糖原磷酸化酶 b(Glycogen phosphorylase b,GPb)试剂盒说明书
生物学专业英语词汇(字母G)
gadfly 牛虻gag reflex 咽反射galactolipid 半乳糖脂galactophorous duct 输乳管galactosamine 氨基半乳糖galactose 半乳糖galactosemia 半乳糖血症galactosidase 半乳糖苷酶galactosyltransferase 半乳糖基转移酶galacturonic acid 半乳糖醛酸galbulus 柏黍果galea 外叶gall 虫瘿gall bladder 胆囊gallic acid 五倍子酸gallinaceous birds 鹑鸡类gallstone 胆石galn 氨基半乳糖galvanic test 直羚刺激试验galvanometer 电疗galvanonarcosis 电性麻醉galvanotaxis 晴性galvanotherapy 羚疗法galvanotropism 向电性gametangial copulation 配囊融合gametangiogamy 配囊融合gametangium 配子囊gamete 配子gametic copulation 配子结合gametic lethal factor 配子致死因子gametic lethality 配子致死性gametic nucleus 配子核gametic reduction 配子减数gametic selection 配子淘汰gametic sterility 配子不育gametocyst 配子母细胞囊gametocyte 配子母细胞gametogamy 配子结合gametogenesis 配子发生gametogeny 配子发生gametogony 配子生殖gametophore 配子托gametophyte 配子体gametophytic generation 配子体世代gametophytic incompatibility 配子体不亲和性gamma globulin 球蛋白gamma rays 射线gamobium 有性世代gamocyst 配子囊gamogenesis 两性生殖gamone 配激素gamont 配子母细胞gamopetaly 合瓣gamophase 配子期gamotropism 向配子性gangliocyte 神经节细胞ganglion 脑神经节ganglion cell 神经节细胞ganglioside 神经节苷脂gangrene 坏疽ganoid scale 硬鳞gap 裂gaping 张口状gaping reaction 张口反应garbage worm 旋毛虫garden 庭garlic 大蒜gas 气体gas chamber 气室gas change 气体交换gas chromatography 气相色谱gas gland 泌气腺gas vacuole 气孢gas vesicle 气孢gaseous interchange 气体交换gasometry 气体测量法gasteromycetes 腹菌类gastral 胃的gastral cavity 胃腔gastral filament 胃丝gastral layer 胃层gastral mesoderm 原肠中胚层gastric 胃的gastric caecum 胃盲囊gastric gland 胃腺gastric juice 胃液gastric mill 胃磨gastric respiration 肠呼吸gastrin 胃泌素gastritis 胃炎gastrocoele 原肠腔gastrocolic omentum 大网膜gastrocolic reflex 胃结肠反射gastroenteritis 胃肠炎gastrointestinal hormone 胃肠激素gastrolith 胃石gastropods 腹足类gastrovascular system 腔肠系gastrozooid 营养个体gastrula 原肠胚gastrulation 原肠胚形成gaussian distribution 正态分布gaze reflex 凝视反射gdp mannose 鸟苷二磷酸甘露糖geitonogamy 同株异花受精gel 凝胶gel electrophoresis 凝胶电泳gel filtration 凝胶过滤gelatificaiton 胶凝gelatin 动物胶gelatin liquefaction 煤液化gelatinase 解胶酶gelatinization 胶凝gelatinizing agent 胶凝剂gelatinous connective tissue 粘液组织gelation 胶凝gelose 琼脂gemma 无性芽gemmation 出芽生殖gemmule 芽球gena 颊gene 基因gene activation 基因激活gene amplification 基因增殖gene bank 基因库gene base 基因库gene clone 基因克隆gene cloning 基因克隆化gene drift 遗传漂变gene duplication 基因再复制gene engineering 基因工程gene expression 基因表达gene flow 基因怜gene frequency 等位基因频率gene fusion 基因融合gene isolation 基因分离gene locus 基因座位gene manipulation 基因操作gene map 基因图gene mutation 基因突变gene pool 基因储备gene product 基因产物gene replica hypothesis 基因复制说gene therapy 基因治疗gene transfer 基因转移genealogical tree 系统树系谱树genealogy 系统学genecology 种生态学general chemical sense 共同化学感觉general physiology 普通生理学general transduction 一般转导generalied transduction 一般转导generalization 普遍化generation 世代generation index 世代指数generation interval 世代间隔generation time 世代时间generative cell 生殖细胞generative hypha 生殖菌丝generative nucleus 生殖核generative organs 生殖器generative phase 生殖期generative propagation 生殖繁殖generator potential 发生歧势generic 属的generic hybrid 属间杂种generic name 属名generitype 属之模式种genesis 发生genetic 遗传的genetic assimilation 遗传同化genetic balance 遗传平衡genetic blocking 遗传性阻碍genetic coadaptation 遗传的共同适应genetic code 遗传密码genetic disease 遗传病genetic distance 遗传距离genetic divergence 遗传分歧genetic drift 遗传漂变genetic engineering 基因工程genetic equilibrium 遗传平衡genetic gain 遗传获得量genetic homoeostasis 遗传稳态genetic information 遗传信息genetic map 遗传图genetic marker 遗传标记genetic material 遗传物质genetic