生物药物的杂质与安全性检查
生物药物安全性评价
生物药物安全性评价生物药物是基于生物技术的药物，主要包括蛋白质药物、基因治疗药物和细胞治疗药物等。
这些药物具有高度的特异性和活性，可以治疗多种疾病，包括癌症、自身免疫性疾病和感染性疾病等。
然而，与传统的化学药物相比，生物药物的安全性评价更为复杂，需要考虑许多因素。
本文将对生物药物安全性评价的相关内容进行分析和总结。
1. 生物药物安全性评价的主要内容生物药物安全性评价涉及许多方面，主要包括以下几个方面：1.1 毒性研究毒性研究是生物药物安全性评价的重要组成部分。
它主要评估药物在体内的毒性及其对组织和器官的影响。
包括急性毒性、慢性毒性、致突变性、致癌性等。
在毒性研究中，需要进行的实验包括体内实验和体外实验。
体内实验包括常规的动物实验，例如小鼠、大鼠、猴子等。
而体外实验一般采用细胞实验或人血清。
1.2 免疫原性评价免疫原性评价是生物药物安全性评价的另一个重要方面。
药物在体内可能会引起免疫反应，包括过敏反应、免疫抗原性和免疫抑制作用等。
在免疫原性评价中，首先需要对药物进行免疫学检测。
免疫学检测包括抗体检测和细胞免疫检测。
通过检测抗体水平或细胞免疫反应，可以评估药物的免疫原性。
1.3 稳定性评价稳定性评价是生物药物安全性评价的另一方面。
由于生物药物具有活性，因此需要考虑药物的稳定性。
包括温度、离子强度、pH值等等因素的影响。
药物在运输和储存过程中，需要考虑温度和湿度等因素的影响。
稳定性评价包括物理稳定性和化学稳定性。
物理稳定性评价主要考虑药物的杂质含量、颗粒度和输液过滤性。
化学稳定性评价主要考虑药物分解和降解等。
1.4 药代动力学和药效学评价药代动力学和药效学也是生物药物安全性评价的重要方面。
药代动力学评价主要关注药物在体内的药代动力学行为。
药效学评价主要考虑药物的治疗效果和其与体内靶点的相互作用。
药代动力学评价主要包括药物的吸收、分布、代谢和排泄等方面。
这些方面对药物治疗效果、毒性和免疫原性都有着重要影响。
第三章 药物的杂质检查 (2)
各杂质峰面积乘以相应的ƒ后与对照液主成分峰面积比较。
Ax Cs=
.ƒ
As'/Cs'
例：红霉素中红霉素B、红霉素C及有关物质的检查
红霉素A是主要活性物质
方法：取本品， 用磷酸盐缓冲液(pH7.0)-甲醇(15 ： 1)溶解并稀释制成每l m l 中约含4mg的溶液， 作为供试品溶液；精密量取5ml,置100ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液(pH7.0)-甲醇(15 ： 1)稀释至 刻度,摇匀,作为对照溶液。照红霉素A组分项下的色谱条件，取对照溶液20ul注人液相色谱仪， 调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的50%,精密量取供试品溶液与对照溶液各
❖ 一般杂质：在自然界中分布较广泛，在多种药物 的生产和贮存过程中易引入的杂质，如酸、碱、 水分、Cl-、SO42-、铁盐、重金属、砷盐、残渣等。
❖ 特殊杂质：是指在特定的药物生产和贮藏过程中 引入的杂质，也称有关物质。这类杂质随药物不 同则不同。
（四）杂质的限量 ( Limit Test )
1、杂质限量
① 杂质对照品法
适用于已知杂质并能够得到杂质对照品的情况
② 供试品溶液自身稀释对照法
适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况(仅限于 二者的颜色相近或相同的情况)
③ 杂质对照品法与供试品溶液自身稀释对照并用法
适用于存在多个杂质
④ 对照药物法
无合适的杂质对照品，或者是供试品显示的杂质斑点颜色和 主成分颜色有差异，难以判断限量。
吡罗昔康中检查“有关物质”
薄层：硅胶GF254（含NaOH） 展开剂：三氯甲烷-丙酮-甲醇（25:25:5） 检视：紫外灯（254nm）
规定： 如显杂质斑点，其颜
色与对照溶液所显主斑 点相比较，不得更深
药物的杂质检查的方法
药物的杂质检查的方法药物的杂质检查方法多种多样，包括物理方法、化学方法和生物方法等。
下面将分别介绍这些方法的原理和应用。
物理方法是通过观察药物的外观和物理性质来判断其中是否有杂质。
这些物理性质包括颜色、形状、溶解性、熔点等。
例如，通过观察药物的颜色和形状变化可以判断是否存在颜色和形状不同的杂质。
溶解性测试可以用来检测药物的纯度，其中固体药物应在适当的溶剂中完全溶解，而溶液药物则不应有明显的沉淀物。
熔点测试可以判断药物的熔化温度是否符合标准，从而判断其纯度。
化学方法是通过使用化学试剂和化学反应来检测杂质的存在。
常用的化学方法包括酸碱中和反应、氧化还原反应、络合反应等。
例如，药物中的酸性杂质可以通过与碱试剂的中和反应来检测，而药物中的氧化性杂质则可以与还原剂反应产生颜色变化。
络合反应是指使用络合剂与药物中金属离子形成络合物，通过颜色变化或沉淀生成来检测杂质的存在。
生物方法是利用生物学原理和技术来检测药物中的杂质。
其中包括生物传感器、生物感受器、生物组学方法等。
生物传感器是通过利用生物组分对特定物质的选择性反应来检测杂质的存在。
生物感受器是利用基因工程技术构建的对特定物质敏感的生物体，通过变化的生理和行为特征来指示杂质含量。
生物组学方法则是利用生物样本中的代谢产物或指标来判断药物是否受到污染或含有杂质。
在实际应用中，通常会综合使用多种方法来进行杂质检查，以提高检测的准确性和可靠性。
