，达到该距离的药物浓度越低，由此可根据抑菌环的⼤⼩，判定细菌对药物的敏感度。
（⼀）含药纸⽚的制备1．滤纸⽚最好选⽤新华1号定性滤纸，⽤打孔机打成直径6mm的滤纸⽚，放在⼩瓶中或平⽫中，在121.3℃灭菌15min，再置100℃⼲燥箱内烘⼲备⽤。
2．药液的配制⽤⽆菌蒸馏⽔将各药稀释成以下浓度：磺胺100mg/ml、青霉素100IU/ml、链霉素、⾦霉素、新霉素、红霉素、多粘菌素1000µg/ml。
3．含药纸⽚的制备将灭菌的滤纸⽚⽤⽆菌的镊⼦摊布于灭菌平⽫中，按每张滤纸⽚饱和吸⽔量为0.01ml计算，50张滤纸⽚加⼊药液0.5ml。
要不时翻动，使纸⽚充分吸收药液，浸泡1~2h后于37℃温箱中烘⼲备⽤。
对青霉素、⾦霉素纸⽚的⼲燥宜采⽤低温真空⼲燥法，⼲燥后⽴即放⼊瓶中加塞，放⼲燥器内或置-20℃冰箱中保存。
纸⽚的有效期⼀般为4~6个⽉。
（⼆）测验⽅法1．钩取⾦黄⾊葡萄球菌和⼤肠杆菌菌落各4~5个，分别接种于⾁汤培养基中，37℃培养4~6h。
2．⽤灭菌⽣理盐⽔稀释培养菌液，使其浊度相当于硫酸钡标准管。
装有以上两种成分的试管须相同，硫酸钡应⽤前需充分振动。
3．⽤⽆菌棉拭⼦蘸取上述⾁汤培养液，在试管壁上挤压除去多余的液体，在琼脂培养基表⾯均匀涂抹。
全自动鉴定药敏分析系统等设备参数要求
全自动鉴定药敏分析系统、血培养仪、二氧化碳培养箱参数要求及部分微生物免疫试剂明细1、保修要求：对于保修期内的甲方设备故障报修，出现故障，服务人员2小时内到达现场，24小时内修复，超过24小时提供免费备用设备服务。
当仪器需用接口功能时、中标商负责提供接入我院LIS接口服务，费用包含在设备报价中。
2、国际或国内知名品牌，市场占有率高调研设备的项目参数要求及部分微生物免疫试剂明细包1：细菌鉴定药敏分析系统试剂及辅材明细表包2、血培养仪试剂及辅材明细表包3：二氧化碳培养箱用于细菌培养，提供一个稳定的温度和湿度环境，又能稳定、连续输送一定浓度的CO2气体，以控制培养液的PH值，为细菌培养生长提供较为理想的条件。
适用范围：主要适用于二氧化碳培养箱是细菌培养二氧化碳培养箱技术参数*一：资质要求：1.生产企业通过TÜV机构认证的ISO13485:2003认证，ISO9001：2008认证；2.产品通过TUV机构认证的CE质量认证和SFDA医疗器械注册证；二：技术参数：1.采用微电脑温度控制器，适用于细胞、组织、微生物等培养2.气套式加热系统，加热迅速，温度.湿度恢复速度快3.内部容积≥100L4.最低温度控制范围为室温+5℃*5.PT1000温度传感器，标配环境温度传感器,带独立传感器的超温保护装置*6.标配254nm波长无臭氧型紫外灯，实现箱体内快速消毒*7.CO2浓度传感器具有"AUTO-START"自动启动功能，自动校准，保证CO2浓度的高精确性8.CO2进气口配备HEPA高效过滤器，过滤效率99.998％9.内腔及附件不锈钢采用特殊电化学处理*10.倾斜式的底盘水库式设计结构，非增湿盘,增加蒸发面积,相对湿度:≥95%，湿度恢复速度快*11.具有玻璃门加热或外门加热功能，有效避免玻璃门上产生冷凝水12.具有独特循环风道设计，非自然对流，保证温度、湿度、CO2浓度的均一性13.可堆叠摆放，节省实验室空间14.标配虹吸泵，清洁方便15. 可配4个接口的钢瓶自动切换装置，同时接4个钢瓶，可自动切换16.具有声光报警装置，出错储存和分析功能列出保证仪器运行的消耗品价格及用量，（专用的写出供货渠道，遗漏视为免费提供）试剂及辅材明细表专用配套耗材部分特别说明：耗材部分报价：1. 详细标明原装耗材的规格和价格，具体明细表见（全自动全自动鉴定药敏分析系统等所需试剂耗材、半自动全自动鉴定药敏分析系统等所需耗材）。