mimic 拟基因型genetic polymorphism 遗传性多态现象genetic progress 遗传获得量genetic variance 遗传方差genetic variation 遗传变异genetics 遗传学genetics of populations 集团遗传学genic balance 基因平衡genin 配基genital atrium 生殖腔genital bursa 生殖囊genital cloaca 生殖腔genital duct 生殖管genital fold 生殖褶genital gland 性腺genital organ 生殖菩云禀genital papilla 生殖乳头genital part 生殖器genital plate 生殖板genital pouch 生殖囊genital ridge 生殖脊genital tubercle 生殖结节genitalia 生殖器genitals 生殖器genitourinary 泄殖的genocline 遗传渐变群genocopy 拟基因型genom 染色体组genomal mutation 染色体组突变genome 染色体组genome analysis 染色体组分析genome mutation 染色体组突变genomic 染色体组的genomic mutation 染色体组突变genonema 基因线genosome 基因体genospecies 基因型群genotype 基因型genotype frequency 基因型频率genotypic adaptation 基因型适应genotypic variation 基因型变异genotypical 遗传型的genovariation 基因突变gentamycin 庆大霉素genus 属genus hybrid 属间杂种genus name 属名geobiology 地质生物学geobiont 土壤动物geobotanical 地植物学的geobotany 地植物学geocarpy 地下结果geoecology 地质生态学geographic distribution 地理分布geographic isolation 地理隔离geographical distribution 地理分布geographical race 地理种geographical vicariad 地理性代替种geography 地理geologic age 地质时代geological succession 地质演替geomorphology 地形学geophyte 隐芽植物geotaxis 秦性geotropism 向地性germ 幼芽germ band 胚带germ carrier 病原菌传递体germ cell 胚细胞germ disc 胚盘germ free 无菌的germ free animal 无菌动物germ layer 胚叶germ line 种系germ plasm 生殖质germ plasm theory 种质说germ theory 生源说germ track 种系germ tube 芽管germ vector 病原菌传递体germarium 生殖腺germfree 无菌的germicidal agent 杀菌剂germicide 杀菌剂germinal center 发芽中心germinal continuity 种质连续性germinal disc 胚盘germinal epithelium 胚上皮germinal gland 胚腺germinal ridge 生殖脊germinal spot 胚斑germinal streak 胚带germinal vesicle 胚泡germinate species 孪生种germinating in autumn 秋发芽germinating power 发芽能力germination 出芽germination energy 发芽能量germination inhibitor 萌芽抑制因子germination test 发芽检验germinative layer 马尔比基氏层germinator 发芽力试验器gerontic stage 老衰期gerontology 老年学gestalt psychology 形态心理学gestaltism 形态论gestation 怀孕gestation period 怀孕期间gestation time 怀孕期间giant axon 巨轴突giant chromosome 巨型染色体giant fiber 巨型神经纤维giant protein 巨型蛋白giant sequoia 巨杉gibberellin 赤霉素giemsa's staining 吉姆萨氏染色gigantism 巨大化gigantocyte 巨红细胞gill 菌褶gill artery 鳃动脉gill book 书鳃gill chamber 鳃腔gill cover 鳃盖gill edge 菌褶缘gill filament 鳃丝gill lamella 鳃瓣gill pouch 鳃囊gill raker 鳃耙gill sieve 鳃耙gill slit 鳃裂ginger 姜gingiva 牙龈gingival 齿龈的ginkgo 银杏ginseng 人参girdle 环带girdling 环状剥皮gizzard 肌胃glabrate 无毛的glabrous 无毛的glacial age 冰川时代glacial flora 冰川植物群glacial period 冰川时代glacial relict 冰河期残遗物glaciation 冰河酌glade 林中空地gland 腺glanders 鼻疽glandular cavity 腺腔glandular cell 腺细胞glandular epithelium 腺上皮glandular hair 腺毛glandular stomach 前胃glandular trichome 腺毛glandule 小腺glandulous 腺的glans 坚果glass beads 玻璃念珠glass electrode 玻璃电极glass filter 玻璃滤器glass sponges 六放海绵类glass wool 玻璃绵glassa 中唇舌glasshouse 温室glasslike cartilage 透庙骨glaucoma 绿内障gleba 产孢体gleization 潜育酌gley horizon 潜育层glia 神经胶glia cell 神经胶细胞gliacyte 绅经胶细胞gliadin 麦醇溶蛋白gliadine 麦醇溶蛋白gliding bacterium 滑移细菌gliding movement 滑走运动gliocyte 绅经胶细胞global environment 全球的环境global radiation 总辐射globefish toxin 河豚毒globin 珠蛋白globin gene 珠蛋白基因globoid 球体globular 球形的globular actin 球肌动蛋白globular embryo 球形胚globular protein 球蛋白globule 小球globulin 球蛋白glochidium 河蚌幼虫glomerular capsule 肾小球囊glomerule 团伞花glomerulus 小球体glossa 中唇舌glossopharyngeal nerve 舌咽神经glottis 声门glucagon 胰高血糖素glucan synthase 葡聚糖合酶glucide 碳水化合物glucoamylase 葡糖淀粉酶glucocorticosteroid 糖皮质激素glucogenesis 葡萄糖生成glucokinase 葡糖激酶glucolysis 