实验:种子活力的快速测定——TTC法课件

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种子生活力测定PPT

种子生活力测定PPT
TTC)无色溶液作为指示剂,当其被活种子组织吸
收后,接受活细胞脱氢酶中的氢,被还原成一种
红色的、稳定的、不会扩散的和不溶于水的三苯
甲基臜。根据胚和胚乳组织的染色反应来区分种
子有无生活力。
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【仪器与用具】
玉米种子;单面刀片;放大镜;培养皿等。
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【试 剂】
1.磷酸缓冲液:。 2.0.1%TTC:采用磷酸缓冲液来配制。即 在上述磷酸缓冲液中溶解准确数量的四唑 盐类,配制成所需浓度的TTC溶液。如每 1000mL缓冲液中溶入1g四唑盐类即得1% 浓度的溶液。
【实验方法】
1.数取试样
从净种子中随机数取至少200粒
种子,每个重复100粒或少于100粒。
期的休眠种子。
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2.预措预湿
预措是在种子预湿前除去种子的外部附 属物(包括剥去果壳),或在种子非要害 部位弄破种皮,如水稻脱去内外稃,刺破 硬实等。
3.染色前的准备
种子生活力的四唑测定
唐涛爱
化垭农职业中学
【实验目的】
种子生活力是种子质量的重要指标。种子 生活力是指种子生命的有无,是种子发芽的潜 在能力指标。具有休眠特性的和要快速预测种 子发芽能力的种子都要进行生活力测定。学会 四唑测定种子生活力的方法。
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【原

理】
利用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(简称四唑,
根据种子构造和胚的位置进行处理。如 禾谷种子沿胚纵切,使胚的主要构造和活 的营养组织暴露出来,便可使四唑溶液快
速充分地渗入,供观察鉴定。
4.染色
将准备好的种子样品放入染色盘(培养 皿)中,加入四唑溶液完全淹没种子。已 经切开胚的种子用0.1%~0.5%的溶液,不 切开胚的种子用1%的溶液。达到规定时间 或已明显染色时,倒去四唑溶液,用清水 清洗。

植物学实验植物种子生命力的快速测定ppt课件

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1,TTC法
浸种24h的玉米种子25粒,沿中心线纵 切。
取25个半粒置于培养皿中,倒入0.5%的 TTC溶液,浸置半个小时。
倒出TTC溶液,以自来水清洗种子,观 察胚着色情况。
统计活种子的百分率。
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
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一、实验原理
种子生命力: 种子萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。
常用方法: 发芽实验; 浮力测定; 荧光法与纸上荧光法; 电导率法等。
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
3,BTB法
配制1%的BTB琼脂凝胶,使用前溶解, 倒平板,室温冷却使之凝固。
将浸种24h的小麦胚朝下整齐的插入凝 胶中,间距1cm。
室温放置1h,观察种子周围凝胶的变色 情况。
统计活种子的百分率。
2,红墨水法
取玉米种子的另25个半粒,置于培养皿 中,倒入5%的红墨水,浸置15min。
倒出红墨水,以自来水清洗种子,观察 胚着色情况。 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
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二、实验步骤
TTC法; 红墨水法; BTB法。
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种子生活力的测定PPT课件

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• 生活力Seed viability:种子发芽的潜在能力 或种胚具有的生活力
种子生活力测定的必要性:
• 1、休眠种子必须进行生活力测定: • 2、快速预测种子发芽能力
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一、实验目的 1.了解四唑染色及红墨水染色测定种子生活力的原理和方法。 2.掌握判别种子有无生活力的鉴定标准。
谢谢您的观看!
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四、实验过程
1 .小麦、玉米种子四唑染色测定 ⑴ 浸种:软化种子,活化有关酶 ⑵ 样品准备
小麦: 200n×(2-4) 沿胚纵切 20n 玉米: 200n×(2-4) 沿胚纵切 50n×2 ⑶ 染色 浸入0.1%四唑溶液中,35℃ 0.5-1h
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⑷ 观察鉴定 小麦:观察切片、胚和盾片 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②盾片上下任一端1/3不染色 ③胚根大部分不染色,但不定根原基体 盾片中央有不染色组织,表明受到热损伤 玉米:观察切面 鉴定 ①胚的主要构造染成正常鲜红色 ②胚根 1/3不染色 ③盾片上下1/3不染色 盾片中央有不染色组织,表明受到热损伤
二、材料和用具 1. 种子材料:小麦、玉米、大豆 2. 试剂:0.1%四唑溶液、5%红墨水 3. 用具:镊子、刀片、吸水纸、烧杯、放大镜
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三、实验原理 1 .四唑染色测定原理 四唑盐类的无色溶液是一种可被种子组织吸收的指示剂,参与活细胞的还原过程 DPNH2+TTC→DPN+TTCH+HCL (辅酶ⅠH2) (四唑)(辅酶Ⅰ)(甲 月替)(氯化氢) 2 .红墨水染色测定原理 种子活细胞的细胞膜均能选择性地吸收外界有用物质,而死亡的细胞则丧失了这一 能力。有生活力的种子,胚部细胞不让染料进入,因而不容易被染色;而丧失生活力 的种子,胚部细胞丧失了选择透过性,染料可以自由的进入到细胞内,使胚部染色。

