SZX16体视显微镜
新型小鼠动脉粥样硬化消退模型的构建
[收稿日期]㊀2020-06-28[修回日期]㊀2020-09-15[基金项目]㊀国家自然科学基金项目(81670134);江苏省自然科学基金项目(SBK2020021780)[作者简介]㊀吴凡,硕士,研究方向为动脉粥样硬化,E-mail 为wufan9547@㊂通信作者唐朝君,博士,副研究员,硕士研究生导师,研究方向为血管疾病机制研究与转化,E-mail 为zjtang@㊂[文章编号]㊀1007-3949(2021)29-07-0579-06㊃实验研究㊃新型小鼠动脉粥样硬化消退模型的构建吴凡1,盛玉兰2,梁羽3,唐朝君2,4,5(1.苏州大学医学部剑桥-苏大基因组资源中心,2.苏州大学唐仲英血液学研究中心,3.苏州大学卫生与环境技术研究所,4.苏州市血栓与血管生物学重点实验室,5.江苏省血液学协同创新中心,江苏省苏州市215123)[关键词]㊀动脉粥样硬化消退;㊀血液扰动流;㊀动物模型;㊀部分颈动脉结扎[摘㊀要]㊀目的㊀动脉粥样硬化通常被认为是一种不断发展的病变,但斑块的消退提示动脉粥样硬化病变存在逆转的可能,因此建立一种高效且操作方便的小鼠动脉粥样硬化斑块消退模型对于阐明斑块消退的机制具有重要意义㊂方法㊀在ApoE -/-模型鼠中,首先进行三种类型的颈动脉结扎,诱导不同类型的血流形成颈动脉斑块㊂为了建立斑块消退模型,利用活结部分结扎小鼠左颈动脉分支造成扰动流,高脂饮食喂食2周诱导斑块形成后,打开活结,并恢复正常饮食㊂颈动脉血流超声检测追踪由结扎或斑块引起的血流变化;苏丹Ⅳ染色评估动脉粥样硬化病变区域;免疫荧光染色评估巨噬细胞浸润情况㊂结果㊀颈动脉部分结扎高脂饮食喂养2周后,扰动流模型诱导的动脉粥样硬化斑块面积最大㊂造模小鼠打开活结2周后,颈动脉血流恢复接近正常值;且可显著减少动脉粥样硬化斑块大小,同时斑块中巨噬细胞含量和血管腔内斑块面积也明显减少㊂结论㊀基于颈动脉结扎手术的新型小鼠动脉粥样硬化消退模型成功建立,利用该模型将帮助理解动脉粥样硬化消退的潜在机制㊂[中图分类号]㊀R363;R5[文献标识码]㊀AThe establishment of a novel model of atherosclerosis regression in ApoE -/-miceWU Fan 1,SHENG Yulan 2,LIANG Yu 3,TANG Chaojun 2,4,5(1.CAM-SU Genomic Resource Center ,2.Cyrus Tang Hematology Center ,3.Sanitation &Environment Technology Institute ,4.Suzhou Key Laboratory of Thrombosis and Vascular Biology ,5.Collaborative Innovation Center of Hematology of Jiangsu Province ,Soochow University ,Suzhou ,Jiangsu 215123,China )[KEY WORDS ]㊀atherosclerosis regression;㊀disturbed blood flow;㊀animal model;㊀partial carotid ligation[ABSTRACT ]㊀㊀Aim ㊀Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease,but the regression of plaques suggests the possibility of reversal of atherosclerotic disease.㊀Thus,the establishment of a model of atherosclerosis regression in mice is of great significance for elucidating the mechanism of plaque regression.㊀㊀Methods ㊀In ApoE -/-mice,three types of carotid ligation were performed to induce different types of blood flow.㊀To establish the regression model,partial carotid ligation with a slipknot was firstly used to induce disturbed flow.㊀After feeding on a high-fat diet for 2weeks,the slipknot was removed,and followed by a chow diet for two weeks.㊀The ultrasonic testing was performed to monitor the blood flow in real time caused afterligation or plaque formation;Sudan Ⅳstaining was used to assess atherosclerotic lesions;immuno-fluorescence staining with anti MOMA2was applied to examine monocyte-macrophage infiltration.㊀㊀Results ㊀Three types of ligation induced different types of blood flow.㊀The disturbed flow induced the largest atherosclerotic plaque area in ApoE -/-mice.㊀After restore of blood flow combined with chow diet,atherosclerotic plaques can be significantly reducedand reversed,and the macrophage infiltration also significantly decreased.㊀㊀Conclusion ㊀A novel atherosclerosis re-gression model in mice based on carotid ligation surgery was successfully constructed,which will help to understand the un-derlying mechanism of atherosclerosis regression.㊀㊀动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)是一种好发于大㊁中等动脉以脂质蓄积和炎症为特征的血管壁慢性病变,其病变过程包括血管炎症㊁内皮损伤㊁血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)表型转化和迁移增殖㊁泡沫细胞形成㊁细胞死亡㊁脂质和胆固醇蓄积以及血栓形成等[1]㊂临床上通常利用各种抗动脉粥样硬化药物抑制斑块进展,但是很少有药物表现出显著诱导斑块消退的作用㊂据报道某些新一代他汀类药物可减少啮齿类动物的颈动脉斑块大小,但在人体中促成斑块减小的有效剂量限制了其临床应用[2-5]㊂尽管到目前为止进展有限,但人们仍在努力寻找可以逆转动脉粥样硬化病变的新型药物[2,6]㊂先前的研究表明,巨噬细胞和单核细胞浸润至动脉内皮下在动脉粥样硬化的发病机制和进程中起着至关重要的作用[7]㊂已知高脂血症和扰动流会促进白细胞向病灶处募集和迁移,从而导致内皮炎症促进动脉粥样硬化斑块发生[8]㊂相关遗传模型的建立如载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)和低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor, LDLR)基因敲除小鼠揭示了该过程的机制,这为开发抗动脉粥样硬化药物提供了有价值的工具[9-12]㊂但目前已报道的斑块消退动物模型较少,Reis等[9]利用ApoE-/-小鼠主动脉段移植模型来研究动脉粥样硬化病变的消退㊂另有报道利用遗传手段构建了用于斑块消退的模型,一种可逆转的高脂血症小鼠品系(LDLR-/-ApoB100/100Mttpfl/flMx1Cre+/+),可通过失活微粒体甘油三酯转移蛋白(microsomal triglyceride transfer protein,MTTP)抑制小鼠高胆固醇血症的发生[13]㊂此外,给ApoE-/-小鼠注射ApoA1[14]或miR-33抗体[15-16],可以迅速降低小鼠血液胆固醇水平㊂总之,这三个动脉粥样硬化斑块消退模型都是基于降低低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)水平的㊂与胆固醇相似,大量研究表明血液扰动流(dis-turbed