药物毒理学实验
药物毒理学 实验课程
药物毒理学实验课程是指通过实验手段来研究药物在体内的毒性效应和机制的课程。
这门课程旨在培养学生对药物毒理学的基本概念、技术和实践的理解和应用能力。
药物毒理学实验课程通常包括以下内容：
1.毒性分类和评估：介绍药物和化学物质的毒性分类、毒性评估方法和标准，以及了解毒性物质对人体的潜在影响。
2.实验设计和操作：学习和实践常用的药物毒性实验设计和操作技术，包括动物模型的选择、药物给药途径、毒性指标的测定方法等。
3.毒性测定方法：学习和掌握常用的毒性测定方法，如细胞毒性实验、遗传毒性实验、生殖和发育毒性实验等。
4.毒性评价和数据分析：学习如何评估药物的毒性，收集和分析实验数据，解读和报告实验结果。
5.毒理机制研究：了解药物毒理反应的机制和生物学基础，如药物代谢、细胞损伤机制、药物与受体或酶的相互作用等。
药物毒理学实验课程旨在通过实践操作和理论学习，培养学生对药物毒性的全面了解和评估能力。
学生在实验中将学习和掌握实验设计、操作技术、数据分析和结果解读的技能，并能运用这些技能进行药物毒性评价和风险评估。
在进行药物毒理学实验课程时，科学伦理和动物福利也是必须重视的方面。
学生需要遵守相关的伦理原则和法规，保护实验动物的福利权益，并采取适当的伦理和安全措施来确保实验的可靠性和可持续性。
药理毒理学实验
药理毒理学实验引言药理毒理学实验是药物研究过程中的重要环节之一。
药理毒理学实验主要通过实验手段，对药物的药理作用及有害效应进行评估，为药物的研发提供科学依据。
本文将介绍药理毒理学实验的基本概念、实验设计和实验步骤等内容。
药理毒理学实验的基本概念药理学药理学是研究药物在机体内的作用机制、效应和代谢过程的学科。
药理学实验通过对药物在体内及体外的作用机制进行研究，来评估药物的药理活性和安全性。
毒理学毒理学是研究有害物质对机体产生有害效应的学科。
毒理学实验通过对有害物质的毒性和危害性进行评估，来判断其对人体健康的影响程度。
药理毒理学实验的目的药理毒理学实验的主要目的是评估药物的药理作用和毒性，以确定药物的有效剂量范围和安全性。
通过药理毒理学实验的结果，可以为进一步的临床试验和药物注册提供科学依据。
药理毒理学实验的实验设计实验动物的选择在药理毒理学实验中，通常选择小鼠、大鼠、兔子、猪等动物作为实验对象。
实验动物的选择应根据药物的使用目的、药物在不同动物体内的代谢和反应差异等因素进行合理选择。
实验组和对照组的设置药理毒理学实验中，通常将实验对象分为实验组和对照组进行比较。
实验组接受药物处理，而对照组则不接受药物处理，用来评估药物处理后的效应。
实验参数的评估药理毒理学实验中，常用的评估参数包括药物的生物利用度、药物的作用机制、药物的药效和剂量效应关系、药物的副作用等。
通过对这些参数进行评估，可以全面了解药物的药理作用和安全性。
药理毒理学实验的实验步骤实验前准备实验前准备包括准备实验材料和设备、对实验动物进行适应性饲养、制定实验方案等。
准备工作的好坏直接影响到实验结果的准确性和可靠性。
实验操作实验操作包括给动物投药、观察实验效果、收集数据等。
在实验过程中，要保证实验操作的准确性和规范性，避免实验误差的发生。
数据处理与分析数据处理与分析是药理毒理学实验的重要环节。
通过对实验数据进行统计和分析，可以得出实验结果的可靠性和科学性。
药理毒理学实验
药理毒理学实验
药理毒理学实验是指研究药物对机体生理和病理过程的影响以及药物的毒性和安全性的实验研究。
这些实验常用于药物的开发、评价和监管。
药理学实验常包括以下方面的研究：
1. 药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程；
2. 药物对生理系统和器官的作用机制和效应；
3. 药物对生理参数（如血压、心率、血糖等）的影响；
4. 药物的药效学研究，如测定最小有效剂量、最大耐受剂量等。
毒理学实验主要研究药物对机体引起的毒性反应，包括急性毒性、慢性毒性和亚慢性毒性等。
常用的毒理学实验包括：
1. 急性毒性实验：用于确定药物对动物的一次性剂量引起的毒性反应；
2. 慢性毒性实验：用于评估长期接触药物对动物的毒性效应；
3. 亚慢性毒性实验：用于评估中长期接触药物对动物的毒性效应；
4. 各种毒性指标的测定，如致死剂量、半数致死剂量、致畸性、致癌性等。
药理毒理学实验通常在动物模型中进行，常用的动物包括小鼠、大鼠、猴等。
实验设计需要符合伦理规范，并进行必要的安全措施，以确保实验过程安全且可靠。
值得注意的是，药理毒理学实验虽然可以提供药物效果和毒性的初步评估信息，但实验结果在转化到人类临床应用方面仍需要进行更进一步的研究和验证。
药物毒理学长期毒性试验
这对于制定临床试验的剂量方案具有重
要意义
t
预测药物的生殖和发育毒性
某些药物可能对生殖和发育造成不良影
响，长期毒性试验可预测这些潜在毒性
4
方法
进行药物毒理学长期毒性试验时，需要考虑以下因素 实验动物：选择适合的实验动物，如小鼠、大鼠、狗、灵长类等 给药方案：根据药物的性质和实验目的，确定给药的剂量、频率和持续时间 观察指标：在试验期间，定期观察动物的生理指标(如体重、呼吸、体温等)、血液学 指标(如红细胞计数、白细胞计数等)、生化指标(如肝功能、肾功能等)以及其他可能 的毒性反应 病理学检查：在试验结束后，对动物进行病理学检查，以评估药物的毒性作用 数据处理与分析：对试验数据进行整理和分析，评估药物的长期安全性和毒性反应
结果评估
根据上述评估结果，药物开发商可以制定相应的临床 试验方案，确保药物在临床试验中的安全性
x
同时，这些结果也为药物的上市许可提供了重要的参 考依据
-
请各位老师批评指正!