糖解gluconeogenesis 糖原异生gluconic acid 葡糖酸glucoprotein 糖蛋白glucosamine 葡糖胺glucosazone 葡萄糖脎glucose 6 phosphate dehydrogenase 间酶glucose 葡萄糖glucose effect 葡糖效果glucose isomerase 葡萄糖异构酶glucose oxidase 葡萄糖氧化酶glucose phosphate 葡萄糖磷酸glucose sensor 葡萄糖感受器glucose utilization 葡糖利用glucoside 葡糖甙glucosuria 糖尿glucuronic acid 葡萄醛酸glue 胶gluma 颖glume 颖glutamate oxaloacetate transaminase 谷氨酸草酰醋酸氨基移转酶glutamic acid 谷氨酸glutaminase 谷酰胺酶glutamine 谷氨酰胺glutaric acid 戊二酸glutathion 谷胱甘肽glutelin 谷朊gluten 谷蛋白glutenin 麦谷蛋白glycemia 血糖glyceraldehyde 3 phosphate 甘油醛3 磷酸glyceraldehyde 甘油醛glyceride 甘油酯glycerine 甘油glycerine fermentation 甘油发酵glycerol 甘油glycine 甘氨酸glycine oxidase 甘氨酸氧化酶glycinin 大豆球蛋白glycocoll 甘氨酸glycogen 动物淀粉glycogen granule 糖原粒glycogen phosphorylase 糖原磷酸化酶glycogen primer 糖原引物glycogenesis 糖原生成glycogenic amino acid 糖原性氨基酸glycogenolysis 糖原分解glycogeny 糖原生成glycolic acid 甘醇酸glycolipid 糖脂glycolysis 糖解glycolytic pathway 糖酵解途径glycopeptide 糖肽glycophyte 甜土植物glycoside 糖苷glyoxal 乙二醛glyoxalase 乙二醛酶glyoxylase 乙二醛酶glyoxylate cycle 乙醛酸循环glyoxysome 乙醛酸循环体gnathobase 颚基gnathopod 颚足gnawed 缺刻状的gneiss 片麻岩gnotobioctics 无菌生物学gnotobiology 无菌生物学goblet cell 杯形细胞goiter 甲状腺肿goldfish 金鱼golgi apparatus 高尔基体golgi body 高尔基体golgi lamella 高尔基片层gomphosis 嵌合gonad 性腺gonadal hormone 性激素gonadectomy 去性腺gonadin 性腺素gonadotropic hormone 促生殖腺激素gonadotropin 促生殖腺激素gonagium 生殖壶gonapophysis 生殖突gonidium 绿颗体gonimoblast 产孢丝gonium 生殖原细胞gonochorism 雌雄异体现象gonocyte 生殖母细胞gonoduct 生殖管gonome mutation 染色体组突变gonomery 两亲染色体分立gonophore 生殖体gonopore 生殖孔gonosome 生殖体gonotheca 生殖鞘gonozooid 生殖个员goral 羚gotlandian period 哥特兰纪graafian follicle 格拉夫氏泡grade 改良种动物grade animal 改良种动物graded response 等级应答gradient 梯度gradient analysis 梯度分析gradient elution 梯度洗脱gradient gel electrophoresis 梯度凝胶电泳gradient mixer 梯度混合器gradient plate method 倾斜平板法grafing 移植graft 接穗graft chimaera 嫁接杂种graft hybrid 嫁接杂种graft rejection 移植排斥graft transmission 嫁接传染grafting 嫁接grain 谷粒graining 谷粒形成graining phase 谷粒形成期grains 谷粒gram 克gram atom 克原子gram equivalent 克当量gram molecule 摩尔gram negative bacterium 革兰氏阴性细菌gram positive bacterium 革兰氏阳性细菌gram staining method 革兰氏染色法gramicidin 短杆菌肽gramineae 稻科植物类gramineous 禾本科的gramme 克grana 基粒granite 花岗岩granivores 食谷鸟类granivorous 食种子的granular endoplasmic reticulum 粗面内质网granular gland 颗粒腺granular layer 颗粒层granular structure 团粒状结构granulated feed 颗粒饲料granulated fertilizer 粒状肥料granulated gel 颗粒凝胶granulation 小粒形成granulation tissue 肉芽组织granule 颗粒granulocyte 有粒细胞granulocytopoiesis 颗粒白细胞形成granulopoiesis 颗粒白细胞形成granulose 细菌淀粉granulum 小颗粒grape sugar 葡萄糖grape vine 葡萄树graph 图解graptolites 笔石类grass 草grass blade 草茎grass fen 草沼地grass moor 草沼地grasses 稻科植物类grassland 草地grassplot 草坪gravidity 妊娠graviperception 重力觉gravitational water 重力水gravity 重力grazing animal 放牧动物grazing forest 放牧林great epiploon 大网膜great ice age 大冰期时代great omentum 大网膜greater circulation 大循环greater lip of pudendum 大阴唇greater omentum 大网膜green algae 绿藻类green belt 绿区green blindness 绿盲green feed 青饲料green fence 书green fodder 青饲料green gland 绿腺green gram 绿豆green manure 绿肥green mosses 绿苔类green plant 绿色植物green sulfur bacterium 绿色硫黄细菌greenhouse 温室gregarious parasitism 群居寄生gregariousness 群居本能gregaroid colony 聚生群体grey heron 苍鹭grey humic acid 灰色腐植酸grey matter 灰质grinding tooth 臼齿grip 列性感冒gristle 软骨gristly 软骨的grit cell 石细胞gritstone 沙岩groin 腹股沟grooming behavior 清整动作grosbeak 锡嘴雀gross energy 总能量gross production 总产量grotto 洞穴ground animal 地下动物ground cover 