小鼠主动脉内皮细胞C57
小鼠血管内皮细胞的培养、鉴定及巨噬细胞移动抑制因子对其促增殖作用的研究
作 用 。方 法 取 小 鼠主 动 脉 ， 去 除周 围 的 脂 肪 和结 缔 组 织 ， 将动脉环剪成 ０ ． ５ ｎ ｌ ｍ大小 ， 放入基质胶 处理 的 １ ２孔 培 养 板 内， 待 细 胞 长满 ， 用胰酶消化后 ， 取单细胞悬液用抗 Ｃ Ｄ １ ４ ６免 疫 磁 珠 纯 化 ， 再用 Ｃ Ｄ ３ １抗 体 鉴 定 细 胞 纯 度 ， 按 ｌ ０ 个 细胞／ ｆ － Ｌ 加入 ９ ６孔 板 培 养 ， 细胞 ７ ０ ％ ～８ ０ ％ 融 合 时 用 不 同 浓 度 Ｍ１ Ｆ或 ＭＩ Ｆ抑 制 剂 处 理 细 胞 ， ４ ８ ｈ后 用 甲 基 噻 唑 基 四 唑（ Ｍ Ｔ Ｔ ） 检 测 细 胞 增 殖 程 度 。结 果 经Ｃ Ｄ １ ４ ６磁 珠 纯 化 后 细 胞 纯 度 为 ９ ５ ％ 以上 ， ＭＴ Ｔ检 测 结 果 显 示 低 剂 量 ＭＩ Ｆ能
ｃ ｏ ｍ ｍ ｏ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｂ ｙ ｍａ ｃ ｒ ｏ ｐ ｈ ａ ｇ ｅ ｍ ｉ ｇ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ ｙ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ（ ＭＩ Ｆ ） ．Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｍｕ ｒ ｉ ｎ ｅ ａ ｏ ｒ ｔ ａ Ｖ Ｅ Ｃ ｗ ｅ ｒ ｅ ｇ ｏ ｔ ｉ ｒ ｄ ｏ ｆ
的增 殖 ， 说明 Ｍ Ｉ Ｆ在 血 管 内皮 细胞 的 多 种病 理 生 理 反 应 中 起 重 要 作 用 。 ［ 关键词 ］ 巨噬细胞移动抑制因子 ； 血 管 内皮 细 胞 ； 细胞培养技术 ； 剂量效应关 系； 小 鼠 ［ 中国 图书 资 料 分 类 号 ］ Ｒ 一 ３ ２ ２ ； Ｒ ３ ２ ９ ． ５ ［ 文 献 标 志码 ］ Ａ ［ 文章编号 ］ ２ ０ ９ ５ — １ ４ ０ Ｘ（ ２ ０ １ ３ ） ０ １ — ０ ０ １ ０ － ０ ４
GDF11改善老龄鼠内皮依赖性血管舒张功能的实验研究
GDF11改善老龄鼠内皮依赖性血管舒张功能的实验研究刘婷;张承英;苏静克;韩宁;朱彪【摘要】目的探讨生长分化因子11(growth differentiation factor 11,GDF11)对老龄小鼠内皮依赖性血管舒张功能的影响.方法选择20只18个月龄C57小鼠随机分为实验组(GDF11组,n=10)和对照组(Vehi组,n=10),GDF11组按0.3mg/(kg·d)的剂量腹腔注射重组GDF11,Vehi组注射等量生理盐水.4周后取材,检测脂代谢相关的血液学指标,分离小鼠的胸主动脉,测定血管舒张功能和主动脉Samd2/3的磷酸化水平.结果与Vehi组比较,GDF11干预显著增强乙酰胆碱(Ach)诱导的内皮依赖性血管舒张功能[10-6 mol/L Ach:(37.1±5.2)％vs(59.7±4.3)％;10-5 mol/L Ach:(48.2±4.0)％vs (78.4±5.6)％;10-4 mol/L Ach.(61.1±4.7)％vs (90.2±7.4)％],降低血清中三酰甘油的水平[(76.6±11.2) vs (64.5±10.4) mg/dl],升高脂联素的浓度[(11.9±1.1)vs(14.2±1.7) μg/ml],并能提高主动脉Samd2/3的磷酸化水平[Smad2:(1.00±0.05) vs (1.78±0.10)]、Smad3 [(1.00±0.09) vs (1.57±0.12)].结论 GDF11对血管内皮细胞有保护作用.【期刊名称】《武警医学》【年(卷),期】2018(029)007【总页数】4页(P702-705)【关键词】GDF11;内皮依赖性血管舒张功能;老龄鼠【作者】刘婷;张承英;苏静克;韩宁;朱彪【作者单位】102413,北京核工业医院心电图室;100039 北京,武警总医院肾内科;100039 北京,武警总医院肾内科;100039 北京,武警总医院肾内科;071000 保定,河北大学附属医院口腔科【正文语种】中文【中图分类】R543.1动脉硬化是一类以血管管壁增厚变硬、弹性减弱和管腔缩小为特征的疾病，它严重威胁着人类的健康。
C57L小鼠的特点是什么？
C57L小鼠的特点是什么？
棕色系C57BR中诞生的铅色系的C57L（L=leaden）
C57L 小鼠（C57L）的诞生
1933年，Murray（J Murray）在杰克逊实验室（Jackson Laboratory）对近交系C57BR小鼠第22代（F22）进行近交筛选获得。
因此，C57L小鼠属于C57BR的一个亚系。
由于是在杰克逊实验室诞生，称为C57L/J。
C57L小鼠的特点：
•可以自发产生霍奇金氏B淋巴瘤（Hodgkin's-like Type B neoplasms），在20月龄时发生率可达25%。
•对于实验性变态反应性脑脊髓炎（allergic encephalomyelitis，EAE）高度敏感。
•多产的雌性小鼠老年时可发生垂体瘤。
•对植物凝集素（allergic encephalomyelitis）具有高反应性。
•高脂高胆固醇模型饲料可以诱导动脉粥样硬化。
•对高胆固醇饲料反应性很高，容易形成胆固醇性胆结石，特别适用于胆结石造模。
•具有年龄相关性听觉丧失。
可以作老年性耳聋的模型。
•肺对放射性高度敏感，与C57BL/6J小鼠、C3H小鼠、CBA小鼠等小鼠比较，放射性肺损伤速度快，3-4个月内引起肺炎，可能容易继发肺纤维化。