例如，可以先通过物理方法初步判断药物的纯度和外观，然后再使用化学方法和生物方法进一步验证和确认。
同时，也要根据不同药物的特点选择适合的检测方法。
例如，对于含有金属离子的药物，可以使用化学方法中的络合反应来检测，而对于含有生物活性物质的药物，则可以优先考虑使用生物方法。
总之，药物的杂质检查方法有物理方法、化学方法和生物方法等多种。
每种方法都有其独特的优点和适用范围，可以根据具体情况选择合适的方法进行检测。
正确使用这些方法可以保证药物的质量和安全性，从而确保患者获得有效的治疗效果。
高职药物分析药物的杂质检查
高职药物分析药物的杂质检查1. 引言药物的质量控制对于保证患者用药的安全和有效性至关重要。
药物中的杂质可能影响药物的稳定性、药效以及患者的安全。
因此，在药物分析过程中，对药物中的杂质进行检查是必不可少的。
本文将介绍高职药物分析中药物的杂质检查的方法和步骤。
2. 药物的杂质检查方法药物的杂质检查方法主要包括物理检查、化学检测和生物检测三种方式。
以下将分别介绍这三种方法的原理和应用。
2.1 物理检查物理检查方法主要通过观察和测量药物的外观、颜色、气味、溶解性等特征来进行杂质的初步筛查。
物理检查方法简单易行，不需要复杂的仪器设备，但是只能检测一些可见的或能够直接影响药品质量的杂质。
物理检查方法常用于粉末状药物的外观检查，如颜色是否均匀、是否有斑点或混浊等。
对于固体药物，物理检查方法还可以通过测量其溶解度来初步判断药物的纯度。
2.2 化学检测化学检测方法通过使用化学试剂对药物进行反应，从而判断杂质的种类和含量。
常用的化学检测方法包括酸碱滴定、溶液析出、显色反应等。
酸碱滴定方法适用于可溶于酸碱溶液中的物质检测，可以通过滴定定量方法来测定药物中的酸碱度。
溶液析出方法则通过溶剂的挥发，回收杂质并进行质量分析。
显色反应方法常用于检测有机物杂质，通过与特定试剂发生化学反应后产生明显的颜色变化来识别杂质。
2.3 生物检测生物检测方法是用生物体或其组织对药物中的杂质作出反应，以判断杂质的种类和活性。
常用的生物检测方法包括细胞毒性试验（如细胞存活率检测）、动物实验（如小鼠生物活性检测）等。
细胞毒性试验一般通过将药物溶液与细胞培养基混合，观察细胞存活率变化来判断药物中的杂质对细胞的毒性。
动物实验则通过给小鼠注射药物溶液，观察小鼠的生物反应，如躁动、镇静、死亡等，来评估药物杂质的活性和毒性。
3. 药物的杂质检查步骤药物的杂质检查通常包括以下几个步骤：3.1 样品制备样品制备是药物杂质检查的第一步，它关系到后续检测的准确性和可靠性。
生物制药技术中的质量控制指标与检测方法详解
生物制药技术中的质量控制指标与检测方法详解生物制药技术是一门应用生物技术方法制造药物的科学，生物制药产品的质量控制对于确保其安全性、有效性和一致性至关重要。
在生物制药技术中，质量控制指标和检测方法的选择与应用是保证产品质量的关键步骤。
本文将详细介绍生物制药技术中常见的质量控制指标和检测方法，以帮助读者更好地理解该领域的质量管理。
一、质量控制指标1. 纯度：纯度是衡量生物制药产品内所含有关物质的杂质程度的指标。
常见的杂质包括有机杂质、无机杂质、微生物污染物等。
纯度的高低直接影响产品的安全性和有效性。
生物制药产品的纯度通常通过高效液相色谱、质谱、核磁共振等分析方法来检测。
2. 安全性：安全性是评估生物制药产品对人体的毒理学影响的指标。
常见的安全性评估包括细胞毒性、基因毒性、致癌性等。
对于生物制药产品的毒性评估，通常采用体外细胞实验、动物试验和临床试验等方法进行。
3. 含量：含量是衡量生物制药产品中所含活性成分的浓度的指标。
含量的恒定性是产品的一致性和效力的保证。
常用的含量测定方法有光谱法、质谱法、比色法等。
4. 力价比：力价比是衡量生物制药产品的效果和成本之间的关系的指标。
力价比的高低将影响药物的市场竞争力和经济可行性。
力价比的评估需要考虑产品的疗效、安全性、价格等因素。
二、检测方法1. 高效液相色谱(HPLC)：HPLC是一种常用的分离和纯化技术，可用于生物制药产品的纯度和含量分析。
通过将样品溶液经由一层具有特定亲和性的固相材料上流动，不同成分会在运行过程中以不同的速率分离出来，再通过检测器进行定性定量分析。
2. 质谱(MS)：质谱是一种利用质谱仪对样品进行分析和识别的技术。
在生物制药产品分析中，质谱常用于检测杂质成分和确认产品的结构及组成。
质谱技术能够提供非常准确的分析结果，并且对微量成分具有高灵敏度。
3. 核磁共振(NMR)：核磁共振是一种利用核自旋在外加磁场作用下吸收和发射电磁波的原理进行分析的技术。
第五章药物的杂质检查
第五章药物的杂质检查第一节药物中的杂质及其来源一、药物中的杂质概念：是指药品中含有的对人体健康造成危害或无治疗作用的成分。
二、药物杂质的来源1、生产中引入杂质途径有：1）原料不纯引入杂质；2）生产中的中间体或副反应产物；3）精制时未除去的剩余原料；4）制造过程中加入的其他化学试剂。
例如：1）用水杨酸合成阿司匹林时，会由于乙酰化反应的不完全而引入水杨酸、乙酰水杨酸酐等杂质。
2）用阿片生产吗啡时有可能引入罂粟碱等生物碱；3）生产中接触到的器皿、工具等金属设备会引入重金属及砷盐；4）以工业氯化钠生产药用氯化钠时，会将钾、溴、碘、镁等元素的化合物作为杂质带入产品中。
2、贮藏中引入杂质因外界条件的变化，如温度、湿度、阳光、空气和微生物等，将使药物易发生诸如水解、氧化、分解、聚合、潮解、发霉及晶型转变等化学及物理上的变化，从而产生杂质。