地被物ground flora 地被物ground layer 草本层ground substance of bone 骨基质ground substnace 基质ground tissue 基本组织ground water 地下水groundnut 落花声groundwater 地下水groundwater level 地下水位groundwater table 地下水位group 群group agglutination 群凝集group translocation 基团移位grove 林growers 雏growing 饲育growing birds 雏growing point 生长点growing point culture 生长点培养growing region 生长区growing season 生长期growth 成长growth attribute 生长属性growth chracteristic 生长属性growth cone 生长圆锥growth control 生长第growth curvature 生长弯曲growth curve 生长曲线growth factor 生长因素growth formula 生长公式growth hormone 生长激素growth in thickness 加厚生长growth inhibiting 生长抑制的growth inhibitor 生长抑制剂growth line 生长线growth movement 生长运动growth promoter 生长促进剂growth rate 生长速率growth regulating substance 生长第剂growth regulation 生长第growth regulator 生长第剂growth retardation 生长阻滞growth ring 生长轮growth stimulant 生长促进剂growth velocity 生长速率growth zone 生长区growthform 生长形态growthhabit 生长形态grub worm 毛虫guaiacol 愈刨木酚guanase 鸟尿素酶guanidine 胍guanine 鸟粪素guanine cell 含鸟粪素细胞guano 鸟粪guanophore 含鸟粪素细胞guanosine 鸟尿环核甙guanosine diphosphte mannose 鸟苷二磷酸甘露糖guanylic acid 鸟苷磷酸guard bee 监视蜂guard cell 保卫细胞guild 种群guinea fowl 珠鸡guinea pig 豚鼠gula 咽喉gull 海鸥gullet 食管gully 峡谷gulonic acid 古洛糖酸gulose 古洛糖gum 屎gum arabic 阿拉伯胶gum duct 屎道gum resin 胶尸gummiferous 产屎的gumming 梁gummosis 梁gustation 味觉gustatory cell 味细胞gustatory organ 味觉瀑gustatory pore 味孔gustatory sense 味觉gut 肠gut cavity 肠腔guttation 吐水gymnocarpic 裸果的gymnocarpous 裸果的gymnocyte 裸细胞gymnospermous plants 裸子植物类gymnosperms 裸子植物类gymnospore 裸孢子gynaeceum 雌蕊群gynaecium 雌芯gynandrism 雌雄同体gynandromorph 雌雄嵌体gynandromorphism 雌雄嵌性gynandrous 雌雄芯合体的gyneceum 雌芯gynic 雌的gynoecium 雌蕊群gynogenesis 雌核发育gynomerogony 雌核卵片发育gynophore 雌蕊柄gynospore 大孢子gynostegium 合蕊冠gynostemium 合蕊柱gyratory shaker 旋转搅拌机gyrus 脑回。
糖原代谢和糖异生
另有10%葡萄糖残基要经己糖 激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸 进行糖酵解的。
个
15.3 糖原合成
糖原的生物合成不是糖原降解的逆过程,而是通过 另外一条途径。
糖原合成需要的能量是由尿嘧啶核苷三磷酸(UTP) 提供的。
糖原合成的底物是UDP-葡糖。
G o' = -16.3 kJ/mol
旁路III:葡糖-6-磷酸水解生成葡萄糖
葡糖-6-磷酸在葡糖-6-磷酸酶作用下水解为 葡萄糖 和无机磷酸。
G o'= -13.8 kJ/mol
糖
葡糖-6-磷酸酶
异
生
途
径
总
览
图
糖 异 生 与 糖 酵 解 过 程 能 量 变 化
糖异生是个需能过程,由2分子丙酮酸合成1分子葡萄 糖需要4分子ATP和2分子GTP,同时还需要2分子NADH。 总反应方程式为:
3. 糖异生的调控
磷酸果糖激酶I(PFK-I)和果糖-1,6-二磷酸酶的调节
果糖-2,6-二磷酸可以激活PFK-1,加快糖酵解;而抑制 果糖-1,6-二磷酸酶(FBPase-1),进而抑制糖异生。
当ATP和柠檬酸水平高时,PFK-I受抑制,降低糖酵解速 率;柠檬酸增加果糖-1,6-二磷酸酶活性,从而增加糖异 生速率。当AMP水平高时,PFK-I激活,加快糖酵解,果 糖-1,6-二磷酸酶受抑制,糖异生关闭。
但糖酵解途径中由丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶I和己 糖激酶催化的三个高放能反应是不可逆的。
1. 糖异生反应
旁路I:丙酮酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸
(1)丙酮酸羧化生成草酰乙酸 在丙酮酸羧化酶(生物素作为辅基)催化下,丙酮酸
糖原磷酸化酶
八、糖原合成与分解的生理意义
1.贮存能量。
2.调节血糖浓度。
3.利用乳酸:肝中可经糖异生途径利用糖 无氧酵解产生的乳酸来合成糖原。这就 是肝糖原合成的三碳途径或间接途径。
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糖代谢的调节过程
一、无氧酵解的调节 二、TCA 的调节 三、磷酸戊糖途径调节 四、糖异生的调节 五、糖原代谢的调节 六、神经和激素对糖的调节
作用生成自由葡萄糖后转运至肌肉组织加以
利用,这一循环过程就称为乳酸循环(Cori
循环)。
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五、糖原合成
1 定义: 由单糖合成糖原的过程称为糖原的合 成(glycogenesis)。
单糖: 葡萄糖(主要)、果糖、半乳糖等
部位: 肝脏、肌肉组织等细胞的胞浆中
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2.缩合:
线粒体 乙酰CoA
PEP
丙酮酸
② 草酰乙酸
苹果酸/ 天冬氨酸
丙酮酸 ①
草酰乙酸
②
苹果酸/ 天冬氨酸
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PEP
6
糖酵解和葡萄糖异 生的关系
葡萄糖 G-6-P
F-6-P F-1.6-P
3-P-甘油醛
A A G-6-P磷酸酯酶
B F-1.6-P磷酸酯酶
C1 丙酮酸羧化酶
B
C2 PEP羧激酶
磷酸二羟丙酮
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三羧酸循环的调节酶及其调节
酶 的 名 称 变构激活剂 变构抑制剂
柠檬酸合酶
ATP
异柠檬酸脱氢酶 ADP、AMP
NADH
α-酮戊二酸脱氢酶系
ATP、NADH、 琥珀酰CoA
