病理组织切片制作技术
病理组织切片制作技术
（二）固定及目的：
应用化学试剂使组织或细胞中的无机 成分和有机成分液（4%甲 固定液是10%福尔马林溶液（4%甲 醛溶液），固定24小时以上。 醛溶液），固定24小时以上。
固定的目的
1、迅速阻止组织、细胞死后变化，防止 自溶与腐败，使之尽量保持生前的状 态与结构。 2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等 成分转变为不溶性物质，以保持其原 有状态。 3、使组织内各种物质成分产生不同的折 光率，以便染色后易于鉴别和观察。 4、使组织块硬化，便于制作薄片。
三、脱蜡和染色
（一）、脱蜡 1、二甲苯Ⅰ5-10min 、二甲苯Ⅰ 2、二甲苯Ⅱ1-2min 、二甲苯Ⅱ 3、1：1二甲苯：乙醇（冬天20min） 二甲苯：乙醇（冬天20min） 5min 4、无水乙醇、 95%、80%、 70、 50% 95%、80%、 70、 梯度乙醇每级1 梯度乙醇每级1-2min 5、蒸馏水1-2min 、蒸馏水1
固定的注意事项
1、组织块不宜大，厚度小于5mm，长宽 、组织块不宜大，厚度小于5mm，长宽 也应小于15×15mm。 也应小于15×15mm。 2、固定液与组织块的比例应大于10：1。 、固定液与组织块的比例应大于10： 3、软组织或较大组织块可先经2-3小时固 、软组织或较大组织块可先经2 定后再修整成小块，重新投入新配制 的固定液中继续固定。 4、肠道可在浆膜面贴上一层厚纸，以防 固定组织变形。
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病理组织切片制作技术
实验内容 掌握组织材料的取材、固 定、脱水、透明、包埋、切片、 烤片、脱蜡、染色及封固的基 本操作。
一、取材及固定
（一）取材注意事项： 1、材料新鲜 2、组织块力求小而薄 3、勿使组织块受挤压 4、尽量保持组织的原有形态 5、熟悉取材部位
皮肤组织病理切片技术
一、V — G法（胶元纤维染色法） 结缔组织含有三种纤维，即胶原纤维、网 状纤维、弹力纤维。胶原纤维在结缔组织中 含量最多，起支持作用，具有一定的韧性和 坚固性，抗拉力强的特点。胶原纤维染色在 病理诊断上主要用于和肌纤维的鉴别。常用 的胶原纤维染色方法为V—G法。 结果： 细胞核蓝黑色或黑色，胶原纤维红色，肌 纤维、细胞浆、红血球呈黄色。
配法：(PH 7.0~7.2)
甲醛 NaH2PO4· 2H2O 或 无水 Na2HPO4· 12H2O 或 无水 蒸馏水 100ml 5.2g 4.0g 16.4g 6.5g 900ml
三、脱水
组织脱水，就是把组织内的水分彻底 除掉，故亦称无水法。无论任何组织都 含有不同程度的水分。一般组织经过固
皮肤组织病理切片技术
一、取材
1、手术取材。 适用于：（ 1 ）面部、关节部，易出血部位 等；（2）较大、较深的皮疹；（3）结节 和囊肿性皮疹；（ 4 ）切除治疗和检查， 主要用于小的肿瘤。 2、钻孔取材。（角膜钻孔器）
适用于一般的皮疹取材。
二、固定
固定的作用和目的：
1、可以防止组织溶解及腐败。
2 、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶 等各种成分沉淀保存下来，保持它原有
透明
切片 染色
切 片 质 量 标 准（100分）
切片完整 没有刀痕 厚薄均匀 附贴适量 平坦无褶 10分 5分 10分（一层细胞） 5分 10分
树胶适量 染色鲜艳 对比清晰 透明度好 片内无污染 无“人工”现象 玻片整洁 标签端正
5分 10分 10分 10分 10分 5分 5分 5分
常 规 染 色
固定的注意事项：
1、组织块必须小而薄。 2、固定液对组织有收缩及硬化作用，亦有 使组织膨胀的作用。
病理组织切片制作
实验四病理组织切片制作一、实验目的组织切片技术是病理学中不可缺少的一个组成部分。
通过实验，能够使学生了解和掌握病理组织切片的基本方法之一，即石蜡包埋的组织切片法。
二、实验原理根据病变及检查的要求，合理采集病料，经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋后进行切片，在进行染色得到结果。
固定是用化学药品把组织原来的结构保存下来，以便观察。
脱水是除去组织中的水分，以利于透明和浸蜡。
组织的透明是便于透蜡包埋。
包埋的是使石蜡透入组织内部，把软组织变为适当硬度的包埋块，以便切成薄片。
最后使用切片机，将包埋块中组织切成薄片。
三、主要仪器及试材已固定好病料，石蜡，手术刀，手术剪，镊子，脱水框，染色缸，梯度脱水酒精和透明剂一套，烘箱，切片机，毛笔，玻片，蛋白甘油，染色架，酒精灯，三角架，大烧杯，温度计，火柴，切片刀，记号笔或铅笔。