THESIS DEFENSE POWERPOINT
XXXXXXXXXX
指导老师：XXX
答 辩 人 ：XXX
2
概念
1
药物毒理学长期毒性试验是 指通过给予实验动物一定剂 量的药物，观察和分析药物
对动物的长期毒性作用
2
长期毒性试验通常采用啮齿类动 物或非啮齿类动物作为研究对象， 连续给药一段时间(如3个月至1 年)，以评估药物的长期安全性
3
目的
药物毒理学长期 毒性试验的主要 目的是评估药物 的长期使用对动 物的毒性作用， 包括
5
结果评估
根据长期毒性试验的结果，可以进行如下评估 毒性反应类型与程度：确定药物引起的毒性反应类 型和程度，如轻度、中度或重度 安全剂量范围：根据不同剂量下的毒性反应，确定 药物的安全剂量范围 致癌性评估：根据药物的致癌性检查结果，评估药 物的致癌风险 生殖和发育毒性评估：根据药物的生殖和发育毒性 检查结果，评估药物对生殖和发育的影响2Βιβλιοθήκη XX药物毒理学长 期毒性试验
毒理学指标及试验操作汇总
.药物毒性试验指标1.急性毒性试验一、半数致死量（LD50）的测定(一)目的:观察受试物一次给予动物后，所产生的毒性反应和死亡情况。
(二)动物分组和剂量1.动物:一般用小白鼠8周龄，体重18---22g(同次试验体重相差不超过2g)大白鼠6~8周龄，体重120--150g，同次试验体重相差不超过10g。
2.受试物:溶于水的做成溶液，不溶于水的做成混悬液.(三)试验方法1.剂量:一般选用3一5个剂量，各剂量间剂距根据受试物情况和预试结果而定。
2.给药途径和容积:给药途径:应与临床试验的途径相一致。
口服药物应灌胃给药，一、二类新药应采用两种途径给药，其中一种应为推荐临床研究的给药途径。
水溶性好的药物还应测定静脉给药的急性毒性。
给药容积:小白鼠禁食(12~16小时)，不禁水，按体重计算:灌胃(ig)不超过0. 4ml/ 10g体重。
大白鼠禁食(12~16小时)，不禁水、灌胃(ig)，不超过3ml/只。
3.测定LD:将动物按体重随机分组，每组至少10只(雌雄各半)。
给受试物后立即观察50动物反应情况，每天观察一次连续观察七天。
详细逐天记录动物毒性反应情况及死亡分布，并用适当的统计学方法(申报时应说明方法名称)计算出LD值及95%可信限。
504.观察毒性反应:给受试物后应严密观察反应情况，并记录动物的外观、行为活动、精神状态、食欲(饲料消耗量)、大、小便及其颜色、被毛、肤色、呼吸、鼻、眼、口腔有无异常分泌物，体重变化以及死亡等情况。
死亡动物应及时进行尸检，发现病变器官应做病理组织学检查。
若发现中毒反应或死亡率一与动物的性别有明显相关时，则应选择性别敏感的动物进行复试。
(四)试验报告和结果评价应详细具体，包括试验日期、动物的规格、性别、数量、受试物来源及含量、试验方法。
LD 值及其95%可信限，以及各剂量组的死亡率，或最大耐受量的值及其相当于临床剂量的50倍数.详细报告实验过程中动物出现的中毒表现及致死症状，综合评价受试物毒性大小。
药物毒理学实验实验动物一般操作技术
二、实验内容
实验动物的健康状况的判定 实验动物的抓取、固定 实验动物的性别鉴定 实验动物的称重 实验动物的编号 生理指标的测定 生物材料的采集 血红蛋白的测定
实验动物的健康状况的判定
1)发育正常、体态丰满、外观无畸形； 2)被毛浓密、贴顺有光泽、不蓬乱； 3)胸阔宽阔、脊柱不弓不弯； 4)眼睛明亮； 5)表皮无溃疡、无结痂（注意尾巴）； 6)各天然孔干净、无分泌物； 7)行动灵活、反应敏捷。
实验动物的抓取、固定
1. 小鼠抓取和固定
固定方法 手固定法
固定时注意，过Leabharlann 用力会使 小鼠颈椎脱臼，若用力过轻头部 能反转过来咬伤实验者的手。这 种固定方法是灌胃给药和腹腔注 射给药常用的方法。
（此方法一定要在动物安静的状态下测定，不是精确的测量方法。）
生物材料的采集
血液的采集：心脏采血、断头采血、腹主动脉采血、 眼眶静脉从采血、尾静脉采血、剪尾采血（示教）
尿液的采集：通常使用代谢笼（示教）
血红蛋白的测定
用剪尾采血的方法来测血红蛋白含量。 先吸0.38ml0.1N的HCL，加入试管，用上述采血的方法 取20μl血液，快速打入装有盐酸的试管中，弹指法混匀， 10分钟后倒入比色管中比色，要用水冲洗试管， 向比色管 中加蒸馏水，直至颜色与标准色板颜色一致时，读数g/L， （读蓝色侧数值），最后将管冲洗干净。
2. 大鼠抓取固定方法 抓取
固定方法
实验动物的性别鉴定
大、小鼠 主要依肛门与生殖孔间的距离区分， 间距大者为雄性，小者为雌性。
实验动物的称重
现在称重通常使用电子称，将动物放在篮子 或饭盒中，先进行去皮调零后再将动物放入 篮子中记录体重。
药物毒理学实验-溶血实验2012-5-25
原理（二）
有些药物由于含有溶血成分或物理、化学及生物等方面的原因，在直接注 入血管后可产生溶血作用；有些药物注入血管后可产生血细胞凝聚，引起 血液循环功能障碍等不良反应。例如多种中草药(党参、桔梗、夹竹桃、
实验方法（一）
(1) 2%红细胞悬液的制备 取新鲜兔血10~20 ml →用玻璃棒搅动血液，除去纤维蛋白原，使成脱纤 血液。 →加入NS100 ml，摇匀，3000 r/min离心10分钟， 除去上清液，沉淀的红细胞再用NS按上述方法洗 涤2-3次，至上清液不显红色为止。 →将所得红细胞用NS配成2％的混悬液(红细胞2 ml， 加生理盐水至100 ml)，供试验用。