细菌对抗菌药物的敏感试验(实验)
5．质量控制
采用标准菌株与测试菌在同一条件下做药敏试验。 标准菌株的抑菌圈应落在预期范围内。如果超出该范围， 则不应发出报告，及时检查原因，予以纠正。
ATCC25923 金黄色葡萄球菌 ATCC25922 大肠埃希菌 ATCC27853 铜绿假单胞菌 ATCC29212 或 33186 粪肠球菌
金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性试验结果判断
无菌棉签 涂布
MH琼脂表面
室温 5min
贴含药纸片 35℃ 观察 16～18h 结果
操作注意事项：
菌液应在15分钟内接种完毕 接种后，平板放置时间不要超过5min 注意纸片距离
＞15mm ＞24mm
3．结果解释 测量抑菌圈直径，参照CLSI的标准解释结果。
20mm
4.影响纸片法药敏结果的因素 ①培养基质量 成分、pH、深度、硬度和表面 湿度等。 ②药敏纸片的质量 含药量和保存方式。 ③接种菌量 ④操作质量 接种后贴药片的时间；培养温度 和时间；抑菌圈测量工具的精度
大肠埃希菌抗菌药物敏感性试验结果判断
抗菌药物敏感性试验
成都医1.掌握纸片扩散法（K-B法）原理、操作 方法、结果的判读及其临床意义。
2.掌握纸片扩散法的质量控制。
实验内容 纸片琼脂扩散法（K-B法）
实验器材
1. 菌种： 金黄色葡萄球菌ATCC25923、 大肠埃希菌ATCC25922
（幼龄菌，1.5×108/ml） 2. 培养基：水解酪蛋白琼脂（MH琼脂）平板，1个/人 3. 抗菌纸片：青霉素（PEN）、红霉素(ERY)、庆大
霉素（GEN） 4. 其它：无菌生理盐水、无菌棉签、镊子、 接种环、
刻度尺（自带）、0.5 麦氏比浊管（相当于 1.5×108CFU/ml）
药品各检验项目所需仪器、器具、试剂
仪器：洁净采样车 器具：取样器（固体：探子、不锈钢勺、镊子、铗子；液体：药用移液管、烧杯、勺子、粘度大液体用玻璃棒） 、品盛装容器（烧杯、广口瓶、具塞锥形瓶、塑料袋、自封袋） 、辅 助工具（手套、剪刀、纸、笔、不干胶标签、酒精棉签等）二、工艺用水取样 SOP取样工具：洁净的具塞锥形瓶（卫检取样用灭菌具塞锥形瓶、消毒酒精棉球）滴定液与标准液配制 SOP仪器与用具：十万分之一电子分析天平、恒温干燥箱、滴定管、移液管、容量瓶1、硫酸滴定液【分析纯硫酸、基准无水碳酸钠、甲基红 - 溴甲酚绿指示剂】2、盐酸滴定液【分析纯盐酸、基准无水碳酸钠、 甲基红-溴甲酚绿、玛瑙研钵、具盖磁坩埚】3、氢氧化钠滴定液【分析纯氢氧化钠、基准邻苯二甲酸氢钾、酚酞指示液、聚乙烯塑料瓶塞中有 2 孔，孔内各插入玻璃管 1 支，1 管与钠石灰管相连， 1 管供吸出本液使用）、玛 瑙研钵，称量瓶】4、硝酸银滴定液【硝酸银、基准氯化钠、碳酸钙、糊精、荧光黄指示液、具玻璃塞的棕色玻瓶】5、硫代硫酸钠滴定液【分析纯硫代硫酸钠、无水碳酸钠、基准重铬酸钾、碘化钾、淀粉指示液、碘瓶】6、乙二胺四醋酸二钠滴定液【乙二胺四醋酸二钠、基准氧化锌、0.025%甲基红的乙醇、氨试液、氨-氯化铵缓冲液（PH10.0）、铬黑T 