四、实验方法与步骤。
（一）固定采取的病理材料必须立即放入10％福尔马林固定液中。
（二）脱水组织经固定后，尚含有多量水分，而水与透明剂苯、石蜡根本不相融合。
必须先把组织中的水分除去。
但脱水剂必须是与水在任何比率下均能混合的液体，脱水剂常兼有硬化组织的作用。
最常用的脱水剂为酒精、丙酮等。
1．酒精沸点78．4℃，为最常用的脱水剂。
脱水能力强，并能使组织硬化，能较好地与二甲苯透明剂相混合。
最终结果表明，只要脱水环节处理好，都会得到好的切片。
脱水的程序为70％一80％一95％一100％。
各级酒精2—4小时，视材料的大小、厚薄而定。
100％酒精有硬化组织的作用，时间不宜太长，一般不超过3小时。
脑组织、脂肪组织或疏松结缔组织，脱水时间要适当延长。
2．丙酮沸点为56℃。
脱水作用比乙醇强，但对组织块的收缩较大，主要用于快速脱水或固定兼脱水。
脱水时间l一3小时左右。
（三）透明透明对组织有脱酒精及透明两种作用。
当组织中全部为透明剂占有时，光线可以透过，组织可呈现不同程度的透明状态，此种现象称为透明，具有这种作用的试剂称为透明剂。
病理组织切片制作技术
------------------------------------------ 最新资料推荐------------------------------------病理组织切片制作技术病理组织切片制作技术病理组织切片常用的制作方法有三种。
即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。
以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是：组织取材固定冲洗脱水透明浸蜡组织包埋组织切片展片附贴切片脱蜡染色脱水染片透明封固。
以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。
因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。
一、取材采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。
切取的工具要清洁。
采取病料越新鲜越好，一般不超过死后24小时。
应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。
特殊病料应根据器官的结构特点切取。
管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。
带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。
切取组织块大小，以1.51.50.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。
组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。
切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。
二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。
材料取下后，应迅速固定。
固定液数量应为病理组织块的5到20倍。
由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2至IJ 3厘米。
因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90毫升配成。
三、冲洗固定后的组织块，应将固定液洗去。
一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。
及时冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色。
冲洗时如不方便用流水冲洗，也可用较大容器盛装水浸洗，每隔相当时间换水一次。
病理切片制作过程及注意事项
病理切片制作过程及注意事项简介病理切片是病理学中非常重要的工具，它能够帮助医生做出准确的诊断。
本文将详细介绍病理切片的制作过程以及需要注意的事项。
制作过程步骤1：组织取材•选择适当的组织进行切片制作；•确保组织样本取材的准确性和代表性。
步骤2：固定组织•使用合适的固定剂固定组织样本，如福尔马林；•确保固定时间和固定剂的浓度符合要求。
步骤3：脱水与清洁•将固定的组织放入酒精溶液中进行脱水处理；•清洁组织以去除固定剂和杂质。
步骤4：组织包埋•将脱水的组织置于熔蜡中进行包埋；•确保组织完全包裹，避免产生气泡。
