环氧乙烷残留量分析方法

二、气相色谱法
顶空进样适用于固体和液体供试品中 挥发性组分的分离和测定。将固态或液态 的供试品制成供试液后，置于密闭小瓶中， 在恒温控制的加热室中加热至供试品中挥 发性组分在非气态和气态达至平衡后，由 进样器自动吸取一定体积的顶空气注入色 谱柱中。
二、气相色谱法
• 1.3 色谱柱 色谱柱为填充柱或毛细管柱。 • 填充柱的材质为不锈钢或玻璃，内径为2~ • 4mm，柱长为2~4m，内装吸附剂、高分子多孔 • 小球或涂渍固定液的载体，粒径为0.25~0.18mm、
一、比色分析法
混匀，按式（1）计算其浓度： C＝ W 1000 ……………………………式（1） 50 式中： c－乙二醇标准贮备液浓度，g/L； W－溶液中乙二醇重量，g
•
移取标准贮备液1.0ml，用水稀释至1000ml。
4.7 乙二醇标准溶液（浓度C1=C×10-3)：精密
一、比色分析法
• 5 样品试液制备 • 5.1 试液制备应在取样后，立即进行，
医疗器械环氧乙烷的接触量限度
• 短期接触（≤ 24h；平均日剂量≤ 20mg） • 长期接触（≤ 30d，>24h；平均日剂量≤ 2mg， • 持久接触（ > 30d；平均日剂量≤0.1mg，此外
最大剂量：前24h ≤ 20mg，前30d ≤60mg，一 生≤ 2.5g）
此外最大剂量：前24h ≤ 20mg，前30d ≤60mg）
• 7 试验步骤 • 7.1 用储备液配制1× 10-3g/L ～ 1×
10-2g/L六个系列浓度的标准溶液。各取 10ml按6.2方法处理。 用玻璃注射器依次从 平衡后的标准样和试样中迅速取1ml上部气 体，注入进样器，记录环氧乙烷的峰高 （或面积）。
二、气相色谱法
•注
1 在一个分析中尽量一人操作，并使用同一只 1ml玻璃注射器； 2 注射器预先恒温到样品相同温度； 3 每次注意环氧乙烷保留时间的变化，以防 进样气化垫漏气； 4 每个样品（包括标样）在尽可能短的时间 内分析三次，三次分析中必须有两次结果相差不 大于5%，否则此样品应重新进行分析。
二、气相色谱法
•1
气相色谱法简述 气相色谱法系采用气体为流动相（载气）流 经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。 物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行 分离，各组分先后进入检测器，用记录仪、积分 仪或数据处理系统记录色谱信号。 气相色谱仪由载气源、进样部分、色谱柱、 柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、 色谱柱和检测器的温度均在控制状态。
一、比色分析法
• 3 测定方法
•
3.1 取乙二醇标准品适量，制成一定 浓度的标准溶液。 • 3.2 精密量取不同体积的乙二醇标准溶 液配制成不同浓度的标准品供试液，测定 吸光度。 • 3.3 根据不同体积的标准溶液对应的 吸光度值，绘制吸光度－体积标准曲线。
一、比色分析法
•
3.4 取样品适量，配制成样品供试液， 同法测定吸光度，以测得的吸光度从标准 曲线上查得相应的标准溶液的体积。 • 3.5 根据公式，计算出环氧乙烷残留量。
一、比色分析法
析的依据，其数学表达式如下： 1 A=lot T =ECL 式中：A为吸光度 T为透光率 E为吸收系数 C为溶液浓度 L为光度长度 如溶液的浓度（C）为1％（g/ml），光 路长度（L）为1cm，相应的吸光度即为吸收 % 系数以 E 1 表示。 1cm
一、比色分析法
• 2 原理
环氧乙烷在酸性条件下水解生成乙二 醇，乙二醇经高碘酸氧化生成甲醛，甲醛 与品红－亚硫酸试液反应生成产生紫红色 化合物，通过比色分析法可求得环氧乙烷 含量。
•
柱长 内径 担体 GDX-407 80目～100目
表2
柱温 约130℃
1～2m
2～3mm
Porapak q－s 80目～100目
约120℃
二、气相色谱法
• 4.3 仪器各部位温度