溶血试验
混匀后，立即置37℃±0.5℃的恒温水浴中进 行温育，观察记录各管的溶血情况。开始每隔15分 钟观察1次，1小时后，每隔1小时观察1次，一般 观察3小时。
溶血试验结果判断标准
当阴性对照管无溶血和凝聚发生，阳性对照管有溶血发生 时，若受试物管中的溶液在3小时内不发生溶血和凝聚，则受 试物可以注射使用；若受试物管中的溶液在3小时内发生溶血
远志、三七等)含有皂苷，皂苷是一类表面活性剂，有很强的乳化力，具
有溶血作用； 另外大量输入低渗溶液以及含有某些自体化合物的注射液也可以引起溶血。 因此，凡是注射剂和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血反应的其他药物 制剂均应进行溶血性试验。在溶血性试验中还可观察供试品有无红细胞凝
聚作用。
实验用品
【器材】 烧杯、玻璃棒(去纤维蛋白用)、10 ml 试管、试管架、滴管、吸管、离心机、恒温水浴 锅。 【药品】 受试药物、生理盐水、蒸馏水。 【动物】 家兔1只，体重2.5~3.0 kg，雌雄不限 (供采血之用)。
药物毒理学的研究方法
药物毒理学的研究方法药物毒理学是研究药物对生物体的毒性作用和剂量-反应关系的科学。
它是保证药物安全性和有效性的重要环节。
本文将介绍药物毒理学的研究方法。
一、急性毒性实验急性毒性实验是评价某种化合物对动物的急性毒性作用的一种方法。
这种实验通常使用小鼠或大鼠，通过口服、皮肤接触或注射等方式给予化合物，然后观察动物在一定时间内是否死亡，并计算LD50值（半数致死剂量）。
二、亚急性和慢性毒性实验亚急性和慢性毒性实验是评价某种化合物对动物长期暴露下的毒性作用的一种方法。
这种实验通常使用小鼠或大鼠，通过口服或注射等方式给予化合物，然后观察动物在数周或数月内是否出现任何不良反应。
此外还可以进行血液、生化和组织学检查等。
三、遗传毒理学实验遗传毒理学实验是评价某种化合物对生殖细胞和基因的影响的一种方法。
这种实验通常使用小鼠或大鼠，通过口服或注射等方式给予化合物，然后观察动物的生殖细胞是否出现异常，并进行染色体畸变和突变等检查。
四、生殖毒性实验生殖毒性实验是评价某种化合物对动物生殖能力和后代发育的影响的一种方法。
这种实验通常使用小鼠或大鼠，通过口服或注射等方式给予化合物，然后观察动物的生育能力是否下降，并观察其后代是否出现任何不良反应。
五、致癌性实验致癌性实验是评价某种化合物对动物致癌作用的一种方法。
这种实验通常使用小鼠或大鼠，通过口服或注射等方式给予化合物，然后观察动物是否出现肿瘤，并进行组织学检查。
六、免疫毒理学实验免疫毒理学实验是评价某种化合物对动物免疫系统的影响的一种方法。
这种实验通常使用小鼠或大鼠，通过口服或注射等方式给予化合物，然后观察动物免疫系统是否受到影响，并进行免疫学检查。
七、神经毒理学实验神经毒理学实验是评价某种化合物对动物神经系统的影响的一种方法。
这种实验通常使用小鼠或大鼠，通过口服或注射等方式给予化合物，然后观察动物是否出现神经系统异常，并进行行为学和生理学检查。
八、药代动力学和药效学实验药代动力学和药效学实验是评价某种化合物在体内的代谢和作用机制的一种方法。
药物毒理学实验指导
药物毒理学实验指导南方医科大学药学院实验中心二0一0年八月目录实验一、药物急性毒性实验（LD50测定）实验二、急性肺损伤实验实验三、药物免疫毒性试验实验四、小鼠骨髓细胞微核试验实验五、小鼠精子畸形实验实验六、药物生殖毒性实验实验一 急性毒性试验［盐酸二甲弗林（回苏灵）LD 50测定］一、实验目的化学物急性毒性试验是研究化学物毒性效应的基本试验。
本实验的目的是学习急性毒性试验的实验设计、实验原理和实验操作方法。
二、基本原理选择健康的实验动物，根据体重按随机分组的方法，依据LD 50计算的设计原料则将动物分成数个染毒组。
一次或24h 内多次给予受试物后，观察动物所产生的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的情况等，根据各组动物死亡数计算半数致死量（LD 50）。
据此分析受试物毒性反应与剂量的关系，并根据LD 50值对化学物进行毒性分级。
三、实验材料1、器材 1ml 注射器、烧杯、电子天平、苦味酸、镊子、剪刀、酒精棉球等。
2、药品 0.4％回苏灵注射液（经预试验后按比例稀释）。
3、动物 健康成年小白鼠若干只，体重18-22g ，雌雄各半。
四、实验方法 1、预试验（1）探索剂量范围：先找出100%与0%的致死量为实验的上下限剂量，即Dmax 和Dmin 。
取动物若干，每4只一组，按估计量给药，如出现4/4死亡时，下一组剂量降低，当出现3/4死亡时，则上一剂量为Dmax ；如降低一剂量出现的死亡率2/4或1/4时，应考虑到4/4死亡剂量组在正式实验时可能出现死亡率低于70%，为慎重起见可将4/4死亡剂量乘以1.4倍，作为Dmax 。
同法找出Dmin 。
（2）确定合适的剂量分组方案：组数（n ）以5-8组为宜，根据下面公式计算组间剂量公比r 。
r=1/1min max/ n D D各组剂量分别Dmax 、(Dmax) r 、(Dmax)r2、(Dmax)r3……。
2、正式试验（1）动物的称重、编号和分组： 每组10只动物（雌雄各半），随机分组和用苦味酸编号。