、玻璃塞瓶】 7、高锰酸钾滴定液【分析纯高锰酸钾、基准草酸钠、硫酸、垂熔玻璃滤器、玻璃塞棕色玻验项目所需仪器 器具 试剂物料取样 SOP瓶】8、碘滴定液【分析纯碘、基准三氧化二砷、碘化钾、盐酸、氢氧化钠滴定液（1mol/L）、硫酸滴定液（0.5mol/L）、碳酸氢钠、甲基橙指示液、淀粉指示液、垂熔玻璃滤器、棕色细口瓶、玻璃塞的棕色玻瓶】9、高氯酸滴定液【无水冰醋酸、醋酐、高氯酸（70%〜72%）基准邻苯二甲酸氢钾、结晶紫指示液、棕色玻瓶】四、微生物检查SOP仪器及设备：恒温培养箱、生化培养箱、恒温水浴锅、电冰箱、超净工作台、生物显微镜、放大镜、电热恒温干燥箱、电热压力消毒器、药物天平。
药品检验检测实验室主要仪器设备配置标准
1
动态控温控湿薄层色谱仪
1
多功能可见异物检测仪
1
1
药品快速筛查试剂箱(含试剂)
1
1
重金属快检仪
1
九
其他仪器
溶出度仪
20
9
自动溶出度仪
8
1
崩解仪
9
3
干燥箱
40
10
超净工作台
12
5
精密恒温水浴
20
2
切片机
2
1
生化培养箱
20
2
恒温恒湿实验柜
15
1
超声波清洗机
60
5
旋转蒸发仪
10
4
离心机
5
1
低温离心机
10
1
低温冰箱
14
2
马弗炉
8
3
除湿机
20
8
超纯水机
6
2
蒸汽灭菌锅
8
药材粉碎机
6
2
厌氧培养箱
2
1
生物安全柜
20
1
小型冻干机
4
二氧化碳培养箱
5
1
真空干燥箱
8
1
集菌仪
6
4
恒温培养箱
16
10
干热灭菌器
6
1
浮游菌采样器
4
2
全自动固相萃取仪
2
微波消解仪
5
1
氮吹仪
6
1
均质器
6
1
尘埃粒子计数器
3
2
全自动血细胞分析仪
1
隔离器
药品检验检测中心（院、所）实验室主要仪器设备配置标准
药效学试验常用仪器设备
药效学试验常用仪器设备药效学试验，听起来是不是有点严肃？其实里面的仪器设备可是五花八门，各具特色，像个超级市场一样，让人眼花缭乱。
首先咱们聊聊那些常见的试验设备吧，像是小小的显微镜，简直就是科学家们的“放大镜”，能把看不见的小细胞清晰地呈现在眼前。
哎呀，这可让人兴奋得不行，细胞的秘密就藏在里面呢，谁说科学无趣，看看那些奇妙的形状，真是让人开眼界！然后呢，咱们还有离心机，听这个名字就很有力量感，对吧？就像在做一场科学版的洗衣机舞蹈，转呀转呀，把液体中的成分分离得一清二楚。
科学家们用这个设备就像是魔术师，轻轻一按，液体就乖乖地分成了几层，真是神奇得让人惊叹。
想象一下，如果把离心机放在家里，隔三差五就能看看饮料分层，那生活岂不是多了不少乐趣？别忘了我们亲爱的生物反应器，这玩意儿可是药效学实验里的大功臣。
它像个小型的工厂，能够提供最佳的生长环境，让细胞们在里面欢快地“派对”。
想象一下，各种细胞在里面争先恐后，像是参加比赛，最后谁能长得最好，真是期待啊！通过调节温度、pH值和营养成分，科学家们就像调酒师一样，调制出完美的“鸡尾酒”，让细胞们肆意生长。
再来就是高效液相色谱仪，听起来就像个高大上的设备。
它可是分析药物成分的利器，让科学家们可以一眼看穿各种药物的秘密。
就像是在进行一场“谁是卧底”的游戏，最终找出隐藏的成分。
这个仪器的精准度简直可以与金字塔里的测量仪器媲美，谁都无法逃脱它的“法眼”，真是让人佩服得五体投地。