步骤5：切片制作•使用专用的切片机将包埋的组织切成薄片；•控制切片的厚度和形状，确保质量。
步骤6：染色•使用合适的染色剂对切片进行染色，如血液样本使用血液染色剂；•控制染色时间和染色剂的浓度，确保染色效果。
步骤7：封片•将切片放在载片上，使用专用胶水将其封闭；•确保切片和载片的牢固性。
步骤8：质量控制•检查切片的质量，包括切片厚度、染色效果等；•确保切片符合病理学的要求。
注意事项注意事项1：安全•在病理切片制作过程中，要注意使用个人防护装备，如手套、口罩等；•避免接触有害化学物质，如福尔马林。
注意事项2：操作规范•按照病理切片制作的标准操作流程进行，确保结果的准确性；•遵守操作规范，减少操作失误的风险。
注意事项3：仪器维护•定期对切片机等相关仪器进行维护保养；•确保仪器的正常工作状态，减少故障的风险。
注意事项4：质量控制•对制作的病理切片进行质量控制，如切片的厚度、染色的均匀性等；•确保制作出的病理切片符合质量要求。
注意事项5：记录保存•对制作的病理切片进行记录，包括样本信息、制作过程、染色方法等；•妥善保存记录，方便后续查阅和追溯。
结论病理切片的制作过程需要经过多个步骤，每个步骤都需要严格操作和控制。
同时，要注意安全、遵守操作规范、定期维护仪器，并进行质量控制和记录保存。
只有这样，才能制作出高质量的病理切片，为病理学的研究和诊断提供可靠的依据。
组织病理切片制备
组织病理切片制备
组织病理切片的制作，首先医生取下组织病理标本，放在10%的中性福尔马林里进行固定，固定完之后标本送到病理科。
小标本需要固定4-6个小时，大标本需要固定6-12个小时，固定完之后由病理医生进行取材。
所谓的取材指把标本取出放在标本盒里，置于全自动脱水机中脱水16个小时处理标本。
处理过程包括组织进行固定、透明、脱水、浸蜡，处理完16个小时之后，病理技师把标本拿到包埋机上进行包埋，把病变组织放在蜡里，包埋成病理蜡块。
蜡块包埋完之后，病理技师把蜡块放在切片机上进行切片，切片大约需要切3-4μm的切片。
切完片子需要捞在病理玻片上，玻片再进行脱蜡，放在二甲苯中需要透明，之后放在全自动染色机中进行染色，再放在封片机里进行封片，这样才能制成病理切片，这个过程一般需要2-3天的时间。
法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作
法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作答案：法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作是通过将采集的组织样本固定、包埋、切片、染色等步骤，通过显微镜观察细胞结构，从而帮助法医学鉴定案件中的病理变化和死因。
在法医学病理标本处理中的组织切片制作过程中，首先需要采集病理标本，通常是通过活检或尸检获得。
随后，对标本进行固定处理，以保持组织结构的完整性。
然后，将固定后的组织样本进行包埋，即将组织置于蜡块中，使其易于切割。
接下来，使用组织切片机将标本切割成薄片，通常为几微米至几十微米的厚度。
随后，切片进行染色处理，以突出不同的细胞结构和病变特征，便于观察和分析。
通过法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作，法医学家可以通过观察组织切片的细胞结构、细胞核形态、染色质分布等特征，辅助判断病变类型、病理变化和死亡原因。
这对于破解案件真相、保护公共安全、维护司法公正等具有重要的意义。
深入讨论：在法医学病理标本处理中，组织切片制作是法医学鉴定的重要一环。
通过对组织切片的制作，可以帮助法医学家观察病理变化、病变类型、细胞结构等信息，从而为案件的司法鉴定提供客观依据。
不同的染色方法可以突出组织中不同的结构和物质，使得细胞和细胞器在显微镜下更清晰可见。
在实际操作中，法医学家需要严格遵循标本处理的规范和步骤，确保所得到的组织切片质量符合鉴定需求。
特别是在病理判断和诊断方面，组织切片的质量直接影响到法医学鉴定结果的准确性和可靠性。
因此，精细制备和准确染色是关键步骤，需要具备丰富的经验和专业知识。
总的来说，法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作是一项具有挑战性且重要的工作。
通过对病理组织样本的精细处理和观察，可以为法医学鉴定提供关键支持，促进案件的准确处理和司法公正。
病理学中的组织切片技术
病理学中的组织切片技术病理学是医学领域中非常重要的一个学科，研究人体各个器官和组织的疾病变化及其发生、发展机制。
而组织切片技术是病理学中的基础操作，是为了观察和诊断疾病而必要的步骤之一。
本文将详细介绍组织切片技术的相关知识和方法。