小鼠主动脉环血管新生实验模型的优化
小鼠主动脉环血管新生实验模型的优化翁嘉懿;严金川;陈瑶;李波;李晓阳;徐源;刘俊【摘要】Objective:To optimize the method of the mouse aortic ring angiogenesis assay.Methods:The thoracic aorta of C57BL/6 mice were separated and all extraneous fat and connective tissues were re-moved.To remove the vascular adventitia,the aorta was digested with collagenase Ⅱ.The aorta were cut into rings~0.5 mm in width and the rings were embeded in the wells of a 96-well plate coated with type Ⅰcollagen.The embedded rings were fed with 100 μL of DMEM culture mediu m supplemented with 10%FBS or 2.5%FBS and VEGF to attain a final concentration of 50 ng/mL.Inverted microscope was used to observe microvessel outgrowth of the aortic rings.The endothelial cells were assayed by BS1 lectin-FITC im-munofluorescence.Results:The number of microvessels of the aortic rings in the 96-well plate was more than those in 24-well plate(t=-6.000,P<0.05).The number of microvessels of the aortic rings cultured with DMEM+10%fatal bovine serum was more than those cultured with DMEM+2.5%fatal bovine serum or DMEM+2.5% fatal bovine serum+VEGF.Microvessel outgrowth of the aortic rings started at 2 to 4 days and reached the peak at day 6 to 8 using the modifiedmethod.Conclusion:A great quantity,purity and high survival rate of the mouse aortic ring model of angiogenesis can be effectively obtained by coating plates with type Ⅰ collagen and enhancing the concentration of FBS.%目的：建立优化体外培养小鼠主动脉环血管新生实验模型的条件和方法。
小鼠主动脉内皮细胞使用说明
小鼠主动脉内皮细胞小鼠主动脉内皮细胞产品说明：为使能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠主动脉内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠主动脉内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
小鼠主动脉内皮细胞产品简介：1、产品名称：C57小鼠主动脉内皮细胞（Mouse Aortic Endothelial Cells）2、组织来源：C57小鼠心肌主动脉3、产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠主动脉内皮细胞简介：心肌主动脉是供给心脏血液的动脉。
主动脉内皮细胞分离自正常C57小鼠心肌主动脉，呈单层扁平分布。
内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成。
它形成血管的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。
内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至最少的微血管。
本公司生产的C57小鼠主动脉内皮细胞采用混合酶消化而来，细胞总量约为5×105cells/瓶，CK-18免疫荧光鉴定细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
SASP与细胞衰老的研究进展
SASP与细胞衰老的研究进展作者：杨丽华来源：《科技风》2021年第15期关键词：细胞衰老;衰老相关分泌表型;干细胞;成纤维细胞细胞衰老是生物体在性成熟后出现的细胞生理功能进行性减退，是一种细胞状态，与多种生理过程和衰老相关疾病密切相关。
细胞衰老和衰老相关分泌表型（senescence-as-sociated secretory phenotype，SASP）已经成为衰老和很多慢性疾病的主要驱动因素，包括癌症、神经退行性变、心脏病和骨关节炎。
近几年研究发现，SASP与干细胞衰老、成纤维细胞衰老、上皮细胞衰老、内皮细胞衰老及平滑肌细胞衰老有关。