实验中还有超声波清洗机，简直就是科学界的小白兔，温柔又细腻。
用它来清洗试管，简直就像给小试管洗个澡，泡泡水中的细菌统统被赶走，干干净净。
试想一下，试管洗完澡后，闪闪发亮，宛如新生，研究人员就像是看着新玩具的小朋友，乐得合不拢嘴。
试验过程中，数据记录仪也是不可或缺的好帮手。
它就像是忠实的小秘书，把每个实验数据都记录得妥妥帖帖，绝对不会遗漏一丝一毫。
这样一来，科学家们就可以把心思全放在实验上，根本不必担心会漏掉任何关键数据，真是省心省力。
实验设备-小企业药敏试验和血凝试验
解剖检查、细菌培养药敏试验、HA、HI试验所需器材如下：名称数量备注规格及用途解剖检查不锈钢桌面解剖台 1 根据实验室实际条件不小于150×80cm，带水槽给排水方便、配照明设备。
搪瓷盘2—4 必需50cm×30cm（参考）手术剪 2 必需14—17cm尖头家用剪刀 1 根据实际情况长镊子 2 必需20cm有齿镊子 2 根据实际情况13cm放大镜 1 根据实际情况5—10倍细菌培养药敏试验电热培养箱 1 必需电热烘干箱 1 必需普通生物显微镜 1 必需微生物检查高压消毒锅 1 必需蒸馏水发生器 1 必需超净工作台 1 必需电子秤 1 精确到1g/100 称量试剂、药品接种棒2—4 必需铂金丝或镍铬丝10支必需接种棒上使用酒精灯 2 必需烧杯2—4 必需500ml量筒 1 必需500ml，配制试剂量筒 1 必需200ml，配制试剂培养皿若干必需直径90mm玻璃棒 4 必需眼科镊子 2 必需夹取药敏片等洗瓶 2 根据实际情况500ml注射器可根据需求另备1ml、2ml、5ml各20个，10ml、20ml各5个针头若干根据实际情况7#、9#、12#试管刷各6 必需大、中、小号试管架2—5 根据实际情况孔径18—20mm玻璃试管20 根据实际情况10cm×1cm电炉子 1 必需2500W干燥器 2 必需内径20cm电炉子 1 必需2500W电热恒温水浴锅 1 必需药敏纸片若干必需常规使用抗生素试管框2—5 根据实际情况产气管若干必需玻璃珠若干根据实际情况三角瓶若干必需250、300、500三角瓶塞若干必需同上广口瓶1-4 必需试管若干必需13*150\17*170试管帽若干必需同上HA、HI实验所需器材冰箱 1 必需200L左右（保鲜冷冻一体式即可）电动离心机 1 必需额定4000转即可。
96孔“V”型塑料板若干根据实际检测量可重复使用的，也可用一次性板。
移液器 1 必需8道的最为方便，有条件可配备备用，涵盖50-300vl，配套吸头和吸头盒微量移液管若干必需与移液器配套微量移液管盒 4 必需与吸头、移液器配套微量振荡器 1 必需检测抗体使用计时器 1 根据实际情况配置确定反映时间加样槽若干必需配抗原使用杂物类刻度吸管各20 1ml、5ml、10ml洗耳球 2 必需玻璃漏斗各2个必需直径150mm、直径60—80mm医用橡胶管2—4m 根据实际情况磨口试剂瓶3—6个根据实际情况200ml，装盛酒精棉球或其他试剂，棕色一个装碘酊载玻片2盒根据实际情况试验台（最好表面耐酸碱高温）、工作服（白大褂）、帽子、口罩、胶皮手套、脱脂棉、纱布、滤纸、打孔器、水桶、塑料盆、药匙、蜡烛、线绳、温度计、消毒液试剂类各种商品化琼脂包括：普通营养琼脂（必需）、麦糠凯、伊红美兰、营养肉汤、琼脂粉各种HI检测抗原包括：H5、H9、ND、EDS等。
