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醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告引言:血清蛋白是人体内一类重要的生物大分子,对于维持人体正常生理功能具有重要作用。

因此,对血清蛋白的研究一直备受关注。

本实验旨在利用醋酸纤维薄膜电泳技术,对血清蛋白进行分离和鉴定,以期获得关于血清蛋白的更深入了解。

实验方法:1. 实验仪器和试剂准备本实验所需仪器包括电泳装置、电源、薄膜电泳槽等。

试剂包括醋酸纤维、缓冲液、血清样品等。

2. 实验步骤(1)制备醋酸纤维薄膜:将醋酸纤维溶液均匀涂布在玻璃板上,待干燥后剥离,得到醋酸纤维薄膜。

(2)制备电泳槽:将醋酸纤维薄膜固定在电泳槽中,保证其平整并与电极接触良好。

(3)样品准备:将待测血清样品离心,取上清液作为实验样品。

(4)电泳操作:将实验样品均匀涂布在醋酸纤维薄膜上,接通电源进行电泳,设定适当的电压和时间。

(5)染色和观察:将电泳结束后的薄膜进行染色处理,然后观察薄膜上蛋白带的分布情况。

实验结果:经过实验,我们观察到在醋酸纤维薄膜上形成了多个蛋白带,这些蛋白带代表了血清中不同种类的蛋白质。

通过比较不同样品的蛋白带分布情况,我们可以发现不同样品中蛋白质的种类和含量存在差异。

讨论:1. 醋酸纤维薄膜电泳技术的优势相比于传统的凝胶电泳技术,醋酸纤维薄膜电泳具有以下优势:操作简单、分辨率高、分离效果好、重复性好等。

因此,该技术在血清蛋白分离和鉴定中具有广泛应用前景。

2. 血清蛋白的研究意义血清蛋白是人体内一类重要的生物大分子,对于维持人体正常生理功能具有重要作用。

通过对血清蛋白的研究,可以了解人体内不同蛋白质的种类和含量,从而为临床医学、生物医学研究等领域提供重要的参考依据。

结论:本实验利用醋酸纤维薄膜电泳技术成功分离和鉴定了血清蛋白,观察到了不同蛋白质在薄膜上的分布情况。

该实验结果为进一步研究血清蛋白的功能和生理意义提供了基础数据。

醋酸纤维薄膜电泳技术的应用前景广阔,有望在血清蛋白研究领域发挥重要作用。

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告今天,我们要进行一项非常有趣的实验——血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验。

这个实验听起来很高大上,其实呢,就是让我们看看血液里的小家伙们是怎么分门别类地游动的。

那么,我们现在就开始吧!我们需要准备一些东西。

这里有一个小小的试管,里面装满了我们的“主角”——血清。

然后,我们需要把这些血清放到一个叫做“膜”的东西上。

这个膜可不是普通的纸,而是由一种叫做醋酸纤维的材料制成的。

这个膜有一个特点,就是可以让血液中的小分子物质按照它们的大小和电荷分别排列在不同的位置上。

这样一来,我们就可以通过观察这些小家伙们的运动轨迹来了解它们的种类和数量了。

现在,让我们开始实验吧!我们需要把一些试剂滴到血清上,让它变得更加丰富多彩。

然后,我们把这个混合物放到膜上,让它自由地游动起来。

这时候,我们会发现,那些小小的家伙们开始按照它们的大小和电荷分别排列在不同的位置上了。

比如说,那些大的蛋白质分子就会聚集在一起,形成一个又一个大的集团;而那些带负电荷的小分子则会向左移动,而那些带正电荷的小分子则会向右移动。

这样一来,我们就可以通过观察这些小家伙们的运动轨迹来了解它们的种类和数量了。

经过一段时间的观察,我们发现了很多有趣的事情。

比如说,我们发现了一些叫做“抗体”的蛋白质分子。

这些抗体分子非常厉害,它们可以识别并攻击那些对我们身体有害的病毒和细菌。

我们还发现了一些叫做“细胞因子”的蛋白质分子。

这些细胞因子可以帮助我们的免疫系统更好地应对病毒和细菌的侵袭。

通过这次实验,我们对血液中的小家伙们有了更深入的了解。

让我们再来回顾一下这次实验的过程吧。

我们首先准备了一些东西,然后进行了实验。

在这个过程中,我们发现了很多有趣的事情。

通过观察这些小家伙们的运动轨迹,我们了解到了它们的种类和数量。

这次实验让我们对血液中的小家伙们有了更深入的认识。

希望大家也能像我们一样喜欢这个实验哦!。

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告引言:血清蛋白是人体内一种重要的生物大分子,它在维持人体正常生理功能中起着至关重要的作用。

