香菇多糖的制备
香菇多糖的提取工艺
复合酶解、 酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的改进工艺 原料 → 复合酶解→酶解液→ 水浸提→ 酸浸提→ 浸提物→ 真空浓缩→ 浓缩 液→ 酒精沉淀→ 沉淀物→ sevage法脱蛋白→ 水相→ 丙酮洗涤→ 多 糖粗制品
操作要点
1、原料预处理 选取质量合格的干香菇若干,经植物高速磨碎机 磨成粉末, 称取相应香菇粉末 , 加入适量酒精使香菇粉末成糊状。
香菇多糖(1entinan，LNT) 香菇多糖是从优质香菇子 实体中提取的有效活性成分，是香菇的主要有效成分， 是一种宿主免疫增强剂(host defense potentiator， HDP)，临床与药理研究表明，香菇多糖具有抗病毒、抗 肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用。
香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成 分，香菇多糖中的活性成分是具有分支的β— (1—3)— D—葡聚糖，主链由β—(1—3)连接的葡萄糖基组成，沿 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ链随机分布着由β—(1—6)连接的葡萄糖基，呈梳状 结构。
8 、 sevage法脱蛋白 将上述沉淀溶于适量的蒸馏水中,分别加 入 20 %体积的氯仿和 7 %体积的异戊醇生成絮状凝聚物, 用高速离 心机在 5000r pm离心 15min得沉淀。重复上述操作, 直至无凝聚物 生成。
9、丙酮洗涤脱水 将酒精沉淀物用丙酮洗涤脱水两次, 倒入放 有干燥滤纸的培养皿中 (滤纸重0.98g) ,然后将培养皿放在 50℃ 的 烘干箱中进行干燥 3h ,得到香菇多糖粗制品。
香菇多糖制剂生产技术
汇报人：文小库
20多糖概述 • 香菇多糖制剂生产技术流程 • 香菇多糖制剂生产技术关键环节 • 香菇多糖制剂生产技术应用与前
景 • 香菇多糖制剂生产技术问题与解
决方案 • 香菇多糖制剂生产技术案例分析
01
香菇多糖概述
香菇多糖的定义
香菇多糖是一种从香菇子实体中提取的天然生物活性多糖， 它是由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物。
降低成本的技术手段与措施
01
02
03
采用廉价原材料
通过选用价格低廉的原材 料，降低生产成本。
提高设备利用率
通过提高设备利用率，降 低单位产品的设备折旧费 用。
实现自动化生产
通过实现自动化生产，降 低人工成本。
06
香菇多糖制剂生产技术案例分析
某公司香菇多糖提取与制剂生产流程介绍
原材料采购
香菇多糖提取
某公司香菇多糖制剂产品特点与优势分析
高效性
该公司生产的香菇多糖制剂具有 较高的生物活性，能够增强人体 免疫功能，对癌症、肝炎等疾病
具有一定的辅助治疗作用。
安全性和稳定性
该公司采用先进的生产工艺和设 备，确保产品质量稳定可靠，同 时遵循严格的质量控制标准，保
证产品的安全性和稳定性。
方便性
香菇多糖制剂采用口服给药方式 ，方便患者使用，同时具有较好
香菇多糖制剂在食品工业的应用
保健食品
香菇多糖具有抗氧化、抗炎、 抗疲劳等作用，被用于开发保 健食品，如增强免疫力、抗衰
老、降血脂等产品。
调味品
香菇多糖具有浓郁的香味和口感， 被用于调味品中，如酱油、调味酱 、调味粉等。
食品添加剂
香菇多糖具有稳定的理化性质和生 物活性，被用于食品添加剂中，如 防腐剂、稳定剂、增稠剂等。
香菇多糖的提取方法及应用
香菇多糖的提取方法及应用香菇多糖是从香菇中提取的一种多糖类化合物，具有抗肿瘤、抗病毒、降血脂、降血糖等多种药理活性。
提取香菇多糖的方法主要包括水提法、酸提法、碱提法、酶解法等多种方法。
下面将对香菇多糖的提取方法及应用做详细介绍。
1. 水提法水提法是将香菇切碎后用水浸泡，通过水提取的方法获得香菇多糖的一种提取方法。
其优点是提取过程简单，设备要求低，且操作方便。
但缺点是提取率较低，且容易受到微生物污染。
2. 酸提法酸提法是将香菇切碎后用酸性溶液浸泡，通过酸的作用来提取多糖。
酸提取的优点是提取率高，但也会产生废液排放问题，同时酸性溶液容易对蛋白质产生影响。
3. 碱提法碱提法是将香菇切碎后用碱性溶液浸泡，通过碱的作用来提取多糖。
碱提取的优点是提取率高，同时对蛋白质影响较小。
但碱性溶液的使用需要注意对环境的影响，且碱性条件下易使多糖发生降解。
4. 酶解法酶解法是通过加入酶类来促进多糖的提取，能够有效地增加提取率。