药品检验检测实验室主要仪器设备配置标准
205
恒温金属浴
10
206
过滤器
10
207
光敏仪
3
208
超声波细胞破碎仪
4
209
全自动血凝分析仪
1
210
血小板聚集仪
1
211
全自动核酸提取仪
1
212
全自动化学发光分析仪
1
213
组织烘片机
1
214
组织摊片机
1
215
凝固点测定仪
1
216
冷冻切片机
1
217
包埋盒打码器
1
218
风量罩
1
219
抗性测定仪
1
220
恒温培养箱
16
10
160
干热灭菌器
6
1
161
浮游菌采样器
4
2
162
全自动固相萃取仪
2
163
微波消解仪
5
1
164
氮吹仪
6
1
165
均质器
6
1
166
尘埃粒子计数器
3
2
167
全自动血细胞分析仪
1
168
隔离器
5
1
169
快速溶剂萃取仪
1
170
流式细胞仪
2
171
信息化平台
1
1
172
显微注射系统
1
173
水迷宫
2
174
68
荧光显微镜
1
69
照相显微镜
3
1
70
倒置显微镜
2
71
透射电镜
药敏试验操作方法
药敏试验操作方法药物敏感性试验是一种常见的实验方法，用于评估药物对细菌或其他微生物的敏感性。
下面我将详细介绍药敏试验的操作方法。
一、实验仪器和试剂准备1. 培养基：根据要测试的细菌种类选择相应的培养基，并按照说明书配制。
2. 抗生素：根据实验需求选择合适的抗生素。
可以是已知的抗生素，也可以是待测的新药物。
3. 细菌悬浮液：从培养物中挑取单一菌落，转接到培养基中培养一夜，然后取一定量的细菌悬浮液用生理盐水调制。
二、药敏试验步骤1. 稀释菌悬液：将细菌悬液稀释至适宜浓度，通常为0.5 McFarland 标准浓度，以确保实验准确性。
2. 制备琼脂平板：将培养基煎化至液态，待温度降至45-50时加入相应抗生素浓度，快速混合后倒入培养皿中。
3. 扩展细菌：将含有药物的琼脂平板倒扣在灭菌台上，用细菌悬液均匀涂抹在琼脂平板表面上。
4. 培养和观察：将培养皿放入恒温培养箱中，在适宜的温度下培养一段时间，通常为18-24小时。
培养结束后，观察菌落生长情况，并记录结果。
5. 结果解读：根据菌落的生长情况和直径大小，判断细菌对药物的敏感性。
通常，抗生素有效抑制菌落生长的区域称为抑制圈，其直径大小与药物对细菌的抑菌效果相关。
- 抗生素敏感（S）：抑制圈直径大于抗生素的最低抑菌浓度（MIC）；- 中度敏感（I）：抑制圈直径仅略大于MIC；- 抗生素耐药（R）：抑制圈直径小于MIC。
6. 结果记录和分析：将对应的药敏结果记录下来，并进行案例分析和数据统计。
7. 实验验证：如果需要，可以对少数样本进行二次验证以确保结果的准确性。
三、注意事项和常见问题1. 实验操作要严格遵守无菌技术，以防止外界细菌的污染。
2. 实验室工作人员应佩戴适当的个人防护装备，如实验手套、口罩等。
3. 实验仪器和试剂要经过严格的消毒和无菌处理。
4. 抗生素的选择要与实验目的和细菌种类相匹配，避免选择不当的抗生素。
5. 实验结束后，应正确处置培养皿和含有抗生素的废弃物，以避免对环境造成污染。
药敏实验器材及操作步骤
药敏实验器材及操作步骤
操作步骤：
一、药敏试纸片的制备:
1. 取定性滤纸,用打孔机打成直径6毫米的圆形小纸片.