药物毒理学实验动物
生殖毒性实验主要研究药物对雌雄性生殖器官、生殖细胞、受精、胚胎发育、妊娠、分娩和哺乳期等方面的毒性作用。该实验有助于了解药物对生殖过程的影响，为药物的安全性评价提供依据。
详细描述
生殖毒性实验
发育毒性实验是评估药物对胎儿和新生儿发育的毒性作用。
发育毒性实验主要研究药物对妊娠期和哺乳期动物及其子代的发育毒性作用，包括对胎儿和新生儿的生长、发育和行为等方面的影响。该实验有助于了解药物对胎儿和新生儿发育的影响，为药物的安全性评价提供依据。
VS
慢性毒性实验是评估药物长期给药对实验动物的毒性作用。
详细描述
慢性毒性实验通常在较长时间内（如几个月到一年或更长）观察药物对实验动物的长期毒性作用，包括致癌性、致畸性、致突变性等方面的研究。该实验旨在评估药物长期使用或接触后的潜在危害，为药物的安全性评价提供重要依据。
总结词
慢性毒性实验
生殖毒性实验是评估药物对实验动物生殖功能的毒性作用。
操作规程
遵循实验操作规程，正确使用仪器设备和化学试剂，避免意外事故发生。
个人防护服
穿着符合要求的实验服，保护实验人员免受化学物质和微生物的侵害。
要点一
要点二
护目镜、口罩和手套
佩戴合适的护目镜、口罩和手套，防止化学物质和生物污染物的侵入。
个人防护措施与装备
废弃物分类
将实验废弃物进行分类，分别处理，避免对环境和人体造成危害。
详细描述
急性毒性实验
总结词
亚急性毒性实验是评估药物在较长时间内对实验动物的毒性作用。
详细描述
亚急性毒性实验通常在较长时间内（如几周到几个月）观察药物对实验动物的多方面毒性作用，包括生长、发育、生理生化指标、组织病理学变化等。该实验有助于更全面地了解药物的毒性作用，为药物的安全性评价提供依据。
药物毒理学实验演示课件
6. 注意事项
6.1 正确捉拿小白鼠，防止咬伤；
6.2 注意肌肉注射方法，给药剂量力求准确；
二. 实验原理
选择健康的实验动物，根据体重按随机分组方法， 根据LD50计算的设计原则将动物分成数个染毒组。一 次或24h后，观察动物所产生的警醒毒性反应及其严 重程度，中毒死亡的情况等，根据各组动物死亡数计 算半数致死量（LD50）。据此分析受试动物毒性反应 与剂量的关系，并根据LD50值对药物进行毒性分级。
表2：结果记录表
组别
注射浓度（mg/kg）
Hale Waihona Puke 动物数 死亡数 死亡率备注
1
1000
4
2
850
4
3
720
4
4
660
4
5
520
4
4. 计算LD50
4.1计算方法：目测机率单位法、加权机率单 位法(Bliss 法)、寇氏法、序贯法。
4.2 Bliss 法是目前推荐使用的方法。此法对 剂量分组无严格要求，不需要剂量组有0%和 100%死亡率，是目前公认最准确的测定方法。
安全范围 是指药物的最小有效量与最小中毒量之间的范围，它表示药 物的安全性，一般安全范围越大，用药越安全。药理学用上95%有效剂量 （ED95）到5%中毒剂量（LD5）的距离来表示。
实验一 急性毒性试验
• （一） 药物LD50的测定
一、实验目的
（1）理念——是药三分毒; （2）了解一些常规药物毒理学的试验方法， 及评价指标; （3）掌握药物急性毒性试验的试验设计方 法、LD50的测定及计算方法。
亚慢性毒性 是指实验动物连续多日接触较大剂量的外来化合物所出 现的中毒效应。所谓较大剂量，是指小于急性LD50的剂量。“多日”的确 切天数，至今尚无完全统一的认识。一般认为在环境毒理学与食品毒理学 中所要求的连续接触为3～6个月，而在工业毒理学中认为1～3月即可。
药物毒理学-药物的安全性评价试验方法1
1、生殖细胞的遗传损伤危害
• 对后代产生致死性或非致死性的影响。 非致死性效应表现为后代出现显性或隐 形遗传性疾病。
2、体细胞遗传损伤的危害
• 只影响接触到该诱变剂的个体。体 细胞突变可能与肿瘤、衰老有关。
•
二、遗传损伤的类型
• 基因突变：基因中DNA 序列的改变 • 染色体畸变：染色体结构的改变
第十五章
药物遗传毒性作用
遗传毒理学：研究理化因素引起遗传物质（DNA）
改变，预测并防止潜在的有害效应。
一、遗传改变产生和潜在结果
突变：指有机体遗传物质发生变化引起遗传信息 的变化，并发生新的表型效应。
自发突变：在自然条件下发生的突变。
诱发突变：由人工利用物理因素或化学药剂诱发 的突变称为诱发突变。
（三）围产期试验：检测药物对胚胎发育 后期、母代分娩过程、哺乳和新生幼仔 是否有影响。
实验方法： 1、动物：小鼠或大鼠 2、剂量与给药途径：高中低剂量组 临床给药途径 3、给药时间：大鼠、小鼠于妊娠第15天开始给 药，至分娩后21天（小鼠）和28天（大鼠） 4、对照组：阴性对照、阳性对照 5、观察与报告：观察动物一般状态、记录胎仔 数、一般发育状况、外观畸形等
外源化学物对生殖发育的影响
干扰生殖发育的任何环节，并造成损害作用。 可以通过对内分泌系统，特别是对性腺的作用， 发生间接的影响。 神经系统对内分泌功能也有调节作用，通过下 丘脑-垂体-睾丸轴(下丘脑-垂体-卵巢轴)两条 途径作用于生殖发育过程 。
生殖毒性的评价
外源化学物对生殖的过程的损害作用可以 表现为不发情，发情周期紊乱或各种形式的性
原理：利用一组鼠伤寒沙门氏菌突变型菌株，