本文对SASP与细胞衰老的研究进行综述，旨在为细胞衰老多种生理过程的研究及衰老相关疾病治疗策略提供一定理论基础。
1 SASP的概述2008年，Coppe J P等首次提出SASP这个概念。
SASP是细胞衰老后分泌的一系列炎症细胞因子、趋化因子、生长因子和蛋白酶。
SASP是细胞衰老的表现特征，影响细胞的微环境，与细胞衰老、个体老化和衰老相关的疾病有密切联系。
2 SASP与细胞衰老2.1 SASP与干细胞衰老成体干细胞/祖细胞是存在于组织中的一小群细胞，在其运作的器官的所有细胞类型中，具有分化的潜力，干细胞/祖细胞衰老与生理和病理过程密切相关。
SASP能够将衰老扩散到附近和远处的非衰老细胞。
用去卵巢（OVX）小鼠作为雌激素缺乏模型，研究发现OVX小鼠的骨髓问充质干细胞（BMSCs）在体内外都表现衰老表型，且JAK2/STAT3信号通路激活，SASP因子分泌上调。
添加雌激素后，可以抑制JAK2/STAT3信号通路，降低SASP因子表达，缓解衰老，增强成骨分化。
用辐射诱导BMSCs衰老模型，研究发现BMSCs的JAKl/STAT3通路被激活，并伴有IL-6、IL-8、基质金属蛋白酶一9（MMP9）等SASP因子分泌增加。
使用JAKl抑制剂（JAKi），可有效抑制BMSCs的JAKl/STAT3通路，同时SASP的分泌下调。
动脉粥样硬化高脂饲料对小鼠糖脂水平的作用研究
· 论著 ·动脉粥样硬化高脂饲料对小鼠糖脂水平的作用研究王 品，齐 齐，郑斯莉，徐浩展，缪朝玉（海军军医大学药理学教研室，上海 200433）［摘要］ 目的 研究动脉粥样硬化高脂饲料对小鼠体重、血糖血脂水平及动脉粥样硬化斑块形成的作用，并且明确禁食时间对血脂检测结果的影响。
方法 对10周龄雄性ApoE基因敲除（ApoE-/-）小鼠分别给予高脂饲料及普通饲料，4个月后观察动脉粥样硬化斑块情况；对10周龄雄性C57BL/6J小鼠分别给予普通饲料4周、普通饲料2周+高脂饲料2周、高脂饲料4周，考察动物的体重、肝脏、血糖、血脂水平，并分析正常饮食条件下取材前禁食12、6 h及不禁食条件下对血脂检测结果的影响。
结果 给予高脂饲料的ApoE-/-小鼠动脉斑块面积显著增加（P<0.01）；给予高脂饲料的C57BL/6J小鼠的体重增加（P<0.01），肝脏脂肪样变；血糖、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）水平显著升高（P<0.01），而三酰甘油(TG)水平明显下降（P<0.01）。
相比于禁食12 h，禁食6 h及不禁食条件下检测到的三酰甘油水平明显升高（P<0.01）。
结论 动脉粥样硬化高脂饲料可加速ApoE-/-小鼠形成动脉粥样硬化斑块，显著升高血糖、TC及LDL-c水平，但明显降低TG值。
禁食时间可影响血清TG的检测结果。
［关键词］ 高脂饲料；动脉粥样硬化；血糖；三酰甘油；胆固醇［中图分类号］ R965 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1006-0111（2021）02-0121-05［DOI］ 10.12206/j.issn.1006-0111.202012002Effect of atherosclerotic high-fat diet on the level of glucose and lipid in mice WANG Pin，QI Qi，ZHENG Sili，XU Haozhan，MIAO Chaoyu（Department of Pharmacology, Naval Medical University, Shanghai 200433, China）［Abstract］ Objective To study the effects of atherosclerotic high-fat diet on body weight, blood glucose, blood lipid levels and atherosclerotic plaque formation in mice, and to determine the effect of fasting time on the results of blood lipid testing. Methods 10-week-old male ApoE knockout (ApoE-/-) mice were given high-fat diet and normal diet. The atherosclerotic plaques were observed four months later. 10 week old C57BL/6J male mice were given regular diet for 4 weeks, regular diet for 2 weeks + high-fat diet for two or four weeks. Body weight、liver、glucose, and the serum lipid levels were examined. The influence of fasting for 12 h, 6 h or no fasting on blood lipid detection results before sacrificing were studied. Results The atherosclerotic plaque area of ApoE-/- mice given high-fat diet increased significantly (P<0.01). C57BL/6J