药敏实验

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药敏实验

检验原理:含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上,纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断的向纸片周围区域扩散,形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制,形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈越大,MIC越小。

样本要求:鉴定后的致病微生物纯菌落

检验方法:

1、菌液制备:挑选鉴定后的致病微生物纯菌落3~4个菌落置于灭菌0.9%氯

化钠液中,制成均匀悬液。

经与浊度管(0.5麦氏单位比浊管)比较,浊度一致。

2、接种平板:用灭菌的棉拭子蘸取制备好的接种菌液,在管壁上旋转挤压几

次,去掉过多的菌液,再用试子涂布整个培养基表面,反复几次,每次将平板旋转60℃,最后沿平皿周边绕两圈,用镊子压平。?每张纸片间距不少于24mm,纸片中心距平皿边缘不少于15mm。

3、孵育:贴好纸片后在15min内放到35℃孵箱,将平板倒置培养。平板孵

育16~18h后取出。

4、结果判定:培养后取出平板,测量抑菌环的直径,抑菌环的边缘以肉眼见

不到细菌明显生长为限。

【检测结果的解释】

用毫米尺量取抑菌环直径,参照下表判读结果,按敏感(S)、中介(I)、耐药(R)报告。

纸片法药敏试验抑菌环直径判断标准(非苛养菌)

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