flow,Db-flow)在动脉粥样硬化中具有促斑块形成的作用,而稳定的层流可保护前期内皮免受动脉粥样硬化刺激㊂尽管如此,层流对动脉粥样硬化消退的贡献仍有待阐明㊂为了确定层流是否可以调节动脉粥样硬化斑块的消退,本研究根据Nam 等[17]先前报道的小鼠部分颈动脉结扎(partial carotid ligation,PCL)模型提出了一种手术诱导的小鼠颈动脉斑块消退模型㊂该模型利用ApoE-/-小鼠PCL手术后高脂饮食(high fat diet,HFD)诱导斑块形成,通过开结恢复颈动脉血流同时停止HFD而促使斑块消退㊂该斑块消退模型具备操作简易和观察期短的特点,有望成为未来心血管研究的有用工具㊂1㊀材料和方法1.1㊀实验动物野生型C57BL/6J小鼠和ApoE-/-(C57BL/6J 背景)小鼠购自南京大学模式动物研究中心㊂动脉粥样硬化消退模型中,小鼠喂食正常的食物8周成年后进行颈动脉结扎手术,之后改用含0.15%胆固醇和21%脂肪的高脂饮食喂养㊂将所有动物饲养在SPF级动物房条件下,保持恒温24ħ,湿度40%~70%和光照周期为12/12h的昼夜节律,并自由获取食物和水㊂苏州大学动物实验许可证为SYXK(苏)2017-0043,所有实验操作符合苏州大学动物使用指南㊂1.2㊀颈动脉结扎模型构建气体麻醉系统麻醉小鼠,剪开小鼠颈部皮肤暴露颈动脉,利用10-0规格医用结扎线进行颈动脉分支结扎手术㊂颈动脉结扎小鼠颈外动脉(external carotid artery,ECA)和甲状腺上动脉(superior thyroid artery,STA)两个分支构建缓速流模型(decreased flow,De-flow)(图1A)㊂扰动流模型(disturbed flow, Db-flow)参照Nam等[17]所述,结扎小鼠左颈动脉(left carotid artery,LCA)的颈外动脉㊁颈内动脉(in-ternal carotid artery,ICA)和枕动脉(occipital artery, OA),而保留甲状腺上动脉完整(图1B)㊂通过结扎颈动脉中的所有分支建立全扎模型(blocked flow, Bl-flow)模型(图1C)㊂右颈动脉(right carotid artery,RCA)作为假手术对照㊂进行颈动脉超声检查以检测是否成功构建模型,结束后将小鼠置于加热垫苏醒㊂1.3㊀En-face染色采用0.1%苏丹Ⅳ(S4261,Sigma-Aldrich)染液对颈动脉的动脉粥样硬化斑块进行染色㊂颈动脉固定后,70%乙醇中浸泡2min后放入0.1%苏丹Ⅳ中染色30min或过夜,用80%乙醇洗涤1min㊂然后将样品浸于PBS中,沿中线纵向切开,展平后用毛细针固定在黑石蜡盘中,体视显微镜(Olympus SZX16)进行图像采集㊂1.4㊀免疫荧光染色及定量分析组织固定后蔗糖脱水,OCT包埋及冰冻切片㊂使用大鼠抗小鼠MOMA-2(anti-monocyte/macrophage, MOMA-2)抗体(ab33451,Abcam)鉴别单核/巨噬细胞,DAPI(C1002,Beyotime)定位细胞核㊂荧光偶联的山羊抗大鼠二抗(ab150167,Abcam)染色单核/巨噬细胞㊂使用激光共聚焦显微镜拍照,通过FV10-ASW软件进行图像分析㊂根据荧光染色切片结果,血管斑块横截面积占比(%)=1-(血管残余内腔面积/内弹力板管腔面积)㊂1.5㊀统计学分析所有数据均至少有3次以上重复,每组数据均至少有3个样本㊂数据统计以xʃs表示㊂两组数据之间比较用Students t检验进行分析,多组数据分析使用单因素方差分析,数据用GraphPad Prism软件进行统计,当P<0.05被认为差异有统计学意义㊂2㊀结㊀果2.1㊀颈动脉结扎方式的改变造成不同的血流动力学改变血流动力学影响动脉粥样硬化的发生发展过程,2009年Nam等[17]成功利用部分颈动脉结扎(PCL)手术构建了扰动流诱导的动脉粥样硬化小鼠模型,但改变结扎方式造成的血流动力学改变和动脉粥样硬化斑块形成还不清楚㊂首先,结扎左颈动脉的两个分支导致血流减少构建缓速流模型(De-flow),超声血流频普显示与假手术组右颈动脉血流无差异,2周后血流减缓但相较于右颈动脉血流流速无明显差异(图1A)㊂结扎左颈动脉的三个分支导致血流紊乱构建扰动流模型(Db-flow),恢复2周后左颈动脉血流频普呈多峰形态,收缩期迅速达高峰,上升陡直,舒张期下降亦快,相比右颈动脉血流明显减缓并且出现逆向流,相较于右颈动脉血流减少67.5%(图1B)㊂全扎模型(Bl-flow)结扎左颈动脉全部分支,血流超声波形呈平直单峰型,峰值低,频带窄,相较于右颈动脉血流减少72.2%(图1C)㊂图1.PCL引起的不同血流类型导致血流速度下降(nȡ4)A为缓速流模型(De-flow)和对应的血流超声图像及统计数据;B为扰动流模型(Db-flow)和对应的血流超声图像及统计数据;C为全扎模型(Bl-flow)和对应的血流超声图像及统计数据㊂Figure1.PCL induced the decline of velocity of blood flow(nȡ4)2.2㊀扰动流模型促进ApoE -/-小鼠颈动脉斑块形成为进一步探究血流变化对高脂饮食喂养小鼠斑块形成的影响,三种血流模型在手术后进行高脂饮食喂养2周,所有小鼠安乐死并分离出颈动脉㊂苏丹Ⅳ染色可见所有小鼠均形成颈动脉粥样斑块;定量结果表明Db-flow 组斑块面积较其他两组更大,Db-flow 组斑块面积较De-flow 组增加65%,与Bl-flow 组相比增加88%(图2)㊂结果表明低速且振荡的扰动流可加重ApoE -/-小鼠高脂饮食诱导的斑块形成㊂图2.Db-flow 诱导ApoE -/-小鼠形成的斑块面积最大(n ȡ3)A 为苏丹Ⅳ染色观察ApoE -/-小鼠颈动脉的腔内动脉粥样硬化斑块;B 为三种模型小鼠染色斑块面积占左颈动脉总面积大小的统计图㊂Figure 2.Db-flow induced the largest plaque size in ApoE -/-mice (n ȡ3)2.3㊀基于扰动流模型的动脉粥样硬化消退模型建立小鼠动脉粥样硬化消退模型设计如图3A 所示,对照组喂食高脂饲料4周,斑块消退组在Db-flow 手术2周后喂食高脂饲料2周,之后释放左颈动脉的活结以恢复颈动脉血流,转为正常饲料喂养㊂高分辨率小动物超声监测部分颈动脉结扎手术前后的血流(红色曲线表示PCL 之后和活结释放之前的血流速度,蓝色曲线表示活结释放后的流速),结果显示解除部分颈动脉结扎(release partial carotid ligation,rPCL)后颈动脉血液流速增加,2周后血流速度恢复至原始流速的66%(图3B)㊂图3.动脉粥样硬化消退模型的构建(n ȡ8)A 为小鼠斑块消退模型的示意图,对照组为小鼠部分颈动脉结扎后高脂饮食喂养4周,消退组为在部分颈动脉结扎手术后高脂饮食喂养2周后解除结扎即rPCL,之后采用正常饮食喂养2周㊂B 为活结释放后,利用高分辨率小动物超声仪记录颈动脉血流速度㊂Figure 3.The construction of a model of atherosclerosis regression (n ȡ8)2.4㊀消退模型小鼠颈动脉斑块形成减少为检测血流恢复是否促成斑块消退,将ApoE -/-小鼠分为三组:PCL 2周组㊁PCL 4周组和rPCL 组㊂苏丹Ⅳ染色结果显示rPCL 组的斑块大小与PCL 后喂食高脂饮食4周组小鼠相比明显减少23%,而与PCL 后喂食高脂饮食2周组小鼠斑块总面积差异无显著性(图4A 和4B)㊂进而通过免疫荧光染色检测了颈动脉管腔内斑块区域的横截面积,结果发现与PCL 2周组和PCL 4周组相比,rPCL 组血管腔内斑块面积分别减少26%和33%(图4C 和图4D)㊂单核/巨噬细胞的积累对动脉粥样硬化斑块的进展至关重要㊂进一步通过单核/巨噬细胞抗体MOMA-2对LCA 斑块进行染色以定量巨噬细胞,结果显示,与PCL 2周组和PCL4周组相比,rPCL 组中观察到MOMA-2+单核/巨噬细胞显著下降(图4C 和图4E)㊂斑块巨噬细胞含量和斑块横截面积下降表明血流和饮食的恢复促进了动脉粥样硬化斑块的消退㊂图4.ApoE -/-小鼠的血流和饮食恢复减少动脉粥样硬化斑块形成A 为PCL 手术结合高脂喂食2周㊁4周和rPCL 组小鼠的颈动脉斑块苏丹Ⅳ染色㊂B 为LCA 中的斑块占LCA 总面积的占比统计图(n ȡ4)㊂C 为左颈动脉腔内斑块MOMA-2染色(红色);L 为管腔㊂D 为3~6个切片样品定量斑块面积相对于管腔面积的占比(n ȡ3)㊂E 为3~6个切片样品定量MOMA-2荧光面积相对于斑块总面积占比(n ȡ3)㊂Figure 4.Restore of blood flow and diet decreased the atherosclerotic plaque formation3㊀讨㊀论高脂血症是引起动脉粥样硬化斑块发生发展的必要因素[18]㊂当血浆LDLC 浓度降低,HDL 胆固醇逆向转运功能增强时,动脉粥样硬化斑块消退效果最佳㊂降脂治疗也是目前临床治疗消退斑块努力的方向[19]㊂为探索动脉粥样硬化的发生发展机制,广泛应用的动物模型包括ApoE 