薄层色谱法原理 PPT
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经典色谱法分析技术—薄层色谱法(分析化学课件)
小
极性
大
薄层色谱固定相和流动相选择
2. 流动相展开剂的选择要求
薄层色谱分离中一般要求各斑点的Rf值在0.2～0.8之间，Rf值之 间应相差0.05以上.
3. 流动相展开剂的选择方法
如果单一展开剂分离效果不好，可用两种或两种以上的单一溶剂按 照一定比例混合而成的溶剂展开,可以达到较好的分离效果.
薄层色谱固定相和流动相选择 被测组分、吸附剂和展开剂的选择原则
常用溶剂的极性顺序为：
常用吸附剂的极性顺序为：
增
增
大
大
薄层色谱固定相和流动相选择
多糖、蛋白质等大分子、生物碱盐
极 性
苷类（皂苷、黄酮苷、蒽醌苷）
渐 黄酮、蒽醌等苷元、有机酸
小
香豆素、萜类、挥发油等亲脂性成分
烷烃＜烯烃
＜二甲胺＜酯类＜酮
＜醚＜硝基化合物
类＜醛类＜硫醇＜胺 类
＜酰胺类＜醇 类＜酚类＜羧 酸类
分离原理
吸附薄层色谱分离原理
展开（分离）
分离过程：
制板→点样→展开→显色→定性定量分析
固定相--吸附剂
薄层色谱的固定相所用的吸附剂
流动相---展开剂
薄板的底端浸入到适当的流动相溶剂
吸附薄层色谱分离原理
薄 层 色 谱
点样
展开剂
吸附薄层色谱分离原理
分离原理：
展开剂在毛细管的 浸润作用下，带着 各组分沿着薄板向
薄层色谱固定相和流动相的选择
薄层色谱固定相和流动相选择
一、固定相（吸附剂）的选择
1. 选择原则 根据被分离组分的极性选择吸附剂：
被分离组分的极性强——弱极性吸附剂； 被分离组分的极性弱——强极性吸附剂；
薄层色谱固定相和流动相选择
第五章 薄层色谱法(共84张PPT)
荧光;银激活的ZnS和CdS, ZnS• CdS •Ag在366nm
的紫外线照射下能够产生荧光。 硅胶即可以进行吸附层析，又可以进行分配层
析，主要的区别是在于活化程度不同，前者活化程 度高，后者活化程度低。 （3）纤维素
可在实验室制备，取脱脂棉或滤纸剪成小
11/20/2022
12
块加适量的5％的盐酸，加热煮沸3小时，冷却
要于150－160度干燥1－3小时，备用。
（3）薄层板的活化
硅胶、氧化铝的活性与其含水量有关，
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含水量越低，吸附能力越强，其活度越高。 因此层析板在使用之前必须经过活化。对于硅胶 薄层其活化温度为105~110°C，氧化铝薄层的活
化温度为150~200°C，活化后的薄层板在使用 之前应放在干燥器中备用。
薄层层析中的吸附剂和柱层析相似，首先 应该考虑应如何层析，一般的讲，非极性或弱极 性的组分的分离用吸附层析，水溶性组分的分离 用分配层析。
常用的吸附剂：
（1） 氧化铝
氧化铝铺层时一般不加粘合剂，直接用干
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8
粉铺层，得到的层析板称为“干板” 或“软 板”，但也可以加煅石膏作粘合剂，这种混有 煅石膏的吸附剂称为氧化铝G，用氧化铝G加水，
3.各种特制薄层
由于工作需要，各种特制薄层相继出现，
这里介绍数种：
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（1）混合薄层 有两种吸附剂混合制成。例如，
为了降低硅胶的活度，可在其中加入一定量的硅藻
土铺层，也可以用硅胶：氧化铝（1：1）铺层，
对糖和醇具有较好的分离效果。 （2）酸碱薄层和pH缓冲薄层 在分离生物碱和氨基酸时，为了得到更好的
(2) 1958年斯塔尔对薄层层析的吸附剂和 涂铺工具进行了改革并使之标准化，克服了 技术上的困难，从此以后，薄层层析法得到 了迅速的发展。
的紫外线照射下能够产生荧光。 硅胶即可以进行吸附层析，又可以进行分配层
析，主要的区别是在于活化程度不同，前者活化程 度高，后者活化程度低。 （3）纤维素
可在实验室制备，取脱脂棉或滤纸剪成小
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块加适量的5％的盐酸，加热煮沸3小时，冷却