种子生活力测定PPT课件

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任务4 冲洗与观察鉴定:染色后的种子用清水冲洗种子 至少2次,直至洗液无红色为止(注意要缓慢冲洗,不 要让水流直接冲到种子上),观察种胚被染色的情况 (可借助放大镜查看),凡种胚不着色的为有生活力 的种子,种胚和胚乳都被染成相同红色的就是无生活 力的种子。

无生活力的种子
生活Leabharlann 力的种子
.
9
任务5 计算: 种子生活力(%)=(有生活力的种子数/检测种子数)
模块三 快速测定种子生活力
➢ 红墨水染色法
.
1
种子生活力:是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生 命力。没有生活力的种子是死亡的种子,不能萌发。
.
2
项目一. 实验目的 ➢ 掌握快速测定种子发芽率的方法。 ➢ 能正确计算发芽率。
项目二. 实验方法 ➢ 红墨水染色法。
.
3
项目三. 实验原理
➢有生活力种子胚细胞的原生质膜具有半透性,有选择吸 收外界物质的能力,一般染料不能进入细胞内,胚部不 染色。
×100%(保留整数) 先计算每份实验的种子生活力。再计算其平均生活力。
.
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项目六. 结果报告
姓名:
送检单位 作物名称
种子生活力测定的记载表
产地 送检样品重(g)
品种名称
重复


检验粒数
种子 生活 力测 定
有生活力种子数 种子生活力


平均种子生活力
. 填表日期:
年月日
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项目七. 注意事项
1)切取时,一定要沿胚的中线切开; 2)染色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中; 3)染色时间不足或太长,否则不易区分; 4)冲洗次数不够,冲洗时把麦粒冲到废液杯中; 5)鉴别错误,把活种子看着死种子,把死种子看着活种子; 6)计算结果4组平均生活力保留整数。

植物种子生命力的快速测定

植物种子生命力的快速测定

实验36 植物种子生‎命力的快速‎测定.TTC法一、原理TTC(2,3,5-三苯基氯化‎四氮唑)的氧化态是‎无色的,可被氢还原‎成不溶性的‎红色三苯甲‎月替(TTF)。

应用TTC‎的水溶液浸‎泡种子,使之渗入种‎胚的细胞内‎,如果种胚具‎有生命力,其中的脱氢‎酶就可以将‎T TC作为‎受氢体使之‎还原成为三‎苯甲月替而‎呈红色,如果种胚死‎亡便不能染‎色,种胚生命力‎衰退或部分‎丧失生活力‎则染色较浅‎或局部被染‎色,因此,可以根据种‎胚染色的部‎位或染色的‎深浅程度来‎鉴定种子的‎生命力。

二、材料、仪器设备及‎试剂(一)材料:水稻、小麦、玉米、棉花、油菜等待测‎种子。

(二)仪器设备:1. 小烧杯;2. 刀片;3. 镊子;4. 温箱;(三)试剂:0.12%~0.5%TTC溶液‎(TTC可直‎接溶于水,溶于水后,呈中性,pH7±0.5,不宜久藏,应随用随配‎)。