但酶类的成本较高，同时酶解条件的控制较为严格。
提取得到的香菇多糖可以通过浓缩、絮凝、沉淀及净化等方法得到纯净的多糖产品。
香菇多糖的应用广泛，主要包括以下几个方面：1. 药品领域香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒的作用，被广泛应用于肿瘤治疗、免疫调节、抗病毒等方面。
临床研究表明，长期服用香菇多糖可以增强人体免疫力，减少感染病毒的风险。
2. 食品工业香菇多糖可作为功能性食品添加剂，提高食品的营养价值，增加食品的功能性。
例如可以将香菇多糖添加到饼干、饮料、果冻等食品中，以增强食品的健康功能。
3. 化妆品领域香菇多糖具有较好的保湿性，被应用于化妆品中具有很好的效果，如护肤乳液、面膜等产品中。
4. 其他领域香菇多糖还可以用于环保领域，例如用于废水处理，其能够起到絮凝剂的作用，帮助去除水中的杂质，达到净化水质的效果。
总而言之，香菇多糖的提取方法多样化，可以根据需要选择适合的提取方法，提取得到的多糖产品应用广泛，涉及药品、食品、化妆品等多个领域，具有很好的开发和利用前景。
论香菇多糖的制备
论香菇多糖的制备姓名：朱鹏飞班级：生物技术1211学号： 2012040941系部：制药药与生物工程技术系学校：常州工程职业技术学院论香菇多糖的制备摘要：通过对目前六种香菇多糖的制备方法的概述、分析、比较，寻找影响制备结果的因素，以便达到最佳的生产效率，结论是要综合使用多种方法才能达到良好的效果。
关键词：香菇多糖；提取；分离；纯化；结合目录1 香菇多糖制备相关知识 (2)2制备方法 (3)2.1 热水浸提法 (3)2.1.1 操作步骤 (3)2.1.2实验影响因素 (4)2.2 稀酸（碱）提取法 (4)2.3 酶解法 (4)2.4 微波法提取香菇多糖 (5)2.4.1 微波提取法简介 (5)2.4.2 操作步骤 (5)2.4.3实验影响因素 (5)2.5 超声波提取法 (6)2.5.1超声波提取法简介 (6)2.5.2实验步骤 (6)2.5.3 实验影响因素 (6)2.6深层发酵培养提取法 (6)3 几种提取方法的优缺比较 (6)4 香菇多糖的市场价值 (7)参考文献 (7)1香菇多糖制备相关知识香菇多糖是从香菇中提取的一种多糖，它的结构主要以β-D-[1→3]葡萄糖残基为主链，侧链为（1→6）葡萄糖残基的葡聚糖。
香菇多糖为白色粉末状固体，对光和热稳定；水中最大溶解度为3mg/ml,能溶于0.5mol/ml的NaOH，溶解度可达50~100mg/ml，因此会有热水浸提法，稀碱、稀酸浸提法；不溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂中。
香菇多糖具有吸水性，因此要注意密封保存。
在组织中，多糖多与蛋白质以共价键结合，所以在制备过程中，要用办法使多糖-蛋白质之间的共价键断开，除去蛋白质。
2制备方法目前，香菇多糖的制取方法主要有热水浸提法、稀酸（碱）浸提法、酶解法、微波提取法、超声波提取法、深层发酵提取法，另外几种提取方法可结合使用，实际生产为了提高效率，降低成本，常常结合使用，如热水浸提结合超声波，复合酶解法结合微波提取去，深层发酵结合稀酸稀碱法，还有超临界CO2辅助提取法，这也是将超临界CO2萃取脱脂和热水提取法结合的一种方法无论何种提取法，其主要步骤基本相同：预处理（粉碎香菇）→浸提（使多糖与细胞分离）→过滤（得到多糖溶液）→浓缩醇析（得到粗多糖）→纯化（脱色，除去蛋白质等杂质）2.1 热水浸提法2.1.1 操作步骤（1）预处理取适量香菇，洗干净，捣碎（2）提取将捣碎的香菇放入搪瓷缸里，加适量水煮沸，浸渍一段时间，过滤，收集滤液（3）浓缩将滤液浓缩至适当体积（4）醇析在浓缩液中加入乙醇，静置，得到多糖沉淀(5)除去蛋白质将沉淀溶于0.5mol/L的NaOH溶液中，加入氯仿，沉淀蛋白质（6）成品将上一步的上清液蒸发干燥得到香菇多糖2.1.2实验影响因素热水浸提时，料液比、温度、时间、pH值，醇析时的乙醇添加倍数及提取次数是影响多糖得率的主要因素。
香菇多糖的生产
多糖纯化 取上述香菇多糖提取物溶于蒸馏水中，离心除去 不溶物。按照项目三SephadexG50凝胶装好柱， 48h 4 /min 用蒸馏水平衡48h（控制好流速：4滴/min），然 后将上清液上柱分离，用蒸馏水洗脱，洗脱速度 5ml/min（可用恒流泵控制洗脱速度）,200nm波 长紫外检测，收集主要峰部分（当记录仪上出现 波峰时即用试管开始收集洗脱液），冷冻干燥得 白色香菇多糖，并称重。
项目原理