一、组织切片技术的概述组织切片技术是指将人体组织切割成薄片并染色，以便于病理学家观察。
这项技术已经存在了很长时间，并且随着技术的发展和改进，已经成为了诊断和治疗疾病的重要手段之一。
组织切片技术可以被广泛应用于疾病的研究、诊断和治疗中。
二、组织切片技术的步骤组织切片技术的主要步骤包括取样、固定、脱水、包埋、切片和染色。
下面将对这些步骤进行详细的介绍：1. 取样组织切片的第一步是取样，即从人体组织中取出一小块，以便于后续的操作。
取样的方法根据不同的情况会有所不同，比如在手术中取样，就需要根据病变的部位和特点来选择取样点，而在活检中取样，就需要根据患者的症状和体征来确定取样点。
2. 固定取样后，需要用一种方法把组织中的细胞和结构固定住，以便于后续处理。
目前常用的固定剂是福尔马林，它可以迅速把组织中的蛋白质交联，使其不易变性，从而保持组织形态的完整。
3. 脱水在固定后，需要将组织逐渐从水中转移到酒精、乙醇等脱水剂中，以便于把组织中的水去除，使其硬化。
这是组织切片的关键步骤之一，如果脱水不彻底，切出的组织切片会变形或破损。
4. 包埋将脱水的组织置于熔蜡中，使其被包覆在蜡中。
这么做可以保持组织的形态，并使其更易于切割。
5. 切片蜡包埋后，组织需要被切成薄片。
切片可以使用手工或自动切片机完成，手工切片需要技巧和经验，而自动切片机可以更好地保证切片的厚度和质量。
6. 染色切片完成后，需要对组织进行染色，以便于病理学家对其进行观察。
目前常用的染色剂有血液学染色剂、组织学染色剂以及免疫组化染色剂等。
三、组织切片技术的应用组织切片技术在病理学中有广泛的应用，其中包括：1. 诊断和治疗疾病组织切片技术是病理学家进行诊断和治疗疾病的重要手段之一。
病理组织制片技术基本流程
病理组织制片技术基本流程病理组织制片技术是病理学中的一项重要技术，它通过将病理标本切片、染色和覆盖玻片，使得细胞和组织的形态结构能够被显微镜观察和分析。
这项技术在医学诊断、研究和教学中起到了关键作用。
下面将介绍病理组织制片技术的基本流程。
1. 标本采集与固定病理组织制片的第一步是标本采集与固定。
医生根据患者的病情，选择合适的组织或细胞标本进行采集。
常见的标本包括切除标本、活检标本等。
采集后，标本需要立即进行固定，以保持组织的形态结构和化学成分的稳定。
最常用的固定剂是10%的中性缓冲福尔马林溶液。
2. 组织处理与包埋固定后的标本需要进行组织处理与包埋。
首先，将固定的标本进行去除固定剂的处理，然后用乙醇逐渐脱水，最后用苯麻油进行透明处理。
透明处理后，标本需要被包埋在石蜡中，以便后续的切片操作。
3. 切片与染色石蜡包埋的标本需要进行切片与染色。
首先，使用组织切片机将石蜡块切割成薄片，通常厚度为4-6微米。
切片后，将切片浸泡在水中，使其展开。
然后，将切片依次浸泡在染色剂中，进行组织染色。
不同的染色剂可以突显不同的细胞和组织结构，例如血液常规染色、免疫组化染色等。
4. 脱脂与覆盖玻片染色后的切片需要进行脱脂与覆盖玻片。
首先，将染色后的切片依次浸泡在醇中，去除多余的染色剂。
然后，使用透明剂将切片与玻片粘结在一起，使其固定。
最后，将覆盖玻片放在切片上，使用压力将其压平，使切片与玻片紧密结合。
5. 干燥与封装覆盖玻片后的切片需要进行干燥与封装。
将覆盖玻片的切片放置在干燥箱中，通过温度和时间控制，将其彻底干燥。
干燥后，将切片放置在干燥剂中，以防止切片吸湿。
最后，将切片放入切片盒中，进行封装，以便长期保存和使用。
病理组织制片技术的基本流程包括标本采集与固定、组织处理与包埋、切片与染色、脱脂与覆盖玻片以及干燥与封装。
这一流程确保了病理标本的形态结构得以保留，并使其能够被显微镜观察和分析。
病理组织制片技术的应用广泛，对于疾病的诊断和治疗具有重要意义，同时也为病理学研究和教学提供了有力支撑。
病理标本切片技术
病理标本切片技术病理学作为现代医学的重要组成部分，着重于通过病理学检查以确定疾病诊断及治疗方案。
而病理标本切片技术作为病理学检查中的关键步骤之一，对疾病的诊断及治疗起着不可替代的作用。
一、病理标本切片技术概述病理标本切片技术是将组织样本切割成非常薄的部分，以便进行显微镜检查的过程。
这一过程通常被称为“制片”，其一般包括如下步骤：1.组织预处理：该步骤包括固定、清洗、脱水、透明化等几个关键步骤，目的是使组织样本保持原有形态并易于切割。
2.切片：该步骤使用病理切片机将组织样本切割成具有一定厚度的切片，通常在3~10μm之间。
3.染色：该步骤是为了使组织样本结构更易于识别，通常使用的染色剂有常规的血液学染色剂、免疫组织化学染色剂等。
二、病理标本切片技术的重要性正确的病理标本切片技术可以帮助病理学家准确判断疾病病变的类型、性质及病变程度等。