三、杂质的分类1、按来源和分布：分为一般杂质和特殊杂质一般杂质是指在自然界中分布广泛，在多数药物生产贮藏过程中极易引入。
如：酸碱性杂质、水分、氯化物、硫酸盐、砷盐、重金属等。
特殊杂质是指某些个别药物，在选定的生产工艺中引入的杂质。
如：阿司匹林中的水杨酸。
2、指示性杂质：对人体健康不造成危害，但在存在数量能反映出其他杂质的含量和药品的总体纯度等情况；有毒有害杂质：重金属、砷盐、氰化物、氟化物等严重危害人体健康的杂质。
四、药物的纯度与化学试剂的纯度1、药物的纯度是为了保证用药的安全性和有效性而提出的，要求检测药物本身及所含成分是否对生物体造成生理及毒副作用，它的检测标准只有合格与不合格之分。
2、化学试剂的纯度则是按本质含量的高低分为不同等级，如优级纯、分析纯、化学纯等。
第二节药物的杂质检查法一、杂质的限量1、把杂质的量控制在一定的限度以内，就仍然能够保证用药的安全与有效，因此在不影响疗效和不发生毒性的前提下，对于药物中可能存在的杂质，允许有一定的量。
2、药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。
说明药物进行杂质检查的意义
说明药物进行杂质检查的意义
药物进行杂质检查的意义在于确保药物的质量和安全性。
药物作为人们治疗疾病的重要工具，其质量直接关系到患者的治疗效果和健康风险。
对药物进行杂质检查可以判断药物中是否存在不应该存在的杂质，例如有害物质、不纯净的成分、重金属、微生物等。
药物中存在的杂质可能会对人体产生不良影响，例如引起过敏反应、毒性反应、药物相互作用等。
杂质的存在也会降低药物的纯度和效果，影响药物的治疗效果。
因此，对药物进行杂质检查可以确保药物的质量和纯度，提高药物的疗效，减少患者的健康风险。
此外，对药物进行杂质检查还可以维护药品市场的秩序和公平竞争。
通过检查可以发现和排除潜在的不合格产品，保证市场上的药品质量一致性和竞争公平性。
因此，药物进行杂质检查的意义在于保障药物的质量和安全性，提高药物的疗效，减少患者的健康风险，以及维护药品市场的秩序和公平竞争。
第四章药物的杂质检查
第四章药物的杂质检查药物的杂质是指药物中存在的无治疗作用、或影响药物的稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质。
这些物质的存在不仅影响药物的质量，有的还反映出生产中存在的问题。
对药物所含杂质进行检查既可保证用药的安全、有效，同时也为生产、流通过程的质量保证和企业管理的考核提供依据。
第一节概述一、药物的纯度要求药物的纯度即药物的纯净程度，是反映药品质量的一项重要指标。
药物的来源多种多样，性质也各不相同，在药物的生产和贮藏过程中，总不可避免地会引入杂质。
如药物的生产中常常要使用盐酸、硫酸等，若洗涤不够，在成品中就会引入氯化物、硫酸盐等无机杂质。
又如解热镇痛药阿司匹林是由水杨酸乙酰化制得的，当乙酰化不完全或贮藏过程中水解时都会产生杂质水杨酸。
水杨酸不仅对胃有刺激性，而且其分子中的酚羟基在空气中会逐渐被氧化而产生有色的醌型物质，使药品变色。
人类对药物质纯度的认识是在防治疾病的实践中积累起来，并随着分离、检测技术的提高而进一步发现药物中存在的新杂质，从而不断提高对药物纯度的要求。
盐酸哌替啶（度冷丁，I）就是一个典型的例子。
早在1948 年，盐酸哌替啶已被收入英国药典并广泛使用，直至1970 年经气相色谱分离鉴定，才发现其中还混有两种无效的异构体（Ⅱ）和（Ⅲ）。
这两种杂质是生产中因工艺条件控制不当而产生的，它们的含量有时甚至高达2030。
目前中国药典、英国药典、美国药典均对这些杂质的量加以控制。
又如对阿司匹林的纯度研究发现：阿司匹林中除含有水杨酸外，还存在着乙酰水杨酸酐、乙酰水杨酰水杨酸等水杨酸衍生物。
这些杂质具有免疫活性，可导致服用过敏反应。
因此，应加以控制。
总之，对于药物纯度的要求不是一成不变的，而应随着临床应用的实践和分析测试技术的发展，不断改进，使之更趋完善。
药物的纯度主要由药品质量标准中的“检查”项下的杂质检查来控制，内容包括可能存在的杂质名称、相应的检查项目、检查方法和允许限量。
对药品的检查应完全按照药品质量标准的要求进行，不合格的产品不得出厂、不得销售、不得使用。
中国药典下列药物中特殊杂质的检查方法
中国药典下列药物中特殊杂质的检查方法中国药典下列药物中特殊杂质的检查方法1. 引言中国药典是我国医药行业的标准性参考文献，对药物的质量要求和检测方法进行了明确的规定。
特殊杂质指的是在药物中可能存在的不属于药物本质成分的其他物质，如有害的微生物、重金属、农药残留等。
本文通过对中国药典下列药物中特殊杂质的检查方法进行全面评估，旨在探讨相关概念和方法，为读者深入理解和学习提供参考。
2. 概述（主题文字：中国药典下列药物中特殊杂质的检查方法）在中国药典中，关于特殊杂质的检查方法主要通过采用化学分析、物理检测、生物学试验等手段来评估药物质量。
其中，常见的特殊杂质包括微生物、重金属、农药残留等。
下面将分别对这些特殊杂质的检查方法进行讨论。
3. 微生物检查方法（主题文字：微生物）微生物主要包括细菌、真菌和病毒等。
中国药典对微生物的检查方法要求严格，以确保药物的安全性和有效性。
常用的微生物检查方法包括菌落总数、大肠杆菌、霉菌和病毒等的检测。
这些检测方法能够快速、准确地判断药物中是否存在微生物污染，并提供相应的处理方法。
4. 重金属检查方法（主题文字：重金属）重金属是指密度大于5g/cm3的金属元素。