• 本实验主要采用传统的热水浸提法。中性 多糖常用水作溶剂来提取，可以用水浸煮。 • 香菇中色素较高，活性炭有脱色素、脱去 异味等作用。 • 蛋白质不溶于氯仿等有机溶剂，可对香菇 多糖进行除去杂蛋白。而香菇多糖在氯仿 中溶解度大于在热水中的溶解度，所以可 以用氯仿对香菇多糖进行萃取。
项目原理
香菇多糖的生产
香菇多糖简介
• 香菇多糖（简称LNT），存在于香菇中，分子量 为100万，是一种非特异性免疫刺激剂。具有抗 病毒、抗肿瘤、调节免疫功能（T细胞促进作用)， 现在已被广泛用于不能手术和化疗后的癌症病人 的康复治疗。与其他抗肿瘤药物相比，香菇多糖 几乎无任何副作用，是目前已知最强的免疫增强 剂之一。到目前为止，香菇多糖仍是从香菇子实 体中提取，香菇子实体生长周期长，受环境条件 的影响与限制、产量低，从而导致香菇多糖的生 产成本高，价格昂贵。
• 香菇子实体有含量较多的脂类的物质，可 以用石油醚、乙醚等低级性溶剂除去脂溶 性杂质。 • 因为香菇肉质太厚，萃取时氯仿很难渗透 至其深处，则萃取物的产率低。热水提取 法多糖在260nm和280nm波长处有较明显 的吸收峰
项目器材与试剂
• 实验器材：组织捣碎机、恒温水浴锅、循 环水式真空泵、冷冻离心机、凝胶柱、脱 脂棉、再字夹、紫外分光光度计、容量瓶、 试管、烧杯,紫外检测仪、记录仪、流量泵、 • 试剂：氯仿、无水乙醇、丙酮、乙醚、 苯酚-硫酸试剂：苯酚3g,浓硫酸5mL，溶于 95mL无水乙醇中。 • 原料:香菇
香菇多糖的提取方法
香菇多糖的提取方法
香菇多糖的提取方法如下：
1. 采购新鲜的香菇，清洗干净并切成小块。
2. 将香菇块放入大型锅中，加入足够的水，与香菇比例大约为10：1。
3. 将锅中的香菇块煮沸，然后改用中小火慢慢煮煮2-3小时。
这个过程中，可以不断搅拌，确保香菇均匀受热。
4. 使用细网过滤器或纱布等细密过滤器，将煮煮后得到的香菇汁滤掉固体部分。
滤液便是香菇多糖的提取物。
5. 将香菇多糖的提取物进行进一步处理，可以采用醇沉淀法。
将提取液中加入等体积的酒精，搅拌均匀，并置于低温环境下静置一段时间，使得多糖在酒精中沉淀。
6. 将酒精沉淀物通过离心机进行离心分离，得到固体沉淀。
7. 将固体沉淀经过冷冻干燥或真空干燥等方法使其干燥，得到香菇多糖粉末。
注：以上方法仅供参考，具体的提取方法可以根据实际情况和需要进行调整。
3 王博 香菇多糖的提取
香菇多糖的提取一，实验目的：掌握热水侵泡法分离多糖类化合物的原理和方法。
二，实验原理：多糖溶于热水,不溶于60%以上乙醇，所以用热水提取,乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质;因为热水也可以将蛋白类物质提取出来,所以用乙醇除去提取液中的蛋白.三，实验材料与设备：香菇，葡萄糖，乙醇，苯酚，浓硫酸，紫外可见分光光度计，恒温浴槽。
四，制作标准曲线；采用苯酚硫酸法，以葡萄糖为标准物，称取105℃干燥至恒重的无水乙醇的葡萄糖14.8mg，置100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，分别取：0.0ml ,0.4ml ,0.6ml ,0.8ml ,1.0ml ,1.2ml ,1.4ml ,1.6ml ,1.8ml ,加水补充至2.0ml，再加1ml 5%的苯酚溶液，迅速加入5ml的浓硫酸，摇匀，静置20分钟，冷却至室温，以蒸馏水为空白，在490mm波长处测定吸光度，绘制标准曲线，得到回归方程为：y=0.006x +0.032,R=0.9991，线性范围是：0~266.4ug.标准曲线的绘制：假如葡萄糖0 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 溶液的量mlA490 0.005 0.016 0.020 0.019 0.029 0.031 0.041 0.044 0.049五，操作步骤：1 提取取干香菇粉粉碎，称取20g，置于250ml烧杯中，加入100ml蒸馏水在石棉网上加热至沸腾，并不断搅拌，30min后抽滤，滤渣在用100ml的蒸馏水溶液煮沸30min，合并两次滤液，加热浓缩至20ml，溶于95%乙醇中，搅拌并冷却至室温，静置1h，以4000r/min离心10min，沉淀，真空干燥，得到粗香菇多糖。
2 除蛋白粗糖50ml 100℃热水溶解，加sevage溶液10ml，剧烈震动10min，静置10min，4000r/min离心10min，取上清液，加sevage溶液反复操作5次。
3 纯化粗糖置于烧杯中，加蒸馏水50ml溶解，加入等体积的0.15mol/L 的CTAB与硼酸缓冲溶液，静置10min，4000r/min离心得沉淀用2mol/L的乙醇溶解，静置10min，4000r/min离心后取上清液加等体积的甲醇，静置24h。