基础生物化学-糖类分解代谢报告
5.3.2 淀粉(糖原)的酶促降解 淀粉(糖原)有水解和磷酸解两种酶促降解途 径。 5.3.2.1 淀粉酶促水解 淀粉酶、-淀粉酶、脱支酶和麦芽糖酶参与 了植物体内的淀粉水解。
①- 淀粉酶耐热 (70℃,15min) 不耐酸 (pH3.3) , 在淀粉分子内部随机水解-1,4糖苷键,将直 链淀粉水解的产物为葡萄糖、麦芽糖;将支 链淀粉作用产物为葡萄糖、麦芽糖和糊精。
5.3.3 细胞壁多糖的酶促降解 纤维素是由1000~10000个-D-葡萄糖通过-1, 4糖苷键连接的直链分子,是植物细胞壁的主 要组分。纤维素可在酸或纤维素酶作用下水 解为-葡萄糖。
单糖的分解代谢 在生物体内首先要将多 糖水解为单糖才能为 生命活动提供能源或 碳源,葡萄糖是大多 数有机体生命活动的 主要能源,细胞通过 分解葡萄糖将其中所 含的化学能转化成细 胞能够利用的形式 (ATP)。
5.3 双糖和多糖的酶促降解 5.3.1 蔗糖、麦芽糖、乳糖的酶促降解 5.3.1.1 蔗糖的水解 蔗糖是植物光合作用产物的主要运输形式。 ①在蔗糖合成酶作用下水解
②在蔗糖酶(转化酶)作用下水解
5.3.1.2 麦芽糖的水解 麦芽糖酶可催化麦芽糖水解为葡萄糖。
5.3.1.3 乳糖的水解 乳糖在-半乳糖苷酶催化下水解为 D-葡萄糖和 D-半乳糖。
②- 淀粉酶耐酸不耐热,从多糖的非还原端的 -1,4糖苷键,将直链淀粉水解成麦芽糖;将 支链淀粉(或糖原)水解为麦芽糖和极限糊 精。
③脱支酶(R酶)可专一水解 -1,6糖苷键。支 链淀粉经淀粉酶水解产生的极限糊精,由脱 支酶水解去除 -1,6键连接的葡萄糖,再在淀粉酶和-淀粉酶作用下彻底水解。 ④麦芽糖酶水解麦芽糖和糊精中的-1,4糖苷键, 生成葡萄糖。
糖原磷酸解时,在酶 a 的作用下,从糖原非还 原端逐个磷酸解下葡萄糖基,生成 G-1-P , 切至离分支点 4 个葡萄糖残基处停止,然后 由 -1,4-1,4- 寡聚糖基转移酶 (oligosaccharyl transferase)切下分支点上的麦芽三糖,同时 将它转移到另一链上,以-1,4糖苷键连接, 被加长了的支链仍由糖原磷酸化酶 a 磷酸解, 而连接有 1 个葡萄糖残基的 -1,6 糖苷键由脱 支酶水解形成葡萄糖。
26糖原的分解与合成
糖尿病(Diabetes mellitus)
Insulin缺乏或其受体异常,不能对抗 由肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质 激素等引起的血糖升高作用,产生高血 糖和糖尿。病人的代谢发生障碍,机体 供能不足,表现出典型的多饮、多食、 多尿及体重减少的“三多一少”症状。 严重时还伴随酮血症及酸中毒。
三、糖原的分解
糖原分解需要三种酶参与,即糖原磷酸化酶 (glycogen phosphorylase),糖原脱支酶(glycogen debranching enzyme)和磷酸葡萄糖变位酶 (phosphoglucomutase)。分步反应:
(1)从糖链的非还原端开始
磷酸化酶
糖原(Gn)+ H3PO4
分步反应:
(1) G
G-1-P
HO CH2
H
H
OH OH
H
ATP ADP P O CH2
O H
H
H
H OH
Mg+
OH OH
OH 葡萄糖激酶
H
HO CH2
O H
H OH
HH
OH OH
OH 磷酸葡萄 H
O H
H OP
OH
G
G-6-P 糖转位酶 G-1-P
(2)尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)的合成
UDPG焦磷 酸化酶
+
G
② G-1-P
磷酸葡萄糖 转位酶
G-6-P
葡萄糖-6-磷酸
酶(肝、肾)
③ G-6-P
G + H3PO4
葡萄糖-6-磷酸酶只存在于肝、肾中,而不存在于肌肉 中,所以只有肝和肾可补充血糖,而肌糖原不能分解为葡 萄糖,不能补充血糖,只能进行糖酵解或有氧氧化。
生物化学及分子生物学(人卫第九版)-05-05节糖代谢
熟悉 糖原合成与分解关键酶的调节;糖异生与糖酵解的底物循环 调节;乳酸循环的概念和生理意义;血糖调节激素及其作用 机制
了解
糖原累积症的发病机制;糖醛酸途径、多元醇途径的概念和 生理意义;血糖的来源和去路;糖代谢异常所致疾病
第五节
糖原的合成与分解
Glycogenesis and Glycogenolysis
激素调节的整合作用
糖、脂肪、氨基酸代谢相协调 肝、肌、脂肪组织等各组织代谢相协调
(一)胰岛素是降低血糖的主要激素
特点: 血糖升高时分泌增多 机制: 促进糖原、脂肪、蛋白质合成
促进肌、脂肪组织等通过GLUT4摄取葡萄糖
激活磷酸二酯酶而降低cAMP水平,使糖原合酶活化、磷酸化酶抑制 激活丙酮酸脱氢酶磷酸酶,使丙酮酸脱氢酶活化
一、血糖水平保持恒定
是血糖来源和去路相对平衡的结果
食物糖
糖原合成
CO2 + H2O 肝(肌)糖原 其他糖
肝糖原
分解
血糖
磷酸戊糖途径等
非糖物质
脂肪、氨基酸
二、血糖稳态主要受激素调节
调节血糖的主要激素
降低血糖:胰岛素 (insulin)等
升高血糖:胰高血糖素 (glucagon)、糖皮质激素、肾上腺素等
葡糖-1-磷酸
UDPG
ATP
UTP
CH 2 OH
H
HO
H OH H
O H
H O P
+
P
P
P
尿苷
葡糖-1- 磷酸 UDPG焦磷酸化酶 PPi
H
HO
OH
UTP
CH 2 OH H OH H O H H O P P
尿苷
2Pi+能量
糖原的分解合成代谢
腺苷环化酶
腺苷环化酶(有活性)
(无活性) ATP
cAMP
PKA
(无活性)
PKA
(有活性)
磷酸化酶b激酶 磷酸化酶b激酶-P
Pi
磷蛋白磷酸酶-1
–
糖原合酶
糖原合酶-P
磷酸化酶b 磷酸化酶a-P
Pi
糖原的分解合成代谢
磷蛋白磷酸酶-1
Pi
–
PKA(有活性)
磷蛋白磷酸酶-1
–
磷蛋白磷酸酶抑制剂-P
磷蛋白磷酸酶抑制剂
葡萄糖-6-磷酸酶(肝,
肾)
葡萄糖-6-磷酸
葡萄糖
葡萄糖-6-磷酸酶只存在于肝、肾中,而不存在
于肌中。所以只有肝和肾可补充血糖;而肌糖原不
能分解成葡萄糖,只能进行糖酵解或有氧氧化。
糖原的分解合成代谢
第15页
肌糖原分解
➢ 肌糖原分解前三步反应与肝糖原分解过程相同, 不过生成6-磷酸葡萄糖之后,因为肌肉组织中 不存在葡萄糖-6-磷酸酶,所以生成6-磷酸葡萄 糖不能转变成葡萄糖释放入血,提供血糖,而 只能进入酵解路径深入代谢。
合成部位: 组织定位:主要在肝脏、肌肉 细胞定位:胞浆
糖原的分解合成代谢
第4页
糖原合成路径:
1.葡萄糖磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸
ATP
ADP
葡萄糖 己糖激酶;
葡萄糖-6-磷酸
葡萄糖激酶(肝)
糖原的分解合成代谢
第5页
2.葡萄糖-6-磷酸转变成葡萄糖-1-磷酸
磷酸葡萄糖变位酶
葡萄糖-6-磷酸
葡萄糖-1-磷酸
➢ 当糖原合成路径活跃时,分解路径则被抑制, 才能有效地合成糖原;反之亦然。
糖原的分解合成代谢
糖代谢
第四章糖类分解代谢新陈代谢(metabolism)是生物的基本特征之一。
新陈代谢又称 物质代谢,是指生物与周围环境进行物质交换和能量交换的过 程。
合成代谢(也叫同化作用 assimilation) 新陈代谢 分解代谢(也叫异化作用 dissimilation) 生物新陈代谢的特点是: ① 代谢反应是在温和条件下,由酶催化来实现。
② 各种代谢反应互相协调、有条不紊。
③ 能随着内外环境的变化进行自我调节。
④ 无论是分解代谢还是合成代谢,其生物化学反应都是分步进行 的,伴随着的能量吸收和释放也是逐步进行的。
⑤ 由于反应是分步进行的,上一反应的产物就成为下一反应的底 物,因此代谢反应中的任一反应物、中间物或产物,都通称为 代谢物(metabolite)。