因此,对血清蛋白的研究一直备受科学家的关注。

本实验旨在利用醋酸纤维薄膜电泳技术,对血清蛋白进行分离,以期进一步了解血清蛋白的组成和功能。

实验方法:1. 准备样品:从健康人体中提取血清样品,将其离心,得到血清上清液。

2. 制备醋酸纤维薄膜:将醋酸溶液倒入玻璃容器中,将玻璃容器放置在恒温槽中,使醋酸溶液温度保持在60℃左右。

然后,将玻璃容器从恒温槽中取出,迅速浸入冷水中,使醋酸溶液迅速凝固形成醋酸纤维薄膜。

3. 实验操作:将醋酸纤维薄膜放置在电泳槽中,加入足够的电泳缓冲液,使醋酸纤维薄膜完全浸泡其中。

然后,将血清样品均匀涂抹在醋酸纤维薄膜上,并连接电源进行电泳分离。

4. 电泳条件:设置电泳电压和时间,一般情况下,电泳电压为100V,电泳时间为30分钟。

5. 实验结果:观察电泳结束后的醋酸纤维薄膜,记录血清蛋白的分离情况。

实验结果与讨论:经过电泳分离后,观察到醋酸纤维薄膜上出现了多个带状条纹,这些条纹代表了不同的血清蛋白组分。

根据条纹的迁移距离和形状,我们可以初步判断血清蛋白的分子量和电荷特性。

通过对实验结果的分析,我们可以发现,血清蛋白主要可以分为白蛋白、球蛋白、半胱氨酸蛋白和β-球蛋白等几个主要组分。

白蛋白是血清蛋白中含量最高的成分,迁移速度最快;球蛋白次之,迁移速度较慢;半胱氨酸蛋白和β-球蛋白迁移速度最慢。

这些血清蛋白的分离结果与其分子量和电荷特性有关。

白蛋白分子量较小,电荷较弱,因此迁移速度最快;球蛋白分子量较大,电荷较强,迁移速度较慢;半胱氨酸蛋白和β-球蛋白分子量更大,电荷更强,迁移速度最慢。

结论:本实验利用醋酸纤维薄膜电泳技术成功地对血清蛋白进行了分离,并初步了解了血清蛋白的组成和特性。

通过观察醋酸纤维薄膜上的带状条纹,我们可以对血清蛋白的分子量和电荷特性进行初步判断。

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告实验原理1. 电泳的基本原理带电颗粒在电场中向着与其电性相反方向移动的现象称为电泳。

电泳时不同的带电粒子在同一电场中泳动速度不同。

带电颗粒 ( 球形分子 ) 在电场中的电泳速度 (V )从上式看出,带电颗粒在电场中的移动速度 (V ) 与颗粒带电荷量 (Q ) 以及电场强度 (E ) 成正比,与球形分子的大小 ( 半径为 r ) 及所在介质的粘度(η) 成反比。

因此 , 在同一电场、同一介质中进行电泳时,带不同电荷,不同大小的颗粒就可以通过电泳而被分离。

在实际操作中,为了不考虑不同电压对电泳速度的影响,我们常用迁移率( move rate,M )来表示带电颗粒的电泳特性,迁移率指带电颗粒在单位电场强度下的电泳速度,即可见,带电颗粒的净电荷越多,分子颗粒越小,在电场中的迁移率就越快;反之越慢。

但电泳速度和电泳迁移率是两个不同的概念,后者有利于不同电场强度下电泳结果的比较,各种带电颗粒在一定条件下测得的迁移率是一个常数。

2. 影响电泳的主要因素(1) 电泳介质pH 值的影响: 对于蛋白质和氨基酸等两性分子,电泳介质的pH 值影响蛋白质的电离情况,即可决定蛋白质的带电量 (Q ) 。

pH 值小于等电点,分子带正电荷,向负极泳动,如果 pH 大于等电点,分子带负电荷,向正极泳动。

pH 值偏离等电点越远,分子所带净电荷越多,其泳动速度越快。

当缓冲液 pH 等于其等电点时,分子处于等电状态,不移动。

由于血清蛋白质的等电点多在 pH4 ~ 6 之间,因此,分离血清蛋白常用 pH 8.6 的巴比妥缓冲液或三羟甲基氨基甲烷 (Tris) 缓冲液。

(2) 缓冲液的离子强度 : 离子强度低,电泳速度快,分离区带不易清晰;离子强度高,电泳速度慢,但区带分离清晰。

如离子强度过低,缓冲液的缓冲量小,不易维持 pH 的恒定;离子强度过高,则降低蛋白质的带电量 ( 压缩双电层 ) 使电泳速度减慢。

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告实验室报告
题目:醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告
一、实验目的
本实验旨在使用醋酸纤维薄膜电泳技术分离血清蛋白,并分析其分离效果。

二、实验原理
醋酸纤维薄膜电泳技术是一种利用薄膜作为电泳载体,在交流电场中将带电微粒体分离的方法。

其分离原理在于不同电动力学直径的带电微粒体在局部电场中受到的电离流和离子机动力学的影响不同,导致粒径较小的微粒体在电场中移动的速度较快,粒径较大的微粒体则移动较慢,从而实现了分离。

三、实验步骤
1.将5μL血清样品加入凝胶载体中。

2.在醋酸纤维薄膜电泳仪中进行样品电泳分离,设置电场参数:电压300 V,电泳时间30分钟。

3.将分离后的血清蛋白样品涂在聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳定
量和分析。

四、实验结果
通过电泳定量和分析,我们可以得到血清蛋白的分离效果。


们发现,血清蛋白样品在30分钟内可以被醋酸纤维薄膜电泳技术
有效地分离,分离效果良好,明显区分了不同种类的蛋白。

五、结论
醋酸纤维薄膜电泳技术是一种非常有效的血清蛋白分离方法。

通过本次实验,我们得到了良好的分离效果和明确的蛋白种类区分。

这种技术具有高分离效率、高通量、简单易行等特点,可以
在临床医学、药物研发、生命科学等领域得到广泛应用。

此外,在使用醋酸纤维薄膜电泳技术分离血清蛋白时,需要注意控制一定的电场参数,以确保实验效果。

醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告_0

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醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告前言血清蛋白:血清蛋白是血液中脂肪酸的载体当身体需要能量或建筑材料时,脂肪细胞将脂肪酸释放到血液中,脂肪酸被血清蛋白捕获并运送到所需的位置牛血清白蛋白的相对分子质量是10的四次方,这是不确定的,但是是一种聚合物,并且在一些地方测量到70,000,这是一个数据。

它将用于聚合酶链反应牛血清蛋白是血液的主要成分,分子量为68kD。

等电点4.8氮含量16%,糖含量0.08%只含有己糖和己糖胺,脂肪含量仅为0.2%白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸残基形成17个二硫键,在肽链的第34位有一个游离巯基白蛋白可以与各种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合血液中的白蛋白主要起维持渗透压、缓冲液、载体和营养的作用。