和LDLR 基因敲除小鼠具有非常重要的作用[2]㊂然而,关于斑块消退的研究遇到了相当大的阻力,现有的斑块消退动物模型难以得到广泛应用㊂因此,仍然需要更多可以应用于研究动脉粥样硬化消退的新方法和模型㊂在我们的研究中,基于ApoE -/-小鼠的动脉粥样硬化消退模型利用部分颈动脉结扎手术在短期诱导动脉粥样硬化斑块,恢复血流和正常饮食后即可促进动脉粥样硬化斑块消退㊂2018年Mueller 等[20]报道低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low-density lipo-protein receptor-related protein 1,LRP1)敲除能够加速动脉粥样硬化斑块消退㊂因此,利用本研究的斑块消退模型结合降脂或者LRP1阻断抗体结合或能在促进动脉粥样硬化斑块消退方面取得更显著的效果㊂此外,在将来的研究中,如何在同一实验动物个体内实现实时精确定量追踪斑块的消退也是该领域需要重点攻克的难点㊂除了已知的动脉粥样硬化的危险因素(包括高脂血症㊁高血压或糖尿病)导致内皮功能障碍以外[21-23],血液扰动流也被认为是诱导动脉粥样硬化斑块发生的重要因素㊂已知血液扰动流主要存在于血管弯曲和分岔处,血液剪切应力较低且紊乱,抑制内皮细胞一氧化氮合酶产生,上调内皮炎症因子表达,促进动脉粥样硬化的发生㊂相反,稳定的层流起到动脉粥样硬化保护作用[8,24],因此剪切应力在动脉粥样硬化的发病机制中起重要作用㊂本研究对比不同血流速度变化对动脉粥样硬化斑块形成的影响,与之一致的是,发现只有血流低速且振荡才能导致更加严重的动脉粥样硬化病变,而层流则发挥保护血管功能的作用㊂鉴于此,PCL模型经过改进后成功构建颈动脉斑块消退小鼠模型㊂与已有研究报道的消退模型相比,该模型技术要求更低,更重要的是该模型可以使动脉粥样硬化斑块在1个月内开始消退,为研究动脉粥样硬化消退的机制和介入研究提供了有效的途径㊂基于PCL的动脉粥样硬化消退模型可应用于研究基因敲除或转基因小鼠研究疾病进展与机制㊂通过与最先进的彩色多普勒超声结合,该模型有望增进对动脉粥样硬化中血液动力学调节作用的理解,参与相关药物的研发与创新㊂该模型导致斑块消退的机制如何,是否与血管细胞和血液细胞的炎性反应相关,需要进一步的实验探讨㊂综上,本研究中紊乱的血液扰动流在动脉粥样硬化斑块的发生和进展中起着至关重要的作用㊂因此,本研究建立了一种基于扰动流诱发动脉粥样硬化的新型消退模型㊂该模型具有更低的介入性和较低的技术要求,并且可以短期内促进动脉粥样硬化斑块消退,将为动脉粥样硬化的机制研究提供新的手段㊂[参考文献][1]赵战芝,姜志胜.我国动脉粥样硬化基础研究几个热点领域的新进展[J].中国动脉硬化杂志,2019,27(8):645-654. 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体视显微镜的操作方法及操作步骤
体视显微镜的操作方法及操作步骤简介体视显微镜（Stereo Microscope）也称为放大镜显微镜，是通过两个视野不同但相同焦距的镜头组成的显微系统，用于物体表面形态和结构分析。
它的使用范围很广，常用于生物、医学、工业、制造、印刷、纺织和电子等领域。
下面将介绍体视显微镜的操作方法及步骤。
操作方法1.首先要准备好耳机或插入外部扬声器以得到更好的听觉体验。
这是为了在操作过程中听取到音频信号的帮助，以检测物体是否与显微镜处于最佳位置。
2.将显微镜放置在平稳的表面上，并将电源线插入，以保证显微镜正常工作。
3.在操作前，将物体固定好在试管架上，以保证物体在操作过程中保持稳定。
4.打开显微镜后，将两个眼镜调整到适当的位置（通常为与自己的瞳距相同的距离），并调整放大倍数。
通常建议在20-40x的放大倍数下进行操作。
5. 使用放大器的顶部和侧面的控制钮进行对焦调整，直到物体变得清晰。
此时物体应该在两个眼镜中显现出恰当的大小和形状，且在深浅方面相同。
6. 移动物体使其在显微镜中不同的角度显现出来，可以进行旋转和平移。
7. 在检查过程中，如果需要，可以进行对比度调整。
通常可以调整显微镜的光源来达到更好的效果。
8. 操作完成后，轻轻地移开物体，断电并将显微镜盖好。
操作步骤1.确定要检查的物体，并将其固定到适当的支持器上。
2. 调整显微镜的放大倍数和对焦以获得清晰的图像。
3. 检查物体在显微镜中的不同角度，观察其不同的部分。
4. 如果有必要，可以调整显微镜的光源来使物体更具对比度。
5. 操作完毕后，将物体轻轻地移开，并断电并将显微镜盖好。
总结以上就是体视显微镜的操作方法及操作步骤。
操作体视显微镜时需要注意把物体固定好，然后调整显微镜的放大倍数和对焦来获得清晰的图像。
在操作过程中，要时刻注意物体是否与显微镜处于最佳的位置。
如果需要，可以适当调整光源来提高对比度。
最后，操作完成后要及时断电并将显微镜盖好，以免显微镜受到损坏。
谷精草与华南谷精草的微性状鉴别
谷精草与华南谷精草的微性状鉴别Li Shuqin;Wang Qi;Wu Xueyuan;Qiu Zhibing【摘要】目的:鉴别谷精草及其混伪品华南谷精草.方法:运用微性状鉴别方法对谷精草和华南谷精草进行鉴别.结果:从整体外观性状到细微结构能更准确、快速地对谷精草与华南谷精草进行鉴别.结论:应用微性状鉴别方法,可以对谷精草及其伪品华南谷精草进行更好的鉴别.【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2018(015)012【总页数】2页(P2-3)【关键词】谷精草;微性状鉴别;华南谷精草【作者】Li Shuqin;Wang Qi;Wu Xueyuan;Qiu Zhibing【作者单位】;;;【正文语种】中文【中图分类】R282.5谷精草来源为谷精草科植物谷精草Eriocaulon buergerianum Koern.带花茎的头状花序[1]，为常用中药材，在《开宝本草》中就有药用记载，具有非常悠久的药用历史[2]，产于浙江、江苏、安徽、江西、湖南、广东、广西等地[3]，具有清热祛风、清肝明目、利尿镇痛等功效，笔者在检验中工作发现谷精草的混伪品多数为华南谷精草，两者外形很像，容易混用。
华南谷精草为谷精草科植物华南谷精草（Eriocaulon sexanglare L）.干燥带花茎的头状花序，由于两者性状相似，在民间把掺伪品作为药用[4]。
由于传统的性状鉴别需要鉴定人员，显微鉴别、理化鉴别需要专业仪器，而这两点基层单位和民众的配备不足，是导致谷精草药用时很容易将伪品当做正品使用的主要原因。
微性状鉴别方法具有快速、准确、廉价的特点[5]，便携式体视显微镜的产生使得它更方便在基层推广。
找到微性状鉴别方法快速鉴别中药材的鉴别点特别重要。
1 实验材料及仪器1.1 实验材料：本实验收集的样品，均经过江门市中医药学校郑小吉老师鉴定，并经本所中药室检验，符合2015版《中国药典》规定，现存放于江门市药品检验所标本室。
温度、盐度对西藏卤虫卵孵化率的影响
温度、盐度对西藏卤虫卵孵化率的影响潘正军;朱传坤;许虹;常国亮;丁怀宇;王辉【摘要】西藏卤虫(Antemia tibetiana)是一种重要的水产资源,其无节幼体是鱼虾幼苗的优质饵料.影响卤虫卵孵化的因素有多种,最重要的是温度和盐度.本文探讨了不同的温度和盐度对西藏卤虫卵孵化率的影响,也进行了光照对孵化率影响的对比试验.结果表明在温度28℃、盐度15时孵化率最高,无光照时会显著降低卤虫卵的孵化率.【期刊名称】《水产养殖》【年(卷),期】2017(038)010【总页数】4页(P24-27)【关键词】西藏卤虫;温度;盐度;孵化率【作者】潘正军;朱传坤;许虹;常国亮;丁怀宇;王辉【作者单位】淮阴师范学院生命科学学院,江苏省特色水产繁育工程实验室,江苏淮安 223300;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省特色水产繁育工程实验室,江苏淮安223300;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省特色水产繁育工程实验室,江苏淮安223300;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省特色水产繁育工程实验室,江苏淮安223300;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省特色水产繁育工程实验室,江苏淮安223300;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省特色水产繁育工程实验室,江苏淮安223300【正文语种】中文【中图分类】S917.4卤虫（Brine shrimp）亦称盐水丰年虫、仙女虾，分类上属于节肢动物门（Arthropoda），甲壳亚门（Crustacea），鳃足纲（Branchiopoda），无甲目（Anostraca），卤虫科（Artemiidae），卤虫属（Artemia），对不良环境适应能力强，繁殖能力高，它的休眠卵可以长期保存，需要时可立即孵化并获得幼虫，初孵时间仅需18～30 h[1]。