z z z糖类物质是一类多羟基醛或多羟基酮化合物或聚合物。
糖类物质可以根据其水解情况分为:单糖、寡糖和多糖。
糖类是自然界分布最广的物质之一,在生物体内,糖类物质 主要以均一多糖、杂多糖、糖蛋白和蛋白聚糖形式存在。
动物和大多数微生物所需的能量,主要是由糖的分解代谢提 供的,一克葡萄糖彻底氧化分解可释放16.74kJ的能量。
另一 方面,糖分解的中间产物,又为生物体合成其它类型的生物 分子,如氨基酸、核苷酸和脂肪酸等,提供碳源或碳链骨 架。
糖的分解代谢是指大分子的多糖和寡糖酶促降解生成单糖, 单糖进一步氧化分解成CO2和H2O,并释放能量的生物化学变 化过程。
糖的分解代谢是生物体广泛存在的最基本代谢。
zzz1第一节 双糖和多糖的酶促降解一、双糖的酶促降解 生物体内广泛存在的双糖主要有蔗糖、麦芽糖和乳 糖。
1、蔗糖的水解 蔗糖是由葡萄糖和果糖通过α,β-1,2-糖苷键脱水缩合而 成。
其化学学名是α-D-葡萄糖-(1→2)- β-D-果糖苷。
CH2OHOOH OH OH OCH2OH OOH CH2OHOH1)蔗糖合成酶(sucrose synthetase) 催化蔗糖与UDP反应生成果糖和尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG), 反应可逆。
糖代谢-糖原的分解和生物合成
三 糖原的生物合成
糖基的直接供体: UDPG(尿苷二磷酸葡萄糖) 1. UDP- 葡萄糖焦磷酸化酶:
G–1–P + UTP UDPG焦磷酸化酶 UDPG + PPi
催化单糖基的活化, 形成糖核苷二磷酸, 2Pi
为各种聚糖形成时,提供糖基和能量。
动物细胞:UDPG→糖原
植物细胞:UDPG →蔗糖
ADPG →淀粉
4
细胞溶胶5
6
一 糖原的生物学意义
二 是在肝脏和骨骼肌中作为容易动 员的能量贮存物质.
三 糖原是葡萄糖的一种高效的贮能形 式.
糖原→G-1-P →G-6-P →31(33)个ATP
耗1个ATP
G → G-6-P
→G-1-P耗1→个UUTPDPG糖原→引糖物 原,
7
选择糖原作为不可缺少的贮能物质的三重意义: ☺ 动员迅速 ☺ 无氧分解 ☺ 能分解成葡萄糖, 维持血糖正常水平
糖 原 分 解 图 示:
Pi
G-6-P
H2O
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复习
Pi
H2O
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课外阅读
14
磷酸化酶 糖原 +H3PO4 (磷酸解)
+H2O (水解)
脱支酶
G-1-P 少量G
G-6-P
糖酵解
15
16
钙结合稳定蛋白
肝细胞
复
习
Glc transporter T3
Pi transporter T2
P11782
38
Casein kinase II
39
40
41
第六节 糖原的分解和生物合成
要点回顾
◆ 糖原的分解和生物合成途径及其关键酶 ◆ 糖原代谢的调控因素
糖原磷酸化酶 b(Glycogen phosphorylase b,GPb)试剂盒说明书
货号: QS3602 规格:50管/24样糖原磷酸化酶 b(Glycogen phosphorylase b,GPb)试剂盒说明书紫外分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。
GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。
GPb在一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。
测定原理:GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。
添加一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
自备实验用品及仪器:紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:提取液:60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体40 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1支,-20℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;试剂四:粉剂×1瓶, -20℃保存;试剂五:粉剂×1支, -20℃保存;样本的前处理:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零;2、工作液的配制:临用前将试剂二转移到试剂一中混合溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
糖类代谢
③6-磷酸果糖的磷酸化
• 磷酸果糖激酶(phosphofructokinase, PFK)催化F6P第一位C 上磷酸化生成 FBP, 磷酸根由ATP供给。 Mg2+是PFK的激活剂, PFK是第2个限速酶。
3.2.2 磷酸己糖的裂解 ④1.6-二磷酸果糖的裂解 • 醛缩酶(aldolase)催化FBP生成磷酸二羟丙酮(DHAP)和3磷酸甘油醛 (GAP)。
基本要求: (1)掌握糖酵解、三羧酸循环,乙酰辅酶A形成的具 体过程及调控、TCA循环的生物学意义、磷酸戊糖途径反 应和生物学意义 (2)理解TCA循环是葡萄糖、脂肪、蛋白质三大物质 的转换枢纽 (3)了解生物体内的糖类、糖原的合成与分解 教学重点及难点: (1)糖酵解、三羧酸循环的反应途径、乙酰辅酶A形 成的具体过程及调控 (2)TCA循环的生物学意义
麦芽糖( )
α -D-半乳糖
α -D-葡萄糖
β -D-果糖
棉子糖
-环糊精分子结构
环糊精分子的空间填充模型
1.3 多糖
多糖是多个单糖基通过糖苷键连接而 形成的高聚物。 • 多糖可以由一种单糖缩合而成,称为均一 多糖,如:淀粉、糖原,纤维素。 • 也可以由不同类型的单体缩合而成,称为 不均一多糖。
⑧3-磷酸甘油酸的变位反应
• 磷酸甘油酸变位酶(phosphoglycerate mutase)催化3-PGA 的C3位上的磷酸基转变到C2位上生成2-PGA。
⑨2-磷酸甘油酸的脱水反应 • 由烯醇化酶催化,2-PGA脱水的同时,能量重新分配,生成含 高能磷酸键的磷酸烯醇式丙酮酸(PEP )。
~
同多糖(均一多糖)
杂多糖(不均一多糖)
• 淀粉是由- D-葡萄糖缩合而成, 是植物贮存的 养料, 分为直链和支链淀粉,葡萄糖分子间多是 (14)糖苷健,而分支点上是(16)糖苷健。 • 糖原是动物组织内糖的贮存形式,如肝和肌肉中 贮存的养分,有“动物淀粉”之称。 • 糖原分子量较淀粉略大,分支较支链淀粉略多, 单糖连接方式与支链淀粉相同。
糖原磷酸化酶的作用
糖原磷酸化酶的作用一、糖原磷酸化酶的基本概念和结构糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase)是一种重要的酶类,主要参与人体能量代谢过程中的糖原分解。
它是一种分子量为97kDa的单体蛋白,由两个结构域组成:N-末端结构域和C-末端结构域。
其中,N-末端结构域具有催化活性,而C-末端结构域则与底物和调节因子的结合有关。
二、糖原磷酸化酶在能量代谢中的作用1. 糖原分解在人体运动或长时间不进食时,血液中葡萄糖水平下降,身体需要从肝脏和肌肉中分解储存的糖原来提供能量。
这时,糖原磷酸化酶就发挥了重要作用。
它通过将α-1,4-链上的葡萄糖单元逐个切割成为α-D-葡萄糠和一个较小的分支链,在肝脏和肌肉细胞内释放出可供能量代谢的葡萄糖分子。