在动物细胞的无血清培养中,白蛋白的加入可以起到生理和机械的保护作用和载体作用。

醋酸纤维素薄膜电泳:醋酸纤维素薄膜电泳以醋酸纤维素薄膜为载体它是纤维素的乙酸酯,由纤维素的羟基乙酰化而成。

它溶解在有机溶液如丙酮中,并可被涂覆成厚度为0.1毫米-0.15毫米的均匀微孔膜太稠,吸水性差,分离效果差;如果它太薄,如果它缺乏应有的机械强度,膜就会变脆。

醋酸纤维素薄膜电泳操作简单、快速、廉价。

它已广泛应用于血清蛋白、血红蛋白、球蛋白、脂蛋白、糖白蛋白、甲胎蛋白、类固醇激素和同工酶等的分离和分析。

虽然其分辨率低于聚丙烯酰胺凝胶电泳,但具有简单、快速的优点。

功能:1。

(1)醋酸纤维素膜对蛋白质样品的吸附很少,没有“拖尾”现象。

染色后,背景可以完全脱色,各种蛋白染色带可以清晰分离,提高了测定的准确性。

(2)快速节省时间醋酸纤维素膜的亲水性比滤纸差,膜中含有的缓冲溶液少,电渗少,电泳时大部分电流由样品传导,分离速度快,电泳时间短。

一般来说,电泳时间只有45-60分钟。

染色和脱色后,整个电泳过程只需约90分钟。

(3)灵敏度高,样品消耗少。

血清蛋白仅需要2μl血清,即使样品体积小至0.1μl,对于仅含5μg蛋白的样品也可获得清晰的分离带。

醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳法分离⾎清蛋⽩实验报告前⾔⾎清蛋⽩:⾎清蛋⽩是⾎液中脂肪酸的携带者。

当⾝体需要能量或者需要建造材料时,脂肪细胞就把脂肪酸释放到⾎液中,脂肪酸被⾎清蛋⽩获取,并被运送到需要的部位。

⽜⾎清⽩蛋⽩的相对分⼦质量为10的4次⽅这个级别,它不是⼀定的,是多聚物,有的地⽅测的70 000,这就是⼀个数据了。

在做PCR的时候会⽤到它。

⽜⾎清蛋⽩是⾎液的主要成分,分⼦量68kD。

等电点4.8。

含氮量16%,含糖量0.08%。

仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。

⽩蛋⽩由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个⼆硫键,在肽链的第34位有⼀⾃由巯基。

⽩蛋⽩可与多种阳离⼦、阴离⼦和其他⼩分⼦物质结合。

⾎液中的⽩蛋⽩主要起维持渗透压作⽤、PH 缓冲作⽤、载体作⽤和营养作⽤。

在动物细胞⽆⾎清培养中,添加⽩蛋⽩可起到⽣理和机械保护作⽤和载体作⽤。

醋酸纤维薄膜电泳:醋酸纤维薄膜电泳以醋酸纤维薄膜为⽀持物。

它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经⼄酰化⽽制成。

它溶于丙酮等有机溶液中,即可涂布成均⼀细密的微孔薄膜,厚度以0.1mm—0.15mm为宜。

太厚吸⽔性差,分离效果不好;太薄则膜⽚缺少应有的机械强度则易碎。

应⽤醋酸纤维薄膜电泳操作简单、快速、廉价。

已经⼴泛⽤于⾎清蛋⽩,⾎红蛋⽩,球蛋⽩,脂蛋⽩,糖蛋⽩,甲胎蛋⽩,类固醇激素及同⼯酶等的分离分析中,尽管它的分辨⼒⽐聚丙酰胺凝胶电泳低,但它具有简单,快速等优点。

特点:1.(1)醋酸纤维薄膜对蛋⽩质样品吸附极少,⽆“拖尾”现象,染⾊后背景能完全脱⾊,各种蛋⽩质染⾊带分离清晰,因⽽提⾼了测定的精确性。

(2)快速省时。

由于醋酸纤维薄膜亲⽔性较滤纸⼩,薄膜中所容纳的缓冲液也较少,电渗作⽤⼩,电泳时⼤部分电流是由样品传导的,所以分离速度快,电泳时间短,⼀般电泳45—60min即可,加上染⾊,脱⾊,整个电泳完成仅需90min左右。

(3)灵敏度⾼,样品⽤量少。

⾎清蛋⽩仅需2µl⾎清,甚⾄加样体积少⾄0.1µl,仅含5µg蛋⽩样品也可得到清晰的分离带。

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告
为了研究血清蛋白的分离和鉴定,我们进行了醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白
的实验。

本实验旨在通过醋酸纤维薄膜电泳技术,对血清蛋白进行有效的分离和检测,为进一步的蛋白质研究提供可靠的技术支持。

实验方法:
1. 样品制备,取血清样品,并进行蛋白质浓缩处理。

2. 醋酸纤维薄膜电泳,将处理后的血清样品加载到醋酸纤维薄膜电泳仪中,进
行电泳分离。

3. 凝胶染色,对电泳分离后的蛋白进行凝胶染色处理。

4. 结果分析,观察电泳结果,分析血清蛋白的分离情况。

实验结果:
经过醋酸纤维薄膜电泳分离,我们成功地将血清蛋白分离成多个明显的条带,
这表明醋酸纤维薄膜电泳技术能够有效地实现血清蛋白的分离。

通过凝胶染色后,我们观察到不同条带对应的蛋白质成分,为后续的蛋白质鉴定和研究奠定了基础。

实验结论:
醋酸纤维薄膜电泳技术能够有效地分离血清蛋白,为血清蛋白的研究提供了重
要的技术手段。

通过本实验的分离和分析,我们成功地获取了血清蛋白的组成信息,为进一步的蛋白质研究提供了可靠的数据支持。

总结:
本实验通过醋酸纤维薄膜电泳技术,成功地分离了血清蛋白,并对其进行了初
步的鉴定分析。

醋酸纤维薄膜电泳技术具有分离效率高、操作简便等优点,适用于
血清蛋白等复杂蛋白质混合物的分离和分析。

希望本实验的结果能够为相关领域的研究工作提供一定的参考价值。

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及定量实验报告

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及定量实验报告

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及定量实验报告实验报告:血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及定量一、实验目的本实验旨在通过醋酸纤维薄膜电泳技术,对血清中的蛋白质进行分离和定性,同时利用扫描仪对电泳条带进行定量分析,加深对血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及定量的理解。