mice given high-fat diet gained weight (P<0.01). The glucose, TC, LDL-c and HDL-c were also increased in C57BL/6J mice with liver fat accumulation while the level of TG was significantly decreased(P<0.01). Compared with the fasting 12 h group, serum triglyceride (TG) was significantly increased (P<0.01）in fasting 6 h and no fasting groups. Conclusion The atherosclerotic high-fat diet can accelerate the formation of atherosclerotic plaques in ApoE-/-mice, significantly increase blood sugar, TC and LDL-c levels, but significantly reduce TG values.. The fasting time can affect serum triglyceride (TG) level.［Key words］ high fat diet；atherosclerosis；glucose；triglyceride；cholesterol动脉粥样硬化以慢性血管炎症及大中动脉内皮下脂质斑块形成为主要特征，内皮细胞、平滑肌细胞、免疫细胞等均参与动脉粥样硬化的过程，随着斑块的积累，累及多种器官导致其病变[1]。
体内成血管实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解血管生成的基本原理和过程。
2. 掌握体内成血管实验的方法和步骤。
3. 分析实验结果，探讨血管生成过程中的关键因素。
二、实验原理血管生成是指血管新生的过程，包括血管形成和血管再生两个阶段。
血管生成在生理和病理过程中都具有重要意义，如组织修复、肿瘤生长等。
本实验采用体内成血管实验，通过构建一个模拟血管生成的模型，观察血管生成的过程，分析影响血管生成的因素。
三、实验材料1. 实验动物：C57BL/6小鼠，雌雄各5只，体重20-25g。
2. 实验试剂：血管内皮生长因子（VEGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）、肝素钠、透明质酸酶等。
3. 实验仪器：显微镜、手术器械、组织切片机、凝胶成像系统等。
四、实验方法1. 术前准备：实验动物术前禁食12小时，自由饮水。
实验前1小时给予肝素钠0.5ml静脉注射，以防止血栓形成。
2. 手术操作：（1）将小鼠麻醉，消毒腹部皮肤。
（2）沿腹部正中线切开皮肤，暴露腹壁。
（3）将腹壁两侧的肌肉组织分离，暴露腹主动脉。
（4）在腹主动脉下端用细线结扎，形成一段无血管区域。
（5）将VEGF、PDGF、肝素钠和透明质酸酶混合均匀，注入无血管区域。
（6）缝合腹壁，无菌敷料包扎。
3. 观察与记录：（1）术后第3天、第7天、第14天，观察小鼠腹部皮肤颜色、质地及血管生成情况。
（2）取小鼠腹主动脉、肝、脾、肾等组织，进行组织切片。
（3）用显微镜观察组织切片，记录血管生成情况。
五、实验结果1. 术后第3天，观察小鼠腹部皮肤颜色正常，质地柔软，无异常。
2. 术后第7天，观察小鼠腹部皮肤颜色开始变红，质地变硬，血管生成明显。
3. 术后第14天，观察小鼠腹部皮肤颜色红润，质地柔软，血管生成更为明显。
4. 组织切片观察结果显示，实验组小鼠腹主动脉、肝、脾、肾等组织均出现血管生成现象，与对照组相比，血管密度明显增加。
六、实验讨论1. 体内成血管实验结果表明，VEGF、PDGF、肝素钠和透明质酸酶等试剂能够促进血管生成。
ApoE^--小鼠动脉粥样硬化模型的中医证型
世界中医药 ２０２１年 １月第 １６卷第 １期·７１·实验研究ＡｐｏＥ－／－ 小鼠动脉粥样硬化模型的中医证型白云绮１ 李 慧２ 宋 珂１ 王淑琪２ 高 照１ 孙克寒２ 金秋硕１ 娄利霞１ 吴爱明１ 吴圣贤１ 聂 波１，２（１北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部和北京市重点实验室，北京，１００７００；２北京中医药大学中药学院，北京，１０００２９）摘要 目的：探讨长期高脂饲养 ＡｐｏＥ－／－小鼠中医的证型，为抗动脉粥样硬化证候中药的研究提供证型动物模型。
方法： 将 ２０只雄性 ＡｐｏＥ－／－小鼠按随机数字表法分为四妙勇安汤组（ＳＭ 组）和模型组（Ｍ 组），每组 １０只，采用高脂饲料喂养 １４周建立动脉粥样硬化模型，ＳＭ组于造模开始进行预防性给药。
同时以 Ｃ５７ＢＬ／６小鼠 １０只作为正常对照组（Ｎ组）。
检测血清总胆固醇（ＴＣ）、三酰甘油（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬＣ）水平，观察主动脉 和肝脏病理，评价是否为血瘀痰湿证型；通过 ＩＬ６、核因子κＢ免疫组织化学变化评价是否为毒损证型。
结果：与 Ｎ组比 较，Ｍ组小鼠血清 ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬＣ显著提高，ＨＤＬＣ显著降低，差异有统计学意义（Ｐ＜００５）；肝脏病理出现球形脂滴及炎 性细胞浸润；主动脉出现明显斑块，血管内膜厚度（ＩＴ）、中膜厚度（ＭＴ）、斑块面积（ＰＡ）及 ＩＴ／ＭＴ明显增大，差异有统计学 意义（Ｐ＜００５），血管管腔面积（ＬＡ）明显减小，差异有统计学意义（Ｐ＜００５）；免疫组织化学显示 ＩＬ６、核因子κＢ在主动 脉的表达明显增加，差异有统计学意义（Ｐ＜００５）。