2. 调节血糖水平糖原磷酸化酶的活性受到多种因素的调节,其中最重要的是胰岛素和葡萄糖。
当血液中葡萄糖水平较高时,胰岛素会促进肝脏和肌肉中的糖原合成,并抑制糖原分解酶的活性,从而降低血糖水平。
相反,当血液中葡萄糖水平下降时,胰岛素分泌减少,而肾上腺素和胃泌素等激素则会刺激糖原分解酶的活性,提高血糖水平。
三、影响糖原磷酸化酶活性的因素1. 蛋白质结构由于N-末端结构域是催化活性部位,因此其结构对于催化反应非常关键。
如果该区域发生变异或缺失,则会导致酶活性降低或完全失去催化能力。
2. 底物浓度底物浓度越高,则反应速率越快。
但当底物浓度达到一定程度时,酶活性会受到抑制,这是因为底物过多会使酶分子之间的竞争增加,从而降低反应速率。
3. 温度和pH值糖原磷酸化酶的最适温度为37℃,最适pH值为6.8-7.4。
如果温度或pH值偏离这个范围,则会影响酶的构象和电荷状态,从而导致酶活性下降。
4. 调节因子糖原磷酸化酶的活性还受到多种调节因子的影响,包括AMP、ATP、钙离子等。
其中,AMP被认为是一种强力激活剂,可以显著提高糖原分解速率。
四、应用前景1. 治疗代谢性疾病由于糖原磷酸化酶在能量代谢中发挥着重要作用,因此其异常表达或功能失调往往与代谢性疾病有关。
糖原磷酸化酶b检测
糖原磷酸化酶b检测
糖原磷酸化酶分为有活性的糖原磷酸化酶a(Glycogen phosphorylase a, GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(Glycogen phosphorylase b, GPb)两种形式。
添加一定浓度的腺苷酸(5'-AMP)时测定糖原磷酸化酶(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5'-AMP)时测定糖原磷酸化酶a活性,用糖原磷酸化酶活性减去糖原磷酸化酶a活性得到糖原磷酸化酶b活性。
迪信泰检测平台采用生化的方法检测糖原系列物质,结合相应的试剂盒,可高效、精准的检测糖原磷酸化酶b的活性变化。
此外,我们还提供其他糖原类的检测服务,以满足您的不同需求。
生化法测定糖原磷酸化酶b样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期:2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关参数(中英文)
3. 图片
4. 原始数据
5. 糖原磷酸化酶b含量/活性信息。
糖原磷酸化酶同工酶脑型:心肌损伤的新标志物
糖原磷酸化酶同工酶脑型:心肌损伤的新标志物王宇竞【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2011(17)2【摘要】Glycogen phosphorylase isoenzyme BB ( GPBB) is a key enzyme of glycogenolysis, as an enzyme for early laboratory detection of ischaemia.At present, GPBB is the most promising because it increases as early as one to four hours from the onset of chest pain.Its early release appears to be essentially dependent on ischemic myoeardial pared with the established cardiac markers, GPBB is a sensitive marker for the early diagnosis of acute coronary syndromes.Both multiple biomarkers and enzyme linked immunosorbent assay are used for the determination GPBB.GPBB is not only a marker of monitoring acute coronary syndromes,but also may be a marker of myocardial necrosis and ischemia caused by other myocardial injury factors.%糖原磷酸化酶同工酶脑型(GPBB)是糖原分解的关键酶,最早在实验室因缺血而被检测到.目前,GPBB成为最具潜质的心肌损伤生物标记,其在胸痛开始的1~4 h内浓度开始增加,并且释放本质上依赖于心肌缺血损伤.对比其他已知心肌标志物,GPBB对于诊断冠状动脉综合征中不同形式的心肌缺血损伤具有高度敏感性和特异性.近期随着酶联免疫吸附法、多种生物标记技术测定GPBB含量的应用,GPBB还可能应用于其他原因所致的心肌损害.【总页数】3页(P175-177)【作者】王宇竞【作者单位】呼伦贝尔市人民医院检验科,内蒙古,呼伦贝尔,021008【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.糖原磷酸化酶同工酶脑型和缺血修饰蛋白在新生儿窒息合并心肌损伤中的变化及临床意义 [J], 田斌;刘兰凤;邓虎重;李凤莲;刘海燕2.合并心肌损伤的窒息新生儿血浆心肌营养素-1及糖原磷酸化酶同工酶脑型的测定及临床意义 [J], 黎日保;李彦甫3.糖原磷酸化酶同工酶脑型对小儿心肌损伤的早期诊断价值 [J], 陈铃;朱红枫;魏洪平;陈桃;陈书琴4.糖原磷酸化酶同工酶脑型联合其他标志物在窒息新生儿心肌损伤中的应用研究[J], 田斌;刘兰凤;邓虎重;李凤莲;刘海燕5.血清心脏型脂肪酸结合蛋白联合糖原磷酸化酶脑型检测在小儿脓毒症心肌损伤诊断中的临床价值 [J], 陈丽红;朱屹华;吴明因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
糖原磷酸化酶BB型(GPBB)测定在临床中的应用
糖原磷酸化酶BB型(GPBB)测定在临床中的应用
杨雪松;范蓉;等
【期刊名称】《中华临床医药杂志(北京)》
【年(卷),期】2002(003)023
【摘要】目的:分析脑缺血导致脑细胞损伤与血清GPBB水平之间的关系。
方法:用间接夹心ELISA方法测定急性心肌梗死和脑缺血患者及正常人血清GPBB水平。
结果:急性心肌梗死血清GPBB水平高于正常人水平,脑缺血患者则处于正常水平,与正常人无显著差异。
结论:在心肌缺血缺氧时会导致GPBB的释放,而脑
缺血时未见血清GPBB升高。
【总页数】2页(P31-32)
【作者】杨雪松;范蓉;等
【作者单位】大连医科大学生化教研室;大连医科大学第二临床学院神经内科
【正文语种】中文
【中图分类】R446.112
【相关文献】
1.糖原磷酸化酶BB型(GPBB)测定在临床中的应用 [J], 杨雪松;范蓉;王健;朱正美
2.糖原磷酸化酶同工酶 BB 对急性冠状动脉综合征早期诊断价值 [J], 杨云净;罗艳
3.糖原磷酸化酶BB在非ST段抬高急性冠脉综合征诊断和预后中的作用 [J], 简明;喻红波;刘阳
4.糖原磷酸化酶BB型同功酶在急性心肌梗死早期诊断中的应用 [J], 张嘉宁
5.急性心肌梗死伴糖尿病患者糖原磷酸化酶同工酶BB及脂蛋白相关磷脂酶A2浓度与心功能的关系 [J], 秦小霞;闫国超;邱会卿;靳萍奎;秘玉静;武艳
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磷酸化酶b分子量
磷酸化酶b分子量引言磷酸化酶是一类重要的酶,它在细胞信号传导和代谢调控中起着关键的作用。
