Cellometer细胞计数仪Auto T4中文操作手册

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2.2.3 插入细胞计数板 轻持细胞计数板的白色区域,将其插入 Auto T4 样品槽,轻推至停止。此时,仪器将计数分析插入 Auto
T4 中加样室中的细胞样品。计数结束后,取出,反转插入计数板,计数另一加样室中样品。
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2.2.4 焦距调节 1.打开电源,运行 cellometer 软件。 2.加样后,将 CHT4 计数板插入 Auto T4。
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2.点击“next”
3.点击“install”
4.点击“finish” B USB 驱动软件安装 1.连接 Auto T4 电源,打开背面开关。 2.USB 线分别连接 Auto T4 与电脑 USB 2.0 端口(确认 Cellometer®软件安装已经结束),安装程序自动起动。
量成团细胞,或者细Baidu Nhomakorabea浓度很高,“De-cluster”必须激活,同时,调低“Contrast Enhancement”值。 3.7 细胞大小分析
每次细胞计数后,我们可以通过细胞大小分析功能观察细胞大小分布,同时获得细胞大小直方图用于鉴别样 本中不同的细胞类型或者监测细胞培养过程中细胞大小的改变。使用“Save As”功能,可以存储数据。如果未 存,该数据将被下一样品的数据所覆盖。 选择“Multiple”最多可以添加 5 个细胞大小数据在直方图中进行比较。数据也可拷贝至剪贴板,然后再粘贴到 其它类型文件,如:Work,Excel,PowerPoint.
3.点击

4.缓慢调节焦距调节旋钮,直至细胞图像清晰:细胞边缘清晰,中央明亮。
5.取出 CHT4. 6.Options 菜单选项中选择“Take Background Image”. 7.点击 OK. 2.2.5 细胞计数
点击“Count”键进行细胞计数(必须首先按“display image”键)。位于底部的进程栏显示细胞计数进 程。 3.2.细胞存活率检测 1. 点击 “Test Viability”选项 2. 点击“Count”键进行细胞计数 3. 输出显示 “Live Cell Concentration” (cells/ml), 及 "Viability" (%) 4. 点击 “Counted”选项,观察计数结果。 2.2.6 结果显示
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3.点击“next”
4.选择“install the software automatically(recommended)” 5.点击“next”
6.选择“continue anyway”
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7.点击“finish” 有时,计算机可能会要求重装 USB 驱动,重复 1-7 步。
中心过亮的死细胞 此类细胞的典型特征是中心区过亮,如下图所示,参数中的“Sensitivity”用来检测此类死细胞。可以看
到随着“Sensitivity”的升高,检测到的死细胞数目增加。
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CHO 细胞参数设置 3.5 去团簇参功能数调整
界面的左侧显示细胞计数的结果,包括:计数细胞数,直径均值,以及细胞浓度。如果选择了细胞存活 率检测,结果将只显示活细胞计数以及细胞存活百分率。 2.2.7 数据保存
细胞计数结果可以保存为数据文件。界面的左下角显示数据文件名称及存储位置。如需更改,选用菜单
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栏中 File->New Data File 选项,点击保存。 2.2.8 图像保存
MCF7 细胞,调整后的参数用于区分细胞簇。 3.6 小细胞计数过程中去团簇功能的开启/关闭
小细胞主要是指小鼠脾细胞,淋巴细胞,胸腺细胞以及 PBMC,这些细胞的直径一般小于 7μm。对于这些小 细胞计数,去团簇功能的激活可能会影响细胞计数的速度,所以一般应关闭此功能。但是,如果细胞样品中含大
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3 软件指南
3.1 细胞计数浓度范围 为了保证细胞计数结果的准确,样品浓度范围应该在 2.5×105-1×107 ,浓度过低,过高都会影响计数
结果的准确性。 3.2 设定新的细胞类型