因取材方便、营养价值高，已被国内外水产养殖业广泛地用来培育鱼类和甲壳类幼体的活饵料[2－4]。
作为优质饵料，卤虫无节幼体对鱼虾蟹幼体生长和存活率的促进作用优于其他种类饲料[5－9]。
中国异极衣科地衣二新记录种
中国异极衣科地衣二新记录种作者：柳林任强来源：《广西植物》2021年第05期摘要：该文综合运用形态学、解剖学和化学等方法对山东大型地衣进行分类研究，发现了两个中国新记录种，即德氏蜂窝衣（Heppia despreauxii）和多孢小极衣（Lichinella myriospora）。
德氏蜂窝衣隶属于蜂窝衣属（Heppia），生于光线充足且裸露的土壤上，主要识别特征为下皮层缺失、子实层IKI+蓝色;多孢小极衣隶属于小极衣属（Lichinella），生于干燥的钙质岩石上，主要识别特征为其子实层IKI+酒红色变为蓝色。
该文对这两个中国新记录种进行了详细描述，与近似物种进行了对比讨论，并且提供了其地衣体、子囊盘及其解剖特征图片。
同时，该文还补充报道了白棋盘蜂窝衣（Heppia solorinoides）的有性繁殖结构特征和数据。
蜂窝衣属和小极衣属均为山东新记录属。
以上研究结果为中国异极衣科（Lichinaceae）地衣研究提供基础资料。
关键词：地衣型真菌，异极衣科，蓝藻型地衣，蜂窝衣属，小极衣属，石灰岩中图分类号： Q949文献标识码： A文章编号： 1000-3142（2021）05-0808-05Abstract： Morphological， anatomical and chemical characters were used in this research. Two Lichinaceae species new to China， Heppia despreauxii and Lichinella myriospora， were discovered during a taxonomical study of the macrolichens from Shandong Province. Heppia despreauxii，belonging to the genus Heppia， grows on well-lit bare soil in open situations， and is characterized by its absence of lower cortex and hymenium IKI+ blue; Lichinella myriospora， belonging to the genus Lichinella， occurs on calcareous rock in arid sites， and is characterized by its hymeniumIKI+ wine-red turning blue. Descriptions in detail， comments with similar species， and morphological photographs of these two species are provided. The materials of Heppia solorinoides，reported from China by other lichenologists， lack apothecia， and the morphological and anatomical characters of its apothecia are described according to the materials collected and examined by us. Both genera Heppia and Lichinella are reported for the first time from Shandong Province. All these results provide basic data information for the taxonomy of the family Lichinaceae.Key words： lichenized fungi， Lichinaceae， cyanolichens， Heppia， Lichinella，limestone山东省地处暖温带，属于温带季风气候区，分布有温带阔叶落叶林，主要分为鲁东、鲁中南山地丘陵地区和鲁西北平原区两种地形。
体视显微镜
体视显微镜物品介绍体视显微镜，又称“实体显微镜”“立体显微镜”，是一种具有正像立体感地显微镜，被广泛地应用于材料宏观表面观察、失效分析、断口分析等工业领域。
是一种具有正像立体感地目视仪器，被广泛地应用于生物学、医学、农林、工业及海洋生物各部门。
结构体视显微镜的倍率变化是由改变中间镜组之间的距离而获得的，因此又称为“连续变倍体视显微镜”（Zoom—stereo microscope）。
随着应用的要求，如荧光，照相，摄像，冷光源等等。
技术参数目镜:10x/16x/40x(可选各目镜倍数)物镜:1,0.63,2光学放大倍数:7.8-160X产品特点1.采用先进的CMO光学原理设计，为用户提供锐利的图像。
2.3D图像，在整个变焦范围内都能提供清晰的无失真的图像。
3.宽视场光学观察。
4.超长工作距离。
操作方法立体显微镜采用两个独立的光学通路生成三维的光学影像，因此也叫实体显微镜、属于低倍数的复式光学显微镜. 对科学研究、考古探索、工业质量控制和生物制药等领域的发展都产生了积极的影响。
为了发挥立体显微镜的最大功效，正确使用操作立体显微镜尤其重要。
操作步骤步骤1将显微镜置于一个对操作员舒适的工作台平台，然后打开反射光（表面光），在显微镜底座上放上一个式样，比如硬币，将显微镜的变倍旋钮旋到最低倍数, 通过调节升降组找到大致焦平面（最佳成像面）。
步骤2调整目镜的观察瞳距，并调整目镜上的屈光度以找到最佳的焦平面。
步骤3利用以上方法，逐渐旋大变倍旋钮的倍数，适当调节显微镜的升降组，逐渐找到最大倍数的焦平面。
调节过程中，请利用硬币上比较明显的参照点比对成像的清晰度。
步骤4将变倍旋钮旋到最低倍数，也许像会有一些失焦，此时请不要再调节升降组进行对焦，只需调节两只目镜上面的屈光度以适应眼睛的观察（屈光度因人而异）。
此时，显微镜已经齐焦，即显微镜从高倍变倍到低倍，整个像都在焦距上。
同样的试样，我们不需要再调节显微镜的其他部件，只需要旋动变倍旋钮就可以轻松对试样进行变倍观察了。
蓖麻种子结构的解剖和显微观察
作物学报ACTA AGRONOMICA SINICA 2020, 46(6): 914-923 / ISSN 0496-3490; CN 11-1809/S; CODEN TSHPA9E-mail: zwxb301@DOI: 10.3724/SP.J.1006.2020.94141蓖麻种子结构的解剖和显微观察郭学民*赵晓曼徐珂王芯蕊张辰瑜东方阳河北科技师范学院农学与生物科技学院, 河北昌黎 066600摘要: 本文通过萌发法、分离法、石蜡切片法和显微观察技术, 分别以番红固绿和希夫试剂染色, 系统观察了蓖麻种皮、胚乳和胚的结构及其维管束分布。
(1)蓖麻种子背侧基部的种孔并未被种阜所覆盖。
(2)种皮包括外种皮、内种皮和种阜3部分, 其中, 外种皮由外至内分别为长柱状表皮层、海绵组织层和栅栏组织层, 而内种皮则依次为马氏层、海绵组织层和内珠被内层, 在种阜端由内种皮内层和外层共同围成气室, 类似于鸡蛋的气室。
(3)在外种皮和内种皮中均有维管束分布, 其中外种皮的大型维管束仅分布在种子腹侧种脊的海绵组织层内, 它从种脐延伸至种阜相对一端; 而内种皮维管束也分布在海绵组织层中, 通过维管束索, 逐级分枝, 止于种阜端气室边缘; 内、外种皮的维管束通过合点端的连接点相连续, 共同构成种皮维管系统。
(4)种阜由表皮和薄壁组织构成, 其中薄壁组织由外侧小型薄壁细胞和内侧大型薄壁细胞构成。
种阜维管束仅2束, 分布在种阜中部腹侧, 独立构成种阜维管系统; 在种阜中, 还有种阜管道, 其内端开口于内种皮的气室, 外端为盲端。
(5)胚乳由含大量糊粉粒的薄壁细胞构成, 其中未见维管束分布。
在胚中, 维管束为外韧维管束, 它们分化于胚轴, 从胚轴顶端两侧分别进入2片子叶主脉, 在主脉中由4个逐步减少为1个, 在子叶中分枝变细, 构成胚维管系统; 子叶表皮和叶肉细胞中均含糊粉粒, 但在胚芽、胚轴和胚根中未见糊粉粒; 2片子叶近轴面分离, 远轴面则通过粘液层与胚乳相连接; 胚轴和胚根在空间上与胚乳分离。
南北柴胡果实特征及显微鉴别研究