二、实验原理醋酸纤维薄膜电泳是一种常用的蛋白质分离方法,主要是利用电泳的原理将血清中的蛋白质进行分离并定性地鉴定。

其原理是基于各种蛋白质在电场中的迁移率不同,大小不同的蛋白质在电场的作用下,向正极或负极移动的速度也不同,从而将血清中的蛋白质分成不同的区带。

三、实验步骤1.准备试剂和仪器:醋酸纤维薄膜电泳试剂盒、电泳仪、醋酸纤维薄膜、玻璃板、移液器、注射器等。

2.配制试剂:按照醋酸纤维薄膜电泳试剂盒的说明书配制分离液、浓缩液和电极液等。

3.加样:将血清样品用移液器加到醋酸纤维薄膜上,控制加样量为5μL。

4.浸泡:将加好样的醋酸纤维薄膜放入分离液中浸泡10分钟,使其完全湿润。

5.电泳:将湿润的醋酸纤维薄膜放在玻璃板上,再覆盖上另一块玻璃板,然后将电泳槽装配好,接通电源进行电泳。

电泳时间和电压根据具体实验条件进行调整。

6.染色:电泳结束后,将醋酸纤维薄膜取出,放入染色液中染色10分钟,以便更好地观察蛋白质条带。

7.脱色:将染色后的醋酸纤维薄膜放入脱色液中脱色,直到背景清晰,蛋白质条带颜色较浅为止。

8.扫描定量:利用扫描仪对脱色后的醋酸纤维薄膜进行扫描,获取各蛋白质条带的OD值(吸光度),计算各蛋白质的相对含量。

四、实验结果通过醋酸纤维薄膜电泳,我们可以成功地将血清中的蛋白质分离成不同的条带。

从扫描结果中我们可以得到各条带的OD值,通过这些数据可以进一步计算出各蛋白质的相对含量。

以下是本实验的部分实验数据:OD值(吸光度)数据分析表:通过本次实验,我们成功地利用醋酸纤维薄膜电泳对血清中的蛋白质进行了分离和定性分析。

同时通过扫描定量,我们得到了各蛋白质条带的OD值以及相对含量。

血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验报告
标题:血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳
一、实验目的:
1.掌握醋酸纤维素薄膜电泳的原理和方法。

2.了解血清蛋白质的组成和分布。

二、实验原理:
醋酸纤维素薄膜电泳是一种常用的分离和鉴定蛋白质的方法。

其原理基于不同蛋白质分子在电场中的迁移率不同,从而实现对蛋白质的分离。

这种电泳方法具有快速、简便、分辨率高等优点。

三、实验步骤:
1.准备试剂和器材:醋酸纤维素薄膜、电极缓冲液、血清样
品、水浴锅、电泳仪、计时器、移液管、剪刀、镊子等。

2.加样:将适量血清样品用移液管加到醋酸纤维素薄膜上,
注意不要形成气泡。

3.电泳:将加好样的醋酸纤维素薄膜放入电泳仪中,接通电
源,开始电泳。

记录电泳时间和电流强度。

4.染色:电泳结束后,将醋酸纤维素薄膜取出,放入染色液
中染色。

5.观察和拍照:观察染色后的醋酸纤维素薄膜,记录各蛋白
带的颜色和位置。

用相机拍摄结果。

四、实验结果:
五、实验结论:
通过本次实验,我们成功地分离了血清中的各种蛋白质,并观察到了它们在醋酸纤维素薄膜上的分布情况。

实验结果表明,血清中含有白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白等多种蛋白质。

这种方法有助于我们进一步了解血清蛋白质的组成和分布,为临床诊断和治疗提供参考。

同时,本实验也锻炼了我们实际操作的能力和对醋酸纤维素薄膜电泳原理的理解。

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告实验室里一片忙碌,大家都在准备血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验。

说到这,心里不禁有些激动。

每一次实验就像一次新的冒险,总能带来意想不到的发现。

这次,我们主要是想了解血清中的蛋白质组成,看看它们如何在电场中分离,真是充满期待。

第一步,准备样本。

血清的采集需要小心翼翼。

小针头刺破皮肤,几滴鲜红的液体就收集在试管里。

望着试管中那一抹亮丽的红色,心中不由得感叹,生命的色彩是如此丰富。

接下来,得把这些血清进行稀释,确保在电泳时每种蛋白质的表现都能被清晰捕捉到。

稀释的时候,仿佛在调配一种神秘的药水,每一步都不能马虎。

在样本准备好后,下一步就是上电泳槽。

电泳槽就像一个舞台,蛋白质们要在这里展现自己的魅力。

插上电源,电流通过,整个实验室的气氛瞬间变得紧张。

电场的影响下,蛋白质像是被施了魔法,开始向两端移动。

这个过程就像看一场精彩的舞蹈表演,各种不同的蛋白质在舞台上尽情展现,谁轻盈,谁沉重,一目了然。

随后是染色步骤。

这一步绝对是视觉的盛宴。

把染料倒入电泳槽,蛋白质在染料的浸润下,瞬间绽放出绚丽的色彩。

那些本来默默无闻的蛋白质,突然变得光彩夺目。

看着一条条清晰的带状图,心中涌起一阵成就感。

那种瞬间,仿佛所有的努力都得到了回报。

在观察结果时,我的心情简直如同过山车。

那些带状的颜色深浅、宽窄都在诉说着蛋白质的故事。

有些带宽而亮,显示它们在血清中的丰盛;有些则细细如丝,显得有些微不足道。

这一切的数据与现象,都像是在为我们解读身体的语言。

不仅如此,我们还可以通过这个实验来进一步了解蛋白质的功能。

比如,某些蛋白质的缺失可能与疾病有直接关系。

通过这个电泳实验,我们仿佛在血清中找到了“罪魁祸首”,为后续的医学研究打下了基础。

而实验的最后一步就是记录结果。

我们需要把实验的每一个细节都一一记录下来,确保今后能查阅。

在这个过程中,反复回顾实验的每个环节,心里总是忍不住想:这些小小的带状图,竟然能映射出如此深刻的生物学意义。

分离血清蛋白的实验报告

分离血清蛋白的实验报告

一、实验目的1. 掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白的原理和操作步骤。

2. 了解血清蛋白的种类及其在电场中的迁移规律。

3. 学会通过电泳法分析血清蛋白的组成和含量。

二、实验原理血清蛋白是血液中的一种重要成分,主要由白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原等组成。