其重要性主要表现在以下三个方面：1.诊断：病理标本切片技术可以提供病理学家直接观察、评估组织标本，从而给出准确的疾病诊断。
例如，肿瘤和白血病等疾病需要进行病理学检查并使用病理标本切片技术来确诊。
2.治疗：病理标本切片技术还可以对病人进行治疗方案的定制。
例如，通过病理标本切片技术可以判断某种瘤细胞是否对某种药物敏感，从而在治疗中选用更加有效的药物。
3.预后：病理标本切片技术还可以帮助病人对病程进行预测和评估。
例如，在肿瘤的治疗过程中，通过病理标本切片技术可以评估肿瘤对治疗的响应并进行预测，从而评估病人的预后。
三、病理标本切片技术中存在的挑战与未来发展方向病理标本切片技术虽然在现代医学中发挥了不可替代的作用，但其在实践中仍然存在一些挑战：1.样本收集限制：某些类型的病理标本很难取得，例如甲状腺和胰腺的病理标本。
2.自动化技术发展不足：虽然近年来出现了许多自动化切片仪器，但其切片精度和效率仍然需要进一步提高。
未来病理标本切片技术的发展方向主要包括：1.数字化技术：该技术可以将制片过程中得到的显微镜图像数字化，实现对图像的分析和存储。
法医学在法医学病理学中的组织切片制作与病变判断技术
法医学在法医学病理学中的组织切片制作与病变判断技术法医学在法医病理学中的组织切片制作与病变判断技术法医学是研究应用医学知识和技术手段进行法律鉴定工作的学科，而法医病理学则是法医学的一个重要分支。
在法医病理学中，组织切片制作和病变判断技术是非常关键的环节。
本文将介绍法医学在病理学组织切片制作和病变判断技术方面的应用。
一、组织切片制作技术组织切片制作是法医病理学中的一项重要技术，它主要通过切割组织样本，将其制作成薄片，然后经过染色、封片等步骤，使其适合于显微镜观察。
这种方法能够提供组织结构的详细信息，从而帮助法医学家判断病变和研究死因。
在组织切片制作过程中，首先需要进行固定。
固定是指通过用适当的液体或气体处理组织样本，使其变得坚固且不易腐坏。
常用的固定方法包括福尔马林固定、乙醛固定等。
然后，需要将固定后的组织样本进行去水处理，通常使用酒精脱水和蜡浸渍的方法来完成。
最后，将组织样本包埋在蜡块中，切割成薄片，使用显微镜观察。
二、病变判断技术病变判断是法医病理学中的核心工作之一，它通过观察组织切片中的病理变化，帮助法医学家判断死因、识别病变类型等。
在病变判断过程中，法医学家需要掌握一定的解剖学、病理学和临床医学知识，同时还需要凭借自身经验和专业技术来进行判断。
在病变判断中，法医学家主要关注组织结构的异常变化和细胞形态的改变。
常见的病理变化包括组织坏死、炎症反应、肿瘤等。
法医学家通过观察变异的组织结构，可以判断出是否存在暴力伤害、药物中毒或其他疾病的证据。
此外，法医学家还可以运用一些特殊的病理学技术来辅助病变判断。
比如免疫组化技术可以通过检测特定蛋白的表达来辅助病变的诊断；电子显微镜技术可以观察细胞和组织的超高分辨率细节。
总结：法医学在法医病理学中的组织切片制作和病变判断技术对于研究死因、识别病变类型等方面具有重要意义。
通过组织切片制作，可以提供详细的组织结构信息，帮助法医学家进行病变的观察和分析；而病变判断技术则通过观察组织切片中的病理变化，辅助法医学家诊断死因，判断病变类型。
类器官病理切片方法
类器官病理切片方法
类器官病理切片的制作主要包括以下步骤：
1. 取材和固定：病理组织取材愈新鲜愈好，以保证原有的形态学结构。
根据制片材料和目的不同，制作病理外检、科研切片其组织块可以薄取制作教学切片厚取。
固定分为小块组织固定法、注射灌注固定法、蒸汽固定法。
2. 脱水透明：经过固定和冲洗后，组织中含有较多水分，可用石蜡切片、火棉胶切片，必须将组织块内的水分置换出来。
3. 浸蜡、包埋：在切片放蜡块时，应注意组织包埋的方向，组织的层次，纤维、肌肉等的走向应与切片刀平行，较难切的部分应放在上面，如皮肤的表皮，肿块的包膜，胃肠道的浆膜等，这样可以减少组织的断裂现象。
4. 切片、贴片：通常采用微米级的切片机将组织切成极薄的片。
5. 染色：常用的染色方法是苏木素-伊红染色法，这种对任何固定液固定的组织和应用包埋法的切片均可使用。
6. 封片：将染色后的切片用封固剂封固，以保持切片的完整性。
以上信息仅供参考，如需获取更多详细信息，建议咨询专业医生或查阅相关医学文献。
组织病理切片制作流程(完整版)
组织病理切片的制作流程1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下：(1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。
为此可将组织展平，以尽可能维持原形。
2．固定(1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。