即一系列组氨酸缺陷型菌株，在加入哺乳动物 肝微粒体酶活化的条件下，测定化学物质诱导 回复突变成野生型菌株的能力。当营养缺陷型 细菌回复突变为野生型时，细菌不能合成组氨 酸到能合成组氨酸，从而能在不加组氨酸的培 养基上生长。
药物毒理学生殖毒性试验26 (2)
药物毒理学生殖毒性试验26
药物毒理学的生殖毒性试验可以通过以下的方式进行：
1. 动物试验：常用的动物模型包括小鼠、大鼠、兔子等。
将药物以不同剂量进行口服或注射给予实验动物，观察药
物对动物生殖系统的影响，包括配子形成、生殖腺发育、
性激素水平等指标的变化。
2. 特殊试验：一些特殊试验可用于评估药物的生殖毒性。
例如，通过观察药物对雌性动物的妊娠情况、胚胎发育情
况以及幼儿存活率等指标来评估药物对生殖系统的影响。
3. 体外试验：某些实验也可以在离体细胞培养系统中进行。
例如，使用精子、卵子或培养的胚胎细胞来测试药物对生
殖细胞的影响。
无论采用何种方法，研究人员都应遵守伦理和法律要求，确保试验过程和结果的可靠性和准确性。
药学毒理学实验操作指南
药学毒理学实验操作指南引言：药学毒理学是一门研究药物对生物体产生的毒性效应的学科，对于药物的研发和安全性评价具有重要意义。
在进行药学毒理学实验时，正确的操作方法和技巧是确保实验结果准确可靠的关键。
本文将为您提供一份药学毒理学实验操作指南，帮助您顺利进行实验。
一、实验前准备在进行药学毒理学实验之前，必须进行充分的实验前准备工作，包括实验室设备和试剂的准备、动物的选择和饲养等。
1. 实验室设备和试剂准备：确保实验室设备完好无损，并根据实验需求准备好所需的试剂和溶剂。
试剂的纯度和浓度应符合实验要求，避免使用过期的试剂。
2. 动物的选择和饲养：根据实验的需要，选择适合的实验动物，并进行合理的饲养。
动物应处于良好的健康状态，饲养环境应符合动物福利要求。
二、实验操作步骤在进行药学毒理学实验时，应按照一定的操作步骤进行，确保实验的准确性和可重复性。
1. 毒性试验的选择：根据实验目的和要求，选择适当的毒性试验方法。
常用的毒性试验包括急性毒性试验、亚急性毒性试验和慢性毒性试验等。
根据实验室条件和资源限制，选择合适的试验方法。
2. 实验组织和分组：根据实验设计，将实验动物随机分为实验组和对照组。
实验组接受药物处理，对照组接受相同条件下的安慰剂处理或无处理。
3. 药物给药：根据实验要求，选择适当的给药途径和剂量。
常用的给药途径包括口服、皮下注射、静脉注射等。
给药剂量应根据动物体重和药物的生理活性确定，并进行适当的计算和调整。
4. 毒性指标的测定：根据实验目的，选择合适的毒性指标进行测定。
常用的毒性指标包括生理指标、生化指标和组织病理学指标等。
测定前，应确保测定方法的准确性和可靠性。
5. 数据分析和结果解读：根据实验数据，进行统计学分析和结果解读。
常用的数据分析方法包括方差分析、t检验和相关分析等。
结果解读应结合实验设计和实验目的，进行科学和客观的分析。
三、实验安全和伦理要求在进行药学毒理学实验时，必须严格遵守实验安全和伦理要求，确保实验过程的安全和合法性。
药物毒理实验工作计划范文
药物毒理实验工作计划范文一、实验目的本实验旨在评估一种新药物的毒理学特性，包括其毒性剂量-效应关系、毒性机制和临床应用安全性。
通过实验，我们希望为新药物的进一步临床研究提供科学依据，为其临床应用提供毒理学数据支撑。
二、实验设计1. 实验对象：本实验选取SD大鼠作为实验对象，因其体型适中、育种容易，而且是临床前毒理学研究的常用试验动物。
2. 实验分组：将实验对象分为实验组和对照组，在实验组给予不同剂量的待测药物，对照组给予等体积的生理盐水。
3. 实验时间：实验持续4周，分别进行观察和检测。
三、实验过程1. 实验前准备（1）检查实验动物的健康状况，排除患有疾病的动物。
（2）根据实验设计准备好各组的实验动物，确保每组数量足够。
2. 药物给药（1）按照实验设计，准备好不同剂量的待测药物溶液。
（2）根据实验分组，给予实验组相应剂量的药物，对照组给予等体积的生理盐水。
（3）记录每次给药的剂量和时间，确保给药的准确性。
3. 实验观察（1）每天对实验动物的一般情况进行观察，并记录体重、饮食量等信息。
（2）定期对实验动物进行生物学指标检测，包括血常规、生化指标等。
（3）定期对实验动物进行行为学观察，评估其神经系统反应和运动能力等。
4. 临床症状记录（1）记录实验动物出现的临床症状，包括但不限于死亡、体重减轻、食欲减退、运动障碍等。
（2）对实验动物出现的临床症状进行定性和定量分析，评估药物对其产生的不良反应。
5. 实验数据分析（1）对实验动物的各项指标数据进行统计分析，包括对照组和实验组的比较。
（2）根据数据分析结果，评估待测药物对实验动物的毒性作用和安全性。
四、实验安全1. 实验操作规范（1）实验操作人员必须按照相关规程进行操作，并严格遵守实验安全规定。
（2）对实验动物进行给药和观察时，必须佩戴手套和口罩，避免接触药物或动物排泄物。
2. 废物处理（1）将废弃的药物溶液和动物排泄物等废弃物按规定进行处理，避免对环境造成污染。
药物毒理学实验方法与技术
药物毒理学实验方法与技术
药物毒理学实验方法与技术是用于研究药物的安全性和有效性的
重要手段。
它旨在了解药物如何在人类体内和动物体内影响生物标记物、细胞和分子水平，从而促进新药的发展。
实验方法可以分为两类：生物学和定量分析。
一般来说，在进行药物毒理学实验之前，需要使用许多先进的实