要于150－160度干燥1－3小时，备用。
（3）薄层板的活化
硅胶、氧化铝的活性与其含水量有关，
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含水量越低，吸附能力越强，其活度越高。 因此层析板在使用之前必须经过活化。对于硅胶 薄层其活化温度为105~110°C，氧化铝薄层的活
化温度为150~200°C，活化后的薄层板在使用 之前应放在干燥器中备用。
薄层层析中的吸附剂和柱层析相似，首先 应该考虑应如何层析，一般的讲，非极性或弱极 性的组分的分离用吸附层析，水溶性组分的分离 用分配层析。
常用的吸附剂：
（1） 氧化铝
氧化铝铺层时一般不加粘合剂，直接用干
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粉铺层，得到的层析板称为“干板” 或“软 板”，但也可以加煅石膏作粘合剂，这种混有 煅石膏的吸附剂称为氧化铝G，用氧化铝G加水，
3.各种特制薄层
由于工作需要，各种特制薄层相继出现，
这里介绍数种：
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（1）混合薄层 有两种吸附剂混合制成。例如，
为了降低硅胶的活度，可在其中加入一定量的硅藻
土铺层，也可以用硅胶：氧化铝（1：1）铺层，
对糖和醇具有较好的分离效果。 （2）酸碱薄层和pH缓冲薄层 在分离生物碱和氨基酸时，为了得到更好的
(2) 1958年斯塔尔对薄层层析的吸附剂和 涂铺工具进行了改革并使之标准化，克服了 技术上的困难，从此以后，薄层层析法得到 了迅速的发展。
薄层色谱应用课件.pptx
一、 实 验 目 的
❖ 了解薄层色谱的应用原理 ❖ 掌握薄层色谱的应用方法
二、实 验 原 理
二、实 验 原 理
应用薄层色谱检验、鉴定化合物的原理：
图1 365 nm下观察的结果
图2 硫酸乙醇显色结果
注：两边的是标准品，中间的是样品
二、实 验 原 理
➢ 固定相：硅胶，氧化铝，等。 ➢ 支持板：玻璃板，涤纶布，等。 ➢ 展开剂：根据样品的极性及溶解度选择，可采用单一溶剂，但更常用的
四、实 验 过 程
比移值（ Rf 值）的计算：
五、 注 意 事 项
1. 制作薄层所用玻璃板要平滑、干净。 研磨要充分，保证所制的薄层面应平整均匀 存放薄层板时要注意保持干燥及避免污染。
五、 注 意 事 项
2. 样品浓度（浓度为0.01-0.1%）： 太大，容易出现拖尾；
太小则会导致斑点不明显，难以观察。
五、 注 意 事 项
5. 标记斑点时：要轻轻勾画，避免铅笔将斑点处的硅胶碰掉，从而 影响后续显色结果的观察。
是混合溶剂。
三、实 验 试 剂 与 仪 器
点样样品 香草醛
间苯二酚
展开剂 石油醚 丙酮
四、实 验 过 程
薄层板 的制备
点样
展开
显色、定位
UV灯、显色剂
测定比移值
（Rf 值）
四、实 验 过 程
显色和定位 一般包括：一看、二照、三碘和四显四步。
❖ 一看：指先在自然光下观察 ❖ 二照：指分别在 254 nm 和 365 nm 下观察有无暗斑或荧光斑点 ❖ 三碘：对在自然光和紫外下均无斑点的物质可以用碘蒸汽显色 ❖ 四显：用显色剂显色 ➢ 实际操作中根据需要选择其中的两到三步。
五、 注 意 事 项
薄层色谱和柱层析ppt课件
氧化铝呈碱性，适用于碱性和中性物质的分离。
硅胶和氧化铝1：1量掺和使用，得中性吸附剂，或在制板 时加入稀酸或稀碱使其变性，或用酸性或碱性展开剂展开， 以改变硅胶或氧化铝原来的性质。
2021/8/9
最新
课件
9
（Ⅲ）样品的极性
物质的极性愈大，氧化铝和硅胶吸附愈牢，物质极性大小 如下：
饱和烃 < 不饱和烃 < 醚 < 酯 < 醛 < 酮 < 胺< 羟基化合物 < 酸和碱
性炭因吸附性太强和黑色，使应用受到限制。
（2）分配色谱对载体的要求
（Ⅰ）表面积大
（Ⅱ）在展开剂中不溶，与展开剂和样品组分不起化学反应或 分解作用
（Ⅲ）对样品组分无吸附性或吸附性弱
（Ⅳ）对固定液是惰性的
2021/8/9
最新
课件
8
常用的有纤维素和硅藻土。
实际工作中，吸附剂、载体等的选择，首先决定于样品成