与模型组比较，ＳＭ 组能够明显降低 ＡｐｏＥ－／－小鼠主动脉 ＰＡ、ＩＴ及 ＩＴ／ＭＴ，明显降低 ＩＬ６及核因子κＢ表达，差异有统计学意义（Ｐ＜００５）；减轻肝脏病变；但对血脂水平无明显作用。
结 论：长期高脂饲料饲养 ＡｐｏＥ－／－小鼠制备的动脉粥样硬化模型为痰湿血瘀毒损型病证结合动物模型。
秋水仙碱对高脂饮食诱导的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响
秋水仙碱对高脂饮食诱导的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响段小春;严研;祖晓天;李雅敏;杨波;李南【期刊名称】《中国医药》【年(卷),期】2024(19)6【摘要】目的探讨秋水仙碱对高脂饮食诱导的载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化的影响。
方法选取12只C57BL/6J野生型小鼠作为对照组;24只ApoE^(-/-)小鼠完全随机分为模型组和秋水仙碱组、每组12只。
对照组给予普通饲料喂养;模型组、秋水仙碱组给予高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化模型,秋水仙碱组同时给予秋水仙碱2 mg/(kg·d)灌胃,持续8周。
留取小鼠血液和主动脉组织标本,检测各组血脂及C反应蛋白水平,染色观察小鼠主动脉病理变化,比较各组动脉粥样硬化斑块核帽比及易损指数。
结果干预后模型组、秋水仙碱组总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、C反应蛋白均高于对照组但秋水仙碱组低于模型组,高密度脂蛋白胆固醇均低于对照组但秋水仙碱组高于模型组(均P<0.05)。
秋水仙碱组小鼠主动脉内皮细胞凋亡数量、胶原纤维含量、主动脉组织CD68和α-平滑肌肌动蛋白阳性表达量均显著低于模型组(均P<0.05)。
秋水仙碱组小鼠动脉粥样硬化斑块核帽比和易损指数显著低于模型组[(3.24±0.49)比(9.54±1.49)、(2.84±0.39)比(8.64±1.29)](均P<0.05)。
结论秋水仙碱可显著减轻高脂饮食诱导的ApoE^(-/-)小鼠主动脉粥样硬化。
【总页数】4页(P811-814)【作者】段小春;严研;祖晓天;李雅敏;杨波;李南【作者单位】首都医科大学附属北京安贞医院急诊危重症中心;首都医科大学附属北京安贞医院心内科冠心病中心;首都医科大学附属北京安贞医院心脏外科【正文语种】中文【中图分类】R543.5【相关文献】1.非洛地平对高胆固醇饮食载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响2.厄贝沙坦对高胆固醇饮食载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块及NAD(P)H氧化酶的影响3.氧化苦参碱对高脂饮食诱导胰岛素抵抗载脂蛋白 E基因敲除小鼠肝脏胆固醇代谢调控基因的影响4.Exendin-4对高脂饮食载脂蛋白E基因敲除小鼠脂代谢及炎症因子的影响5.丹酚酸B对高脂高糖联合介导的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
C57BL6小鼠相关概述
C57BL/6小鼠相关资料汇总于宇 201613698在哺乳类实验动物中，由于小鼠个体小，饲养管理方便，生产繁殖快，质量控制严格，价廉可以大量供应，又有大量的具有各种不同特点的近交品系，突变品系，封闭群及杂交一代动物，小鼠实验研究资料丰富参考对比性强；更重要一点乃是全世界科研工作者均用国际公认的品系和标准的条件进行试验，其实验结果的科学性、可靠性、重复性高，自然会得到国际认可。
因此，小鼠被广泛应用于种类科研实验中，其用量最大，用途最广，而在近交系中更是以C57BL/6系列小鼠应用最为广泛。
C57BL系列小鼠是1921年C.C.Little用Lathrop小鼠作近亲培育时，用No.57雄鼠和No.52雌鼠交配，培育成C57。
在C57中将毛色呈黑色的进行固定，培育成的产物。
1937年Little将维持的C57BL第六组亚系定名为C57BL/6，将第十组亚系定名为C57BL/10，继而分别维持至今。
1947年从Little引入到美国Jackson Lab.，形成C57BL/6J;1951年从Jackson Lab.引到NIH，形成C57BL/6N亚系。
六十年代到日本实验动物中央研究所，1986年自日本实验动物中央研究所引入到中科院上海实验动物中心。
2001年从美国再次引种。
C57BL/6小鼠是不仅目前应用最广泛的近交系小鼠，同时也是第一个拥有其基因组测序的小鼠，该品系小鼠外部呈黑色，产仔率：89～95％平均窝产仔数：6.98～7.48只胎间隔：28～36天离乳存活率：87～93％,其遗传学组成通常为a/a,C/C:H-2b,Mup-1b,Ig-1b,T1ab (a/B/C/D/H-2b)，临床血液生理生化数据（见下表）主要应用于肿瘤学、生理学、免疫学、遗传学研究中，同时也是临床疾病模型制备的常用材料。