验技术，以确定实验目标、指导实验过程和分析实验结果，并评估实
验的安全性和质量。
生物学技术包括免疫荧光技术、电镜（TEM）技术、杂交实验、RNA和DNA克隆等。
其中，最常用的实验技术是药物动力学（PK）和药物代谢（XB）实验。
以PK实验为例，主要通过测定新药在体内的吸收率和消除率，
预测其在体外的有效性和有害影响。
与PK实验类似，XB实验旨在探讨药物及其代谢产物在内部环境下如何进行代谢和分解，以及它们是如
何影响有效活性和毒性的。
除了上述技术外，非定量分析技术也是药物毒理学实验的关键工
具之一。
这些技术可以帮助科学家了解复杂生物系统如何应对外来物质，从而揭示药物给患者带来的有效性和毒性。
综上所述，药物毒理学实验需要运用大量先进的实验技术，如生
物学技术、药物动力学和药物代谢实验、非定量分析等技术，以有效
地评估新药剂的安全性和有效性。
这些实验方法是药物开发过程中不
可缺少的一部分，能够帮助医疗行业更好地了解药物的不良作用。
药物毒理学实验 11
实验内容： 实验内容：
健康小鼠腹腔注射0.1%的氯化高汞，以损 健康小鼠腹腔注射0.1%的氯化高汞，以损 伤肾单位
制备无蛋白血滤液 测定非蛋白氮(NPN) 测定非蛋白氮(NPN)
实验原理： 实验原理：
观察氯化高汞对肾脏的影响，氯化高汞是 种肾脏毒物, 一种肾脏毒物,其中毒动物常出现肾的体积 明显增大. 明显增大.汞对肾脏的作用部位主要在近曲 小管, 小管,先影响电解质及氨基酸的吸收，对小 鼠肾动能严重破坏作用。 血液中非蛋白测定是了解肾小球的功能， 血液中非蛋白的高低与肾小球高低有关。
实验方法与步骤：
1、用药物损伤肾单位 取2只小鼠（提前饥饿10到12小时的小鼠）称重，其中取只小鼠 （提前饥饿10到12小时的小鼠） 注入0.1%氯化高汞 0.5ml/10g）， 注入0.1%氯化高汞（0.5ml/10g），观察小白鼠的活动 情况，并计算脏器系数。 2、制备无蛋白血滤液 在离心管中加入0.03mol/l硫酸0.25ml，用采血 在离心管中加入0.03mol/l硫酸0.25ml，用采血 管取0.25ml血液加入上述硫酸溶液中，混匀。在 管取0.25ml血液加入上述硫酸溶液中，混匀。在 加入10%钨酸钠0.25ml，静止10分钟。 加入10%钨酸钠0.25ml，静止10分钟。 再以3000转 再以3000转/分的转速离心五分钟，取上清液。
药物毒理学实验
实验三 氯化高汞对小鼠肾功能的影响
实验目的： 实验目的：
掌握小鼠腹腔注射及采血
掌握脏系数的计算及测量方法
掌握血液中非蛋白氮的测定方法
实验材料： 实验材料：
实验动物：小鼠（18-22g） 实验动物：小鼠（18-22g）4只 实验药物：0.1%氯化高汞 实验药物：0.1%氯化高汞 ，0.03mol/L 硫酸 10%钨酸钠 ， 蒸馏水，酒精 10%钨酸钠 实验器械：镊子，采血管，注射器，手术器 实验器械：镊子，采血管，注射器，手术器 械，容量瓶，大烧杯，解剖板，天平
药物毒理学之生殖毒性实验
生殖毒性试验：所用药物至少应有二至三种剂量并设对照组，高剂量可产生轻度毒性反应，低剂量应为拟议中的治疗量的某些倍量。
给药途径原则上与推荐临床应用的给药途径相同，口服制剂应用灌胃法。
（１）一般生殖毒性试验动物：一种或一种以上试验动物，如用小鼠或大鼠每组雌雄各２０只以上。
给药时期：选择性成熟的动物，交配前雄性动物连续给药６０天以上，雌性动物连续给药１４天。
雌性动物在确定已经交配后继续给药至多数胚胎器官发生期。
检查：给药的雌性动物与给药的雄性动物同笼交配过夜后，以适当方法检查其交配成功与否（阴栓或精子的有无）。
同笼饲养期限最多两周。
必要时给药动物可以和非给药动物分别交配，已交配的雌性动物，推定其妊娠末期及时解剖，观察妊娠的确立、胎儿的吸收和死亡及子宫内活胎的发展情况，并进行形态学检查（性别、外表及内部器官的形态学观察及骨骼透明染色标本的检查），必要时进行组织学和组织化学的详细检查。
给药的雄性动物及未交配上的雌鼠均作剖检，必要时进行病理组织学检查。
（２）致畸胎试验动物：至少一种动物，一般采用小鼠或大鼠，每组１５—２０只孕鼠，家兔每组８—１２只孕兔。
剂量：至少有二至三种剂量，并另设对照组，高剂量可有轻度毒性反应，低剂量应为拟议中的治疗量的某些倍量。
给药途径：原则上与推荐临床应用的给药途径相同，口服制剂应用灌胃法。
给药时期：胚胎的器官形成期。
检查：全部动物在妊娠末期剖检，观察妊娠的确立，有无死胎和吸收胎及子宫内活胎的发育情况，并进行形态学检查（性别、外表及内部器官的形态学观察及骨骼透明染色标本的检查），必要时进行组织学和／或组织化学的详细检查。
某些新药需要观察其对子代的影响。
动物数应相应增加孕鼠１０只，使其自然分娩，观察其下一代直至成年。
检查新生动物的存活、生长及发育情况，包括行为、生殖功能及其他异常症状。
必要时还可对给药的雌性动物长期观察其生殖、受孕、分娩及次子代的情况。
结果处理：将数据汇总成表，尽量将全部观察的结果采用恰当的统计学方法分析及评价。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
重程度，中毒死亡的情况等，根据各组动物死亡数计
算半数致死量（LD50）。据此分析受试动物毒性反应 与剂量的关系，并根据LD50值对药物进行毒性分级。
三.实验材料
（1）器材
（2）药品