（c）酸碱薄层板和pH缓冲薄层板：有些化合物在普通板上分 离不好时，可通过改变原来吸附剂的酸碱性，改善分离效果。 如在铺层时用稀酸（一般用1～4%的盐酸或0.1～0.25mol/L草 酸溶液）代替水制成酸性板，使生物碱形成离子对而分离。
（d）混合薄层板：两种不同吸附剂按一定比例混合，制板， 也可分段铺板，前段预处理，以吸附杂质，后段分离。
2021/8/9
最新
课件
14
（e）径向薄层板：径向板铺法与一般板不同，点样前按下法 处理：
刮去
刮去
用此板展开，可使Rf值相近的化合物得到较好的分离，且 灵敏度高。 （f）梯度薄层板：梯度是指由一种性质到另一种性质的变化。 梯度薄层与常规薄层不同，它显示出具有渐变的分离性能，如
薄层色谱
溶剂前沿
b
色斑中心
aபைடு நூலகம்
点样原点
原点到色斑中心的距离 Rf = 原点到溶剂前沿的距离 =
a b
四、注意事项
• 1、薄层板的制备是实验的关键点之一。 铺板必须厚薄均匀一致，不能开裂。 • 2、点样的圆点必须小且浓度要高些，但 不能太高，以免引起拖尾现象。 • 3、点样后要等溶剂挥发尽才能将薄板放 入展开缸中展开。 • 4、展开结束后，取出薄板要立刻用铅笔 画下溶剂前沿。
• 4、点样 将待测样品溶在极性尽可能低的溶剂中配 成1%的溶液。用一支平口的细毛细管蘸取 少量样品溶液点在薄板上，点样基线距底 边1-2cm，样点直径在1-1.5mm之间,点间 距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜， 距边缘在5mm（以免边缘效应影响分离）。 点样时必须注意勿损伤薄层表面。正常斑 点应是圆形或椭圆形色斑。
最常用的吸附剂是硅胶G（含有煅石膏作黏合 剂）、硅胶H（不黏合剂或其他添加剂）、硅 胶HF 254（含有荧光剂，可在254nm 紫外光下 观察）、硅胶GF254（含有煅石膏和荧光剂）， 其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、 微晶纤维素、 微晶纤维素F254等。
吸附剂颗粒大小,一般要求直径为10～40μm。 薄层涂布,一般可分无粘合剂和含粘合剂两种; 前者系将固定相直接涂布于玻璃板上, 后者 系在固定相中加入一定量的粘合剂，一般常 用10～15％煅石膏(CaSO4.2H2O在140℃烘4小 时)，混匀后加水适量使用，或用羧甲基纤维 素钠水溶液(0.5～1.0％)适量调成糊状，均 匀涂布于玻璃板上。
• 薄层层析有多中展开方式，可分为上行、 下行、双向展开等。展开时均需在密闭 的容器（展开缸）中进行，且该容器内 应使流动相的蒸气饱和。 • （1）上行法：在缸中加入足够量的展开 剂，将点好样品的薄层板放入展开缸的 展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板 底边0.5～1.0cm（切勿将样点浸入展开 剂中）,密封缸盖,待展开前沿离薄板上 端1cm时，取出薄层板，并用铅笔轻轻画 下溶剂前沿，晾干。
薄层色谱法原理 ppt课件
前沿 牢的组分随展开剂移 动慢，吸附弱的组分 随展开剂移动快，一 段时后，组分被分离， 各组分在薄层板上形 成不同距离的斑点。
原点
A
B
薄层色谱法原理
比移值Rf
溶剂
前沿
原点到斑点中心的距离
Rf 原点到溶剂前沿的距离
起始线
a
AA BB
c
Rf
ac Rst
b c
b
Rf值相差越大，分离越好。一般要求分 离后组分的Rf值在0.2～0.8之间，各组 分的Rf值之差应大于0.05，以防斑点重 叠。
（一）薄层色谱法的原理
将一定粒度的吸附剂均 匀地涂铺在表面光洁 的玻璃板或塑料平板 上，制成薄层板。
薄层色谱法原理
薄层板
把待分析试样的溶液滴 加在薄层板的起始线 上（点样）
试样
原点
薄层色谱法原理
把薄层板放入层析缸中，底端浸入适当溶剂。
薄层色谱法原理
• 展开过程中，组分在 两相之间发生多次吸 附—解吸平衡，吸附
甚至多元溶剂 Rf太小——加入强极性展开剂 Rf过大——降低展开剂的极性
薄层色谱法原理
优化
1.占比例较大的溶剂为主要溶剂，可使 试样组分溶解并基本分离。
占比例较小的溶剂可进一步调整各组 分Rf值，改善分离效果。 2.分离酸性或碱性组分时，往往在展开 剂中加入少量酸或碱，以防这些组分 离解，使这些组分的斑点更加集中和 清晰，从而提高分离度。