它们常常以盐的形式存在于药物中，可能会对人体健康造成潜在的威胁。
中国药典通过对重金属的检查方法进行规定，确保药物中重金属的含量符合安全范围。
常用的重金属检查方法包括原子吸收光谱法、火焰原子吸收光谱法等，这些方法能够精确地测定不同药物中的重金属含量。
5. 农药残留检查方法（主题文字：农药残留）农药残留是指在药物中可能残留的农药及其代谢物。
中国药典通过对农药残留的检查方法进行规定，确保药物在使用过程中不会对人体健康产生潜在的危害。
常用的农药残留检查方法包括气相色谱-质谱联用法（GC-MS）、高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS）等，这些方法能够准确地测定药物中的农药残留量。
6. 总结与回顾本文对中国药典下列药物中特殊杂质的检查方法进行了全面评估。
8.第八章 药物的杂质检查
（三） 按杂质是否有害分类：普通杂质和有害杂质 1.普通杂质：氯化物、硫酸盐等 一般无害，含量多少可以反映出纯度的水平。 2.有害杂质：重金属、砷盐、氰化物等 对人体有毒害，在质量标准中要严格控制，以保 证用药安全。
杂质的限量检查： 1）药物的纯度：指药物的纯净程度。反应药物质量 的优劣。 杂质是影响药物纯度的主要因素。 因此，杂质检查是控制药物纯度的一个重要方 面，杂质检查也称纯度检查。
7、炽灼残渣
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是检查有机药物中混入的各种无机杂质（如金属的氧化物或盐）。 有机药物或挥发性的无机药物经 H2SO4处理，于高温 700～800℃ 炽灼至恒重，根据遗留残渣的量和供试品的量，计算炽灼残渣的 百分率。
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当炽灼残渣用于重金属检查时，温度应控制在 500～600℃。
8.易炭化物检查法
2）Ag-DDC法： 首先看一下 Ag-DDC 代表什么：（ Silver dithyl dithioCarbamate Ag-DDC）
原理：第一步同古蔡氏法生成AsH3↑ 第二步将生成的AsH3经导管导入盛有Ag-DDC吡啶溶 液中，与之作用使Ag-DDC中银还原为红色胶态银溶液， 同法处理标准砷溶液后比较（目视或于510nm处测定吸 收度)
3）方法 (1)在弱酸性下（pH3.5醋酸盐缓冲液），以硫代乙酰胺为显色剂 (2)在碱性下（若药物在酸性下不溶解），以Na2S为显色剂。 4）讨论 （1）硫代乙酰胺试剂：Ch.P90版以前用H2S显色剂，缺点是有恶臭和 毒性，污染环境，且不稳定（空气中易析出），浓度不易控制 （H2S↑）。用硫代乙酰胺替代H2S,该试剂在弱酸性下转换为H2S。 所以与H2S显色剂具有相同作用和效果，无恶臭、浓度易控制
第八章 药物的杂质检查
沈阳药科大学药学院 赵春杰
生物制药技术中的杂质分析与清除方法介绍
生物制药技术中的杂质分析与清除方法介绍生物制药技术是利用生物体（如细胞、细胞器、酶等）来合成制药产品的一种方法。
在制药过程中，杂质是不可避免的存在，它们可能会影响药物的质量和疗效。
因此，对于生物制药技术中的杂质的分析与清除方法的研究显得尤为重要。
杂质分析是生物制药过程中的关键步骤之一。
它可以帮助我们了解制药产品中的杂质的种类、含量、来源以及可能的影响。
常见的杂质包括微生物、细胞碎片、代谢产物、残留的培养基成分、溶剂、蛋白质异质体等。
为了确保产品的高质量和安全性，杂质分析需要进行全面、灵敏的检测和定量。
对于杂质的分析方法，我们可以使用多种技术手段。
其中，常用的有物理方法、生化方法和分析化学方法。
物理方法是通过对制药产品进行物理性质分析来检测和定量杂质。
例如，通过粒度分析仪可以检测微生物、细胞碎片和颗粒等杂质的大小和分布；通过显微镜观察可以分析细胞内异物和杂质的形态；通过电子显微镜或扫描电镜可以进一步观察杂质的微观结构。
生化方法是通过生物化学技术来鉴定和分析杂质。
常用的生化方法包括多肽质谱分析、核磁共振（NMR）分析、蛋白质电泳分析等。
这些方法可以帮助我们识别不同种类的蛋白质异质体、通过分析其氨基酸序列得到详细的信息。
同时，生化方法也适用于检测代谢产物和其他低分子量杂质。
分析化学方法是通过化学分析技术来检测和定量杂质。
常用的分析化学方法有气相色谱法（GC）、液相色谱法（HPLC）、质谱法（MS）等。
这些方法可以准确测定不同种类的杂质的含量，并且常常具有高灵敏度和高选择性。
此外，分析化学方法还可以通过标准曲线建立和验证分析方法的准确性和可靠性。
一旦杂质被鉴定和分析出来，清除方法就成为下一步的关注重点。
清除杂质的方法通常包括物理方法、化学方法和生物方法。
物理方法是利用物理原理和技术手段来去除杂质。
常见的物理方法包括超滤、离心、超声波、过滤等。
例如，超滤可以去除颗粒和大分子杂质；离心可以沉淀细胞碎片和微生物；超声波可以加速颗粒和气泡的聚集。
药物分析 药物的杂质限量及检查方法
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（一）
化 学 方 法
1 杂质与一定试剂反应产生沉淀
盐酸肼屈嗪中游离肼的检查.
2 杂质与一定试剂反应产生颜色
氯硝柳胺中2-氯-4-硝基苯胺和5-氯水杨酸的 检查
3 杂质与一定试剂反应产生气体
盐酸乙基吗啡中胺盐检查.
4 滴定法