香菇多糖的研究进展香菇多糖的制备香菇俗名香菌香蕈平庄菇
香菇多糖的研究进展香菇多糖的制备香菇俗名香菌、香蕈、平庄菇（广东）、椎茸（日本），是世界第二大食用菌，也是我国特产之一。
在分类中隶属担子菌纲、伞菌目、白蘑科、香菇属。
干燥的香菇中含有碳水化合物(58-60%)、蛋白质(20-23%)、纤维素(9-10%)、脂肪(3-4%)和灰分(4-5%)。
香菇是著名的食用兼药用真菌，味道鲜美，香气沁人，营养丰富，其味甘，性平，有“植物皇后”美誉。
多糖的提取：香菇多糖存在于香菇子实体细胞壁中，香菇的细胞壁包含两种重要的高分子物质，几丁质和β-葡聚糖。
这两种分子中的单链通过氢桥连接形成共价键。
多糖的提取方法是根据其结构和水溶性的不同而确定，其基本原则是在中性或弱酸弱碱条件下从外层到内层破坏细胞壁。
水提醇沉法是提取多糖最常见的方法，用酸或碱溶液提取可提高提取率，但酸性或碱性较强可能引起糖苷键的断裂。
为了提高多糖的得率，可增加一些物理或生物的辅助手段，如酶解、超声、微波、超高压、高压脉冲电场等多种方法。
多糖的分离：多糖提取液中含有许多杂质，主要是色素、无机盐、低分子量有机物，高分子量的蛋白质等，需逐一除去。
低分子量的物质可用透析法除去。
多糖的纯化：香菇多糖的分离纯化方法主要有分级沉淀法、色谱分离法、膜分离法等。
色谱分离法主要包括离子交换色谱法和凝胶色谱法两种，离子交换色谱法的原理是离子交换和吸附与解吸附，可以分离各种酸性、中性多糖。
凝胶色谱法是根据多糖分子大小和形状不同而分离的方法，常用的凝胶有葡萄糖凝胶、琼脂糖凝胶等，洗脱剂是不同浓度的盐和缓冲液。
香菇多糖的结构多糖的结构在其一级结构基础上,其主链间以氢键结合的形式形成二级结构,各种聚合体又在二级结构基础上,糖单位间的非共价键相互作用形成有序而粗大的构象,形成多糖的三、四级结构因此多糖的结构分析较其他物质更加复杂。
多糖在水溶液中会表现出无规则卷曲、单螺旋结构、双螺旋结构、三螺旋结构、聚集和球形构象等，这些构象的形成与多糖分子间和分子内的氢键有关。
香菇多糖提取实验汇报
超声波法提取香菇多糖研究背景：香菇多糖的性质：香菇多糖以β~1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能用途：抗肿瘤药。
为化、放疗辅助药。
主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。
生产技术状况：因为香菇多糖的用途广泛，提取比较方便，越来越多的人投身于这方面的研究，是的提取技术方面的大幅度提升。
状况良好。
操作过程：方案设计：香菇多糖的提取香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右）→提取45min（中间停顿2次，每次5min）→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min（中间超声波停2次，每次5min）→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用香菇多糖的测定：1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：将溶液PH 调节至8---9，加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5% (w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液。
2.制作标准曲线：准确吸取1mg/ ml 葡萄糖标准溶液1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0ml 置于50ml 容量瓶定容，准确吸取该系列溶液各2ml ，然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
3. 样品的测定：取去完蛋白的样液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度。
将吸光度控制在0.2-0.8人员分工：我们分成两组来完成实验，因为有两组待测夜要进行测定。
然后标准溶液是由第一大组完成。
由于操作比较简单，我们就一起完成。
1人对溶液进行去蛋白，2人制作待测液，1人对待测液进行测定，并记录数据。
实验现象：配置待测液时，加入浓硫酸后溶液变成橙黄色。
从而可来额定吸光度。
香菇多糖的生产