薄层色谱法原理
（二）固、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸 附树脂等。
• 吸附剂的选择要合适，与流动相、被分离化合物不反应
薄层色谱法原理
• 2、流动相（展开剂） 薄层色谱法中采用单一溶剂或多元
混合溶剂作流动相，称为展开剂。 与吸附柱色谱法中选择流动相的一
原点
A
B
薄层色谱法原理
比移值Rf
溶剂
前沿
原点到斑点中心的距离
Rf 原点到溶剂前沿的距离
起始线
a
AA BB
c
Rf
ac Rst
b c
b
Rf值相差越大，分离越好。一般要求分 离后组分的Rf值在0.2～0.8之间，各组 分的Rf值之差应大于0.05，以防斑点重 叠。
（一）薄层色谱法的原理
将一定粒度的吸附剂均 匀地涂铺在表面光洁 的玻璃板或塑料平板 上，制成薄层板。
薄层色谱法原理
薄层板
把待分析试样的溶液滴 加在薄层板的起始线 上（点样）
试样
原点
薄层色谱法原理
把薄层板放入层析缸中，底端浸入适当溶剂。
薄层色谱法原理
• 展开过程中，组分在 两相之间发生多次吸 附—解吸平衡，吸附
甚至多元溶剂 Rf太小——加入强极性展开剂 Rf过大——降低展开剂的极性
薄层色谱法原理
优化
1.占比例较大的溶剂为主要溶剂，可使 试样组分溶解并基本分离。
占比例较小的溶剂可进一步调整各组 分Rf值，改善分离效果。 2.分离酸性或碱性组分时，往往在展开 剂中加入少量酸或碱，以防这些组分 离解，使这些组分的斑点更加集中和 清晰，从而提高分离度。
薄层色谱法原理
（二）固、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸 附树脂等。
• 吸附剂的选择要合适，与流动相、被分离化合物不反应
薄层色谱法原理
• 2、流动相（展开剂） 薄层色谱法中采用单一溶剂或多元
混合溶剂作流动相，称为展开剂。 与吸附柱色谱法中选择流动相的一
薄层色谱法概述PPT课件【共52张PPT】
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k 反映了两种溶质的平均迁移速度，其由流动相溶剂强度 决定 I0 -（ IR + IT ）=差为被介质吸收并转换为热的光强 4 丙酮 0. 氧化铝—有碱性、中性、酸性 放置时间不宜太长，否则背景吸附剂也吸附碘，使信噪比降低。 硅胶G——将硅胶置研钵中，加入少量水，研磨均匀，至无结块和气泡，再加入比例量的水(一般为1份固定相与3份水)，迅速研磨均匀，立即涂铺。 薄层色谱定量测定的光学方法是基于测量斑点和薄层空白处光学响应信号的差值。 归一化法、内标法、外标法 这种影响一般使分配系数变小。 此外还有：化学键合相反相展开、化学键合相正相展开、离子交换、离子对色谱、凝胶、胶束、手性展开。 这类扫描仪技术上一些问题还未解决。 51 / 二氧六环 0. 展开距离一般为10-15cm。 单光束双波长——对背景不均匀引起的干扰有补偿作用，选择的两个波长应接近些。 HPLC一次只能分离一个样品，通常采用反相色谱，色谱后衍生化受限制。
*
*
点样 要求配制样品的溶剂高度挥发性和尽可能非极性，否则易使斑点扩展。 采用多次点加法，第二次点加时应待前一次点加的溶剂挥发后再进行。 点样量应适中，过载会引起斑点拖尾，分离度变差，以最小检测量的几倍～几十倍为宜。 手工点样工具：定容玻璃毛细管（1 –5ul），微量注射器。
*
*
自动点样 Limomat IV 喷样仪——样品溶液通过气流成雾状喷向薄层，移动板台，使在薄层上流下样品条带。 特点：适合于大量稀样品溶液的喷加；条带宽度不超过2mm，有利于改善分辨率；便于狭缝式光密度计扫描；要求薄层板强度高。 自动薄层色谱点样仪——由计算机控制。 药典规定：点样基线距底边2.0cm, 样点直径2-4mm, 点间距离约为cm。
*
薄层色谱参数
保留参数（Rf值） 用来表征斑点位置的基本参数是保留因子，通常称作比移值，用Rf表示。 Rf=Ls/L。，
色谱概论及薄层色谱法PPT课件
操作技巧要求高
薄层色谱法的实验操作技巧要求较高， 需要经验丰富的实验员进行操作。
对环境条件敏感