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（二）
比较法：取供试品一定量依法检查，测定特定的杂质 参数，与规定的限量相比，不得更大。
三、杂质的限量(Limit Test)
杂质限量计算法如下：
杂质限量(%) 杂质最大允许量 100％ 供试品量
标准溶液的浓度 标准溶液的体积 100％ 供试品量
CV
L(%)
100%
S
注意单位统一！
四、杂质的常用检查法
按毒性分类 毒性杂质和信号杂质
按理化性质 有机杂质、无机杂质、残留
分类
溶剂
三、杂质的限量(Limit Test)
药物中所含杂质的最大允许量。
通常用百分之几或百万分之几 (parts per million, ppm )
杂质 限量 控制
限量检查
对照法 灵敏度法 比较法
定量测定杂质含量
注意平行原则
三、杂质的限量(Limit Test)
（二）
色 谱 方 法
3.气相色谱法(GC) ——用于药物中挥发性杂质的检查,
如药物中残留溶剂、农药残留量等.
检查方法:同高效液相色谱法. 标准溶液加入法
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（二）
色 谱 方 法
4.毛细管电泳法 —
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（三）
光 谱 方 法
1. 可见-紫外分光光度法 2. 红外分光光度法 3. 原子吸收分光光度法
3章药物的杂质检查
b ＜(a-b)，符合规定；b ＞(a-b)，不合格。
维生素C中铁、铜离子的检查 碳酸锂中钾盐的检查
（四）其他方法
1、热分析法
在程序控制温度下，测量物质的物理 化学性质与温度关系的一类技术。
中国药典规定检查砷盐时，应取标准 砷溶液2.0ml（每1ml相当于1μg的 As）制备的标准砷斑，今依法检查溴 化钠中的砷盐，规定含砷量不得超过 0.0004%，问应取供试品多少克？
取溴化钠0.5g，检查砷盐，与标准砷 溶液2.0ml制备的标准砷斑比较，不得 超过规定限量（0.0004%）。标准砷 溶液的浓度是多少（μg/ml）？
Ba2+ + SO42-
BaSO4
2、方法：
50ml纳氏比色管 —规定量的供试品+水→40ml+稀盐酸2ml —规定量的标准硫酸钾溶液+水→40ml+稀盐酸
2ml 分别加入25%氯化钡溶液5ml+水→50ml 放置10分钟 黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较。
3、注意事项：
（1）供试品带颜色：内消色法。
葡萄糖中重金属检查：取葡萄糖 4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐 缓冲液（PH3.5）2ml，依法检查 重金属（中国药典），含重金属不 得超过百万分之五，问应取标准铅 溶液多少毫升（每1ml相当于10μg 的Pb）？
磷酸可待因中吗啡检查：取本品0.10g， 加盐酸溶液（9→100）使溶解成5ml， 加亚硝酸钠试液2ml，放置15min， 加氨试液3ml，所显颜色与吗啡溶液 [取无水吗啡2.0mg，加盐酸溶液 （9→100）使溶解成100ml]5.0ml用 同一方法制成对照液比较，不得更深， 问限量为多少？
药物杂质的检查方法
药物杂质的检查方法药物质量的检查与评价对于保障人们的用药安全和治疗效果具有重要意义。
药物杂质是指在药品中存在的不应出现的其他化学成分，它们可能是制剂过程中产生的副产物，也可能是由于原材料污染或不良存储条件引起的。
药物杂质的检查方法多种多样，本文将从化学方法、物理方法和生物方法三个方面进行探讨。
化学方法是常用的杂质检查方法之一。
它主要通过分析药物中的化学成分，比较其与标准物质的相似性和纯度来判断杂质的存在和含量。
例如，可以通过高效液相色谱技术（HPLC）对药物中的杂质进行分离和分析，确定其结构和含量。
此外，还可以利用质谱、核磁共振和红外光谱等分析技术，快速、准确地鉴定和定量药物中的杂质。
化学方法的优点是操作简单、灵敏度高，但也存在不能很好地分析未知杂质和一些杂质难以溶解的问题。
物理方法是另一种常见的杂质检查方法。
它主要通过测量药物的物理性质来鉴定和定量杂质。
例如，可以通过溶解度、熔点、比旋光度、密度等物理参数的测定，来判断药物中是否存在杂质。
此外，还可以使用显微镜和纤维光学仪等仪器对药物的形态、颜色、质地进行观察和分析。
物理方法的优点是操作简单、速度快，但只能对某些特定的药物杂质进行检查。
生物方法是一类较为特殊的杂质检查方法，它主要利用生物体对药物杂质的特异性反应来进行检测。
常见的生物方法包括生物感应法、酶标记法和细胞毒性法等。
例如，可以通过生物感应法检测大肠杆菌的存在，以此评估药物中的细菌污染程度；酶标记法可以利用酶的高度特异性反应来检测药物中的特定成分；细胞毒性法则可以通过对细胞的生长和存活情况进行观察，判断药物中是否存在有毒成分。
生物方法的优点是对某些特定杂质敏感性高，但也存在操作繁琐、时间较长的缺点。
此外，还需要对生物试剂和实验操作环境进行严格的控制，以保证试验结果的准确性和可靠性。
综上所述，药物杂质的检查方法包括化学方法、物理方法和生物方法三个方面。
化学方法通过分析药物的化学成分，鉴定和定量杂质；物理方法通过测量药物的物理性质来检测杂质；生物方法则利用生物体对药物杂质的特异反应进行检测。
生物药物检测技术
生物药物检测技术生物药物检测技术是指利用生物体（整体组织，离体组织微生物和细胞等）来测定药物的生物活性的一种方法。