不同血清蛋白的等电点、分子量和形状不同,导致其在电场中的迁移速度不同。

醋酸纤维素薄膜电泳法是一种常用的分离血清蛋白的方法,其原理如下:1. 将血清样品点样于醋酸纤维素薄膜上,薄膜两侧分别接上电极。

2. 在pH值低于血清蛋白等电点的缓冲液中,血清蛋白带负电荷,向正极移动。

3. 根据血清蛋白的种类、等电点、分子量和形状的不同,其在电场中的迁移速度不同,从而实现分离。

4. 通过染色和扫描,可以观察到血清蛋白的电泳图谱,分析其组成和含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:血清样品、醋酸纤维素薄膜、pH 8.6的缓冲液、染色剂、扫描仪等。

2. 实验仪器:电泳仪、点样器、染色池、扫描仪等。

四、实验步骤1. 制备缓冲液:将pH 8.6的缓冲液配制好,备用。

2. 点样:将血清样品用点样器点样于醋酸纤维素薄膜上,确保样品点均匀。

3. 电泳:将薄膜放入电泳仪中,加入pH 8.6的缓冲液,设置电压和电泳时间,进行电泳分离。

4. 染色:电泳结束后,将薄膜取出,放入染色池中,加入染色剂,进行染色。

5. 扫描:染色后,将薄膜放入扫描仪中,扫描电泳图谱。

6. 分析:根据电泳图谱,分析血清蛋白的组成和含量。

五、实验结果与分析1. 电泳图谱:根据扫描得到的电泳图谱,可以看出血清蛋白的组成和含量。

图谱中,清蛋白、1-球蛋白、2-球蛋白、α-球蛋白和β-球蛋白等血清蛋白均有所体现。

2. 结果分析:根据电泳图谱,可以计算出各血清蛋白的相对含量。

例如,清蛋白的含量为30%,1-球蛋白的含量为25%,2-球蛋白的含量为20%,α-球蛋白的含量为15%,β-球蛋白的含量为10%。

六、实验总结本次实验成功利用醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白,并通过电泳图谱分析了血清蛋白的组成和含量。

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验报告一、实验介绍血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳是一种常用的生物化学实验,用于分离血清中的蛋白质。

该实验利用电泳原理,将血清中的蛋白质按照它们的电荷、大小和形状进行分离。

这种技术可以帮助诊断一些疾病,并可作为治疗方案的参考。

二、实验步骤1. 样品制备:取少量血清,加入等量的缓冲液,混合均匀。

2. 样品处理:将样品加入SDS-PAGE样品缓冲液,煮沸5分钟。

3. 准备凝胶:将凝胶混合物倒入凝胶模板中,待凝胶固化后倒掉上层溶液。

4. 加载样品:将处理好的样品加入凝胶孔中。

5. 电泳:将凝胶放入电泳槽中,连接电源进行电泳。

6. 染色:取出凝胶,在染色溶液中染色15分钟至2小时。

7. 脱色:取出凝胶,在脱色溶液中脱色至背景清晰。

三、实验结果实验结果可通过观察凝胶图谱来进行分析。

在凝胶上,蛋白质会被分离成多个带状区域,每个区域代表一种蛋白质。

观察带状区域的大小、形状和颜色,可以判断样品中蛋白质的种类和含量。

四、实验注意事项1. 样品处理时需要加入SDS-PAGE样品缓冲液,以去除蛋白质的天然电荷。

2. 凝胶制备时需要严格按照说明书操作,确保凝胶固化均匀。

3. 电泳槽中需要加入足够的电泳缓冲液,并保证电极完全浸入缓冲液中。

4. 染色和脱色时需要注意时间控制,过长或过短都会影响染色效果。

5. 实验过程中应注意安全,避免接触电源和有毒溶液。

五、实验应用血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳广泛应用于临床诊断和治疗方案的制定。

例如,在肝功能异常的患者中,可以通过该技术检测血清中的蛋白质种类和含量,以判断肝脏功能是否正常。

此外,该技术还可用于研究蛋白质结构和功能,以及新药物的筛选。

六、实验优化为了提高实验效率和准确性,可以对实验进行优化。

例如,可以选择不同类型的凝胶和电泳缓冲液来适应不同的样品类型;也可以尝试不同的染色方法来提高染色效果。

此外,在实验过程中还需要注意控制变量,以确保实验结果的可靠性。

七、总结血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳是一种常用的生物化学实验,用于分离血清中的蛋白质。

血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验报告引言:血清蛋白质是构成血浆中主要蛋白质的一类物质,对于人体的健康状况具有重要的指示作用。

醋酸纤维素薄膜电泳技术是一种常用的分离和检测血清蛋白质的方法。

本实验旨在探究血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳的原理、操作步骤以及实验结果的分析和讨论。

一、实验原理血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳是一种基于电荷和大小的分离技术。

首先,将血清样品与醋酸盐缓冲液混合,并加载到预制的醋酸纤维素薄膜中。

然后,将电泳槽中的电源接通,利用电场作用使蛋白质在薄膜上移动。

不同的蛋白质根据其分子量和电荷大小的不同,在电场作用下向阳极或阴极方向移动,从而实现蛋白质的分离。

二、实验步骤1. 准备工作:将醋酸纤维素薄膜剪成适当的大小,并在电泳槽中放置好阳极和阴极。

2. 样品制备:取适量的血清样品,加入醋酸盐缓冲液,并充分混合。

3. 样品加载:将样品缓冲液混合物加载到醋酸纤维素薄膜中,并确保完全覆盖薄膜表面。

4. 电泳条件设置:根据实验需要,设置适当的电场强度和电泳时间。

5. 开始电泳:将电泳槽连接电源,开启电源使电泳进行。

6. 实验结束:根据设定的电泳时间,关闭电源,取出醋酸纤维素薄膜。

三、实验结果分析和讨论通过血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验,可以观察到不同蛋白质在薄膜上的迁移情况。