薄层色谱法的分离效果易受环境温度、 湿度等因素的影响。
薄层色谱法的展望
优化实验条件
发展新型薄层板
未来可以通过优化实验条件，提高薄层色 谱法的分离效果和定量分析精度。
研究开发新型的薄层板材料和制备方法， 提高薄层色谱法的分离速度和分辨率。
色谱概论及薄层色谱 法ppt课件
contents
目录
• 色谱概论 • 薄层色谱法 • 薄层色谱法的实验技术 • 薄层色谱法的实验结果分析 • 薄层色谱法的优缺点及展望
01
色谱概论
色谱法的定义与分类
定义
色谱法是一种分离和分析复杂混 合物中各组分的方法，基于不同 组分在固定相和流动相之间的分 配平衡原理。
分类
按分离原理可分为吸附色谱、分 配色谱、离子交换色谱和凝胶色 谱等；按操作方式可分为柱色谱 、纸色谱和薄层色谱等。
色谱法的原理
固定相
选择合适的固体或液体作为固定 相，与流动相相对静止，使混合 物中各组分在固定相中产生吸附、
溶解或分配作用。
流动相
选择合适的液体或气体作为流动 相，使混合物中的组分随流动相 通过固定相，实现各组分的分离。
合于实验室和现场分析。
分离速度快
薄层色谱法的分离时间相对较 短，可以快速得到分离结果。
适用范围广
薄层色谱法适用于各种不同性 质的混合物，如有机物、无机
物、高分子化合物等。
薄层色谱法的缺点
定量分析精度不高
由于薄层色谱法的分离原理和操作方 法的限制，其定量分析的精度相对较 低。
对样品要求较高
薄层色谱法要求样品具有一定的挥发 性、稳定性和溶解性，对于某些特殊 样品可能不太适用。
薄层色谱培训讲稿(共20张PPT)
薄层色谱培训讲稿
薄层色谱
分离原理、条件选择和操作方法
薄层色谱的概念及分离原理
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又称薄层层析，属于 固-液吸附色谱。是一种微量、快速而简单的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优
点。由于薄层色谱一方面适用于小量样品（几到几十微克，甚至0.01 μg） 的分离；另一方面若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条 线，则可分离多达500 mg的样品。因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥
性、外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获得重现的比移值就比较
困难。为此，在测定某一试样时，最好用已知样品进行对照。
样品中某组分移动离开原点的距离 Rf =
展开剂前沿距原点中心的距离
solvent front
new position of comp.B new position of comp.A
• 4、追踪化学反应进程：观察一些化学反应是否完成，可以利用薄层色谱观 察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。
什么是“比移值”？
在相同的展开条件下，一种化合物移动离开样品原点的距离 Li （cm 或
mm）与展开剂前沿距样品原点中心的距离 Lo （cm 或 mm ）之比值，称为
相对移动值，或比移值，用Rf 表示：
薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样，主要根据样品中各组分的极 性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑。展开剂的极性越大， 对化合物的洗脱力也越大 选择展开剂时，除参照溶剂极性来选择外，更 多地采用试验的方法，在一块薄层板上进行试验：
（1） 若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿，此溶剂的
极性过强；
（2）若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动，留在了原点 上，此溶剂的极性过弱。
薄层色谱
分离原理、条件选择和操作方法
薄层色谱的概念及分离原理