它以药物的药理为基础，以生物统计为工具，运用特定的实验设计，在一定条件下比较供试品和相当的标准品或对照品所产生的特定反应，通过等反应剂量间比例的运算，从而测得供试品的效价。
本文主要介绍生物监测一些常用的方法。
一般杂质检查一、氯化物检查法氯化物检查法是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量标难氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，以判断供试品中的氯化物是否超过了限量。
除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25m1(溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。
另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50m1纳氏比色管中，加稀硝酸10m l，加水使成40m l，摇匀，即得对照溶液。
于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0ml，用水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置5m in，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得。
以上检查方法中使用的标难氯化钠溶液每l ml相当于10μg的Cl。
在测定条件下，氯化物浓度以50ml中含50~80μg的Cl为宜，相当于标准氯化钠溶液5~8ml。
在此范围内氯化物所显浑浊梯度明显，便于比较。
二、硫酸盐检查法微量的硫酸盐杂质，也是一种信号杂质。
药物中微量的硫酸盐在稀盐酸酸性条件下与氯化钡反应，生成硫酸钡微粒显白色浑浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下产生的硫酸钡浑浊程度比较，判定供试品硫酸盐是否符合限量规定。
检查方法：取供试品，加水溶解成约40ml，置50ml纳氏比色管咖稀盐酸2ml，摇匀即得供试溶液；另取标准硫酸钾溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2ml，摇匀即得对照溶液；于供试溶液与对照溶液中分别加入25%氯化钡溶液5ml，用水稀释成50ml，摇匀，放置10分钟，比浊。
药物的杂质检查
有机杂质(又称有关物质)包括： Starting materials • By-products • Intermediates • Degradation products • Reagents, ligands and catalysts 无机杂质：
方法学研究中杂质分离度和检测限的图谱、 代表性批次的图谱、采用其它杂质检测方法 所得的图谱、加速及长期稳定性试验的图谱 等，可以辅助说明产品中杂质的概况。如有 必要，申报单位还应提供所有批次产品的杂 质概况（如色谱图等）
名词解释
报告限度（Reporting Threshold）：超出此 限度的杂质均应在检测报告中报告，并应报 告具体的检测数据。
间的正常波动,还要考虑药品本身的稳定性。
药物的纯度和化学试剂的纯度的 区别
药物的纯度：主要从用药安全、有效及药物 稳定性的角度考虑。
合格与不合格
化学试剂的纯度：对使用所产生的影响、使 用范围及使用目的。
化学试剂分级：基准试剂、优级纯、分析纯、化学纯
杂质的来源
药物中的杂质主要有两个来源，生产过程中 引入和贮存过程中产生。
为验证杂质分析方法的专属性，对于原料药， 可根据其合成工艺，采用各步反应的中间体 （尤其是后几步反应的中间体）、立体异构体、 粗品、重结晶母液等作为测试品进行系统适用 性研究，考察产品中各杂质峰及主成分峰相互 间的分离度是否符合要求，从而验证方法对工 艺杂质的分离能力。
为了考察方法能否有效检测出原料药或制剂中的降解 产物，还可根据药物的化学结构特点、制剂的处方与 工艺、储存条件等选用合适的酸、碱、光、热、氧化 反应等加速破坏性试验来验证分析方法的专属性，必 要时可采用二极管阵列检测器、质谱检测器等检测峰 的纯度。
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? 药物的纯度（药用规格或药用纯度）主 要是从保证人民用药安全、有效考虑， 而化工产品及试剂纯度并不考虑杂质的 生理作用，仅从杂质可能引起的化学变 化，在使用上所产生的影响以及它们使 用的范围和目的来加以规定。所以，二 者不能相互代替使用。
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3、药物中杂质的主要来源
? 由生产中引入。如原料、中间体、副产物、 残留溶剂、器皿中金属等
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1） 纳氏比色管应置于黑色背景下，自上而下观察。 2） 加入稀硝酸可加速生成 AgCl，浊度较好，另
外还可避免碳酸银，氧化银，磷酸银沉淀的干扰， 以每50ml中含稀硝酸 10ml为宜。 3） 温度以30-40?C浊度最大，室温亦可。 4） 比色前应在暗处放置 5min，光照将使 AgCl分 解，影响比色。 5） 氯化钠标准溶液用量 5.0-8.0ml/50ml （10μg/ml）时浊度区别最为明显