三、实验步骤1. 将种子用温‎水(约30℃)浸泡2~6h,使种子充分‎吸胀。

2. 随机取种子‎100粒,水稻种子要‎去壳,豆类种子要‎去皮,然后沿种胚‎中央准确切‎开,取其一半备‎用。

3. 将准备好的‎种子浸于T‎T C试剂中‎,于恒温箱(30~35℃)中保温30‎m in。

4. 染色结束后‎要立即进行‎鉴定,因放久会褪‎色。

倒出TTC‎溶液,再用清水将‎种子冲洗1‎~2次,观察种胚被‎染色的情况‎,凡种胚全部‎或大部分被‎染成红色的‎即为具有生‎命力的种子‎。

种胚不被染‎色的为死种‎子,如果种胚中‎非关键性部‎位(如子叶的一‎部分)被染色,而胚根或胚‎芽的尖端不‎染色都属于‎不能正常发‎芽的种子Ⅱ.染料染色法‎原理有生命力种‎子胚细胞的‎原生质膜具‎有半透性,有选择吸收‎外界物质的‎能力,一般染料不‎能进入细胞‎内,胚部不染色‎。

而丧失生命‎力的种子,其胚部细胞‎原生质膜丧‎失了选择吸‎收能力,染料可自由‎进入细胞内‎使胚部染色‎。

实验23种子生活力的快速测定

实验23种子生活力的快速测定

实验23种子生活力的快速测定种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。

它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据,与播种时的用种量直接有关。

测定种子生活力常采用发芽实验,即在适宜条件下,让种子吸水萌发,在规定天数内统计发芽的种子占供试种子的百分数。

但是常规方法(直接发芽)测定种子生活力所需时间较长,特别是有时为了应急需要,没有足够的时间来测定发芽率,遇到休眠种子也无法知道。

而采用以下的化学方法,则能在较短时间内获得结果。

Ⅰ 氯化三苯基四氮唑法( TTC 法)一、原理凡有生命活力的种子胚部,在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,在呼吸代谢途径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的 TTC 还原为红色、不溶性三苯基甲( TTF ),而且种子的生活力越强,代谢活动越旺盛,被染成红色的程度越深。

死亡的种子由于没有呼吸作用,因而不会将TTC 还原为红色。

种胚生活力衰退或部分丧失生活力,则染色较浅或局部被染色。

因此,可以根据种胚染色的部位以及染色的深浅程度来判定种子的生活力。

二、实验材料、试剂与仪器设备(一)实验材料玉米、小麦等种子。

(二)试剂0.5% TTC 溶液:称取 0.5 gTTC 放在烧杯中,加入少许 95% 乙醇使其溶解,然后用蒸馏水稀释至 100 mL 。

溶液避光保存,若变红色,即不能再用。

(三)仪器设备恒温箱,培养皿,刀片,烧杯,镊子,天平。

三、实验步骤1. 浸种将待测种子在 30 ~35 ℃温水中浸种(大麦、小麦 6 小时,玉米 5 小时左右),以增强种胚的呼吸作用。

2. 显色取吸胀的种子 200 粒,用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半,将其中的一半置于 2 只培养皿中,每皿 100 个半粒,加入适量的 0.5% TTC 溶液,以覆盖种子为度。

然后置于30 ℃恒温箱中 1 h 。

观察结果,凡胚被染为红色的是活种子。

将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚,作同样染色处理,作为对照观察。

课件:实验六 种子活力的快速测定

课件:实验六 种子活力的快速测定

BTB显色: pH6.0
pH7.1
pH7.6
二.实验材料
小麦种子(随机), 培养皿,镊子,刀片,玻璃板, 培养箱(30℃)试剂:0.5%TTC,红墨水,BTB琼脂。
三 实验步骤
(一).TTC法和红墨水法
• 1.取小麦种子20粒。沿胚中线成二半,每半均有胚,分别置于2个培养 皿中。
• 2.其中一只培养皿加0.5%TTC,约5ML,培养箱30℃放置0.5h,倒出TTC液, 冲洗1-2次,观察染色情况:3种(死,活,不正常),计算活种子的百 分数。
实验六 种子活力的快速测定
一 实验原理
1. TTC法:凡有生命活力的种子胚部,在呼吸作用过程中都有 氧化还原反应,在呼吸代谢途径中由脱氢酶催化所脱下来 的氢可以将无色的 TTC 还原为红色、不溶性TTF ,而且种 子的生活力越强,代谢活动越旺盛,被染成红色的程度越 深。死亡的种子由于没有呼吸作用,因而不会将 TTC 还原 为红色。种胚生活力衰退或部分丧失生活力,则染色较浅 或局部被染色。因此,可以根据种胚染色的部位以及染色 的深浅程度来判定种子的生活力。
2.红墨水法:有生活力的种子其胚细胞的原生 质具有半透性,有选择吸收外界物质能力, 某些染料如红墨水中的大红 G 不能进入细胞 内,胚部不着色。而丧失生活力的种子其胚 部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力,染 料进入细胞内使胚部染色,所以可根据种子 胚部是否染色来判断种子的生活力。
3.BTB法:凡活细胞必有呼吸作用,吸收空气中的 O 2 放 出 CO 2 。 CO 2 溶于水成为 H 2 CO 3 , H 2 CO 3 解离 成 H + 和 HCO 3 ˉ,使得种胚周围环境的酸度增加, 可用溴麝香草酚蓝( BTB )来测定酸度的改变。 BTB 的变色范围为 pH6.0 ~ 7.6 ,酸性呈黄色,碱性呈蓝 色,中间经过绿色(变色点为 pH 7.1 )。色泽差异显 著,易于观察。