香菇多糖的生产一、简介多糖（polysaccharide）是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个以上的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式（C6H10O5）n表示。
由相同的单糖组成的多糖称为多糖，如淀粉、纤维素和糖原；以没的单糖组成的多糖称为杂多糖，如阿拉伯胶是由戊糖和半乳糖等组成。
多糖不是一种纯粹的化学物质，而是聚合程度不同的物质的混合物。
多糖类一般不溶于水，无甜味，不能形成结晶，无还原性和变旋现象。
多糖也是糖苷，所以可以水解，在水解过程中，往往产生一系列的中间产物，最终完全水解得到单糖。
多糖（polysaccharide）是由多个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。
凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均称为多糖。
目前，多糖的临床作用有免疫调节、抗病毒及抗癌、降血糖、治疗肝肾疾病及消炎镇痛、美容、乳化等，除此之外，Sakata Shigenobu等通过对多种单糖、多糖及其衍生化糖类(如醛糖、黏多糖、多糖酵解后的糖)进行发酵或提取，得到一类稳定、安全的试剂，它可减少典型的有害物(如二氧芑、氰基化合物、多氯联苯等)对环境和人体的侵害，是极有意义的环保试剂。
Watanabe Sa J用一种以吸附多糖(如淀粉)的羟磷灰石作载体的培养基质培养造骨细胞。
此载体的特点在于不用加入血清、细胞生长因子等物质就可刺激造骨细胞生长因子受体，而且它可避免在培养某种造骨细胞时，由于血清种类的特异性而必须筛选最适血清所耗费的大量人力、财力，因而此项发明的问世无疑大大地降低了造骨细胞的培养费用，具有极高的经济价值和社会价值。
二、香菇提取物香菇（Lentinus edodes）在日本和中国已有数千年的使用历史。
其同时作为一种食物和药用植物而闻名。
很长时间以来，人们都相信香菇可以增长精力，治疗感冒和去除肠道寄生虫。
香菇含有脂肪，碳水化合物，蛋白质，纤维，维他命和矿物质。
然而，其关键成分则是被称作香菇多糖的多糖。
香菇多糖提取工艺
多糖纯化
凝胶柱层析原理：所谓层析，就是利用样品中各组成成分的理化性质的差异，使各组分
以不同程度分布在固定相和流动相两相中，由于各组分随流动相前进的速率不同，从而把 它们分离开来的技术。
操作步骤： Sephadex G-100凝胶充分溶胀后装柱，用蒸馏水平衡48h。取上述香菇 多糖提取物溶于蒸馏水中，离心除去不溶物，上清液上柱分离，用蒸馏水洗脱，洗脱速度 5mL/20min，200nm波长紫外检测，收集主要峰部分，冷冻干燥的白色香菇多糖，并称 重。
称重。
(5) 主要生产设备：
烧杯（若干），玻璃棒，温度计，锥形瓶（若干），漏斗，水浴锅，称量天平，台式恒
温振荡器,台式离心机，紫外线分光光度计
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(6) 关键过程与关键技术
多糖的提取
取香菇10g，于组织捣碎机内粉碎，加入20倍量水，90 ℃水浴加热30min，抽滤，得 滤液，加活性炭（1mg/mL），搅拌吸附1h，抽滤，得滤液，用氯仿萃取（3次）以除尽 蛋白质，萃余液中加无水乙醇，使其乙醇最终浓度为80%，沉淀12h后，于离心机中离心 （4000r/min）30min,沉淀物分别用无水乙醇，丙酮，乙醚洗涤三次，既得香菇多糖提取 物。
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(3) 现在常用的生产方法
以上几种方法均有优点和缺点，而现如今也都在被使用！
3 、生产技术
(1)生产原理:
多糖溶于热水,不溶于60%以上乙醇,也不溶于氯仿正丁 醇.热水浸提时，香菇组织膨胀破裂，多糖成分浸出，所以 用热水提取,乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质;因为热水也可 以将蛋白类物质提取出来,所以用氯仿正丁醇萃取除去提取 液中的蛋白。
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(4) 工艺流程说明及主要工艺参数：
香菇提取多糖实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解香菇多糖的提取方法及其原理。
2. 掌握香菇多糖的提取工艺流程。
3. 优化提取条件，提高香菇多糖的提取率。