2. 取圆纸片50片防入清洁干燥的青霉素空瓶中,瓶口以单层牛皮纸包扎.经15-20分钟121℃高压消毒后,
3. 放在37度恒温箱中数天,使其完全干燥.
二、药敏片的制备(商品药):
1. 按商品药的使用治疗量的比例配制药液.
2. 在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升,并翻动纸片,使各纸片充分浸透药液,翻动纸片时不能将纸片捣烂.同时在瓶口或瓶身记录药物名称,放37度温箱内过夜,干燥后即密盖。
3. 如有条件可真空干燥.切勿受潮,置阴暗干燥处存放,有效期3-6个月.
三、培养基的制备：
1. 取16.5g营养琼脂至500ML三角烧瓶中，加蒸馏水至485ML于三角烧瓶。
放置电子万用火炉上，不断搅拌至营养琼脂完全融化。
2. 瓶口以单层牛皮纸包扎.经15-20分钟121℃高压消毒,同时把清洗洁净的培养皿一起高压消毒。
3. 然后，每个培养皿中灌入18-20ML，室温凝固保鲜备用。
四、药敏操作：
1. 在净化工作台上，用动物肝脏或心脏的横断面置于培养基上均匀涂布。
2. 然后把七个不同的药敏片均匀分布在培养基上。
3. 置于恒温培养箱中37℃培养24H，然后观察结果。
药物敏感判定标准:
20以上极敏,15-20高敏,10-14中敏,10以下低敏,0不敏.
培养基:应根据实验菌的营养需要进行配制,倾注平板时,厚度合适,约5-6毫米,不可太薄,一般90毫米直径的培养皿,倾注培养基18-20毫升.。
药敏试验所需器材
一、实验材料1、普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。
做沙门氏菌可选择血清培养基。
2、药敏试纸：购买或自制3、细菌：待做药敏试验的细菌4、仪器：接种环、培养皿、酒精灯、打孔器（得力集团有限公司，浙江宁海县）、电热恒温培养箱（北京科伟永兴仪器有限公司）、净化工作台（康宝牌）移液器、滴头二、实验准备2.1药敏片的准备：购买或自制2.1.1制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。
取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。
经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。
2.1.2抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。
同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。
切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。
2.2药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取1 0毫克加入10毫升的水中混匀。
此稀释液即为用于做药敏试验的药液。
三、实验操作方法3.1药敏片法3.1.1在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。
具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。
然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。
（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。
要求涂布均匀致密）3.1.2将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。
为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。
药敏实验流程
药敏实验1.目的提供细菌对抗菌药物的敏感试验的标准采集与操作方法，选择敏感药物用于临床。
2.范围适用于实验室分离菌及常见菌的抗菌药物敏感试验。
3.采样对接人服务专家针对病死猪进行解剖根据临床症状采集相应的病料。
4.设备和材料无菌剪刀、无菌手术刀、无菌试管、无菌生理盐水、无菌平皿、三角烧瓶、酒精灯、接种环、打火机、75%酒精棉球、一次性手套、营养琼脂培养基、M-H琼脂培养基或特殊培养基、0.5标准麦氏比浊管、药敏纸片、待测病料、记号笔、眼科镊子、2ml或5ml一次性注射器、试管架、超净工作台、恒温培养箱、带刻度直尺。
5.采样及送样操作采集：病料新鲜度→无菌操作采样→有目的进行采样→保证组织完整性→独立存放到封口袋中并做好标记。
运输：采集好病料放入保温箱（泡沫纸箱+冰袋）中，冷藏即可，不可冷冻。
常见细菌分离采样部位病名样品链球菌脑、腹腔积液5.1样品的标识要求有样品编号、样品名称、样品来源、样品数量、初步诊结果抽样日期及周龄、检测项目等内容。
5.2采样数量猪一般采集3-5头，6.细菌分离在无菌操作条件下，将待测病料（含有典型临床症状部分）用平板划线分离法接种于普通营养琼脂培养基或特殊培养基上（血琼脂、SS琼脂、麦康凯琼脂、BP琼脂等），于37℃±1℃恒温培养箱中培养18-24h后备用。
细菌在培养基上生长特点7.药敏试验操作步骤7.1制作待检菌液在超净工作台内挑取培养18-24h普通营养琼脂平板上的菌落，悬于含3ml无菌生理盐水的试管中。
混匀后与比浊管比浊，调整浊度至0.5麦氏标准（相当于1-2*10 cfu/ml）。
