香菇多糖

香菇香菇多糖发酵生产分离提取生理活性

摘要:香菇是一种营养丰富的食、药用真菌香菇多糖因其具有如降血脂、抗血栓、抗血

小板聚集及抗肿瘤等生理活性而受到广泛的关注本论文通过香菇深层发酵来生产具有

生物活性的多糖为目的，研究了香菇多糖的发酵生产、提取、分离纯化及结构的初步分

析研究了营养性因子对香菇深层发酵的影响，结果表明葡萄糖、玉米粉、豆饼粉有利于

香菇菌体生长和胞外多糖的形成进一步的正交优化实验，确定了香菇深层发酵培养基为

葡萄糖20gL，豆饼粉60目20gL，KH2PO42gL，无机盐MgSO4·7H2O0.5gL优化发

酵工艺条件为初始pH5.5自然、接种量10％、种龄6d，温度28℃、250mL摇瓶装液

量80mL的条件下，香菇深层发酵结果最佳，在此基础上进行摇瓶发酵曲线测定，确定

了香菇适宜发酵周期为144h，胞外粗多糖含量最高可达542mg100mL，菌体生物量达

8.41mg100mL香菇发酵液胞外多糖最佳提取工艺为75％VV的乙醇浓度沉淀，温度为4℃，溶液pH值7.0时胞外粗多糖得率为670mg100mL发酵清液香菇发酵液胞内多糖

最佳提取工艺为组织捣碎法破壁处理、提取温度90℃、料水比14、提取时间4h、提

取次数2次，胞内多糖的最高产率为14.73mg50g湿菌丝体香菇胞外粗多糖经活性炭

脱色，酶法和三氯乙酸正丁醇法脱蛋白，经DEAE-纤维素柱进行组别分离和

Superdex200进行分级分离，经透析脱盐冷冻干燥得到香菇多糖纯品含量最多的胞外

多糖级分LEN1经红外光谱照射，证明其有多糖的特征吸收峰，是α-型吡喃环多糖经

紫外光谱扫描证明其不含蛋白质经HPLC测定，其分子量为6.5×105，是处于这一分

子量范围的单一成分，把提取出的香菇多糖应用于果蔬复合饮料中，无沉淀产生，证明

香菇多糖可用于饮料生产

标题:香菇香菇多糖发酵生产分离提取生理活性

专业:食品科学

学位:硕士

单位:山东轻工业学院@

关键词:香菇香菇多糖发酵生产分离提取生理活性

论文时间:2007

分类:TS201.5 S646.12

导师:王成忠

语种:中文文摘

香菇多糖提取的原理是什么？

多糖溶于热水,不溶于60%以上乙醇,也不溶于氯仿正丁醇.所以用热水提取,乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质;因为热水也可以将蛋白类物质提取出来,所以用氯仿正丁醇萃取除去提取液中的蛋白.

香菇子实体粉碎,低温烘干,准确称量,乙醚回流脱脂,乙醚提取物回收处理,香菇子实体粉末加入20倍量水,温度50 ℃,反应时间为80 min提取香菇多糖粗品,活性炭脱色[ 5 ],离心除去沉淀,上清液中加入95%乙醇,使乙醇终体积分数为75% ,离心取沉淀即得香菇多糖粗品。

香菇多糖粗品水溶解后过DEAE2 52层析柱(cm × 60 cm,柱高52

cm) ,DEAE2 52层析柱先用pH518的磷酸盐缓冲液平衡,样品溶于此缓冲液后上柱。

洗脱程序如下:首先用蒸馏水进行洗脱,洗脱400 mL,然后用磷酸盐缓冲液梯度

洗脱,洗脱80mL。

香菇多糖提取

原理：香菇多糖（lentinan;LTN），是从优质香菇子实体中提取的有效活性成分，经热水提取的香菇多糖可调节人休内有免疫功能的T细胞活性，可降低甲基胆蒽诱发肿瘤的能力。

1．提取

将香菇洗净后除根部后切除根部，菌伞切成小块，放入真空干燥箱（低温）烘干，然后将烘干的香菇小块放在研钵里研磨。

用台秤量取香菇粉20g，置于250ml烧杯中，加入100ml蒸馏水，于石棉网上加热至沸，并不断搅拌，煮沸30min后,抽滤。滤渣再用100ml蒸馏水溶液煮沸30min,抽率。合并两次滤液，然后将合并后的滤液加热浓缩至20ml,溶于

100ml95℅乙醇，搅拌并冷却至室温，静置1h。将混合液以4000r/min的转速离心10min,得到的沉淀放在真空干燥器中干燥，得到粗香菇多糖。

2.除蛋白

将得到的粗糖50ml100℃热水溶解，加Sevage 溶液10ml,剧烈震动10mim,静置10min，4000r/min离心10min,取上层清液，加Sevage 溶液反复操作5次

3.纯化

将提取的粗糖置于烧杯中，加蒸馏水50ml溶解，向溶液中加入等体积0.15mol/l 的CTAB与硼酸-硼砂缓冲液处理，静置10min, 4000r/min离心得沉淀用2mol/l 乙酸溶解，静置10min, 4000r/min离心后去上清液加等体积甲醇，静置24h.