植物生理学实验6种子生活力的测定ppt课件

植物生理学实验6种子生活力的测定ppt课件

资金是运 动的价 值,资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的, 是时间 的函数 ,随时 间的推 移而增 值,其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
TTC还原反应如下:
氯化三苯基四氮唑
三苯甲腙
资金是运 动的价 值,资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的, 是时间 的函数 ,随时 间的推 移而增 值,其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
有生活力种子 占供试粒数的%
TTC
30
红墨水
30
BTB
30
资金是运 动的价 值,资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的, 是时间 的函数 ,随时 间的推 移而增 值,其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
注意事项
? 沿种胚中央准确切开,同粒 TTC/红墨水法各一半 ? TTC溶液最好现配现用,如需贮藏则应贮于棕色瓶
资金是运 动的价 值,资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的, 是时间 的函数 ,随时 间的推 移而增 值,其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
染料染色法 TTC法
资金是运 动的价 值,资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的, 是时间 的函数 ,随时 间的推 移而增 值,其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
?种子生活力( seed viability ):指种子能够萌发 的潜在能力或种胚具有的生命力。
?种子活力( seed vigor):
资金是运 动的价 值,资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的, 是时间 的函数 ,随时 间的推 移而增 值,其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
思考题
三种方法测定种子生活力的理论依据有何不同 ?

实验五-植物种子生命力的快速测定

实验五-植物种子生命力的快速测定
只能快速地了解种子具有的发 芽潜力,为急需之用。 TTC法染色结束后要立即进行鉴定,因放久会褪 TTC法染色结束后要立即进行鉴定,因放久会褪 色
如果种胚中非关键性部位(如子叶的一部分)被染色,而 胚根或胚芽的尖端不染色都属于不能正常发芽的种子
二、材料、设备及试剂 材料:小麦种子 材料:小麦种子 设备:培养皿、 设备:培养皿、 刀片、 镊子 试剂:0.1%BTB琼脂凝胶 试剂:0.1%BTB琼脂凝胶 三、实验步骤 1.浸种:同TTC法。 1.浸种:同TTC法。 2.显色:取吸胀的种子30粒,整齐地埋于准备好的琼脂凝胶 2.显色:取吸胀的种子30粒,整齐地埋于准备好的琼脂凝胶 培养皿中,种子平放,间隔距离至少1cm。然后将培养皿 培养皿中,种子平放,间隔距离至少1cm。然后将培养皿 置于30℃下培养90min,在蓝色背景下观察,如种胚附近 置于30℃下培养90min,在蓝色背景下观察,如种胚附近 呈现较深黄色晕圈的是活种子,否则是死种子。 3.计数:种胚附近出现黄色晕圈的活种子数,算出活种子百 3.计数:种胚附近出现黄色晕圈的活种子数,算出活种子百 分率。
Ⅱ. BTB法 BTB法
原理 凡细胞必有呼吸作用,吸收空气中的O ,放出CO 凡细胞必有呼吸作用,吸收空气中的O2,放出CO2。
CO2溶于水成为H2CO3,H2CO3解离成H+和HCO3-,使 溶于水成为H 解离成H+和 得种胚周围环境的酸度增加,可用溴麝香草酚蓝法 得种胚周围环境的酸度增加,可用溴麝香草酚蓝法 (BTB法)来测定酸度的改变。BTB的变色范围为 BTB法)来测定酸度的改变。BTB的变色范围为 pH6.0-7.6,酸性呈黄色,碱性成蓝色,中间经过绿色 pH6.0-7.6,酸性呈黄色,碱性成蓝色,中间经过绿色 (变色点位pH7.1)。色泽差异显著,易于观察。 (变色点位pH7.1)。色泽差异显著,易于观察。

