【检验医学】丙氨酸氨基转移酶活性测定
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▪ 急性肝炎ALT下降伴血清甲胎蛋白轻度升高，表示 肝细胞再生，急性肝炎恢复。ALT在100U/L处波 动或再升高，提示急性肝炎转为慢性肝炎。
◈⊃ ► ◄ ■
临床意义
▪ 胆道疾病：胆囊炎、胆道结石、胆管炎、癌性肝外胆道 梗阻等，ALT轻度或中度增高。
▪ 心血管疾病：急性心肌梗死、心肌炎、心力衰竭合并肝 淤血，ALT轻度或中度增高。
◈⊃ ► ◄ ■
临床意义
▪ 生物参考区间: 男5～40U/L 女5～35U/L
▪ 轻度增高（50-100U/L）轻微肝损伤指征。见于各 种类型的轻型肝炎、肝脏轻度物理损伤或化学中毒、 脂肪肝、肝硬化、慢性迁延性肝炎。
▪ 中度增高（100-500U/L）病因与ALT明显增高基 本相同，但病情较轻，还可见于慢性活动性肝炎、 严重胆道梗阻伴肝细胞损伤、原发性肝癌、肝脓肿、 肝硬化活动期多。
毒性、中毒性、肝休克等。酒精性肝中毒应低 于此值。 ALT降低：磷酸吡多醛缺乏症
◈⊃ ► ◄ ■
注意事项
▪ 血清中含有酮酸能消耗NADH，使结果偏高；血清 中谷氨酸脱氢酶增高时，在有氨的条件下，亦消耗 NADH，使结果偏高。
▪ 血清不宜反复冷冻保存，以免影响酶的活性。 ▪ 标本应避免溶血，红细胞内的ALT的含量高于血清
▪ 试剂主要成分：
▪ R1： Tris 缓冲液（PH=7.5）100mmol/L
L-丙氨酸
500mmol/L
LDH
>1200U/L
▪ R2： α-酮戊二酸
15mmol/L
NADH
0.18mmol/L
▪ 2.试剂的储藏和稳定性：试剂在2-8℃避光保存，可稳 定至有效期；启用后在2-8℃稳定4周；若试剂混浊或 以水为空白在340nm处吸光度值小于1.0时，则不能使 用。
▪ 药物影响：氯丙秦、异烟肼、乙醇等药物引起ALT增高 ▪ 其它：如低血糖、低胆固醇及前白蛋白降低是肝功能严
重损害的指标。
◈⊃ ► ◄ ■
临床意义
▪ 医学决定水平： ＜20U/L可排除许多与ALT升高的有关疾病。 ＞60U/L的时候可考虑引起ALT增高的各种疾病。 ＞300U/L通常与急性肝细胞损伤有关，包括病
▪ 谷丙转氨酶催化丙氨酸的氨基转移，生成丙酮酸。 ▪ 丙酮酸与NADH在LDH的催化下反应生成乳酸和
NAD+ 。NADH在340nm处有特异吸收峰，其被氧 化的速率与血清中的ALT活性成正比，在340nm处测 定NADH下降速率，即可测出ALT活性。
◈⊃ ► ◄ ■
试剂与仪器
▪ 1.试剂：液体双试剂，可直接使用。
◈⊃ ► ◄ ■
临床意义
▪ 明显增高（大于500U/L）急性弥漫性肝损伤、严 重中毒性肝损伤，最高可达5000U/L。
▪ 急性病毒性肝炎，黄疸出现后，ALT迅速上升，其 活性的高低与病情基本一致。
▪ 重症肝炎症状恶化同时伴有黄疸加重而ALT下降， 呈现胆红素与ALT分离，表示肝细胞大量坏死，肝 功能衰竭。
◈⊃ ► ◄ ■
计算
ALT（U/L）= △A/min × ──T─V×─10─00── SV×（ε1－ε2）×P
= △A/min×3376 式中： TV = 总反应体积（µl）
SV = 样品体积（µl） ε1 = NADH在340nm处的毫摩尔消光系数6.22 ε2 = NADH在405nm处的毫摩尔消光系数 P = 比色杯光径（0.5cm）
▪ 测定读点：21-26
样品量：6.0μl
▪ R1试剂量：120μl ▪ R2试剂量：30μl ▪ 定标方式：LINEAR
R1位置：A03 R2位置：A04
定标液数值=98U/L
▪ ALT（U/L）=（△A样品吸光度/△A标准液吸光度） ×标准液浓度
◈⊃ ► ◄ ■
操作步骤
▪ 实验参数(单试剂) R1:R2=4:1 ▪ 反应方式：RATE DOWN ▪ 波长：340nm ▪ 样品量：25μl ▪ 试剂量：500μl ▪ 定标方式：FACTOR ▪ 酶测定因数：-3376 ▪ 单位：U/L
▪ 1998年IFCC批准37℃条件下的酶活性测定 的推荐方法，是目前公认的国际参考方法， 同时推荐应用酶校准品校准各实验室酶活性 测定结果，提高了实验室间测定结果的可比 43;α-酮戊二酸 ALT 丙酮酸 + L-谷氨酸
▪ 丙酮酸 + NADH + H+ LDH L-乳酸 + NAD+ + H2O
▪ 转氨酶广泛存在于肝脏、心肌、骨骼肌、肾、 脑、胰、脾、肺、白细胞和红细胞中。这些 组织损伤或坏死时，酶从这些组织细胞中释 出，致使血清中ALT或AST活性升高。