磷酸化酶b是其中的一种,它具有特定的分子量和结构,对细胞功能的调控具有重要意义。
本文将详细介绍磷酸化酶b的分子量及其相关知识。
磷酸化酶b的定义磷酸化酶b是一类酶,它能够催化磷酸化反应,将磷酸基团转移给底物分子,从而改变其活性或功能。
磷酸化酶b在细胞信号传导中起着关键作用,能够调控多种细胞过程,包括细胞增殖、分化、凋亡等。
磷酸化酶b的分子量磷酸化酶b是一种蛋白质酶,其分子量通常以千道尔顿(kDa)为单位来表示。
磷酸化酶b的分子量因具体的种类而异,一般在几十kDa到几百kDa之间。
磷酸化酶b的结构磷酸化酶b的结构一般由多个蛋白亚基组成,这些亚基在结构和功能上相互配合。
磷酸化酶b的结构可以分为两个主要部分:催化亚基和调节亚基。
催化亚基是磷酸化酶b中的主要活性部分,它含有催化活性位点,能够催化磷酸化反应。
催化亚基的结构通常由一个或多个蛋白链组成,这些蛋白链通过非共价键或共价键相互连接,形成一个稳定的结构。
调节亚基是磷酸化酶b中的辅助部分,它能够调控催化亚基的活性。
调节亚基的结构和功能多样,可以通过与催化亚基相互作用来调节催化亚基的活性。
调节亚基的结构通常由一个或多个蛋白链组成,这些蛋白链与催化亚基相互作用,形成一个复合物。
磷酸化酶b的功能磷酸化酶b在细胞信号传导和代谢调控中起着重要的作用。
它能够催化磷酸化反应,改变底物分子的活性或功能,从而调控多种细胞过程。
磷酸化酶b可以通过磷酸化或去磷酸化底物分子来调节其活性。
磷酸化通常会增强底物分子的活性,而去磷酸化则会降低底物分子的活性。
通过磷酸化和去磷酸化的相互作用,磷酸化酶b能够在细胞内实现复杂的调控网络。
磷酸化酶b在细胞增殖和分化中起着重要作用。
它能够调控细胞周期的进程,控制细胞的增殖和分化。
磷酸化酶b还能够参与细胞凋亡的调控,通过磷酸化或去磷酸化相关蛋白来调节细胞的生存和死亡。
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货号:MS3602 规格:100管/48样糖原磷酸化酶 b(Glycogen phosphorylase b,GPb)试剂盒说明书
微量法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。
GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。
GPb在一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。
测定原理:
GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。
添加一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
自备实验用品及仪器:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:100mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体16 mL×1瓶, 4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;
试剂三:粉剂×1支,-20℃保存;
试剂四:粉剂×1支, -20℃保存;
试剂五:粉剂×1支, -20℃保存;
样本的前处理:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零;
2、工作液的配制:临用前将试剂二转移到试剂一中混合溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃
保存,禁止反复冻融。
3、试剂三的配制:临用前在试剂三瓶中加入1mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后
-20℃保存,禁止反复冻融。
4、试剂四的配制:临用前在试剂四瓶中加入1mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后
-20℃保存,禁止反复冻融。
5、试剂五的配制:临用前在试剂五管中加入500μL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装
后-20℃保存,禁止反复冻融。
第1页,共2页
6、将工作液、试剂三、试剂四和试剂五置于37℃预热5分钟;
7、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、10μL试剂三、10μL试剂四、10μL蒸
馏水和160μL工作液,立即混匀,记录340nm处5min后的A1和10min后的吸光值A2,计算ΔAGPa=A2-A1。
8、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、10μL试剂三、10μL试剂四、10μL试
剂五和160μL工作液,立即混匀,记录340nm处5min后的A3和10min后的吸光值A4,计算ΔAGP=A4-A3。
注意:由于每个样本需要同时测一个GP(GPa和GPb)活性和一个GPa活性,因此本试剂盒100管测48个样本。
GPb活性计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位定义:每mg组织蛋白每分钟产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
GPb(nmol/min/mg prot)=[(ΔAGP-ΔAGPa)×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=643×(ΔAGP-ΔAGPa)÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位定义:每g组织每分钟产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
GPb(nmol/min/g 鲜重)=[(ΔAGP-ΔAGPa)×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总)÷T=643×(ΔAGP-ΔAGPa)÷W
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
b.用96孔板测定的计算公式如下:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位定义:每mg组织蛋白每分钟产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
GPb(nmol/min/mg prot)=[(ΔAGP-ΔAGPa)×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1286×(ΔAGP-ΔAGPa)÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位定义:每g组织每分钟产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
GPb(nmol/min/g 鲜重)=[(ΔAGP-ΔAGPa)×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总)÷T=1286×(ΔAGP-ΔAGPa)÷W
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
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