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4）不溶性的硫化物应作处理（加酸、碱或形成配 合物），使其可溶后检查。 5）配制供试品溶液时，如使用盐酸超过 1.0ml， 氨试液超过 2ml，或加入其它试剂进行处理者， 除另有规定外，对照液中应取同样同量的试剂置 瓷皿中蒸干，同上进行检查。
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第二法：炽灼破坏法 将供试品炽灼破坏后检查或取炽灼的残渣进行检 查的方法，适用于在水、乙醇中难溶的药物，或 能与重金属离子形成配合物的有机药物。
? 原理：同第一法
? 方法与限量：同第一法
? 注意点： 1）炽灼温度应控制在 500-600 ?C，否则重金属 将损失。 2）炽灼的残渣用硝酸加热处理时，要蒸干氧化 氮，否则亚硝酸会氧化硫化氢析出硫而影响比色。 3）蒸干后加盐酸使之成为氯化物，盐酸中带入 重金属的机会较多，应作空白检查。
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第三法：硫化钠法 适用于难溶于稀酸，但能溶于稀碱的药物，如 磺胺类、巴比妥类药物。
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1） 标准铁溶液（用稀硫酸配硫酸铁铵 FeNH4(SO4)2·12H2O，防止水解）浓度以 50ml中含10-50? g为宜，吸收度与浓度呈良好 的线性关系，呈色梯度明显。 2） 酸度以50ml中含稀盐酸 4ml为宜，所生成 红色最深。另外稀盐酸可防止铁水解和避免弱 酸盐的干扰。 3） 过硫酸铵可使供试液中的 Fe2+ → Fe3+；防 止遇光光线敏使 感，? F易e 还(S原CN或)分6?3解-褪）色。（另?外Fe过(量SC的N过) 6硫?3酸铵还可增加配离子的稳定性，提高反应灵敏 度和消除氯化物与铁盐形成配合物的干扰 。
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5、砷盐的检查
（一）、古蔡法（ Gutzeit ） ? 原理
金属锌与酸作用生成新生态的氢，与药物中微 量的砷反应生成具有挥发性的砷化氢，遇溴化汞 试纸，产生黄色至棕色的砷斑。
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? 方法与限量： 1)标准砷斑用 2ml ，1μg/ml标准砷液相当于 2μg的砷，制备可得清晰的砷斑。 2)反应液中加入碘化钾和氯化亚锡能将 As5+ →As3+ ,碘化钾被As5+氧化为碘分子又被氯化 亚锡还原为碘离子，它与锌离子能形成稳定的 络合物，有利于砷化氢的不断生成。另外，碘 化钾和氯化亚锡还能抑制锑化氢的生成（锑化 氢也能与溴化汞试纸作用生成锑斑）。氯化亚 锡又可与锌作用，在锌粒表面形成锌锡齐，起 去极化作用，从而使氢气连续、均匀地发生。
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? 注意点： 1）供试品如有色，可采取外消色法（焦糖） , 使两管颜色相似或内消色法。 2）若溶液中有微量的高铁盐存在，在弱酸性 溶液中将氧化硫化氢析出硫，影响比色，可加 入维生素 C或盐酸羟胺，使 Fe3+→Fe2+，Fe2+ 不干扰测定。 3）若供试品为铁盐，可使其与盐酸络合为 HFeCl 62-,用乙醚除去再碱化后用氰化钾掩蔽微 量的铁盐，加硫化钠检查铅盐（酸性条件会破 坏络合物）。
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3、铁盐的检查（影响药物稳定性）
（一） 硫氰酸盐法（ chp 、usp 采用） ? 原理：
Fe3+ + 6SCN- → ? Fe (SCN ) 6?3- （稀盐酸环境 下）与标准铁溶液比较所呈颜色（红色） ? 方法与限量： 样品配成水溶液约 25ml +稀盐酸4ml+过硫酸 铵50mg, +水至35ml +30% 硫氰酸铵溶液 3ml+水至50ml,摇匀,与标准铁溶液（ 10? g/ml, 1.0-5.0ml/50ml ）对照管比较。
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2、硫酸盐的检查
? 原理： SO4 2-+ Ba2+ → BaSO 4↓ 白色（稀盐酸环境下） 与标准硫酸钾溶液比较浊度
? 方法与限量： 样品配成水溶液约 40ml (溶液如为碱性，可加盐 酸使成中性 )+稀盐酸2ml+25% 氯化钡溶液5ml, +水至50ml摇匀,与硫酸钾标准溶液（ 0.1mg/ml, 1.0-5.0ml/50ml ）对照管比较。
? 特殊杂质是指在药物的生产和贮藏过程中， 根据该药物的性质、生产方法和工艺条件， 有可能引入的杂质。如阿司匹林中的游离水 杨酸，盐酸普鲁卡因注射剂中对氨基苯甲酸， 肾上腺素中的肾上腺酮等。
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2)按其性质分类：信号杂质/有害杂质。 ? 信号杂质本身一般无害，但其限量的多
少可以反映出药物的纯度水平，如限量 过大，表明药物的纯度差，因此也称为 指示性杂质。氯化物、硫酸盐等就属于 信号杂质。