南北柴胡果实特征及显微鉴别研究周修腾;杨光;周凌锋;邵爱娟;韦颖;池秀莲;李晓琳【摘要】目的:南北柴胡果实在外观上极为相似,极易混淆,本文研究南柴胡、北柴胡果实的外观和显微鉴别,为区别南柴胡与北柴胡提供科学依据.方法:本研究采用体视显微镜和石蜡切片法对南北柴胡果实的外观形态特征及显微特征进行比较研究.结果:南柴胡果实略大于北柴胡,横截面呈五边形,背棱粗,呈棒状,且油管数多,油管腔大,而北柴胡横切面近圆形,背棱不明显,油管数少,但胚乳细胞内含草酸钙簇晶.结论:上述特征可作为南北柴胡果实的鉴别特征,为药用柴胡的分类和鉴别提供科学依据.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2018(020)010【总页数】4页(P1251-1254)【关键词】柴胡;狭叶柴胡;果实;显微鉴别【作者】周修腾;杨光;周凌锋;邵爱娟;韦颖;池秀莲;李晓琳【作者单位】道地药材国家重点实验室培育基地/中国中医科学院中药资源中心,北京 100700;道地药材国家重点实验室培育基地/中国中医科学院中药资源中心,北京100700;广东医科大学,广东东莞 523808;道地药材国家重点实验室培育基地/中国中医科学院中药资源中心,北京 100700;道地药材国家重点实验室培育基地/中国中医科学院中药资源中心,北京 100700;道地药材国家重点实验室培育基地/中国中医科学院中药资源中心,北京 100700;道地药材国家重点实验室培育基地/中国中医科学院中药资源中心,北京 100700【正文语种】中文柴胡始载于《神农本草经》，距今已有2000多年的药用历史，属于常用大宗药材。
以根入药，性辛、苦，微寒，疏散退热，疏肝解郁，升举阳气。
用于感冒发热，寒热往来，胸胁胀痛，月经不调，子宫脱垂，脱肛[1]。
《中华人民共和国药典》2015年版规定柴胡为伞形科柴胡属植物柴胡Bupleurum chinense DC.和狭叶柴胡Bupleurum Scorzonerifolium Willd的干燥根，分别习称“北柴胡”和“南柴胡”[1]，二者的果实外形相似[2]，不易区分。
光学显微镜简单介绍
数值孔径
数值孔径（NA）是物镜前透镜与被检物体 间介质的折射率（η）和孔径角（u）半数 正弦的乘积。用公式表示： NA= η sin u/2
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数值孔径（NA）是显微镜中最重要的技术参数, 它几乎决定和影响了其它技术参数。它与分辨率 成正比；与有效放大率成正比；与焦深成反比； NA的平方与图象亮度成正比 NA值增大 视场宽度 与工作距离都会相应变小。
分辨率
在显微镜的设计中确定，当最小点的衍射 斑象的中心刚好落在另一个衍射斑象的边 缘，则认为两物点象刚刚能够被分辨；这 就是可以分辨的最小距离。
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焦深
焦深是焦点深度的简称，即在使用显微镜时，当 焦点对准某一物体点时，不仅位于该点平面上的 各点都可看清楚，而且在此平面上下的一定厚度 内，也能看得清楚，这个清晰部分的厚度就是焦 深。
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聚光器
聚光器，又称聚光镜，作用：可以弥补光 源亮度的不足和适当改变从光源射来的光 线性质，还能将光线聚焦于被检物体上， 以得到最强的照明光线。 聚光器由透镜组与孔径光阑组成。 聚光器根据用途可以分为：眀视野聚光器 和专用聚光器。 眀视野聚光器用于常规的明视野镜下观察 及显微摄影。用的有阿贝聚光器、消色差
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色镜，在黑白摄影中最为常见的有绿色、 蓝色和橘黄色滤色镜。 色温转换滤色镜是改变光源的色温，以此 来达到色彩平衡的目的。只有灯光型和日 光型两种。 中灰滤色镜也叫中性密度滤色镜。它的主 要功能是保证在色温不变的条件下使通过 的光亮度大大降低。常用的有ND6、ND12、 ND25和ND50四种。
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中国污核衣属地衣(污核衣科)四个新记录种
Short communication 简报22 January 2021, 40(1): 79-86 Mycosystema ISSN1672-6472 CN11-5180/Q DOI: 10.13346/j.mycosystema.200113赵欣聊城大学生命科学学院讲师，现主要从事地衣型真菌分类学与分子系统学等方面的研究。
已在《Fungal Diversity》《PLoS O ne》《Organisms Diversity & Evolution》《Lichenologist》和《Mycotaxon》等国际学术期刊上发表论文10余篇。
主持国家自然科学基金青年基金项目（31700018)。
中国污核衣属地衣（污核衣科）四个新记录种赵欣°贾泽峰刘飞月聊城大学生命科学学院山东聊城252059摘要：报道了中国污核衣科P o r i n a c e a e污核衣属P o r/'n a地衣的4个新记录种，分别是小溪污核衣P.//u m/'n e a、黄褐污核衣P./u A/e"a、四室污核衣P.t'e t r a m e r a和萨氏污核衣P.f h a x t e r/'。
提供了各种的形态描述、形态及解剖照片。
研究标本采自山东、贵州、广东及海南等地，保存于中国科学院菌物标本馆（H M A S)和山东师范大学植物标本馆（S D N U)。
关键词：地衣型真菌，子囊壳，形态学，分类学[引用本文]赵欣，贾泽峰，刘飞月，2021.中国污核衣属地衣（污核衣科）四个新记录种.菌物学报，40(1>: 79-86Zhao X, Jia ZF, Liu FY, 2021. Four new records of Porino (Porinaceae) from China. Mycosystema, 40(1): 79-86Four new records of Porina (Porinaceae) from ChinaZHAOXin0 JIAZe-Feng LIU Fei-YueCollege of Life Sciences, Liaocheng University, Liaocheng, Shandong 252059, ChinaAbstract: Four new records of Porina(Porinaceae) are reported from China, viz. P. fluminea, P. fulvello, P. tetramero and P. thoxteri.Detailed descriptions and morphological figures were provided for each species. The specimens were collected from Shandong, Guizhou, Guangdong and Hainan provinces. All specimens examined were deposited in Herbarium Mycologicum Academiae Sinicae (HMAS) and Plant Herbarium of Shandong Normal University (SDNU).Key words: lichenized fungi, perithecia, morphology, taxonomy基金项目：国家自然科学基金青年基金（31700018);国家自然科学基金应急管理项目（31750001)Supported by the National Natural Science Foundation of China (31700018), and Emergency Management Project of National Natural Science Foundation (31750001).o Corresponding author. E-mail: ****************.cnReceived: 2020-04-10, accepted: 2020-06-03Copyright © 2021 Institute of Microbiology, CAS. All rights reserved. |**********.cn Tel: +86-10-64807521菌物学报79赵欣等/中国污核衣属地衣（污核衣科）四个新记录种污核衣科Porinaceae Rchb.隶属于子囊菌 门Ascomycota、茶渍纲 Lecanoromycetes、厚 顶盘目Ostropales，该科地衣的子囊器均为子 囊壳型，生长基质多样，包括树皮、树叶或 岩石等，目前世界范围内的己知物种约计400 种（McCarthy2013; Jaklitsch et a/.2016; Liicking ef a/. 2017: Sobreira ef a/. 2018)。
体视显微镜的构成 -回复
体视显微镜的构成-回复【体视显微镜的构成】：深度解析与详细构成分析体视显微镜，又称为立体显微镜或解剖显微镜，是一种用于观察物体三维结构、表面细节及宏观形态的光学仪器，在生物学、医学、工业检测等领域具有广泛的应用。
其主要特点在于能够提供立体视觉效果，使得观察者能从不同角度清晰地看到样品的立体结构。
本文将从体视显微镜的基本构造出发，逐步深入解析其各个部件的功能和作用。
一、主体框架与支架系统体视显微镜的基础部分是主体框架与支架系统。