◈⊃ ► ◄ ■
简述
▪ 各种肝炎急性期，许多药物引起的肝脏及各 种肝细胞坏死均可见ALT显著增高，因而， ALT检测是肝细胞损伤的灵敏指标。
（浆）3-5倍，有溶血标本会造成结果增高。 ▪ 宜用血清标本测定。草酸盐、枸橼酸盐抗凝剂虽不
抑制酶活性，但可引起血浆轻度浑浊，不宜使用。
◈⊃ ► ◄ ■
方法学评价
▪ 本实验线性：10～1000U/L。 ▪ 批内精密度小于5% 、批间精密度小
于6.67% ▪ 准确性偏差不超过±10%
◈⊃ ► ◄ ■
◈⊃ ► ◄ ■
标本采集与要求
▪ 标本采集：血清或血浆标本 ▪ 标本处理：采血后应尽快送检，送检后血
标本应尽快分离血清。标本在2-8ºC可保 存7天。
◈⊃ ► ◄ ■
操作步骤
▪ 全（半）自动分析法：速率法
▪ 实验参数(双试剂)
▪ 反应方式：RATE DOWN 主/副波长： 340nm/404nm
安全性预警措施
▪ 应按《实验室安全管理》程序执行。在进行 操作前，首先应采取必要的保护性措施如穿 戴保护性外套、手套等。
▪ 如血液标本采用开盖程序测试，开盖时应防 止气雾胶污染环境。
▪ 所有检查过的血液标本及有关的废弃物，都 会带来潜在的危险或生物污染。
丙氨酸氨基转移酶 活性测定
实验目的与要求
▪ 利用半自动生化分析仪进行ALT项目的检测 ▪ 掌握连续监测法测定ALT的基本原理及操作 ▪ 熟悉ALT检测结果的临床意义 ▪ 了解连续监测法测定ALT的特点和注意事项
◈⊃ ► ◄ ■
简述
▪ 转氨酶是催化α-氨基酸和α-酮酸之间氨基移 换反应的一组。丙氨酸氨基转移酶（ALT） 和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）最具有临 床意义。
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临床意义
▪ 胆道疾病：胆囊炎、胆道结石、胆管炎、癌性肝外胆道 梗阻等，ALT轻度或中度增高。
▪ 心血管疾病：急性心肌梗死、心肌炎、心力衰竭合并肝 淤血，ALT轻度或中度增高。
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临床意义
▪ 生物参考区间: 男5～40U/L 女5～35U/L
▪ 轻度增高（50-100U/L）轻微肝损伤指征。见于各 种类型的轻型肝炎、肝脏轻度物理损伤或化学中毒、 脂肪肝、肝硬化、慢性迁延性肝炎。
▪ 中度增高（100-500U/L）病因与ALT明显增高基 本相同，但病情较轻，还可见于慢性活动性肝炎、 严重胆道梗阻伴肝细胞损伤、原发性肝癌、肝脓肿、 肝硬化活动期多。
毒性、中毒性、肝休克等。酒精性肝中毒应低 于此值。 ALT降低：磷酸吡多醛缺乏症
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注意事项
▪ 血清中含有酮酸能消耗NADH，使结果偏高；血清 中谷氨酸脱氢酶增高时，在有氨的条件下，亦消耗 NADH，使结果偏高。
▪ 血清不宜反复冷冻保存，以免影响酶的活性。 ▪ 标本应避免溶血，红细胞内的ALT的含量高于血清
▪ 试剂主要成分：
▪ R1： Tris 缓冲液（PH=7.5）100mmol/L
L-丙氨酸
500mmol/L
LDH
>1200U/L
▪ R2： α-酮戊二酸
15mmol/L
NADH
0.18mmol/L
▪ 2.试剂的储藏和稳定性：试剂在2-8℃避光保存，可稳 定至有效期；启用后在2-8℃稳定4周；若试剂混浊或 以水为空白在340nm处吸光度值小于1.0时，则不能使 用。
▪ 药物影响：氯丙秦、异烟肼、乙醇等药物引起ALT增高 ▪ 其它：如低血糖、低胆固醇及前白蛋白降低是肝功能严
重损害的指标。
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临床意义
▪ 医学决定水平： ＜20U/L可排除许多与ALT升高的有关疾病。 ＞60U/L的时候可考虑引起ALT增高的各种疾病。 ＞300U/L通常与急性肝细胞损伤有关，包括病
▪ 谷丙转氨酶催化丙氨酸的氨基转移，生成丙酮酸。 ▪ 丙酮酸与NADH在LDH的催化下反应生成乳酸和
NAD+ 。NADH在340nm处有特异吸收峰，其被氧 化的速率与血清中的ALT活性成正比，在340nm处测 定NADH下降速率，即可测出ALT活性。