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3、注意点： 1）某些药物（葡萄糖、糊精、硫酸镁）在检 查过程中需加硝酸处理，则不加过硫酸铵，但 需煮沸除氧化氮（ NO、NO2），因硝酸中含 有亚硝酸，能与硫氰根离子作用，生成红色亚 硝酰硫氰化物，影响比色。 2）色调不一致时，可加正丁醇或异戊醇提取， 取醇层比色，（ ? Fe (SCN ) 6?3-在有机溶液中 溶解度大，易于浓缩）。
7、溶液颜色检查法 8、易炭化物检查法
9、澄清度检查法
10、炽灼残渣检查法
11、干燥失重测定法
12、有机溶剂残留量测定法
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1、氯化物的检查
? 原理： Cl- +Ag+ → AgCl↓（稀硝酸环境下）与氯化钠 标准溶液比较浊度
? 方法与限量： 1）样品配成水溶液约 25ml (溶液如为碱性， 可加硝酸使成中性 )+稀硝酸10ml+硝酸银试液 1.0ml+ 水至 50ml 摇匀 , 2）与氯化钠标准溶液（10μg/ml,5.0 8.0μg/50ml）对照管比较。
? 原理：S 2- + Pb 2+→ Pb S↓（在碱性条件下） 与标准铅溶液比较所呈颜色（黄色到棕黑色）
? 方法与限量： 取供试品+氢氧化钠试液 5ml和水20ml使溶解 +硫化钠试液 5滴，与标准铅溶液比较所呈颜色。
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第四法：微孔滤膜法 适用于含 2-5μg重金属杂质的检查（纳氏比色 管难以观察的）。
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? 注意点： 1）溶液不澄清应过滤后取续滤液检查，但纸中 含有氯离子，用含硝酸的蒸馏水洗滤纸，再过滤。
2）溶液有色：①使其褪色，但不影响氯离子的 测定（如检查高锰酸钾中的氯离子可先用乙醇褪 色）；②将供试液分成两份，一份加入硝酸银反 复沉淀，再在其中加入氯化钠标准溶液，配成对 照液；另一份作为供试液。
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? 方法与限量： 样品+ pH3.5醋酸盐缓冲液 2ml+水适量使成 25ml + 硫代乙酰胺试液 2ml（溶液总量为 27ml）,放置2min，与标准铅盐按同法制成的对 照液比较。
1）纳氏比色管应置于白纸背景下，自上而下观察。 2）标准铅溶液配法（10μg/ml硝酸铅，取 12ml, 浓度以 27ml 溶液中含 10 —20μg的铅）为防 止铅盐水解，配制时，加入 5ml硝酸，应在临用 前配制，使用不超过一周。 3）酸度以 pH3.5 为宜，此时PbS↓完全，酸度增 大，呈色变浅，酸度太大则不显色。若供试品呈 强酸性，则需碱化至中性，然后加入醋酸盐缓冲 液。
第七章 生物药物的杂质 与安全性检查
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一、概述
1、杂质的概念： 药物中的杂质是指存在于药物中无治疗作用 或者影响药物的疗效和稳定性，甚至对人 体健康有害的一种物质。
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2、药物的纯度 ? 是指药物的纯净程度 ? 它反映了药物质量的优劣。 ? 事实上，许多杂质不可能完全除掉。只要将
其降低到最低限度，不妨碍药物的疗效和人 体的健康，不影响药物的稳定性以及调配处 理，可允许药物中有一定限量的杂质存在。 ? 纯净的药物是相对的，不纯的药物是绝对的。
? 原理：同第一法
? 方法与限量： 标准铅溶液制备：精密量取标准铅溶液一定量， 用水或规定溶剂稀释成 10ml + pH3.5 醋酸盐 缓冲液2ml与硫代乙酰胺试液 1.0ml,放置 10min，用50ml注射器转移至滤器中滤过（滤 速为 1ml/min ），滤毕，取下滤膜，在滤纸上 干燥即得标准铅斑。另取供试液 10ml,同上操 作，与标准铅盐对照液比较。
3）重金属干扰的排除：某些重金属将极大地干 扰测定（如汞、银、铜离子，形成络合物或沉 淀）。
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4）阴离子干扰的排除：氯离子、磷酸根离子、 硫酸根等离子，与 Fe3+ 形成无色配离子干扰检 查，可适当增加酸度和增加硫氰酸铵试液的量， 用正丁醇或异戊醇提取后比色。氯离子有影响， 加入过量的硫氰酸铵可使氯离子干扰排除；硫酸 根离子干扰较大，故不能在硫酸酸性条件下。 5）环状结构或不溶于水的药物需炽灼后检查。
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2、杂质限量检查方法
? 对照法（最常用的方法） ? 灵敏度法 ? 比较法
? 3、杂质限量的表示方法
? 杂质限量就是指药物中所含杂质的最大允许量， 是通过与一定量的杂质标准溶液进行比较来确 定，杂质的最大允许量也就是杂质标准溶液的 浓度（C）与体积（ V）的乘积。杂质的限量通 常用百分之几或百万分之几（ ppm）来表示。
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4、重金属的检查（影响药物稳定性， 有毒，以铅盐为代表检查）