根据迁移距离和迁移速度,可以初步判断不同蛋白质的分子量和电荷大小。

在实验中,我们可以根据薄膜上不同蛋白质的迁移位置,进行进一步的分析和鉴定。

血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳还可以用于检测某些疾病的诊断。

例如,肝功能异常时,血清中白蛋白和球蛋白的比例会发生变化,通过血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳可以明确出现异常的蛋白质成分,为临床诊断提供重要依据。

实验中需要注意的是,样品的制备和加载过程要尽量避免氧化、污染和杂质的引入,以保证实验结果的准确性。

此外,在设置电泳条件时,应根据样品特性和实验目的进行合理选择,以获得最佳的分离效果。

结论:血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳是一种常用的分离和检测血清蛋白质的方法。

血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳实验报告引言醋酸纤维薄膜电泳是一种常用的蛋白质分离技术,通过不同蛋白质在电场中的迁移速度差异来实现分离。

血清蛋白作为一类重要的生物标志物,在许多疾病的诊断和研究中具有重要意义。

本实验旨在通过醋酸纤维薄膜电泳技术对血清蛋白进行分离和检测,以期获得有关蛋白质的信息。

实验材料与方法本实验所需材料主要包括:血清样本、醋酸纤维薄膜、电泳槽、电源、电极、电泳缓冲液等。

首先,将血清样本进行预处理,如蛋白质沉淀、去除干扰物等。

然后,将处理后的血清样本加载到醋酸纤维薄膜上,进行电泳分离。

电泳过程中,根据蛋白质的等电点和电荷性质,不同蛋白质将在电场中沿着纤维薄膜迁移,最终形成不同的蛋白带。

实验结果与讨论经过醋酸纤维薄膜电泳分离,我们观察到血清样本中的蛋白质在薄膜上形成了多个清晰的蛋白带。

根据蛋白质的分子量和电荷性质,这些蛋白带可以被赋予不同的特征。

通过比较实验结果与标准蛋白质的电泳图谱,我们可以初步确定血清样本中含有的主要蛋白种类及其相对含量。

在实验过程中,我们还发现了一些问题。

由于血清样本中蛋白质种类繁多,且含量差异较大,部分低丰度的蛋白可能会被高丰度的蛋白所掩盖,从而影响了分离结果的准确性。

此外,电泳条件的选择也对实验结果产生了一定影响,如电场强度、运行时间等参数的调整可能会改变蛋白质的迁移速度,进而影响分离效果。

结论通过本次实验,我们成功利用醋酸纤维薄膜电泳技术对血清蛋白进行了分离和检测,初步获得了有关蛋白质的信息。

然而,实验中仍存在一些问题需要进一步解决。

未来,我们将继续优化实验条件,提高分离效率和准确性,以期更好地应用于临床诊断和科研工作中。

总结醋酸纤维薄膜电泳作为一种简便、高效的蛋白质分离技术,在生物医学领域具有广泛的应用前景。

通过本次实验,我们初步了解了该技术在血清蛋白分离中的应用及存在的问题,为今后的研究工作奠定了基础。

希望通过不断努力,可以更好地利用醋酸纤维薄膜电泳技术来解决生物医学领域中的重要问题,为人类健康事业做出更大的贡献。

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量 实验报告

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量 实验报告

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量实验报

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳是一种常用的蛋白质分离和定量技术。

本实验旨在通过电泳分离血清样品中的蛋白质,并利用醋酸纤维薄膜定量测定其含量。

以下是实验的具体步骤和结果。

实验步骤:
1. 样品制备:将血清样品离心并取上清液。

2. 样品混合:将取得的血清样品与等体积的缓冲液混合。

3. 样品加载:将混合样品加在聚丙烯酰胺凝胶电泳板上。

4. 电泳分离:通电使蛋白质沿着凝胶板移动,根据分子大小进行分离。

5. 醋酸纤维薄膜染色:将凝胶板放在染色缸中进行染色。

6. 图像采集:使用分析软件采集凝胶板图像。

7. 定量分析:利用染色蛋白质的光密度值进行定量分析。

实验结果:
经过电泳分离和醋酸纤维薄膜染色后,我们成功地分离出血清样品中的主要蛋白质,并通过定量分析得出各蛋白质的相对含量。

在实验中,我们发现血清蛋白主要包括白蛋白、球蛋白和纤维蛋白等。

结论:
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳是一种有效的蛋白质分离和定量技术,能够帮助我们了解血清样品中的蛋白质组成及含量。

通过实验,我们成功地完成了蛋白质的分离和定量分析,为后续的研究奠定了基础。

以上就是本次实验的全部内容及结果,希望对您有所帮助。

感谢您的阅读!。

醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白-山东大学实验报告

醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白-山东大学实验报告

醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白高熹 168615140001一、实验目的掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白的原理和方法。

二、实验原理蛋白质是两性电解质。

在pH值小于其等电点的溶液中,蛋白质为正离子,在电场中向阴极移动;在pH值大于其等电点的溶液中,蛋白质为负离子,在电场中向阳极移动。

血清中含有数种蛋白质,它们所具有的可解离基团不同,在同一pH的溶液中,所带净电荷不同,故可利用电泳法将它们分离。

血清中含有清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等,各种蛋白质由于氨基酸祖坟、立体构象、相对分子质量、等电点及形状不同,在电场中迁移速度不同。

