实验四___胶体金试纸条检测技术

（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的作 用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静 电作用成为一种稳定的胶体状态。
胶体金的质量判定标准 质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球 形，大小均一，无棱角。 质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状 各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带
胶体金快速诊断技术的特点
简捷快速：操作简单，一般只要5-10min 就
会出结果，而其它方法如 ELISA 需要 1-2h ， PCR 需要时间更长。
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼
很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标
记，这决定了它具有很好的特异性。
胶体金快速诊断技术的应用
负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling
technique）是以胶体金作为示踪标记物应
用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜 的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢 慢向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利 用胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/ 抗体。
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、
新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫
病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果
阴性对照
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
连接垫 （胶体金垫） 样品垫 质检线 吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
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测
定
测定时将试纸条下端浸入液体
标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测
定
若标本中有待测特异抗原，即
可与免疫金复合物中的抗体结 合，此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获，在膜 上显出红色反应线条（T）。
测
定
过剩的免疫金复合物继续前行，
至参照区与固相抗小鼠IgG结合 （免疫金复合物中的单克隆抗 体为小鼠IgG），而显出红色质 控线条（R）。
测
定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
实验四
胶体金试纸条诊断技术
一、简
介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层 析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免 疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激 素（ HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原 （HBsAg）等检测。
胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