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又称薄层层析，属于 固-液吸附色谱。是一种微量、快速而简单的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优
点。由于薄层色谱一方面适用于小量样品（几到几十微克，甚至0.01 μg） 的分离；另一方面若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条 线，则可分离多达500 mg的样品。因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥
性、外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获得重现的比移值就比较
困难。为此，在测定某一试样时，最好用已知样品进行对照。
样品中某组分移动离开原点的距离 Rf =
展开剂前沿距原点中心的距离
solvent front
new position of comp.B new position of comp.A
• 4、追踪化学反应进程：观察一些化学反应是否完成，可以利用薄层色谱观 察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。
什么是“比移值”？
在相同的展开条件下，一种化合物移动离开样品原点的距离 Li （cm 或
mm）与展开剂前沿距样品原点中心的距离 Lo （cm 或 mm ）之比值，称为
相对移动值，或比移值，用Rf 表示：
薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样，主要根据样品中各组分的极 性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑。展开剂的极性越大， 对化合物的洗脱力也越大 选择展开剂时，除参照溶剂极性来选择外，更 多地采用试验的方法，在一块薄层板上进行试验：
（1） 若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿，此溶剂的
极性过强；
（2）若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动，留在了原点 上，此溶剂的极性过弱。
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ⅤBiblioteka 非极性A’ A非极性
极性
被分离物质
展开剂成分的选择：
对于容易分离的化合物，用单一溶剂展 开
优点：溶剂简单，分离重现性好。 对于难分离组分，则选用二元、三元、
甚至多元溶剂 Rf太小——加入强极性展开剂 Rf过大——降低展开剂的极性
优化
1.占比例较大的溶剂为主要溶剂，可使 试样组分溶解并基本分离。 占比例较小的溶剂可进一步调整各组 分Rf值，改善分离效果。
薄层板
把待分析试样的溶液滴 加在薄层板的起始线 上（点样）
试样
原点
把薄层板放入层析缸中，底端浸入适当溶剂。
• 展开过程中，组分在 两相之间发生多次吸 附—解吸平衡，吸附
前沿 牢的组分随展开剂移 动慢，吸附弱的组分 随展开剂移动快，一 段时后，组分被分离， 各组分在薄层板上形 成不同距离的斑点。
2.分离酸性或碱性组分时，往往在展开 剂中加入少量酸或碱，以防这些组分 离解，使这些组分的斑点更加集中和 清晰，从而提高分离度。
3.当展开剂的粘度太大时，可在展开剂 中加入粘度小的溶剂，以降低展开剂 粘度，从而提高展开速度。
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薄层色谱法原理
第一节 薄层色谱法的基本原理
• 定义：薄层色谱法是将被分离的试样 溶液点在薄层板的一端，再用溶剂把 试样展开，从而使试样组分分离。
• 分型：吸附薄层色谱、分配薄层色谱 法、离子交换薄层色谱法、凝胶色谱 等。
（一）薄层色谱法的原理
将一定粒度的吸附剂均 匀地涂铺在表面光洁 的玻璃板或塑料平板 上，制成薄层板。
吸附剂和展开剂的选择
• 对于极性较小的被分离试样组分，应 选用活性较强的吸附剂，极性较小的 展开剂；