故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
病理组织切片制作技术PPT课件
• 病理组织切片制作技术概述 • 样本的收集与处理 • 组织切片的制备 • 病理组织切片的观察与诊断 • 病理组织切片制作技术的发展趋势
01
病理组织切片制作技术概述
切片制作的意义和目的
诊断疾病
教学质量
通过对病理组织进行切片制作，可以 观察组织结构和细胞形态，协助医生 诊断疾病。
环境控制
制作切片的实验室应保持清洁、干燥， 防止灰尘、温度等因素对切片质量造 成影响。
02
样本的收集与处理
样本的采集
手术切除
对于需要病理诊断的病例， 医生会进行手术切除病变 组织。
活检
通过穿刺或钳取的方式获 取少量病变组织用于病理 诊断。
尸检
对于死亡病例，通过尸检 获取病变组织。
样本的处理
清洗
利用人工智能技术对病理组织切片进行图像识别和分类，辅助医生 快速诊断。
辅助诊断系统
基于人工智能技术的辅助诊断系统，能够根据病理组织切片的特征， 提供初步诊断结果。
Hale Waihona Puke 预测模型利用人工智能技术构建预测模型，根据病理组织切片的特征预测疾病 发展趋势和预后情况。
THANKS
感谢观看
切片的染色
染色原理
染色是通过化学或物理方法使组织切 片着色，以突出或显现组织中的不同 结构。
常用染色方法
苏木精-伊红染色（HE染色）是病理 组织切片中最常用的染色方法，能较 好地显示细胞核和细胞质的结构。
切片的封固
封固剂选择
根据不同的染色方法选择合适的封固剂，如中性树胶、香柏 油等。
封固步骤
在染色和脱水完成后，用封固剂将切片固定在载玻片上，以 防止切片在观察和保存过程中发生脱落或损坏。
病理切片制作流程
固定标本。
从患者患处取下的标本应立即进行固定，通常使用10%中性福尔马林，固定时间依标本大小而定，大标本需浸泡24-48小时，小标本需浸泡6-8小时。
病理取材。
病理医生通过检查标本，找到病变部位，并切取典型病变组织，切取的组织块应放入特定的包埋盒内并编号。
脱水、透明、浸蜡。
组织经过梯度酒精脱水，以置换出组织中的水分，随后经二甲苯透明处理，最后浸泡在液体石蜡中，整个过程大约需要15小时。
组织包埋。
经过脱水、透明、浸蜡的组织被放入融化的石蜡中，待石蜡冷却凝固后，组织被石蜡包裹形成蜡块，这个过程称为包埋。
切片制备。
使用切片机将蜡块切成2~5微米厚的薄片（如300张纸的厚度），这些切片被放入45℃的温水中展平后，捞在涂有防脱剂的载玻片上，随后进行染色。
染色和封片。
对切片进行HE染色，这是一种常用的染色方法，首先进行二甲苯脱蜡，然后经过不同梯度的酒精水化，使用苏木素染液进行细胞核染色，随后用伊红进行细胞质和细胞外基质染色，最后用酒精脱去余色，二甲苯透明，完成染色过程。
封片时，在玻片上滴加一滴中性树胶，覆盖上清洁的盖玻片，避免产生气泡。
组织病理切片制作步骤
组织病理切片制作步骤
本文档将介绍组织病理切片制作的完整步骤。
1. 标本收集和处理
1.1 收集患者的组织标本，并确保其完整性和准确标记。
1.2 将组织标本置于合适的中，用适当的缓冲液或固定剂进行
处理，以保持其形态结构并防止腐败。
2. 标本处理和包埋
2.1 用合适的方法将标本固定在组织处理机中，例如将其浸泡
在缓冲液中或使用组织处理机进行自动处理。
2.2 将处理后的标本转移到合适的包埋中，通常使用蜡或树脂
作为包埋材料。
3. 切片制作
3.1 使用专业的旋转切片机将包埋的组织标本切割成薄片，通
常为4-5微米。
3.2 切割后的切片应浸泡在水中，以去除任何残留的包埋材料。
3.3 将切片转移到玻片上，并确保它们平整地展开。
4. 染色
4.1 选择适当的染色方法，如常规组织染色法（H&E染色），以突出组织的形态结构。
4.2 将切片浸泡在染色液中，按照染色方法的要求进行染色处理。
4.3 染色后，通过洗涤和脱水步骤去除多余的染色剂。
5. 盖片和封口
5.1 在切片干燥后，将一小滴透明胶液滴在切片上。
5.2 轻轻放置盖片在切片上，确保无气泡和皱纹。
5.3 用封口剂封住盖片和玻片的边缘，以保护切片并防止其损坏。
6. 观察和存储
6.1 使用显微镜观察切片，检查组织的结构和病理变化。
6.2 将切片存储在干燥、阴凉和避光的地方，以确保其长期保存和保持质量。
以上是组织病理切片制作的完整步骤。
每个步骤都需要仔细操作和适当的设备来确保切片的质量和准确性。
病理组织切片制作技术
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------病理组织切片制作技术病理组织切片制作技术病理组织切片常用的制作方法有三种。