a）气化室200℃ b）检测室250℃ • 4.4 气流量 a）N2 15ml/min ～ 30 ml/min b）H2 30 ml/min c）空气 300 ml/min
二、气相色谱法
•
7.2 用标准样所测数据，绘出标准曲 线（X：EO浓度，g/L；Y：峰高或面积）。 • 7.3 从标准曲线上找出样品相应的浓度。 如果所测样品结果不在标准曲线范围内， 应改变标准溶液的浓度重新作标准曲线。
二、气相色谱法
•
•
对含量表示。
8 结果计算
环氧乙烷残留量用绝对含量或相
按式（4）计算样品中环氧乙烷绝对含量： WEO=5c1· m………………………….式（4） 式中： WEO －单位产品中环氧乙烷绝对含量，mg； c1 －标准曲线上找出的样品试液相应的浓度， g/L ； m － 单位产品的质量，g。
6.1 取五支纳氏比色管，分别加入0.1mol
溶液0.4ml，放置1小时，再分别滴加硫代硫酸 钠溶液至出现的黄色恰好消失（除去剩余的高 碘酸）。再分别加入品红－亚硫酸试液0.2ml，
6.2 于上述各管中分别加入0.5％高碘酸
一、比色分析法
用蒸馏水稀释至10ml，室温放置1小时，于 560nm波长处以空白液作参比，测定吸光度。绘 制吸光度－体积标准曲线。
3.1 取环氧乙烷标准品适量，制成六个浓度 3.2 当标准品试样达到气液平衡时，不同
浓度的液体对应于不同浓度的气体，取平衡后的 气体，注入进样器，记录环氧乙烷的峰高（或面 积）。
二、气相色谱法
• •
根据不同浓度的标准溶液对应的 峰高（或面积） ，绘制峰高（或面积） － 浓度标准曲线。 取样品适量，配制成样品试样，同 法测定峰高（或面积） ，以测得的峰高（或 面积）从标准曲线上查得相应的标准溶液的 浓度。
二、气相色谱法
• 6 样品试样制备 • 6.1 试验样制备ຫໍສະໝຸດ Baidu在取样后立即进行，
否则应将供试样品封于由聚四氟乙烯密封 的金属容器中保存。 • 6.2 将样品截为5mm长碎块，取2.0g 放入萃取容器中，加10ml水，顶端空间 40m;，容器内压力为常压，在恒温水浴60 ℃±1 ℃中放置20分钟。
二、气相色谱法
环氧乙烷残留量分析方法
• 一 、 比色分析法 • 二 、 气相色谱法
一、比色分析法
1 比色法（紫外－可见分光光度法）简述
1.1 紫外－可见分光广度法是通过被测物
质在紫外光区的特定波长处或一定波长范围内的 吸光度，对该物质进行定性和定量的方法。
1.2 一般情况下，紫外－可见分光广度法
遵循朗伯－比尔（Lambert－Beer）定律为光的 1 T 吸收定律，它是紫外分光光度法进行定量分
二、气相色谱法
• 5 环氧乙烷标准贮备液的制备
取外部干燥的50ml容量瓶，加水约30ml， 加瓶塞，称重，精确到0.1mg。用注射器注入约 0.6ml环氧乙烷，不加瓶塞，轻轻摇匀，盖好瓶塞， 称重，前后两次称重之差，即为溶液中所含环氧 乙烷的重量。加水至刻度再将此溶液稀释成1× 10-2g/L作为标准贮备液。
•
6.3 精密移取样品试液2.0ml于纳氏比色管
中，按6.2步骤操作，以测得的吸光度从标准曲线 上查得试液相应的体积。
一、比色分析法
•7
结果计算 环氧乙烷残留量用绝对含量或相 对含量表示。
一、比色分析法
WEO=1.775V1· c1· m……………………….式（2） 式中： WEO －单位产品中环氧乙烷绝对含量，mg； V1 －标准曲线上找出的样品试液相应的体积， ml； c1 －乙二醇标准溶液浓度，g/L； m －单位产品的质量，g。
二、气相色谱法
•
1.1 载气源 气相色谱法的流动相为 气体，称为载气，氦、氮和氢可用作载气， 可由高压瓶或高纯度气体发生器提供，经 过适当的减压装置，以一定的流速经过进 样器和色谱柱；根据供试品的性质和检测 器种类选择载气，除另有规定外，常用载 气为氮气。
二、气相色谱法
1.2 进样部分 进样方式一般可 采用溶液直接进样或顶空进样。 溶液直接进样采用微量注射器、微 量进样阀或有分流装置的气化室进样。 采用溶液直接进样时，进样口温度应高 于柱温30℃ ~50℃ ；进样量一般不超过 数微升；柱径越细，进样量应越少，采 用毛细管柱时，一般应分流以免过载。
一、比色分析法
•
•