二、实验原理香菇多糖是一种具有多种生物活性的多糖类物质，主要存在于香菇子实体中。
香菇多糖的提取方法有热水提取法、酸碱提取法、酶解提取法等。
本实验采用热水提取法，通过加热香菇子实体，使香菇多糖溶解于水中，再通过离心、沉淀等步骤提取香菇多糖。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 香菇子实体：市售优质香菇- 蒸馏水：分析纯- 无水乙醇：分析纯- 95%乙醇：分析纯- NaCl：分析纯- 乙酸：分析纯- 乙醚：分析纯- 磷酸盐缓冲液：pH 7.42. 实验仪器：- 电子天平- 烧杯- 离心机- 恒温水浴锅- 真空干燥箱- 超声波清洗器- 精密移液器- 滤纸- 漏斗- 玻璃棒四、实验步骤1. 香菇子实体的预处理- 将香菇子实体洗净，去除根部，切成小块。
- 将香菇小块放入真空干燥箱中低温烘干，直至水分含量低于10%。
- 将烘干的香菇小块研磨成粉末。
2. 香菇多糖的提取- 称取20g香菇粉末，置于250ml烧杯中。
- 加入100ml蒸馏水，于石棉网上加热至沸，并不断搅拌，煮沸30min。
- 用滤纸过滤，收集滤液。
- 将滤渣再用100ml蒸馏水煮沸30min，过滤，收集滤液。
- 将两次滤液合并，加热浓缩至20ml。
3. 香菇多糖的纯化- 将浓缩后的滤液加入95%乙醇，搅拌并冷却至室温，静置1h。
- 以4000r/min的转速离心10min，收集沉淀。
- 将沉淀置于真空干燥器中干燥，得到粗香菇多糖。
4. 香菇多糖的鉴定- 将干燥后的粗香菇多糖用蒸馏水溶解，制成一定浓度的溶液。
- 采用高效液相色谱法对香菇多糖进行鉴定。
五、实验结果与分析1. 香菇多糖的提取率- 通过实验，得到香菇多糖的提取率为1.5%。
2. 香菇多糖的鉴定- 通过高效液相色谱法，鉴定出香菇多糖的主要成分是β-1,3-葡萄糖。
提取香菇多糖的详细方案
原料：香菇。
NaHCO固体，浓硫酸，95%乙醇稀盐酸，PH试纸，复试剂：蒸馏水，葡萄糖，苯酚，铝片，3合酶（木瓜蛋白酶：纤维素酶=2：1），设备和仪器：100ml容量瓶，6个50ml容量瓶，玻璃棒，蒸馏装置（温度计、沸石、三口烧瓶、冷凝管），烧杯若干，锥形瓶若干，棕色瓶一个，抽滤瓶，1、2、5、10ml吸液管，电子天平，真空干燥箱，恒温水浴锅，紫外分光光度计，粉碎机，40、60、80、100目的筛子，DL700-0.55×1.5超高压等静压机（上海大隆高压设备厂），真空泵，THZ-82A台式恒温振荡器，台式离心机。
1、标准葡萄糖溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖100.0mg，加蒸馏水溶解并定容于100ml容量瓶中，摇匀，配成浓度为1mg/ml标准葡萄糖溶液备用。
2、5%苯酚试剂的配制。
苯酚水浴加热溶解后称取100g，加铝片0.1g(先用1：6的盐酸除去铝片表面氧化铝后，再称量使用)，加入碳酸氢钠30g，蒸馏，收集178-182℃的馏分，取馏出液7.5g，加入蒸馏水150mL，得5.0％的苯酚溶液，置于棕色瓶中备用。
3、标准曲线绘制以葡萄糖作为标准品，采用苯酚—硫酸比色法，用紫外分光光度计测定多糖含量。
精密吸取已配制的葡萄糖标准品溶液0.5，1，1.5，2，2.5，3ml置于6个50ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度线，摇匀。
精密吸取2ml，分别加入5%苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入5ml浓硫酸，振摇5min，置沸水浴上加热15min，然后置冷水浴中冷却30min，以溶剂蒸馏水为空白作对照，在400～600nm内扫描，最大吸收波长为490nm。
在490nm处，测吸光值，以浓度为纵坐标，吸光值为横坐标，绘制标准曲线，得出葡萄糖标准品浓度Y（ug/ml）与吸光值X的回归方程：Y=15.336X-0.0298，R2=0.9997。
在2.5～15.0 ug/ml 范围内呈线性关系。
预处理：将新鲜清洗干净，除去其根部，将剩下的菌伞挤压，切小块放入真空干燥箱干燥，待香菇恒质量，放入粉碎机中粉碎，将粉碎后的香菇粉依次通过40，60，80，100目的筛子，得到40目以下、40～60目、60～80目、80～100目、100目粒度以上的样品，过筛之后把各级香菇粉分别装到清洁干燥的烧杯中，编号贴上标签，置于真空干燥箱中待用。
香菇多糖发酵提取工艺流程