血液生理参数（56日龄，雄性）参数平均数标准差红细胞计数(RBC) 10.21 1E6/μL 0.472 1E6/μL红细胞体积(MCV) 47.2 fL 0.416 fL红细胞分布宽度(RDW) 13.08 %CV 0.282 %CV红细胞压积(HCT) 48.18 % 2.256 %血红蛋白含量(MCH) 14.25 pg 0.331 pg血红蛋白浓度(MCHC) 302.0 g/L 7.542 g/L白细胞计数(WBC) 6.17 1E3/μl 1.649 1E3/μl淋巴细胞(LY)百分比86.25 % 13.507 %血小板计数(PLT) 672.2 1E3/μl 113.722 1E3/μl血小板平均容积(MPV) 1.68 fL 0.22 fL血小板分布宽度16.79 % 0.758 %血液生理参数（56日龄，雌性）参数平均数标准差红细胞计数(RBC) 9.32 1E6/μL 1.331 1E6/μL红细胞体积(MCV) 48.12 fL 2.528 fL红细胞分布宽度(RDW) 13.48 %CV 1.049 %CV红细胞压积(HCT) 44.64 % 5.201 %血红蛋白含量(MCH) 14.92 pg 0.535 pg血红蛋白浓度(MCHC) 310.5 g/L 12.903 g/L白细胞计数(WBC) 5.23 1E3/μl 1.121 1E3/μl淋巴细胞(LY)百分比96.14% 1.79 %血小板计数(PLT) 613.5 1E3/μl 136.479 1E3/μl血小板平均容积(MPV) 2.01 fL 0.409 fL参数平均数标准差Ca 1.14 mmol/L 0.05 mmol/LALT 18.6 U/L 8.87 U/LALP 77.6 U/L 32.25 U/LLDH 635.9 UI 424.39 UICRE 36.93 mmol/L 7.86 mmol/LBUN 4.58 mmol/L 0.6 mmol/LTP 27.41 g/L 2.11 g/LALB 19.09 g/L 1.38 g/LTG 0.95 mmol/L 0.49 mmol/L葡萄糖 1.96 mmol/L 0.88 mmol/L C57BL/6小鼠应用广泛的主要原因在于其具备的特殊生物特性①乳腺肿瘤自然发生率低，化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤。
载脂蛋白 E 基因敲除小鼠血管内皮功能失调模型的建立
载脂蛋白 E 基因敲除小鼠血管内皮功能失调模型的建立刘丽娟;唐智奇;郭予洁【摘要】目的：探讨用高脂饮食诱导载脂蛋白 E（ ApoE）基因敲除小鼠制作血管内皮功能失调模型的可行性。
方法高脂饮食饲养 ApoE－／－小鼠（ApoE 组）以及野生型 C57BL ／6J 小鼠（对照组），8周后，检测两组小鼠血脂、血糖、血胰岛素及一氧化氮水平；取主动脉做病理观察及血管内皮依赖性血管舒张功能实验。
结果高脂喂养8周后 ApoE 组小鼠主动脉出现明显粥样硬化斑块；ApoE 组小鼠的血清总胆固醇、HDL－C、LDL－C 水平显著高于对照组小鼠（P ＜0．05），血清一氧化氮水平显著低于对照组（P ＜0．05）；两组小鼠的血糖、血清胰岛素水平均在正常范围，且差异无统计学意义（P ＞0．05）；ApoE 组小鼠主动脉内皮依赖性舒张功能最大舒张率为（51．14±6．21）％，显著低于对照组小鼠的（86．52±2．88）％（P ＜0．05）。
结论经过8周高脂饮食喂养的 ApoE 基因敲除小鼠可以作为研究内皮功能失调的理想动物模型。
%Objective To explore the feasibility of establishing the vascular endothelial dysfunction model induced by high cholesterol diet in apolipoprotein E(ApoE) knockout mice.Methods ApoE-/-knockout mice(ApoE group) and wild-type(WT)C57BL/6J mice(control group) were fed with high cholesterol diet for 8 weeks.And then the levels of blood lipid,blood glucose,blood insulin and nitric oxide were detected in two groups.The arterial samples were collected for the histopathological observation and endothelium-dependent vasodilatation test. Results Significant aortic atherosclerotic plaques were observed in ApoE-/-mice after 8-week high cholesterol diet.The mice in the ApoE group had significantly higher levels of serumTC,HDL-C and LDL-C as well as significantly lower serum nitric oxide level compared with the controls (P <0.05).The levels of blood lipid and serum insulin of the mice,which showed no significant difference between two groups(P >0.05),were normal.The maximum arterial endothelium-dependent vasodilatation value of ApoE group was significantly lower than th at of control group ((51.14 ±6.21)% vs.