7.2接种细菌在超净工作台内用无菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上挤压去掉多余的菌液，均匀涂抹整个平板表面，最后沿平板内缘涂抹一周（用接种环密集划线法也可以）。
7.3贴药敏片将涂抹均匀的培养皿底部用记号笔做好标记，眼科镊子在酒精灯上灼烧灭菌待冷却后，镊取各种购买或自制的药敏片，分别贴于相应的位置上，用镊子轻轻按压纸片使药敏纸片与培养基表面密贴；药敏纸片应在培养基表面均匀分布，各纸片中心距离大于24mm，纸片距边缘距离大于15mm，这样一个直径90mm的培养皿可贴7个药敏纸片。
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一、实验材料
1、普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可
选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。
做沙门氏菌可选择血清培养基。
2、药敏试纸：购买或自制
3、细菌：待做药敏试验的细菌
4、仪器：接种环、培养皿、酒精灯、打孔器（得力集团有限公司，浙江宁海县）、
电热恒温培养箱（北京科伟永兴仪器有限公司）、净化工作台（康宝牌）
移液器、滴头
二、实验准备
2.1药敏片的准备：购买或自制
2.1.1制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。
取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。
经15
磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。
2.1.2抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。
同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。
切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。
2.2药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取1 0毫克加入10毫升的水中混匀。
此稀释液即为用于做药敏试验的药液。
三、实验操作方法
3.1药敏片法
3.1.1在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。
具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。
然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。
（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。
要求涂布均匀致密）
3.1.2将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。
为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。
为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴七片），每种药敏片的名称要记住。
3.1.3将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。
3.3打孔法：
该法较简单，成本低，易操作，比较适用于商品药物的检测。
3.3.1在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。
具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。
然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。
（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。
要求涂布均匀致密。
）
3.3.2以无菌操作将灭菌的不锈钢小管（外径为4毫米、孔径与孔距均为3毫米，管的两端要光滑，也可用玻璃管、瓷管），放置在培养基上打孔，将孔中的培养基用针头挑出，并以火焰封底，使培养基能充分的与平皿融合（以防药液渗漏，影响结果）。
3.3.3加样：按不同药液加样，样品加至满而不溢为止。
3.3.4将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。
结果观察
在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，其浓度呈梯度递减，因此在纸片周围一定距离内的细菌生长受到抑制。
过夜培养后形成一个抑菌圈，抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。
其直径大小与药物浓度、划线细菌浓度有直接关系。
判定标准
一、药敏实验的结果，应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。
表1药物敏感实验判定标准
二、药物敏感实验判定标准参考表1，多黏菌素抑菌圈；在9毫米以上为高
敏，6—9毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。