香菇多糖发酵提取工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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在进行香菇多糖发酵提取之前，需要进行充分的准备工作。
香菇多糖制作技术
（4）工艺流程说明及主要工艺参数
(5)主要设备
100ml容量瓶、6个50ml容量瓶、玻璃棒、蒸馏装置（温度计、沸石、三口烧瓶、冷凝管） 烧杯若干、锥形瓶若干、棕色瓶一个、抽滤瓶、1、2、5、10ml吸液管、电子天平、 真空干燥管、恒温水浴锅、紫外分光光度计、粉碎机、超高压等静压机、真空泵、 台式恒温振荡器、台式离心机。
（4）、现在常用的生产方法
发酵法(利用纤维素酶、蛋白 酶把细胞壁里面的香菇多糖流出）
三、生产工艺
（1）、原谅及要求：以自然界的香菇为原料。氯仿.无水乙醇. 丙酮 .乙醚.苯酚-硫酸试剂、苯酚3g浓硫酸5ml.溶于95ml无 水乙醇中. （2）、生产原理：
利用深层液体发酵培养香菇菌丝体后，从发 酵液中提取菌丝体，从而得到胞内香菇菌丝 体，再从菌丝体中，利用它在酒精和水，及 酶液的不同溶解度来提取胞内多糖。将菌丝 体抽提、浓缩、离心，取上清液脱色透析， 透析液再浓缩、离心，最后用溶液沉淀、洗 涤干燥而成。
（4）香菇多糖的功能
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香菇多糖具有免疫调节和抗肿瘤的作用：香菇 多糖对调节人体免疫功能的 T细胞有促进作用， 刺激抗体的形成和活化巨噬细胞，降低甲基胆蒽 诱发肿瘤的能力，故对癌细胞有强烈的抑制作用。 香菇多糖被称为免疫学中的外周疗法（Scheme efferent）而应用于抗肿瘤的临床上，在人体中， 香菇多糖能增加DNA的合成和外周单核细胞免 疫蛋白的产生。
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（2）产品及技术的发展过程：香菇是我国传统的食用菌品种，近
年来产区由南到北分布较广，产量占全世界香菇总量的 78％，跃居榜首。产品远销欧美和东南亚等117个国家 和地区。在全球香菇外销市场上占92％。随着生活水平 提高，世界卫生组织提出的“一荤、一素、一菌”的科 学膳食导向，已被越来越多的人接受．国人对绿色无公 害食品的追求越来越高。历时800多年的原木砍花法， 以其独到的砍花和“惊蕈”术及悠久的历史文化促进了 中国与亚洲地区香菇业的发展；尤其是近半个世纪以 来．随着我国香菇产业“南菇北移”战略的实施，香菇 产区由南向北不断延伸，种植面积不断扩大，形成了产 业化、专业化、标准化的生产格局。各地在香菇省力、 低耗、高产、优质栽培技术上形成了许多突破。
香菇多糖的提取
• • ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ • • • •
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1、标准葡萄糖溶液的配制 、 精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖100.0mg，加蒸馏水溶解并定容于100ml 容量瓶中，摇匀，配成浓度为1mg/ml标准葡萄糖溶液备用。 2、5%苯酚试剂的配制。 苯酚试剂的配制。 、 苯酚试剂的配制 苯酚水浴加热溶解后称取100g，加铝片0.1g(先用1：6的盐酸除去铝片表面氧 化铝后，再称量使用)，加入碳酸氢钠30g，蒸馏，收集178-182℃的馏分，取 馏出液7.5g，加入蒸馏水150mL，得5.0％的苯酚溶液，置于棕色瓶中备用。 3、标准曲线绘制 、 以葡萄糖作为标准品，采用苯酚—硫酸比色法，用紫外分光光度计测定多糖 含量。 精密吸取已配制的葡萄糖标准品溶液0.5，1，1.5，2，2.5，3ml置于6个50ml 容量瓶中，加蒸馏水至刻度线，摇匀。精密吸取2ml，分别加入5%苯酚溶液 1ml，摇匀，迅速加入5ml浓硫酸，振摇5min，置沸水浴上加热15min，然后 置冷水浴中冷却30min，以溶剂蒸馏水为空白作对照，在400～600nm内扫描， 最大吸收波长为490nm。 在490nm处，测吸光值，以浓度为纵坐标，吸光值为横坐标，绘制标准曲线， 得出葡萄糖标准品浓度Y（ug/ml）与吸光值X的回归方程：Y=15.336X0.0298，R2=0.9997。在2.5～15.0 ug/ml范围内呈线性关系。
热水法提取香菇多糖的方案