• 对于极性较大的被分离试样组分，应 选用活性较弱的吸附剂，极性较大的 展开剂。
被分离试样组分极性、吸附剂活性和展开剂极性之 间的关系
活泼 Ⅰ
极性
吸附剂 （固定相） B
C’ C
展开剂 （流动相）
不活泼 B’
（二）固定相和流动相
• 1、固定相（吸附剂）
• 常用的吸附剂：硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸 附树脂等。
• 吸附剂的选择要合适，与流动相、被分离化合物不反应
• 2、流动相（展开剂）
薄层色谱法中采用单一溶剂或多元 混合溶剂作流动相，称为展开剂。
与吸附柱色谱法中选择流动相的一 般规则相同，展开剂的选用要从被分 离试样组分极性、吸附剂活性和展开 剂的极性三个因素综合考虑。
原点
A
B
比移值Rf
溶剂
前沿
原点到斑点中心的距离
Rf 原点到溶剂前沿的距离
c a
起始线
b
AA BB
Rf
ac Rst
b c
Rf值相差越大，分离越好。一般要求分 离后组分的Rf值在0.2～0.8之间，各组 分的Rf值之差应大于0.05，以防斑点重 叠。
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问和交流
极性
被分离物质
展开剂成分的选择：
对于容易分离的化合物，用单一溶剂展 开
优点：溶剂简单，分离重现性好。 对于难分离组分，则选用二元、三元、
甚至多元溶剂 Rf太小——加入强极性展开剂 Rf过大——降低展开剂的极性
优化
1.占比例较大的溶剂为主要溶剂，可使 试样组分溶解并基本分离。 占比例较小的溶剂可进一步调整各组 分Rf值，改善分离效果。
薄层板
把待分析试样的溶液滴 加在薄层板的起始线 上（点样）
试样
原点
把薄层板放入层析缸中，底端浸入适当溶剂。
• 展开过程中，组分在 两相之间发生多次吸 附—解吸平衡，吸附
前沿 牢的组分随展开剂移 动慢，吸附弱的组分 随展开剂移动快，一 段时后，组分被分离， 各组分在薄层板上形 成不同距离的斑点。
2.分离酸性或碱性组分时，往往在展开 剂中加入少量酸或碱，以防这些组分 离解，使这些组分的斑点更加集中和 清晰，从而提高分离度。
3.当展开剂的粘度太大时，可在展开剂 中加入粘度小的溶剂，以降低展开剂 粘度，从而提高展开速度。
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薄层色谱法原理
第一节 薄层色谱法的基本原理
• 定义：薄层色谱法是将被分离的试样 溶液点在薄层板的一端，再用溶剂把 试样展开，从而使试样组分分离。
• 分型：吸附薄层色谱、分配薄层色谱 法、离子交换薄层色谱法、凝胶色谱 等。
（一）薄层色谱法的原理
将一定粒度的吸附剂均 匀地涂铺在表面光洁 的玻璃板或塑料平板 上，制成薄层板。
吸附剂和展开剂的选择
• 对于极性较小的被分离试样组分，应 选用活性较强的吸附剂，极性较小的 展开剂；
• 对于极性较大的被分离试样组分，应 选用活性较弱的吸附剂，极性较大的 展开剂。
被分离试样组分极性、吸附剂活性和展开剂极性之 间的关系
活泼 Ⅰ
极性
吸附剂 （固定相） B
C’ C
展开剂 （流动相）
不活泼 B’
（二）固定相和流动相
• 1、固定相（吸附剂）
• 常用的吸附剂：硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸 附树脂等。
• 吸附剂的选择要合适，与流动相、被分离化合物不反应
• 2、流动相（展开剂）
薄层色谱法中采用单一溶剂或多元 混合溶剂作流动相，称为展开剂。
与吸附柱色谱法中选择流动相的一 般规则相同，展开剂的选用要从被分 离试样组分极性、吸附剂活性和展开 剂的极性三个因素综合考虑。
原点
A
B
比移值Rf
溶剂
前沿
原点到斑点中心的距离
Rf 原点到溶剂前沿的距离
c a
起始线
b
AA BB
Rf
ac Rst
b c
Rf值相差越大，分离越好。一般要求分 离后组分的Rf值在0.2～0.8之间，各组 分的Rf值之差应大于0.05，以防斑点重 叠。
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问和交流