主体框架通常采用金属材质制作，坚固耐用，为整个显微镜提供了稳定的支撑平台。
支架系统包括底座、立柱和载物台等部分，它们共同保证了显微镜在使用过程中的稳定性和操作灵活性。
其中，载物台用于放置待观察的样品，并可通过精密调节装置实现X轴、Y轴方向上的移动，以调整观测位置。
二、光学系统1. 物镜系统：体视显微镜的核心光学组件之一是物镜，它位于接近样品的一端，负责收集来自样品的光线并将其聚焦。
不同于普通显微镜的单个物镜，体视显微镜通常配备两个独立且对称设置的物镜组（即一对变焦物镜），通过改变两物镜之间的距离来实现放大倍率的变化，从而获取立体图像。
2. 目镜系统：目镜位于显微镜顶部，是观察者直接通过眼睛进行观察的部分。
同样，体视显微镜也配置有两个独立的目镜，每个目镜都具有一定的放大倍率。
使用者通过双眼分别观察经过物镜系统处理后的左右像，形成视差，进而产生立体视觉效果。
3. 光源系统：为了确保样品照明充足，体视显微镜常配备有上光源或下光源，包括卤素灯、LED灯等多种类型。
光源经由反射镜或导光管，将光线均匀投射到样品上，以便观察。
三、调焦系统与变倍机构调焦系统是体视显微镜的重要组成部分，它允许用户精确调整物镜与样品之间的距离，以获得清晰的焦点。
常见的调焦机构包括粗调旋钮和微调旋钮，前者用于快速定位大致焦点位置，后者则用于精细微调，使图像更为锐利。
变倍机构则是控制物镜放大倍数的关键部件，通过旋转变倍环可以连续改变两物镜间的距离，实现放大倍率的无级变换，便于观察者根据需要选择适宜的放大倍数。
斑马鱼皮肤损伤模型的建立及分子机制
斑马鱼皮肤损伤模型的建立及分子机制陈锡强;王荣春;王希敏;刘可春;萧崇德;韩利文;侯海荣【摘要】目的以皮肤荧光转基因斑马鱼(ktr4: NTR-hKikGR)为实验动物,研究长春新碱对皮肤细胞的损伤作用及其分子机制,建立皮肤损伤模型.方法取受精后24 h 皮肤荧光斑马鱼胚胎,将脱膜后的胚胎分别置于0.01~0.04 mmol·L-1不同浓度的长春新碱中,24 h后采用荧光显像的方法对斑马鱼皮肤荧光斑点进行计数和统计处理;同时对鱼体细胞死亡情况进行TUNEL试剂盒检测,确定其皮肤细胞死亡的水平;利用蛋白免疫印迹的方法对各组斑马鱼胚胎的 caspase-3、KRT4及p53表达水平进行检测.结果在长春新碱与斑马鱼胚胎共同孵育24 h后,0.02、0.04 mmol·L-1长春新碱明显引起斑马鱼荧光皮肤细胞减少(P<0.01);TUNEL检测表明,长春新碱与对照组比较能明显引起斑马鱼皮肤细胞凋亡;Western bolt分析显示,0.02、0.04 mmol·L-1长春新碱能诱导斑马鱼胚胎caspase-3和p53表达增加(P<0.01),同时高浓度的长春新碱可使皮肤角蛋白KRT4表达明显减少(P<0.01).结论利用长春新碱引起斑马鱼皮肤损伤,该局部毒性作用可作为皮肤损伤的造模新方法.%Aim To establish a new model of skin damage by u-sing vincristine to transgenic zebrafish (krt4:NTR-hKikGR).Methods Skin fluorescent transgenic zebrafish embryos after 24 h fertilization were treated with the 0.01~0.04 mmol·L-1 vincristine,and zebrafish skin cell ablation was investigated un-der fluorescence microscope after 24 h,at same time skin death cells were detected with TUNEL assay and image processed, then the protein expressions of KRT4, caspase-3 and p53 were assessed with Western blot. Results 0.02 mmol·L-1and 0.04 mmol·L-1vincristine could obviously induce zebrafish skin cell apoptosis(P<0.01) with statistically significant differ-ence compared with the control, and the same result could be accomplished in TUNEL assay. Results of Western bolt showed that vincristine could increase the embryos caspase-3 and p53 expression(P<0.01), while vincristine in high concentration might decrease KRT4 markedly(P<0.01). Conclusion Vin-cristine can induce damage on zebrafish skin with suppression KTR4,which can be used as a new skin damage model.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2018(034)003【总页数】5页(P433-437)【关键词】长春新碱;斑马鱼;细胞凋亡;caspase-3;p53;KRT4【作者】陈锡强;王荣春;王希敏;刘可春;萧崇德;韩利文;侯海荣【作者单位】齐鲁工业大学(山东省科学院),山东省科学院生物研究所,山东省科学院药物筛选技术重点实验室,山东省生物检测技术工程实验室,山东省生物传感器重点实验室,山东济南 250103;齐鲁工业大学(山东省科学院),山东省科学院生物研究所,山东省科学院药物筛选技术重点实验室,山东省生物检测技术工程实验室,山东省生物传感器重点实验室,山东济南 250103;齐鲁工业大学(山东省科学院),山东省科学院生物研究所,山东省科学院药物筛选技术重点实验室,山东省生物检测技术工程实验室,山东省生物传感器重点实验室,山东济南 250103;齐鲁工业大学(山东省科学院),山东省科学院生物研究所,山东省科学院药物筛选技术重点实验室,山东省生物检测技术工程实验室,山东省生物传感器重点实验室,山东济南 250103;中原大学生物科技系表皮干细胞研究室,台湾 32023;齐鲁工业大学(山东省科学院),山东省科学院生物研究所,山东省科学院药物筛选技术重点实验室,山东省生物检测技术工程实验室,山东省生物传感器重点实验室,山东济南 250103;齐鲁工业大学(山东省科学院),山东省科学院生物研究所,山东省科学院药物筛选技术重点实验室,山东省生物检测技术工程实验室,山东省生物传感器重点实验室,山东济南 250103【正文语种】中文【中图分类】R-332;R322.99;R329.25;R363-332;R758.25;R979.19随着生活方式、污染等多种因素的影响，日益增多的皮肤疾病受到了越来越多的关注。
奥林巴斯(OLYMPUS)SZX16体视显微镜
奥林巴斯（OLYMPUS）SZX16体视显微镜SZX16建立了清晰度、系统灵活性和易操作性的新标准。
体视显微镜在世界当代生命领域中扮演着越来越重要、越来越有价值的角色。
无论用在何处，用于何用途，它们对各种样品提供始终如一的清晰高效的观察成像。
这就是系统灵活性变得至关重要的原因——以充足的工作空间，超宽的变倍范围，真实的图像还原和人机工程学设计，为使用者提供简易、舒适的工作方式。
SZX2系列建立在SZX系列的基础上，承继并超越了SZH系列，在各领域都树立了新的标准。
其关键在于应用了多种新的设计：采用卓越的伽利略光学系统的光学设计提供完美的图象效果，并且能够保证与各种图像设备特点:SZX16：图像记录和可操作性方面的卓越性能SZX16变倍体 / SZX-ZB16从0.7× - 11.5×， SZX16提供了16.4倍的变倍比。
使用0.3X物镜可以观察视场直径为104.80mm的标本，可以提高高倍率下的观察效果，并使SZX16更出色的支持图象记录。
可变倾角双目观察筒和眼点调节器使操作更舒适为了使操作尽可能的舒适，奥林巴斯公司设计了倾角可在5度到45度之间变化的可变倾角双目观察筒，使操作人员无须费力地弯曲脖颈，就可以进行观察。
参数规格使用保养显微镜使用注意事项：显微镜上的目镜和转换盘上的物镜.不用时应套上软皮罩或布套，以防止灰尘侵人或将整个镜体用玻璃罩或布套罩住。
透镜表面若有污秽时，可用拭镜纸或棉球，0少许石油精或二甲苯轻轻擦拭，但不得用酒精.否则透镜胶层将被溶解。
物镜装盒时盒内须清洁，装时透镜前片向上，则灰尘不易落到物镜后片上。
齿轮与齿条的油脂及滑动槽面上的油脂，因日久灰尘污垢或硬化，致使粗动手轮转动发生困难，可用二甲苯将陈脂去除，然后擦上少许无酸动物油脂或无酸凡士林，不可用其他油脂，以免影响仪器。
烟叶成熟过程中活性氧的变化