8、种子生活力的快速测定(TTC法)

8、种子生活力的快速测定(TTC法)

华南农业大学实验报告专业班次11农学1班组别201130010110 题目种子生活力的快速测定(TTC法)姓名梁志雄日期2012-11-21一、实验原理有活力种胚中的脱氢酶可以将TTC还原成不溶性的红色TTF,如果种胚死亡或种胚生活力衰退,则不能染色或染色较浅,因此,可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力二、实验材料与实验器材水稻种子、恒温箱、小白瓷碗、镊子、小烧杯三、实验步骤1、实验之前将种子放在微波炉里稍微加热,将水稻种子用温水(30~35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸涨2、随机抽取30粒水稻种子,小心剥去种皮,千万不要伤害种胚,然后把处理好的种子置于小白瓷碗中,加入0.5%TTC溶液,以刚好浸没种子为度,与恒温箱中(30~35℃)中保温0.5-1h。

3、染色结束后要立即进行鉴定,因放置太久会褪色。

倒出TTC溶液,再用清水将种子清洗1~2次,观察种胚染色的情况。

凡种胚全部或大部分被染成红色即为具有生活力的种子,种胚不被染色的为死种子。

四、数据记录记录本实验测得染色种子25粒,无色种子5粒,其中染色的25粒种子中有19粒种子染色是比较深的,说明其生长活性物质多,生命力强。

根据以下公式种子活力(%)=有活力的种子数/种子总数×100%可以知道种子活力=25/30*100%=83.3%六、实验总结有生活力的种子能够进行呼吸代谢,在呼吸过程中的代谢物质跟TTC反应生成红色TTF,且代谢物质越多,颜色越深,代谢强度越大。

从本实验结果来看,种子生命力总体上时比较强的,且其中的19粒染色较深的那些则更高。

另外TTC法还可以运用于花粉活力的测定。

实验1 作物种子活力的快速测定

实验1 作物种子活力的快速测定
光分解,需现用现配,避光保存。)
三、实验步骤
1.将待测样品种子置于30 ~35℃温水中浸泡(玉米5 h左 右),使种子充分吸胀,以增 强种胚的呼切割成两半


0.1%TTC染色0.5~1 h
将一半置于培养皿中
3.染色结束后,应立即进行鉴定,因久置会褪色。倾出 TTC溶液,用清水冲洗2-3次,立即观察种胚着色情况,判断种 子有无生活力,把判断结果记入表内。
种胚不被染色的为死种子。如果种胚中非关键性部位(如子 叶的一部分)被染色,而胚根或胚芽的尖端不染色,都属于 不能正常发芽的种子。
思考题
1.TTC法快速测定种子生命力的理论依据是什么?在实验操作 中应注意什么?
2.种子生活力与种子的实际发芽率是否一致?如若有偏差,理 论上应为偏高还是偏低?为什么?
作物种子活力的快速测定
一、实验原理
TTC(2, 3, 5-三苯基氯化四氮唑)可渗入种胚的 活 细 胞 内 , 并 作 为 氢 受 体 被 脱 氢 辅 酶 ( NADH2 或 NADPH2)上的氢还原,此时无色的TTC转变成红色 的TTF(三苯基甲臢),吸附在活细胞表面,根据活 细胞着色的深浅可定性判断种子生活力的有无与大小 。
二、材料与方法
试验材料:玉米种子 实验仪器:烧杯,培养皿,镊子,刀片,解剖针 试剂药品:0.1%TTC溶液
准确称取1.000 g TTC(2, 3, 5-三苯基氯化四氮唑)置于 烧杯中,加入少量无水乙醇使其溶解,然后用蒸馏水稀释定容 1000 mL,配成0.1%的TTC溶液,装于棕色瓶中。(注:TTC见
四、结果计算
染色法测定种子生活力记载表
种子名称
供试粒数
有生活力种 子粒数
无生活力种 有生活力的种子 子粒数 占供试粒数的%