由表可知,血清中5种蛋白质的等电点大部分低于pH值7.0,所以在pH8.6的缓冲液中,它们都电离成负离子,在电场中向阳极移动。

在一定范围内,蛋白质的含量与结合的燃染料量成正比,故可将蛋白质区带剪下,分别用0.4mol/L NaOH溶液浸洗下来,进行比色,测定其相对含量。

也可以将染色后的薄膜直接用光密度计扫描,测定其相对含量。

肾病、弥漫性肝损害、肝硬化、原发性肝癌、多发性骨髓瘤、慢性炎症、妊娠等都可以使白蛋白下降。

肾病时α1、α2、β球蛋白升高,γ-球蛋白降低。

肝硬化时α2、β-球蛋白降低,而α1、γ-球蛋白升高。

三、实验器材醋酸纤维薄膜;培养皿;载玻片;玻璃棒;镊子;电吹风;试管;习惯;水浴锅;电泳槽;直流稳压电泳仪;剪刀。

四、实验试剂巴比妥-巴比妥钠缓冲液(PH8.6,离子强度0.06mol/L);染色液;漂洗液(95%乙醇45ml,冰醋酸5ml,水50ml);透明液(无水乙醇14ml,冰醋酸6ml);人血清(新鲜、无溶血)。

五、实验步骤1、提前将醋酸纤维薄膜浸泡30min以上;2、电泳槽调平,搭好滤纸条;3、选好薄膜开始点样,后将薄膜点样端放在滤纸桥负极,放在滤纸桥上,注意点样面朝下,拉平薄膜,不要下垂;4、盖上盖子,平衡10min,后接通电源,调电压90V预电泳10min,后调电压至110V电泳1h;5、将染液倒入大培养皿中,电泳完毕立即用镊子取出薄膜,直接浸入染色液 8min,然后取出;6、配制好漂洗液,前一次漂洗,后两次分别浸泡10min;7、漂洗后薄膜贴在玻璃板上,注意不要有气泡,用透明液淋湿至透明,后用电吹风吹干,揭下压平。

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前言血清蛋白:血清蛋白是血液中脂肪酸的携带者。

当身体需要能量或者需要建造材料时,脂肪细胞就把脂肪酸释放到血液中,脂肪酸被血清蛋白获取,并被运送到需要的部位。

牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别,它不是一定的,是多聚物,有的地方测的70 000,这就是一个数据了。

在做PCR的时候会用到它。

牛血清蛋白是血液的主要成分,分子量68kD。

等电点4.8。

含氮量16%,含糖量0.08%。

仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。

白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。

白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。

血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。

在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。

醋酸纤维薄膜电泳:醋酸纤维薄膜电泳以醋酸纤维薄膜为支持物。

它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成。

它溶于丙酮等有机溶液中,即可涂布成均一细密的微孔薄膜,厚度以0.1mm—0.15mm为宜。

太厚吸水性差,分离效果不好;太薄则膜片缺少应有的机械强度则易碎。

应用醋酸纤维薄膜电泳操作简单、快速、廉价。

已经广泛用于血清蛋白,血红蛋白,球蛋白,脂蛋白,糖蛋白,甲胎蛋白,类固醇激素及同工酶等的分离分析中,尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低,但它具有简单,快速等优点。

特点:1.(1)醋酸纤维薄膜对蛋白质样品吸附极少,无“拖尾”现象,染色后背景能完全脱色,各种蛋白质染色带分离清晰,因而提高了测定的精确性。

(2)快速省时。

由于醋酸纤维薄膜亲水性较滤纸小,薄膜中所容纳的缓冲液也较少,电渗作用小,电泳时大部分电流是由样品传导的,所以分离速度快,电泳时间短,一般电泳45—60min即可,加上染色,脱色,整个电泳完成仅需90min左右。

(3)灵敏度高,样品用量少。

血清蛋白仅需2μl血清,甚至加样体积少至0.1μl,仅含5μg蛋白样品也可得到清晰的分离带。

临床医学检验利用这一点,检测在病理情况下微量异常蛋白的改变。

(4)应用面广。

某些蛋白在纸上电泳不易分离,如胎儿甲种球蛋白,溶菌酶,胰岛素,组蛋白等用醋酸纤维薄膜电泳能较好地分离。

(5)醋酸纤维薄膜电泳染色后,经冰乙酸,乙醇混合液或其它溶液浸泡后可制成透明的干板,有利于扫描定量及长期保存。

2、醋酸纤维薄膜电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳相比,操作简单,但分离效果不太好。

如血清蛋白在醋酸纤维素薄膜电泳中,只能分离出5—6条区带,而聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离出数10条区带。

1、实验目的1.掌握电泳法分离血清蛋白质的原理;2.掌握血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的操作方法。

2、实验原理1.电泳:是指带电粒子在电场中向本身所带电荷相反的电极移动的现象。

在一定pH条件下,不同的蛋白质由于具有不同的等电点而带不同性质的电荷,因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,即它们的电泳迁移率不同,因此,可使它们分离2.影响电泳迁移率的因素:内在因素:蛋白所带净电荷的量、蛋白的大小和形状外界因素:电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度和电渗现象3.血清中各种蛋白质的等电点在pH4.0~7.3之间,在pH8.6的缓冲溶液中均带负电荷,在电场中向正极泳动。

血清中各种蛋白质的等电点不同,所以带电荷量也不同。

此外各种蛋白质的分子大小各有差异,因此在同一电场中泳动的速度不同。

分子小而带电荷多者,泳动较快;反之,则较慢。

4.醋酸纤维素溶于有机溶剂(如:丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等)后,涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。

该膜具有均一的泡沫状的结构,厚度约为120 μm,有很强的通透性,对分子移动阻力很小。

该薄膜电泳具有微量、快速、简便、分辨力高,对样品无拖尾和吸附现象等优点。

现已广泛用于血清蛋白、糖蛋白、脂蛋白、血红蛋白、酶的分离和免疫电泳等方面5. 经醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白按电泳速度分为5条区带,从正极端依次为清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白及γ球蛋白,经染色可计算出各蛋白质的百分含量。

三、实验材料及试剂1、实验器材1. 电泳仪:为电泳提供直流电源。

2. 电泳槽:为电泳提供场所。

3. 血清加样器:可用盖玻片或微量加样器。

4. 醋酸纤维素薄膜:2cm×8cm5. 其它:培养皿(直径9-10cm)、滤纸、镊子等2、实验材料及试剂材料:牛血清1.巴比妥-巴比妥钠缓冲液(pH8.6)2.0.5% 氨基黑10B染色液3.漂洗液4.透明液:临用前配制甲液:取冰乙酸(AR)15ml,无水乙醇(AR)85ml,。