1ml注射器、电子天平、记号笔、镊子、剪刀等。
盐酸赛拉嗪注射液。
（3）动物
实验一
急性毒性试验
•
（一） 药物LD50的测定
一、实验目的
（1）理念——是药三分毒;
（2）了解一些常规药物毒理学的试验方法， 及评价指标; （3）掌握药物急性毒性试验的试验设计方 法、LD50的测定及计算方法。
二. 实验原理
选择健康的实验动物，根据体重按随机分组方法，
根据LD50计算的设计原则将动物分成数个染毒组。一
死试验。
（2） 致癌实验： 短期致癌实验和长期致癌实验。
（3） 致畸胎试验：于孕鼠或孕兔胚胎的器官形成期给药，观察对子代的影响。
最大耐受剂量(MTD)
指在外来化合物急性毒性实验中,化学物质不引起
受试对象(实验动物)出现死亡的最高剂量,故可缩写为LD0。一般不用最大耐 受剂量来比较两种外来化合物的毒性。 治疗指数 为药物的安全性指标。通常将半数中毒量（TD50）/半数有
察受试区皮肤的变化，有无红斑、水肿等现象。
如为多次给受试物实验则一般每日涂抹一次，连续一周， 其余均与一次给受试物的方法和要求一致。
2、结果判断与评价
每只动物实验结果按表1进行刺激反应评分，
计算出平均分值按表2进行刺激强度评价：
表1 皮肤刺激反应评分
红斑形成
无红斑 勉强可见 明显红斑 中等-严重红斑
急性毒性试验
是指一次或24小时内多次染毒的试验，是毒性研究的
第一步。要求采用啮齿类或非啮齿类两种动物。通常为小鼠或大鼠采用经 口、吸入或经皮染毒途径。急性毒性试验主要测定半数致死量（浓度）， 观察急性中毒表现， 亚慢性毒性 是指实验动物连续多日接触较大剂量的外来化合物所出
现的中毒效应。所谓较大剂量，是指小于急性LD50的剂量。“多日”的确 切天数，至今尚无完全统一的认识。一般认为在环境毒理学与食品毒理学 中所要求的连续接触为3～6个月，而在工业毒理学中认为1～3月即可。
分值计算方法
角膜评分：分值×５
虹膜评分：分值×５
结膜评分：（Ａ＋Ｂ＋Ｃ）分值×２
总分：３项评分之和。 分值范围（０－５０分）
眼刺激性评价标准
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 刺激程度 积 分 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 无刺激性 ０－ 5 轻度刺激性 ５－１５ 轻度刺至中度刺激性 １５－２０ 中度刺激性 ２０－３０ 中度至重度度刺激性 ３０－４０ 重度刺激性 ４０－５０ ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
Σp：各组动物死亡率之总和 。
5. 评价指标
急性毒性分级 小鼠一次经口LD50 大致相当于体重 70kg人的致死剂量
极毒
剧毒 高毒
<1 mg/kg
1mg --10 mg/kg 11--100 mg/kg
< 7滴
7滴 ~ 1茶匙 1茶匙 ~ 35克
中等毒 低毒
无毒
101 - -1000 mg/kg 1001--10000 mg/kg
眼睛部分结构：模式图
眼刺激试验--角膜评分
刺激反应强度
无混浊 极轻微弥漫性混浊，虹膜清晰可见 轻度混浊（虹膜细微结构不清晰） 混浊（虹膜结构不清，瞳孔大小看不到） 极混浊（虹膜完全看不到）
评分
0 1 2 3 4
眼刺激试验—虹膜评分
刺激反应强度 评分
正常
皱褶明显加深，充血，肿胀，角膜周围
0
1
轻度充血，瞳孔对光仍有反应
出血，肉眼可见坏死，对光无反应（或源自出现其中一种反应） 2眼刺激试验—结膜评分
Ａ. 充血（指睑结膜、球结膜部位） 血管正常 血管充血呈鲜红色 血管充血呈深红色，血管不易分辨 弥漫性充血呈紫红色 Ｂ. 水肿 无水肿 轻微水肿（包括瞬膜） 明显水肿，伴有部分眼睑外翻 水肿至眼睑近半闭合 水肿至眼睑超半闭合 Ｃ. 分泌物 无分泌物 少量分泌物 分泌物使眼睑和睫毛潮湿或粘着 分泌物使整个眼区潮湿或粘着 评分 ０ １ ２ ３ ０ １ ２ ３ ４ ０ １ ２ ３
构,是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。
微核是在细胞的有丝分裂后期染色体有规律地进 入子细胞形成细胞核时，仍然留在细胞质中的染色 单体或染色体的无着丝粒片断或环。最后单独形成 一个或几个规则的次核，存在于细胞质中，由于比 核小得多故称微核。 微核的产生与染色体损伤有关。
以受试物处理啮齿类动物，然后处死，取骨髓，制片、固定、
染色，于显微镜下计数PCE中的微核。如果与对照组比较，处 理组PCE微核率有统计学意义的增加，并有剂量-反应关系， 则可认为该受试物是哺乳动物体细胞的致突变物。
微 核（micronucleus, 简称MCN）
也叫卫星核,是真核类生物细胞中的一种异常结
>10000 mg/kg
35 ~ 350克 350 ~ 1050克
>1050克
6. 注意事项
6.1 正确捉拿小白鼠，防止咬伤；
6.2
注意肌肉注射方法，给药剂量力求准确；
6.3 实时注意观察小鼠中毒症状及其发生时间、死亡 时间。
7. 作业
7.1 查阅文献，与国内外相关文献报道结果作比较。
7.2 撰写试验报告
健康成年小白鼠若干只，体重18-22g。
四.实验方法
1. 预实验
各组剂量分别为Dmax、（ Dmax ）r、（ Dmax ）r2、(Dmax)r3……….