种子生活力测定的原理PPT课件

种子生活力测定的原理PPT课件
结果计算到近似整数
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种 子 检 验 结 果 报 告 单
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
三、种子生活力的其他测定方法
• 甲烯兰法 • 溴麝香草酚兰法(BTB法) • 红墨水染色法 • 软X射线造影技术
d) 沿胚纵切:水稻、玉米、和麦类等
e) 近胚纵切:松柏和伞形科等植物种子
f) 上半粒纵切:莴苣和其他菊科等植物种子
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
(2)染色前的样品准备
g) 切去种子基端:茜草科等植物种子
h) 斜切种子:菊科、十字花科和蔷薇科等
i) 横切胚乳:黑麦草、羊茅等植物种子
• 大豆:凡是整个种子染成明亮红色,或仅胚根尖端
1/3不染色,或子叶表面有小范围。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
(6)计算和结果表示
生活力测定重复间的最大容许差距
计算各重复有生活力种子百分率,重复间误差不得 超过最大允许误差
6、测定程序
(1)预处理
农作物种子四唑染色技术规定
预湿
水浸快速预湿:适合于水稻、大豆和花生等作物种子
纸床缓慢预湿:适合于葱、玉米和小麦等作物种子
◎ 纸床预湿(小粒豆类种子)
◎ 纸卷预湿(大豆、菜豆、豌豆)
H2O2溶液浸种: (为了加快种子吸胀和促进酶的活化以及 缩短预湿时间) 0.3%, 20~30℃, 1 h
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课件:实验六 植物种子生命力的快速测定

课件:实验六 植物种子生命力的快速测定
TTC本身会变色。 4)显色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中。
染料染色法:
1)染料浸泡时要使漂浮的种子全部浸入试剂中; 2)染色时间不能太长,否则不易区分。
BTB法:
1)BTB溶胶层厚度取决于种子大小,原则上保证种胚接触 皿底后尚有部分露出胶层上方,胶层厚度可使种子稳定 在其中;
2)取完好小麦种子,将种胚轻稳地向下插入BTB琼脂胶中。
供试粒数
有生活力种 子粒数
无生活力 种子粒数
有生活力种子 占供试粒数的%
30
30
BTB
30
分析TTC法和红墨水法测定的种子生活力结果,比较三种 方法快速检测种子活力的优缺点。
6. 注意事项
TTC法:
1)TTC溶液最好现配现用,如需贮藏则应贮于棕色瓶中, 放在阴凉黑暗处,如溶液变红则不可再用。
2)TTC反应温度一般以30~35℃为宜。 3)TTC反应结束,从黑暗下取出后立即观察,因光下久放
➢ 种子发芽率是种子品质和实用价值的主要依据,与播种 的用种量直接有关,但是常规方法(直接发芽,测定发 芽率)所需时间较长,遇到休眠种子也无法得出正确的 结论。快速测定法能较短时间的获得结果 。
➢ 掌握快速测定植物种子生命力的方法。 ➢ 理解TTC/BTB/染料法测定种子活力的原理。
2. 实验原理
材料:小麦种子 仪器设备:小烧杯;刀片;镊子;温箱 试剂: 0.12%~0.5%TTC溶液(TTC可直接溶于水,溶于水后,呈 中性,pH7±0.5,不宜久藏,应随用随配)。 0.02%~0.2%靛红溶液或5%红墨水(酸性大红G)。 1%BTB琼脂
4. 实验步骤
TTC/红墨水法
1)将种子用温水(约30℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。 2)随机取小麦种子30粒,沿种胚中央准确切开,每切1粒确认
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三、实验材料
小麦种子
四、实验步骤
1. 将小麦种子用温水(30~35℃)浸泡2~6h,使种子充分 吸胀。 2. 随机取种子100粒,沿种胚中央准确切开,取其一半 备用。 3. 将准备好的种子放入培养皿,浸于TTC试剂中,于恒 温箱(30~35℃)中保温30min。 4. 倒出TTC溶液,再用清水将种子冲洗1~2次,观察种 胚被染色种子活力有何优缺点?
种子活力的快速测定
——TTC法
一、实验目的
学习掌握TTC法快速测定种子活力的原理和方法。
二、实验原理
有活力种胚中的脱氢酶可以将2,3,5—氯化三苯基
四氮唑 (TTC)还原成不溶性的红色三苯基甲月替 (TTF),如果种胚死亡或种胚生活力衰退,则不 能染色或染色较浅,因此,可以根据种胚染色的部 位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力。
五、注意事项
1. TTC溶液最好现配现用,如需贮藏则需贮存于棕色
瓶中,放在阴凉黑暗处,如溶液变红则不可再用。
2. TTC反应温度一般以30~35℃为宜。 3. TTC反应结束,从黑暗处取出后立即观察,因光下 久放TTC本身会变色。 4. 显色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中。
五、实验结果
种子活力(%)=有活力的种子数/种子总数×100%
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