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试剂与仪器
▪ 1.试剂：液体双试剂，可直接使用。
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临床意义
▪ 明显增高（大于500U/L）急性弥漫性肝损伤、严 重中毒性肝损伤，最高可达5000U/L。
▪ 急性病毒性肝炎，黄疸出现后，ALT迅速上升，其 活性的高低与病情基本一致。
▪ 重症肝炎症状恶化同时伴有黄疸加重而ALT下降， 呈现胆红素与ALT分离，表示肝细胞大量坏死，肝 功能衰竭。
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计算
ALT（U/L）= △A/min × ──T─V×─10─00── SV×（ε1－ε2）×P
= △A/min×3376 式中： TV = 总反应体积（µl）
SV = 样品体积（µl） ε1 = NADH在340nm处的毫摩尔消光系数6.22 ε2 = NADH在405nm处的毫摩尔消光系数 P = 比色杯光径（0.5cm）
▪ 测定读点：21-26
样品量：6.0μl
▪ R1试剂量：120μl ▪ R2试剂量：30μl ▪ 定标方式：LINEAR
R1位置：A03 R2位置：A04
定标液数值=98U/L
▪ ALT（U/L）=（△A样品吸光度/△A标准液吸光度） ×标准液浓度
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操作步骤
▪ 实验参数(单试剂) R1:R2=4:1 ▪ 反应方式：RATE DOWN ▪ 波长：340nm ▪ 样品量：25μl ▪ 试剂量：500μl ▪ 定标方式：FACTOR ▪ 酶测定因数：-3376 ▪ 单位：U/L
▪ 1998年IFCC批准37℃条件下的酶活性测定 的推荐方法，是目前公认的国际参考方法， 同时推荐应用酶校准品校准各实验室酶活性 测定结果，提高了实验室间测定结果的可比 43;α-酮戊二酸 ALT 丙酮酸 + L-谷氨酸
▪ 丙酮酸 + NADH + H+ LDH L-乳酸 + NAD+ + H2O
▪ 转氨酶广泛存在于肝脏、心肌、骨骼肌、肾、 脑、胰、脾、肺、白细胞和红细胞中。这些 组织损伤或坏死时，酶从这些组织细胞中释 出，致使血清中ALT或AST活性升高。
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简述
▪ 各种肝炎急性期，许多药物引起的肝脏及各 种肝细胞坏死均可见ALT显著增高，因而， ALT检测是肝细胞损伤的灵敏指标。
（浆）3-5倍，有溶血标本会造成结果增高。 ▪ 宜用血清标本测定。草酸盐、枸橼酸盐抗凝剂虽不
抑制酶活性，但可引起血浆轻度浑浊，不宜使用。
◈⊃ ► ◄ ■
方法学评价
▪ 本实验线性：10～1000U/L。 ▪ 批内精密度小于5% 、批间精密度小
于6.67% ▪ 准确性偏差不超过±10%
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标本采集与要求
▪ 标本采集：血清或血浆标本 ▪ 标本处理：采血后应尽快送检，送检后血
标本应尽快分离血清。标本在2-8ºC可保 存7天。
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操作步骤
▪ 全（半）自动分析法：速率法
▪ 实验参数(双试剂)
▪ 反应方式：RATE DOWN 主/副波长： 340nm/404nm
安全性预警措施
▪ 应按《实验室安全管理》程序执行。在进行 操作前，首先应采取必要的保护性措施如穿 戴保护性外套、手套等。
▪ 如血液标本采用开盖程序测试，开盖时应防 止气雾胶污染环境。
▪ 所有检查过的血液标本及有关的废弃物，都 会带来潜在的危险或生物污染。
丙氨酸氨基转移酶 活性测定
实验目的与要求
▪ 利用半自动生化分析仪进行ALT项目的检测 ▪ 掌握连续监测法测定ALT的基本原理及操作 ▪ 熟悉ALT检测结果的临床意义 ▪ 了解连续监测法测定ALT的特点和注意事项
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简述
▪ 转氨酶是催化α-氨基酸和α-酮酸之间氨基移 换反应的一组。丙氨酸氨基转移酶（ALT） 和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）最具有临 床意义。