即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。
以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是：组织取材固定冲洗脱水透明浸蜡组织包埋组织切片展片附贴切片脱蜡染色脱水染片透明封固。
以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。
因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。
一、取材采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。
切取的工具要清洁。
采取病料越新鲜越好，一般不超过死后 24 小时。
应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。
特殊病料应根据器官的结构特点切取。
管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。
带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。
切取组织块大小，以 1.51.50.3 厘米为宜，最厚不宜超过0.5 厘米。
组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时1/ 7辨认。
切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。
二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。
材料取下后，应迅速固定。
固定液数量应为病理组织块的 5 到 20 倍。
由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达 2 到 3 厘米。
因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是 10%的福尔马林溶液：使用时，用 40%的甲醛饱和水溶液 10 毫升，加水 90 毫升配成。
三、冲洗固定后的组织块，应将固定液洗去。
病理标本切片技术及质量控制方法
病理标本切片技术及质量控制方法病理标本切片技术是病理医师在进行组织学检查时不可或缺的技术手段。
准确的切片能够为医师提供可靠的病理诊断依据，为患者的治疗方案提供重要参考。
本文将介绍病理标本切片技术的基本步骤，并探讨常见的质量控制方法。
一、病理标本切片技术1. 标本固定：在标本切片之前，首先需要对标本进行固定，以保持组织的形态和结构。
最常用的固定方法是使用10%的缓冲福尔马林溶液，它能够稳定细胞和组织的结构，并防止标本的腐败。
2. 组织包埋：标本固定后，需要将组织进行包埋，以便进行切片。
常用的包埋材料是石蜡，它具有良好的剪切性和切片质量，同时能够保持组织的形态和结构。
3. 切片制备：在进行切片制备时，需要使用病理切片机。
将固定和包埋后的标本切割成薄片，通常为4-6微米，然后将切片浸泡在水中，以去除石蜡。
4. 着色处理：切片制备完成后，需要进行着色处理，以突出组织的形态和结构。
常用的染色方法包括血液学染色、免疫组化染色等。
不同的染色方法可以提供不同的信息。
二、质量控制方法1. 切片质量评估：在进行病理标本切片之前，需要评估切片质量。
检查切片是否有褶皱、刀痕等损伤，是否有细胞和组织变形等问题。
如果切片质量不合格，将会影响到后续病理诊断的准确性。
2. 标本固定时间：标本的固定时间对切片结果有重要影响。
过短的固定时间可能导致组织未固定，形成空洞或伪装的结构；而过长的固定时间可能导致组织的变性和破坏。
因此，需要根据标本的性质和大小，合理控制固定的时间。
3. 标本包埋：包埋过程中，需要保证标本的位置正确，不得有错位或倾斜。
同时，还要确保标本与包埋材料充分接触，避免形成气泡和缺陷。
4. 切片厚度：切片厚度对病理诊断结果有影响。
切片太厚可能导致组织结构不清晰，难以解读；而切片太薄则可能导致组织薄弱或断裂。
因此，在切片制备过程中，需要控制切片的厚度。
5. 染色效果：染色效果直接影响到组织的可见度和诊断结果。
因此，在进行染色处理时，需要注意染料的浓度和染色时间，以保证最佳的染色效果。
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兽医病理解剖学实验
固定的注意事项
1、组织块不宜大，厚度小于5mm，长宽 也应小于15×15mm。
2、固定液与组织块的比例应大于10：1。 3、软组织或较大组织块可先经2-3小时固