方法一:从细胞库中导入 1.打开 Cell Type 菜单 2.选择 Import/export 选项 3. 从细胞库中选择细胞 4. 点击“>>” 5. 点击 “OK” 6. 在 “Set Up”框中点击 “Cell Type”下拉菜单选择细胞 方法二: 1. 点击 New Cell Type Wizard 选项 2. 选择使用 Live 或 Saved Image 3. 处理图像,起始细胞参数 4. 输入细胞类型名称 5. 处理图像,创建细胞类型参数 6.观察检测结果 点击 “Counted” 分别检查 “1” to “8”视野 调整细胞参数,再次计数 3.3 细胞大小参数调整 对于每种细胞类型,“Cell Diameter Max”和“Cell Diameter Min”分别代表细胞大小的最高和最低值。
选择菜单 File->Save Images 选项,图像自动保存。 2.2.9 结果分析(Analysis)
结果分析包括样品调整和细胞大小分析两项。根据细胞浓度检测结果,样品调整功能可以计算目的浓度 或者细胞数。我们也可以得到细胞大小分布及相应的直方图。 新的细胞参数的设置: 1. 先将细胞计数一下,记录细胞的平均直径 2. 选择软件左上角的 Cell type 菜单的 New cell type 3. 在 cell type name 输入细胞种类的名称 4. 在 cell diameter Min 输入平均直径减去 5mm 5. 在 cell diameter Max 输入平均直径加上 5mm 6. 点击 ok 保存即可
HT-29 细胞参数设置
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3.4 死细胞参数调整 对于台盼兰染色效果好的细胞类型,在死细胞参数缺省设置条件下的细胞计数速度最快。而在某些条件下,
需要对该参数进行调整。 死细胞染色弱
为了能够检测到台盼兰染色较弱的死细胞,激活“Very Dim Dead Cells”选项。死细胞的“Contrast Enhancement”值高于正常活细胞。
仪器清单:
Auto T4 软件光盘 Auto T4 功率变流器 USB 线 启动指导 用户手册 CHT4 计数板(单独运输) 2.1.2 软件安装 计算机配置要求:
Windows XP 2.4GHz 处理器 512MB 内存 USB 2.0 端口 安装程序 A 软件安装 1. 将软件安装光盘插入光驱中
加样
插入计数板
1.3 Cellometer®软件
Cellometer®自动计数软件控制仪器,获取,分析及储存数据。
获取数据
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2 Auto T4 使用
2.1 安装
本部分详述 cellometer Auto T4 的安装过程。 2.1.1 仪器检查
仪器在打开包装后应详细检查是否有机械损伤,如焦距调节旋钮。
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2.2 细胞计数设置
本节介绍细胞计数的完整程序 2.2.1 细胞悬液准备
1.准备细胞样品,浓度在 2×105-1×107/mL. 2.如果计数细胞存活率,准备 0.2%台盼兰溶液(0.4%储液在使用前经 PBS 稀释)。 2.2.2 加样 1.CHT4 计数板置于干净的纸巾上。 2.在加样室的边缘标记,避免弄脏计数板的加样仓。 3.准备样品,充分混匀,避免产生气泡。 4.如果进行细胞存活率分析,取 50μL 细胞样品加入等体积台盼兰溶液染色。 5.加样 20μL。
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Cellometer Auto T4 用户手册
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1 简介
Cellometer® Auto T4 全自动细胞计数分析仪采用先进的基于图像分析技术的细
胞计数方法。与手动计数相似,细胞悬液在细胞计数板中平铺为一薄层,摄取的高
两个去团簇参数用来区分连在一起的细胞,分别是“De-cluster Edge Factor”和“Decluster Th Factor”。对于 大多数细胞来说,缺省设置足以区分细胞团内的单个细胞。然而,一些特殊类型的细胞,如:MCF7,PC12,细胞 簇内细胞边界非常弱,此时就需要进行参数调整来加以区分。
分辨率显微图像由 Cellometer®软件分析并获得计数结果。计数面积相当于血球计数
板四个角的面积。
1.1 细胞计数板
细胞计数板包含两个独立的,精确控制高度的加样仓。通过加样孔,每个加样仓中可加入 15-20μL 细胞悬 液。
细胞计数板
1.2 细胞计数步骤
操作简便,快速,3 步即可完成。
每个加样室有 2 个孔,一个用于加样,一个 用于排除空气。.
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