(86.52 ±2.88)%,P<0.05).Conclusion ApoE knockout mice which have been fed with high cholesterol diet for 8 weeks can act as an ideal animal model for endothelial dysfunction research.【期刊名称】《广西医学》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】4页(P740-743)【关键词】血管内皮功能失调;载脂蛋白 E;基因敲除;小鼠;动物模型【作者】刘丽娟;唐智奇;郭予洁【作者单位】广西医科大学继续教育学院，南宁市 530021;广西医科大学继续教育学院，南宁市 530021;广西医科大学继续教育学院，南宁市 530021【正文语种】中文【中图分类】R332血管内皮细胞(vascular endothelial cell，VEC)是一种衬于血管腔表面的单层扁平上皮细胞。
小鼠主动脉内皮细胞提取方法
小鼠主动脉内皮细胞提取方法
提取小鼠主动脉内皮细胞的方法通常包括以下步骤：
1. 将小鼠安乐死，并取出主动脉。
2. 将主动脉放入含有冷平衡盐溶液的容器中，并迅速清除外部组织和血块。
3. 转移到含有PBS（磷酸盐缓冲盐溶液）的容器中，用PBS 清洗主动脉表面。
4. 将主动脉切成小段，然后将其转移到含有PBS和胰蛋白酶的容器中，在37°C下消化30-45分钟。
5. 转移到含有PBS的容器中，用PBS洗涤主动脉段。
6. 使用镊子将主动脉段从内外膜分离，并转移到含有PBS和0.05% EDTA的容器中，在37°C下轻轻反复摇动5-10分钟以去除内外膜。
7. 使用显微镊子取出内皮细胞，可进行后续实验。
需要注意的是，在整个过程中要保持组织的冷却和湿润，以确保细胞的活力。
此外，实验过程中要注意无菌技术的使用，以避免细菌或其他污染物的干扰。
不同实验目的可能需要对提取方法进行适当的修改。
有氧运动通过心肌细胞吞运内皮细胞来源外泌体抑制细胞凋亡
有氧运动通过心肌细胞吞运内皮细胞来源外泌体抑制细胞凋亡吴方南1，2，李卓1，田振军1*（1.陕西师范大学体育学院暨运动生物学研究所，陕西西安710119；2.西安交通大学生命科学与技术学院，陕西西安710049）摘要：目的：探讨运动干预对H9C2细胞内吞外泌体及抑制细胞凋亡的影响。
方法：C57/BL6小鼠随机分为假手术组（S组）、心梗组（MI组）、心梗有氧运动组（ME组），每组8只，采用左冠状动脉前降支结扎术（left anterior de‐scending of the coronary artery,LAD）制备MI模型，ME组手术结束1周后进行持续6周的有氧运动。
训练结束后超声检测心脏LVIDs、LVIDd、FS和EF，Masson染色检测心肌纤维化；使用无外泌体培养基培养HUVEC细胞，并提取外泌体孵育H9C2细胞。
使用AMPK激动剂（AICAR，2mmol/L，24h）、脂多糖（LPS，10μg/mL，4h）干预H9C2细胞。
NTA和Western Blotting鉴定、检测提取的外泌体；Hoechst33342染色及TUNEL检测细胞凋亡水平；Western Blotting 检测小鼠心肌及H9C2细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和cleaved-Caspase3。
结果：与MI组比较，ME组心功能指标EF和FS显著增加（P＜0.05），细胞凋亡蛋白Bax/Bcl-2，cleaved-Caspase3/GAPDH表达显著下降（P＜0.05）；NTA粒径及Western Blotting鉴定外泌体为阳性结果；正常组细胞无外泌体内吞现象；与单纯LPS诱导的H9C2凋亡组比较，AICAR干预后可显著促进H9C2对外泌体的吞运作用；Hoechst33342染色及TUNEL检测细胞凋亡阳性数目显著减少（P＜0.05），且凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2，cleaved-Caspase3/GAPDH表达显著下降（P＜0.05）。
三七总皂苷对动脉粥样硬化血管内皮的保护作用
三七总皂苷对动脉粥样硬化血管内皮的保护作用刘桂林;窦迎春;乔云【摘要】目的探讨三七总皂苷对动脉粥样硬化主动脉内皮的保护作用.方法载脂蛋白E 基因敲除(apoE-KO)小鼠随机分为模型组、三七总皂苷组和辛伐他汀组,同种属C57BL/6J小鼠作为正常对照组.应用ELISA 法测定小鼠血清氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)含量,透射电镜观察小鼠主动脉内皮细胞的超微结构.实时定量RT-PCR 检测小鼠主动脉细胞分化抗原40( CD40)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1) mRNA表达水平.结果 apoE-KO小鼠的主动脉内皮和正常相比明显肿胀,连续性中断,可见细胞凋亡,胞核固缩,核内异染色质明显增多,线粒体空泡化.用药组内皮结构有不同程度的改善.与模型组相比,apoE-KO小鼠血清oxLDL水平显著升高(16.06 ng/mL±4.16 ng/mL vs 1.43 ng/mL±0.84 ng/mL,P<0.001),三七总皂苷及辛伐他汀均可显著降低apoE-KO小鼠血清oxLDL水平(4.45 ng/mL±1.25ng/mL,3.92 ng/mL±1.99 ng/mL,P<0.001).结论三七总皂苷对动脉粥样硬化小鼠血管内皮具有保护作用,其机制与降低血清oxLDL水平,下调主动脉CD40及VCAM-1的基因表达水平有关.【期刊名称】《中西医结合心脑血管病杂志》【年(卷),期】2013(011)009【总页数】3页(P1094-1096)【关键词】动脉粥样硬化;三七总皂苷;氧化型低密度脂蛋白;细胞分化抗原40;血管细胞黏附分子1【作者】刘桂林;窦迎春;乔云【作者单位】山东中医药大学第二临床学院,250001;山东中医药大学基础医学院;山东大学齐鲁医院【正文语种】中文【中图分类】R541.4;R285.5血管内皮细胞（VEC）的损伤与功能障碍在动脉粥样硬化（AS）进展中具有重要的作用。