定后再修整成小块，重新投入新配制 的固定液中继续固定。 4、肠道可在浆膜面贴上一层厚纸，以防 固定组织变形。
兽医病理解剖学实三、脱蜡和染色
（一）、脱蜡 1、二甲苯Ⅰ: 5-10min 2、二甲苯Ⅱ: 5-10min 3、1：1二甲苯：乙醇（冬20min）: 5min 4、无水乙醇、95%、80%、70% 、50%梯度
乙醇每级1-2min 5、蒸馏水1-2min
兽医病理解剖学实验
（二）、染色（HE染色法）
1、苏木素染液: 5～15min 2、蒸馏水（洗去多余的染液）: 30s 3、分色:1%盐酸-70 %乙醇分色: 1-30s 4、蓝化:自来水冲洗（碱化，核蓝色）:
15-20min 5、蒸馏水（洗去多余的碱） : 1-2min
兽医病理解剖学实验
6、逐级入50%、70%、85%乙醇，: 每级12min
兽医病理解剖学实验
实验内容
实验九 心脏血管系统病理 实验十 呼吸系统病理 实验十一 消化系统病理 实验十二 泌尿系统病理 实验十三 中枢神经系统病理
兽医病理解剖学实验
前言
《兽医病理解剖学》实验部分在本 课程教学中占有特殊地位。学生通 过观察肉眼和切片标本印证课堂所 讲的理论，加强理解，取得感性知 识的教学环节。在学习过程中，要 求同学初步掌握观察和描述器官组 织病变的方法和认识病变。
兽医病理解剖学实验
兽医病理解剖学实验
大家有疑问的，可以询问和交流
可以互相讨论下，但要
兽医病理解剖学实验
实验一 病理组织切片制作技术
兽医病理解剖学实验
目的要求：
1、重点掌握病理组织切片的基本 制作过程步骤。
2、了解病理组织切片制作过程中 的注意事项。
兽医病理解剖学实验
实验内容
掌握组织材料的取材、固定、 脱水、透明、包埋、切片、烤 片、脱蜡、染色及封固的基本 操作。
兽医病理解剖学实验
五、光镜观察
兽医病理解剖学实验
兽医病理解剖学实验
兽医病理解剖学实验
兽医病理解剖学实验
生 物 组 织 脱 水 机
兽医病理解剖学实验
(三)、浸蜡与包埋
52-58℃石蜡，浸蜡的全过程 在60℃的温箱中进行。 1：1二甲苯：石蜡: 30min 石蜡Ⅰ: 30min 石蜡Ⅱ: 30min 石蜡Ⅲ: 30min
兽医病理解剖学实验
组织包埋机
兽医病理解剖学实验
（四）切片、粘片 1、切片前处理及切片 2、载玻片处理 3、粘片（展片） 4、烤片
兽医病理解剖学实验
二、固定后处理及切片
(一)、洗涤与修切 (二)、脱水与透明
脱水：将组织块内水分置换的过程。 透明：乙醇和石蜡不互溶，最常用 的透明剂是二甲苯。既能溶于脱水 剂又能溶于包埋剂（石蜡），透明 必须适度 。
兽医病理解剖学实验
50%乙醇: 30-60min 70%乙醇: 1-2小时或过夜 80%乙醇: 1-2小时 95%乙醇: 1-1.5小时 100%乙醇: 30min 100%乙醇: 20min 1：1无水乙醇：二甲苯: 20min 二甲苯: 10-30min
兽医病理解剖学实验
一、取材及固定
（一）取材注意事项： 1、材料新鲜 2、组织块力求小而薄 3、勿使组织块受挤压 4、尽量保持组织的原有形态 5、熟悉取材部位
兽医病理解剖学实验
（一）取材注意事项：
6、选好组织块的切面 7、保持材料的清洁 8、切除不需要的部位
兽医病理解剖学实验
（二）固定及目的：
应用化学试剂使组织或细胞中 的无机成分和有机成分凝固或沉淀， 以保持其生活状态的过程称为固定。
《兽医病理解剖学》实验
实验内容
实验一 病理组织切片制作技术 实验二 局部血液循环障碍：充血、
淤血、缺血、梗死、出血 实验三 局部血液循环障碍 血栓、
水肿 实验四 组织细胞的变性
兽医病理解剖学实验
实验内容
实验五 实验六
实验七 实验八
组织细胞坏死 组织细胞病理性物质沉着 及组织修复 炎症 肿瘤
7、伊红- 95%乙醇染液: 15s～2min 8 、95%、无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ逐级 脱
水，每级1-2min 9、1：1无水乙醇：二甲苯 : 5min 10、二甲苯 Ⅰ ：5min 11、二甲苯Ⅱ ：5min
兽医病理解剖学实验
组织切片染色机
兽医病理解剖学实验
四、封固 滴加中性树胶，加盖玻片
封片。
兽医病理解剖学实验
固定液是10%福尔马林溶 液（4%甲醛溶液），固定24小 时以上。
兽医病理解剖学实验
固定的目的
1、迅速阻止组织、细胞死后变化，防止 自溶与腐败，使之尽量保持生前的状 态与结构。
2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等 成分转变为不溶性物质，以保持其原 有状态。
3、使组织内各种物质成分产生不同的折 光率，以便染色后易于鉴别和观察。