4.5 品红－亚硫酸试液：称取0.1g品红， 加入120ml，热水溶解，冷却后加入10％亚硫 酸钠溶液20ml，盐酸2ml置于暗处。试液应无 色，若发现有微红色，应重新配制。 4.6 乙二醇标准贮备液：取一外部干燥清 洁的50ml容量瓶，加水约30ml，移取0.5ml乙 二醇，迅速加入瓶中，摇匀，精确称重。两次 称重之差即为溶液中所含的 重量，加水至刻度，
0.18~0.15mm、或0.15~0.125mm。常用载体为经酸 洗并硅烷化处理的硅藻土或高分子多孔小球，常 用固定液有甲基聚硅氧烷、聚乙二醇等。
二、气相色谱法
•
毛细管柱的材质为玻璃或石英，内壁或载体 经涂渍或交联固定液，内径一般为0.25mm、 0.32mm或0.53mm，柱长5~60m，固定液膜厚 0.1~5.0um，常用的固定液有甲基聚硅氧烷、不同 比例组成的苯基甲基聚硅氧烷、聚乙二醇等。 新填充柱和毛细管柱在使用前需老化以除去 残留溶剂及低分子量的聚合物， 色谱柱如长期未 用，使用前应老化处理，使基线稳定。
3.3
3.4
•
3.5
根据公式，计算出环氧乙烷残留量。
二、气相色谱法
• 4 气相色谱仪条件 • 4.1 氢焰鉴定器：灵敏度不小于
2×10－11g/s [苯，二硫化碳（CS2)] • 4.2 色谱柱：所用色谱柱应能使试样 中杂质和环氧乙烷完全分开，并有一定 的耐水性。色谱柱可选用表1推荐的条件
二、气相色谱法
•
二、气相色谱法
1.4 柱温箱 由于柱温箱稳定的波 动会影响色谱 分析结果的重现性，因此柱 温箱精度应在±1℃，且温度波动小于每小 时0.1℃。温度控制系统分为恒温和 程序升温两种。
二、气相色谱法
•
适合气相色谱法的检测器有 火焰离子化检测器（FID）、热导检测器（TCD） 、 氮磷检测器（NPD）、火焰光度检测器（FPD）、 电子捕获检测器（ECD）、质谱检测器（MS）等。 火焰离子化检测器对碳氢化合物响应良好，适合 检测大多数的药物。在使用火焰离子化检测器时， 检测器的温度一般应高于柱温，并不得低于 150℃ ，以免水汽凝结，通常为250~350℃ 。
1.5 检测器
二、气相色谱法
•
1.6 数据处理系统 可分为记录仪、 积分仪以及计算机工作站等。
二、气相色谱法
• 2 原理 • 在一定温度下，用萃取剂－水萃取样品
中所含环氧乙烷（EO），用顶空气相色谱 法测定环氧乙烷含量。
二、气相色谱法
• 3. 测定方法
• •
的标准溶液，各取10ml，制备六个浓度的标准品 试样。
环氧乙烷残留量检测
主讲人：吴珺
2007.12
环氧乙烷的综述
环氧乙烷（EO）为一种最简单的环醚。 低温时为无色易流动液体，沸点10.4℃，在 该温度以上为无色气体。EO液体在室温下 易挥发，有醚味。
环氧乙烷的综述
•
环氧乙烷对人体的危害
（1）急、慢性毒性 （2）三致作用及生殖毒性 （3）急性中毒与局部刺激 （4）神经系统损害与慢性毒性 （5）致癌作用 （6）生殖毒性
一、比色分析法
• 4 溶液配制
• • • •
至100ml。
4.1 0.1mol/L盐酸：取9ml盐酸稀释至1000ml。 4.2 0.5％高碘酸溶液：取高碘酸0.5g，稀释 4.3 硫代硫酸钠溶液：取硫代硫酸钠1g，稀 4.4 10％亚硫酸钠溶液：称取10.0g无水硫酸
释至100ml。
钠，溶解后，稀释至100ml。
7.1 按式（2）计算样品中环氧乙烷绝对含量：
一、比色分析法
• 7.2
按式（3）计算样品中环氧乙烷相对含量：
WEO=1.775V1· c1 ………………….式（3）中：
WEO －单位产品中环氧乙烷绝对含量，mg/kg； V1 －标准曲线上找出的样品试液相应的体 积，ml； c1 －乙二醇标准溶液浓度，g/L。
否则应将试样密封于容器中保存备用。 • 5.2 将试样截为约5mm长碎块，称取 2.0g置于容器中，加0.1mol/L盐酸10ml， 室温放置1小时。
一、比色分析法
• 6. 试验步骤
•
• •
/L盐酸2ml，再精确加入0.5ml、1.0ml、1.5ml 、2.0ml、2.5ml乙二醇标准溶液。另取一支纳 氏比色管，精确加入0.1mol/L盐酸2ml作为空 白对照。