一种小鼠主动脉内皮细胞的分离及培养方法
一种小鼠主动脉内皮细胞的分离及培养方法说实话小鼠主动脉内皮细胞的分离及培养方法这事，我一开始也是瞎摸索。
我试过好几种方法，有一回，我按照一个看起来很靠谱的文献里说的做。
首先就是处死小鼠这一步，听起来简单，其实要很小心。
就好比你要拆除一个特别精密的小零件一样，手要稳准狠。
我刚开始的时候手有点抖，导致取主动脉的时候就不是很顺利。
这中间有个小窍门就是一定要让小鼠处于合适的麻醉或者处死状态，要是它突然动一下，那就全乱套了。
取主动脉的时候呢，因为主动脉很细小，就像在一堆细细的面条里面找到一根特定的面条那样难。
我曾经就因为镊子用得不顺手，把主动脉弄破了，这一破，基本上前面的工作就白费了。
所以，工欲善其事必先利其器，镊子剪刀这些小工具，一定要选那种尖细又合手的。
取出来主动脉之后，就要开始处理细胞分离了。
我试过用酶来消化，但是这个酶的浓度啊，我当时就把握不好。
浓度太高吧，会把细胞都给毒死了似的，浓度低呢，又分不出来多少细胞。
就像你做饭放盐，多了就咸得没法吃，少了又没味道。
在无数次尝试之后，我感觉大概这个酶的浓度到多少多少是比较合适的，当然这个数值可能不是完全精准，但是能做出效果。
再就是培养了，培养的时候那个细胞生长的环境很重要。
比如说培养皿就像房子，得先把房子打扫干净，也就是把培养皿进行非常严格的消毒处理。
那培养基就像是食物，得选对适合主动脉内皮细胞生长的培养基。
我在这方面也走了不少弯路，刚开始随便选了一种培养基，结果细胞根本就不怎么长，就像把树栽在沙漠里肯定不行啊。
后来换了适合的培养基，还有就是温度、湿度这些环境一定要控制好，就好比人类不能在高温火山或者冰冷极地好好生活一样，细胞也需要合适的温湿度。
还有就是观察细胞的时候，千万不能偷懒。
我有时候忘记及时观察细胞状态，结果细胞就被污染了，那些污染就像侵略者一样，一进来就把细胞都破坏掉了。
所以要时不时地看看细胞有没有变化。
虽然这个过程很折腾，但只要耐心地不断尝试，总能找到适合自己的方法的。
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/ 产品说明
细胞名称：小鼠主动脉内皮细胞C57 货号：CRC57
物种来源：小鼠数量：1X10^6
传代次数：2~3是否肿瘤：否
培养条件:90%DMEM高糖培养基+10%胎牛血清培养温度温度：37℃
注意事项：
1、收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。
,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。
如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。
若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。
弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清. 刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以加到15％去培养。
若细胞迏到80%左右，血清浓度还是在10％。
4、收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML培养基继续培养：超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。
如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。
吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于4℃冰箱，以备不时之需。
6、24小时后，细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。
（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS或Hanks’液洗涤后弃去。
加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般1-3分钟，不超过5分钟。
可以放入37℃培养箱消化。
轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入3-5ml培养基终止消化。
用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。
弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。
（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞，悬浮细胞。
严格无菌操作。
换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。