1.分别称取40、60、80、100目的香菇粉5g，放入 到250mL的锥形瓶中，加入蒸馏水100ml，混合 均匀后置于90℃水浴锅中，水浴提取2h，提取两 次，提取结束，冷却至室温，将两次提取液混合 后过滤，取2ml滤液分别加入5%苯酚溶液1ml， 摇匀，迅速加入5ml浓硫酸，振摇5min，置沸水 浴上加热15min，然后置冷水浴中冷却30min，即 以溶剂蒸馏水为空白作对照，在490nm处用分光 光度计测吸光值，计算多糖提取率，得到粉碎度 与提取率的关系。
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B样品多糖测定 精密称取香菇多糖10.0mg， 加水溶解，定量移入100ml容 量瓶中，加水至刻度，摇匀。 准确吸取2.00ml，按上述实验 方法显色，测定吸光值，计算 香菇多糖含量。
适应症： 1.抗肿瘤与放疗、化疗、手术配合，主 要用于不宜手术或复发的胃肠道肿瘤。本 品加放疗、化疗治疗小细胞肺癌、乳癌、 恶性淋巴瘤等。也可用于癌性胸腹水的治 疗。 2.抗病毒可用于乙型肝炎及艾滋病等。 3.抗感染应用于具有抗药性的肺结核， 也用于治疗老年性慢性支气管炎。
香菇多糖的生物活性
1.香菇多糖的抗肿瘤活性 2.香菇多糖的免疫调节 3.香菇多糖的抗病毒活性 4.香菇多糖抗感染作用
A制备标准曲线 精密称取60 ℃干燥至恒重的甘 露糖标准品0.1g，置于100ml容量 瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度， 用移液管量取对照品溶液0、0.5、 1.0、2.0、2.5、3.0ml分别置50ml 容量瓶中，加蒸馏水至刻度，在各 精密吸取1ml置于比色管中，准确 移取8%苯酚溶液1ml，快速加入浓 硫酸5ml，置水浴中加热15min，取 出冷却至室温，橘黄色溶液从小到 大逐渐加深，将溶液于490nm波长 的可见分光光度计处测定吸光值， 绘制标准曲线 。
不良反应
①休克 ②皮肤 ③呼吸系统 ④消化系统 ⑤神经系统 ⑥血液 ⑦其它
香菇多糖的提取
一、实验原理
在组织中，多糖多与蛋白质以共价相结 合，所以在生化产品制备工艺中，往往第 一步多用酶降解蛋白质部分或用碱使多 糖—蛋白质间的键裂开，以促进多糖在提 取时的溶解。碱性提取可避免多糖中硫酸 基团水解而破坏。现多采用碱性提取的同 时用蛋白质水解酶处理组织。提取液中存 在的蛋白质可用普通蛋白质沉淀剂使之沉 淀，也可用其他方法使变性沉淀，如适当 调pH和加热等。
药理作用 ： 具有免疫增强作用，其机制在体内虽 无直接杀伤肿瘤细胞作用，但可通过增强 机体的免疫功能而发挥抗肿瘤活性。 在体内能使脾脏和腹腔的NK细胞活性 增强，诱生干扰素与本品剂量相关，其活 性与白细胞介素类或干扰素诱导剂有协同 作用 药动学： 本品体内药动学与葡聚糖等多糖体类 似，给正常小鼠、大鼠和狗用药后，不久 血中浓度迅速降低，然后缓慢下降，呈双 相型变化，5分钟后主要分布于肝、脾、 肺、肾等处，连续给药与单次给药体内分 布相同，主要由尿排泄 。
香菇多糖的简介
药物名称： 香菇多糖 英文名称： Lentinan 香菇是我国传统的著名食用菌，在世 界上最早人工驯化栽培。香菇营养丰 富，味道鲜美，被视为“菇中之王”。 其中含 有十多种氨基酸，其中有异亮氨酸、 赖氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、 缬氨酸等7种人体必需的氨基酸，还 含有维生素B1、B2、PP及矿物盐。
（2）多糖提取 Sephadex G-100凝胶充分溶 胀后装柱，用蒸馏水平衡48h。 取香菇多糖提取物溶于蒸馏水 中，离心去除不溶物，上清液 上柱分离，用蒸馏水洗脱，洗 脱速度5ml/20min，200nm波 长紫外检测，收集主要峰分， 冷冻干燥得白色香菇多糖，称 重。
（3）香菇多糖分析检测 定性分析-----苯酚-硫 酸法 苯酚-硫酸试剂：苯酚3g， 浓硫酸5ml，溶于95ml无水乙 醇中，喷后，110 ℃加入几分 钟，糖显棕色 定量分析-----分光光度 法
二、实验目的 掌握水溶醇沉法分离多糖类 化合物的原理和方法。
三、实验步骤 1、材料：香菇 2、试剂：试剂：活性炭、氯仿、 无水乙醇、丙酮、乙醚、苯酚、 浓硫酸、甘露糖、Sephadex G100凝胶 3、设备和仪器：水浴锅、抽滤装 置、离心机、分光光度计
4、操作过程 （1）多糖的提取 取香菇10g，于组织捣碎机内粉 碎，加20倍量的水，90℃水浴加热 30min,抽滤，得滤液，加活性炭 （1mg/ml），搅拌吸附1h，抽滤， 得滤液，用氯仿萃取（3次）以除 尽蛋白质，萃余液中加无水乙醇， 使其乙醇最终浓度为80%，沉淀12h 后，于离心机中离心4000r/min 30min，沉淀物分别用无水乙醇， 丙酮，乙醚洗涤3次，即得香菇多 糖提取物。