2021年34卷1期Vol. 34No. 1西"农业学&Southwest China Journal of Agricultural Sciences40文章编号：1001 -4829(2021)1 -0040 -05DOI ： 10. 16213/j. cnkl. scjas. 2021. 1.005烟叶成熟过程中活性氧的变化范宁波S 杨 洋2,鄢 敏2,李林秋2,严 素2,易 蔓2,杨懿德2(1.河南农业大学烟草学院，河南郑州450002；2.四川省烟草公司宜宾市公司，四川宜宾644000)摘要：！目的】为明确烟草&Nicotiana tabacum L.)在不同的成熟阶段中活性氧(ROS )的积累。
【方法】采用氯化硝基四+ V 蓝(NBT )化学组织染色法来进行组织染色，并利用#44度法分别测定未熟、适熟和过熟阶段烟叶的过氧化氢(H2O2)、超氧阴离子(0+ -)和丙二醛(MDA '含量，并利用实时荧4定量PCR ( qRT-PCR )法测定了相关基因的相对表达量。
【结果】叶片经NBT 染 色后，随着叶片成熟度的増加，叶片上的蓝色斑増加。
叶片内的0+ -和H 2O 2 % MDA 的含量随成熟度的増加逐渐上升，且皆在过 熟阶段达到最大值。
伴随着成熟度的増加,NtPSAl 的相对表达量逐渐降低，而CYP82E 的表达量却呈逐渐増加的趋势$【结论"烟叶随着自身成熟度的増加，叶片组织内的活性氧物质逐渐积累，对烟叶造成了一定的伤害$ 关键词：成熟度；烟草；活性氧中图分类号:S572文献标识码:AChanges of Reactive Oxygen Species in Tobacco Leaf During MaturingFAN Ning-bo 1 % YANG Yang 2 % MIN Min 2 % LI Lin-qiu 2 % YAN Su 2 % YI Man 2 % YANG Yi-dc 2 !(1 - Colleac of Tobacco , Henan Agricultural University , Henan Zhengzhou 450002, China ； 2- Yibin City Company of Sichuan Tobacco Com pany % Sichuan Yibin 644000 % China )Abstraci :【Objeclve 】 In order to investigate the accumulation of reactive oxycen species (ROS ) in tobacco (Nicotiana tabacum L. ) at dif ferent maturity stages.【Method 】The tissue staining was performed by ngrotetrazolium chloride ( NBT ) chemical tissue staining method- And superoxide anion ( O 2 - ) , hydrogen peroxiCe ( H 2O 2 ) , malondialdehyde ( MDA ) content were measured in leaves with different maturity ,respectively. The relative expression of related genes was determined by real-time quantitive PCR ( qRT-PCR )-【Result 】The resultsshowed that after the leaves were dyed with NBT , as the maturity of the leaves increased , the blue spots on the leaves increased- The content of H 2O 2 , O 2 - and MDA in the blades also increased with the increase of maturity and reached the miirnum in overripe tobacco- With the increase of maturity , the relative expression of NtPSAl graduaOy decreased , while the expression of CCY82E showed a graduaOy increasingtrend.【Conclusion ] With the increase of maturif of tobacco leaves , reactive oxycen species in /o O tissue graduaOy accumulated , whichcaused certain damage to tobacco leaves -Key words ：Maturity stage ； Tobacco ; Reactive oxycen species (ROS)【研究意义］氧气是地球上绝大多数生物维持生命活动的必需物质之一，但是在生物利用氧气的 过程中，会附带产生活性氧物质等副产物。
朱砂药材的微性状和显微鉴别研究分析
朱砂药材的微性状和显微鉴别研究分析摘要】目的：研究分析朱砂药材的微性状和显微鉴别，为朱砂药材的临床使用提供参考依据。
方法：借助显微镜仪器，使用中医上对药物的微性状鉴别和显微鉴别两种方法加以鉴别。
结果：从中得到朱砂药材的微性状特征，显现出不规则的颗粒状或块片状，形状大小有区别，呈现出鲜红色，部分不透明或半透明，少量发出光泽，部分样品的形状块头不规则，个头大，表面出现红色，颜色发暗或现出灰黑色；显微特征表现如下：朱砂是粒度大小不一致的颗粒状形态，部分是片块状，呈现出鲜红色，部分发出光泽，偶尔少数见到黄色颗粒附着表面。
结论：朱砂药材的微性状鉴别方法和显微鉴别方法都具有简单、快捷的鉴别优势，值得在快速鉴定中推广应用。
【关键词】朱砂药材；微性状鉴别；显微鉴别；研究【中图分类号】R282.5 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2018）23-0301-02朱砂是硫化物类矿物辰砂族辰砂，主要成分是硫化汞，最早开始使用“丹砂”名称记录在《神农本草经》中，被认为是上等药品。
朱砂性属甘、微寒，带有毒性，在临床中得到广泛普及应用。
2010年编制的《中国药典》版本中记载了中药成方和复方制剂等1060种，其中带有朱砂药物成分的药品就包括63中，占据总比重的10%左右，应用于儿童的品种有17种。
为了辨别出真伪性，确保朱砂药品质量，以此来保证临床用药的安全性，具有非常重要的价值。
近年来，中医学者提出了“微性状鉴别法”，多被用以果实种子、花草和树叶类等药品的鉴别，还没有针对朱砂的鉴别应用这种方法[1]。
现阶段各种先进的鉴别器械诞生，如X射线衍射分析、扫描电镜/X射线能量分散谱法等多种精密仪器的鉴定研究，但因实施的效果并不理想因此无法在基层药检机构中快速推广检定应用。
本次研究共对6个批次的朱砂药材样品进行微观研究，分析朱砂药材的微性状和显微鉴别两种区别，达到简单快速控制朱砂质量的效果，为临床科学合理用药提供参考依据。
白藜芦醇对阿司咪唑诱导斑马鱼心脏损伤的保护作用
白藜芦醇对阿司咪唑诱导斑马鱼心脏损伤的保护作用薛迪;韩利文;杨继芳;何秋霞;王雪;侯海荣;张爱平;刘可春【摘要】探讨不同浓度的白藜芦醇对阿司咪唑诱导斑马鱼胚胎心脏损伤的保护作用.采用发育正常的48 hpf斑马鱼胚胎作为实验模型,加入阿司咪唑(4 μmol/L)后再加入不同浓度的白藜芦醇处理上述胚胎,于72 hpf观察胚胎心脏的形态、心率及静脉窦-动脉球(SV-BA)的变化.结果发现阿司咪唑模型对照组在给药后出现心脏损伤现象,包括心包水肿、心脏周围血细胞堆积、心率减慢和SV-BA间距的缩短,白藜芦醇给药组对上述损伤情况改善明显,并且随着给药浓度的增加,阿司咪唑诱导的心脏毒性作用明显减小.研究认为白藜芦醇对阿司咪唑诱导的斑马鱼心脏毒性有一定的保护作用.【期刊名称】《山东科学》【年(卷),期】2015(028)003【总页数】5页(P29-33)【关键词】斑马鱼;心脏损伤;心率;阿司咪唑;白藜芦醇;保护作用【作者】薛迪;韩利文;杨继芳;何秋霞;王雪;侯海荣;张爱平;刘可春【作者单位】山西医科大学药学院,山西太原030001;山东省科学院生物研究所,山东省生物传感器重点实验室,山东济南250014;山东省科学院生物研究所,山东省生物传感器重点实验室,山东济南250014;青岛开发区第一人民医院护理部,山东青岛266555;山东省科学院生物研究所,山东省生物传感器重点实验室,山东济南250014;山东省科学院生物研究所,山东省生物传感器重点实验室,山东济南250014;山东省科学院生物研究所,山东省生物传感器重点实验室,山东济南250014;山西医科大学药学院,山西太原030001;山东省科学院生物研究所,山东省生物传感器重点实验室,山东济南250014【正文语种】中文【中图分类】R965.1Key words：zebrafish；cardiac injury；heart rate；astem izole；resveratrol；protection由于药物不良反应所造成的心脏毒性己成为药品撤市的主要原因和制药工业必须面对的首要安全问题，建立快速检测心脏毒性的筛选模型进行早期预测评价，对于降低新药研发风险以及上市药物的再评价都具有重要意义。