2.正式试验
2.1试验步骤 小白鼠禁 食6-10h 60min
随机分成5组
各组按试验设 计方案给药 计算LD50
记录小鼠死亡 只数
得出结论
将小白鼠随机分成5组，每 组4只(随机单位 组设计方法)。
三、实验材料
1、动物：成年健康家兔。家兔休重2kg左右，与给受试物24
小时将动物背部脊柱两侧毛脱掉，脱毛面积约为体表面积1０
％（家兔每侧各约50cm2）。 2、受试物：膏剂、液体或粉末。粉末需用适宜赋形剂（如 羊毛脂、凡士林等）混匀，本实验采用10%双氧水溶液。
四、实验方法
1、实验操作：在家兔背部受试物区和对照区（脱毛后），一 次将受试物1ml均匀涂布受试物区，将生理盐水涂布于空白对 照区，再以医用纱布及胶布进行包扎固定，开始计时。在给 药后30分钟取下包扎，用温水洗净皮肤上的残留受试物，观
（二） 刺激性试验
1. 皮肤刺激实验
2. 眼部刺激实验
1.皮肤刺激性实验
一.实验目的
通过比较染毒动物与正常动物皮肤的变化，学
习评价外源性化学物急性皮肤刺激的 基本方法。
二、实验原理
皮肤刺激试验是指皮肤接触药物是否产生可逆性炎性症状的 试验，它又分急性皮肤刺激试验（一次皮肤涂抹实验）和多次皮 肤刺激试验。
520
4. 计算LD50
4.1计算方法：目测机率单位法、加权机率单 位法(Bliss 法)、寇氏法、序贯法。 4.2 Bliss 法是目前推荐使用的方法。此法对 剂量分组无严格要求，不需要剂量组有0%和 100%死亡率，是目前公认最准确的测定方法。 4.3 我国卫生部规定，Bliss法是作为新药 LD50测定评定必须采用的方法。
（1）小白鼠编号（从1-20号）用两种颜色记 号笔进行标记： 黑色代表个位（蓝色记号笔）； 红色代表十位（红色记号笔）。 （2）小鼠称重并按体重大小依次排序。 ① ④ ② ⑤ ③ ⑥ ⑦ ⑧ ⑨
2.2 试验设计
组别 1 2 3 4 5
小鼠编号 5 18 20 7 13 6 9 1 19 15 2 12 3 16 17 11 10 8 4 14
积分
0 1 2 3
紫红色红斑并有焦痂形成
4
0
水肿形成
无水肿
勉强可见
皮肤隆起轮廓清楚 水肿隆起约1mm 水肿隆起超过1mm，范围扩大 总分
1
2 3 4 8
表2 皮肤刺激强度评价
刺激反应 无刺激 轻度刺激 中度刺激 强刺激 分值 0-0.4 0.5-2.9 3-5.9 6.0-8.0
2. 眼刺激试验
一.试验目的 1.眼刺激试验目的； 2.眼刺激试验方法； 3.眼刺激试验结果的评价方法。
二、实验材料
1.动物：家兔；
2.受试物：10%双氧水溶液；
3.剂量：滴入1滴； 4. 方法：滴入一侧眼结膜囊内，另一侧作为空白对照（滴 入等量生理盐水）。给药后使眼睛被动闭合 1min 。记录给 药后5min、10min、15min、20min时眼的局部反应情况（1h、 12h、24h、48h、72h）。
效量（ED50)或半数致死量（LD50）/半数有效量（ED50）称为治疗指数。
治疗指数大的药物相对治疗指数小的药物安全，但以治疗指数来评价药物的 安全性，并不完全可靠。
安全范围
是指药物的最小有效量与最小中毒量之间的范围，它表示药
物的安全性，一般安全范围越大，用药越安全。药理学用上95%有效剂量 （ED95）到5%中毒剂量（LD5）的距离来表示。
计算方法1：加权机率单位法(Bliss 法)-软件辅助计算
计算方法2： 2. 改良寇氏法公式计算： LD50=log-1[Xm-i(Σp-0.5)] Xm：为最大剂量组剂量对数值； i：为相邻两组剂量比值的对数（相邻两组对数剂量的差值， log2）； P：为各组动物死亡率（用小数表示，如果死亡率为20%应写成 0.20）；
药物毒理学实验
指导老师： 刘 娟 罗艺晨
• 毒性试验
•
给实验动物进行不同途径、不同期限的染毒、检测各
种毒性终点的实验。其目的是确定无害作用水平、毒性类