乙液:取冰乙酸(AR)25ml,无水乙醇(AR)75ml。

5.保存液:液体石蜡6.定量洗脱液(0.4mol/L NaOH溶液)4、实验步骤1、电泳槽的准备电泳槽有两个互相隔离的槽,各自装有缓冲液,接不同的电极,红色为正极,黑色为负极。

每个槽上都有一根可移动的横杆,滤纸的一头搭在横杆上,另一头浸入缓冲液中,形成了滤纸桥。

点好样的醋酸纤维薄膜就搭在滤纸桥上。

2、醋酸纤维素薄膜的润湿将醋酸纤维素薄膜完全浸泡于缓冲液中约30min后,用镊子小心夹住薄膜一端,放在折叠的滤纸中,并用滤纸吸干表面液体。

3、点样把膜条铺在玻璃板上(无光泽面朝上),将点样器在血清中沾一下(量薄薄一层为好),再在膜条一端1.5-2cm处轻轻水平地落下并随即提起,这样即在膜条上点上了细条状的血清样品。

此步是实验的关键。

4、电泳将点样端的薄膜平贴在阴极电泳槽支架的滤纸桥上(点样面朝下),另一端平贴在阳极端支架上(见下图)。

要求薄膜紧贴滤纸桥并绷直,中间不能下垂。

连接好电泳仪。

在室温下电泳,打开电源开关,调节电流强度0.3mA/cm膜宽度电泳时间约为1h。

电泳后,关闭电泳仪切断电源。

5、染色:电泳完毕后将薄膜取下, 放在含氨基黑10B染色液的培养皿中浸泡5-10min。

(染色液回收)6、漂洗:将薄膜从染色液中取出,自来水下冲洗除去多余的染色液后放入盛有漂洗液的培养皿中漂洗,直至背景蓝色脱尽,条带清晰为止,可得到色带清晰的电泳图谱。

7、透明将脱色吹干后的薄膜浸入透明甲液中2min,立即放入透明乙液中浸泡1min,取出后立即紧贴于干净玻璃板上,两者间不能有气泡。

约2min—3min薄膜完全透明。

若透明太慢可用滴管取透明乙液少许在薄膜表面淋洗一次垂直放置待其自然干燥,或用吹风机冷风吹干且无酸味。

再将玻璃板放在流动的自来水下冲洗,当薄膜完全润湿后用单面刀片撬开薄膜的一角,用手轻轻将透明的薄膜取下,用滤纸吸干所有的水分,最后将薄膜置液体石蜡中浸泡3min,再用滤纸吸干液体石蜡,压平。

此薄膜透明,区带着色清晰,可用于光吸收计扫描。

长期保存不褪色。

8、定量(1)浸泡将膜片上的各蛋白质分离区带分段剪下,分别置于相应的标有编号的试管内,然后各加入0.4mol/L的氢氧化钠溶液进行浸泡。

浸泡淡色带所加入的0.4mol/L氢氧化钠溶液的量为4ml,深色带为8ml(此时的稀释倍数是淡色带的2倍)。

室温下的浸泡时间为30min~60min。

若在37℃水浴中浸泡,则为10min~15min。

浸泡期间振荡数次,使蛋白质区带浸出。

另外再剪取与色带膜条大小相同的无色带膜条作为空白,以相同的方式浸泡在0.4mol/L氢氧化钠溶液中。

(2)比色浸泡完毕,将浸出的有色溶液在分光光度计上进行比色测定。

测定波长为620nm,光径为1cm。

若浸出液有混浊或沉淀,则以4000r/min的转速离心10min~20min除去,然后再取上清液进行比色测定白质由于氨基酸组分、立体构象、相对分子质量、等电点及形状的不同,在电场中的迁移速度不同,故可用电泳法将其分离。

2、电泳注意事项:电泳时需要注意电流和电压的控制,以及电泳时间。

根据图谱分析可以估算血清中蛋白质的相对含量。

图谱中颜色的深浅和面积大小可以反应血清蛋白质的含量,颜色较深者含量高,面积较大者含量高。

由于电离时间等因素的影响,实验存在一定的误差。

3、生物化学醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白的试验中,如果区带的分离效果不好,可能存在的影响因素:1.电泳时间不足2.薄膜在染色或漂洗时重叠紧密且时间很长3.薄膜在缓冲液中浸泡的时间不足4.点样时薄膜上是否存在多余的水分4、用醋酸纤维薄膜法可以将血清蛋白质分为哪几个区带可分5条带,分别为:α1—球蛋白、α2—球蛋白、β—球蛋白、γ—球蛋白、白蛋白。

可能分子量越小,带电量越高,运动速度越快。

而这五种蛋白的分子量不同,带电量也不同,在电泳时的速度有快有慢。

七、思考题1、影响醋酸纤维薄膜电泳的因素有哪些,其是如何影响的?血清变质:条带数会有偏差。

巴比妥溶液PH不合适:影响电泳速率。

漂洗次数过多或时间过长:看不清楚条带。

点样没点好浓度不均或者条带模糊。

2、实验过程中哪些操作会影响到实验条带的完整性,应该如何改正?点样没有点好,盖玻片要直直的压在薄膜上,否则血清不均匀,影响电泳条带形状;血清不宜过多,若过多则条带过宽,分离不完全;也不易过少,过少则条带分离不完全。

8、参考文献1.陈巍,龚伟宏;宁夏滩羊血清蛋白组分含量的研究[J];中国草食动物; 2003年S1期2.王友基,王钦利;血清蛋白电泳测定的标准化问题初探[J];江西医学检验;2002年06期3.周丽亚;高静;吴兆亮;李英杰;;血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验的改进[J];生物学杂志;2008年02期4.廖飞,王咏梅,左渝萍,何爱彬,曾昭淳;点样位置对血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳行为的改变[J];实验室研究与探索;2004年04期。

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