深圳宋卡湖根管虫(多毛纲:龙介虫科)个体发育的初步观察
深圳宋卡湖根管虫(多毛纲：龙介虫科)个体发育的初步观察刘燕媚;汪安泰;李世昌;李荔【摘要】对分布于中国深圳的宋卡湖根管虫Ficopomatus talehsapensis Pillai,2008进行了实验观察.结果表明:1)雌雄异体,精子或卵从鳃冠基部喷射至水中,体外受精,繁殖力强,受精后约0.8h开始卵裂,生活史经历早期胚胎发育、担轮幼虫、后担轮幼虫、游毛幼虫、后游毛幼虫、刚节幼体及成虫；2)鳃丝具呼吸、感觉、滤食功能,以单细胞藻类和有机碎屑为食；3)担轮幼虫至成体均具眼点,但视觉功能退化；4)对水环境的适应能力极强.讨论了根管虫对生境水质的影响.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2012(031)003【总页数】5页(P393-396,封2)【关键词】龙介虫科;根管虫属;食性;个体发育【作者】刘燕媚;汪安泰;李世昌;李荔【作者单位】深圳大学生命科学学院,广东深圳518060;深圳大学生命科学学院,广东深圳518060;深圳大学生命科学学院,广东深圳518060;深圳大学生命科学学院,广东深圳518060【正文语种】中文【中图分类】Q968.1多毛纲动物全球有9000多种，“淡水”者逾168种，隶属于24科70属，约占总数的2%，其中龙介虫科 2 属 5 种(Fauvel，1953;Pillai，1960，1971;Glasby＆Timm，2008)。
在我国，吴宝铃和陈木(1963)初次报道中国淡水和半盐水多毛类环节动物15种，随后，沈寿彭和杞桑(1982)报道了珠江河段的7种。
根管虫属Ficopomatus全球已报道4种(Hove＆Weerdenburg，1978)，是一类身体对称，具明显鳃丝与鳃盖，栖身于自身分泌的石灰质虫管中的动物。
虫体可分为头、胸、腹3部分，胸区具可分泌钙质的细胞，分泌的虫管可大量附生于淡水环境中底部石头与木块表面，利用鳃丝进行气体交换与摄食，繁殖能力较强。
在2009年我国才首次报道根管虫属物种(林烁宇等，2009)。
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SZX16/SZX10 技术参数
项目
名称
变倍体
SZX-16
SZX-10
变倍比：16.4 （0.7×～11.5×）
变倍比：10 （0.63×～6.3×）
倍率表示：0.7 / 0.8 / 1 / 1.25 / 1.6 / 2 / 2.5 / 倍率表示：0.63 / 0.8 / 1 / 1.25 / 1.6 / 2
UNIT 2,30/F.,NO99 HENNESSY ROAD,WANCHAI,HONGKONG TEL: (852) 2333 7827 FAX: (852) 2333 0847
SZX16 体视显微镜
建立了清晰度、系统灵活性和易操作性的新标准 体视显微镜在世界当代生命领域中扮演着越来越重要、越来越有价值的角色。无论用在何处，用于何用途，它们对各 种样品提供始终如一的清晰高效的观察成像。这就是系统灵活性变得至关重要的原因——以充足的工作空间，超宽的 变倍范围，真实的图像还原和人机工程学设计，为使用者提供简易、舒适的工作方式。SZX2 系列建立在 SZX 系列的基 础上，承继并超越了 SZH 系列，在各领域都树立了新的标准。其关键在于应用了多种新的设计：采用卓越的伽利略光 学系统的光学设计提供完美的图象效果，并且能够保证与各种图像设备的兼容。 SZX16 和 SZX10：图像记录和可操作性方面的卓越性能 SZX16 变倍体 / SZX-ZB16 从 0.7× - 11.5×， SZX16 提供了 16.4 倍的变倍比。使用 0.3X 物镜可以观察视场直径为 104.80mm 的标本，可以提 高高倍率下的观察效果，并使 SZX16 更出色的支持图象记录。 SZX10 变倍体 / SZX-ZB10 从 0.63× - 6.3×，SZX10 提供了 10 倍的变倍比。变倍体中包括一个内置的孔径光阑，使用 0.5X 物镜可以观察直径 为 69.80mm 的标本。这种透镜的性能保证了长工作距离，并保持稳定的出色的可操作性。 可变倾角双目观察筒和眼点调节器使操作更舒适 为了使操作尽可能的舒适，奥林巴斯公司设计了倾角可在 5 度到 45 度之间变化的可变倾角双目观察筒，使操作人员无 须费力地弯曲脖颈，就可以进行观察。
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Hong Kong Head Office Tel: (852) 2333 7827 Fax: (852) 2333 0847
Shenzhen Office Tel: (755) 8110 8226 Fax: (755) 8395 3050
UNIT 2,30/F.,NO99 HENNESSY ROAD,WANCHAI,HONGKONG TEL: (852) 2333 7827 FAX: (852) 2333 0847
SDFPLAPO1×PF
0.15
60
SZX-ACH1×
0.1
90
SDFPLAPO1.6×PF
0.24
30
DFPLAPO1.25×
SZX-FOA2：电动聚焦装置 / 聚焦方式：行程为 75mm（电动粗调行程每一圈为 1.5mm/sec 微动： 0.3mm/sec ）， 耐荷重范围：2.7-15.0kg
架台
SZX2-ST：标准架台 / 支柱高：270mm、尺寸：284（W）×335（D）×31（H）mm
SZX2-STL：大型架台 / 支柱高：400mm、尺寸：400（W）×350（D）×28（H）mm
3.2 / 4 / 5 / 6.3 / 8 / 10 / 11.5
/ 2.5 / 3.2 / 4 / 5 / 6.3
对物镜 *WHN10×-H/ WHSZ10-H 使
用时
SZX-ZB16 用
种类
N.A.
SDFPLFL 0.3×
0.045
W.D. （mm）
141
SZX-ZB10 用
种类
N.A.
DFPL0.5×-4
100%） 眼幅调整范围：52～76mm
-
SZX-BI30：30°双眼镜筒 镜筒倾斜角：
30°、眼幅调整范围：51～76
-
SZX-BI45：45°双眼镜筒 镜筒倾斜角：
45°、眼幅调整范围：52～76
-
SZX-TBI：双眼镜筒 镜筒倾斜角：5～45°、
眼幅调整范围：51～76
聚焦机构
SZX2-FO：粗调旋钮行程为 80mm（粗调行程每一圈为 36.8mm），耐荷重范围：0-10.0kg
Hong Kong Head Office Tel: (852) 2333 7827 Fax: (852) 2333 0847
Shenzhen Office Tel: (755) 8110 8226 Fax: (755) 8395 3050
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0.125
60
SDFPLAPO2×PFC
0.3
20
SZX-ACH1.2FPL1.5×-4
0.15
45.5
DFPL2×-4
0.2
33.5
目镜
WHN10×-H 视野数 22 WHSZ15×-H 视野数 16 WHSZ20×-H 视野数 12.5 WHSZ30×-H 视野数 7
WHSZ10×-H 视野数 22 WHSZ15×-H 视野数 16 WHSZ20×-H 视野数 12.5 WHSZ30×-H 视野数 7
0.05
W.D. （mm）
171
SDFPLAPO0.5×PF
0.075
70.5
DFPL0.75×-4
0.075
116
SDFPLAPO 0.8×
0.12
81
DFPLAPO1×-4
0.1
81
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镜筒
SZX2-TTR/SZX2-TTRPT： 镜筒倾斜角： 5～45°、光路切换： 2 段（TTR：双眼 100%、双眼 50%/50%、TTRPT：双眼 100%、照相
100%） 眼幅调整范围：52～76mm
SZX2-TR30/SZX2-TR30PT: 30°三眼镜筒 镜筒倾斜角：30°、光路切换: 2 段（TR30：双眼 100%、双眼 50%/照相 50%、TR30PT：双眼 100%、照相
SZX2-FOF：粗调旋钮行程为 80mm（粗调行程每一圈为 36.8mm），微调旋钮行程为 80mm（微调行程每一 圈为 0.77mm），耐荷重范围：2.7-15.0kg
SZX2-FOFH：粗调旋钮行程为 80mm（粗调行程每一圈为 36.8mm），微调旋钮行程为 80mm（微调行程每一 圈为 0.77mm），备有内装式气体，保持平衡，耐荷重范围：8.0-25.0kg