非衍生化串联质谱技术筛查上海部分地区新生儿遗传代谢病的回顾性分析

非衍生化串联质谱技术筛查上海部分地区新生儿遗传代谢病的

回顾性分析

田国力;王燕敏;许洪平;周卓;郭静;姚静

【摘要】目的回顾性分析用串联质谱技术筛查新生儿遗传代谢病的可行性和新生儿遗传代谢病的发病率.方法用非衍生化串联质谱技术检测2010年至2016年上海部分地区126 579例新生儿滤纸干血片上11种氨基酸、游离肉碱和30种酰基肉碱,对新生儿进行氨基酸代谢异常、有机酸代谢异常和脂肪酸氧化代谢异常三大类疾病筛查.结果 126 579例新生儿中确诊遗传代谢病26例,包括氨基酸代谢异常13例、有机酸代谢异常7例和脂肪酸氧化代谢异常6例,总发病率为1∶4 869;另确诊2例母源性原发性肉碱缺乏症和1例母源性3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症.结论非衍生化串联质谱技术可有效用于新生儿遗传代谢病的筛查和诊断,还可对无症状母亲作出诊断.

【期刊名称】《临床检验杂志》

【年(卷),期】2016(034)012

【总页数】4页(P909-912)

【关键词】串联质谱;非衍生化;新生儿筛查;遗传代谢病

【作者】田国力;王燕敏;许洪平;周卓;郭静;姚静

【作者单位】上海市儿童医院新生儿筛查中心,上海200040;上海市儿童医院新生儿筛查中心,上海200040;上海市儿童医院新生儿筛查中心,上海200040;上海市儿

童医院新生儿筛查中心,上海200040;上海市儿童医院新生儿筛查中心,上海200040;上海市儿童医院新生儿筛查中心,上海200040

【正文语种】中文

【中图分类】R446

串联质谱分析技术(tandem mass spectrometry, MSMS)应用于新生儿遗传代谢病筛查，通过分析干血滤纸片上氨基酸谱和酰基肉碱谱，可同时检测氨基酸代谢异常、有机酸代谢异常和脂肪酸氧化障碍等，扩大了新生儿筛查的疾病谱，实现了一次检测多种疾病[1-2]。本新生儿筛查中心于2010年率先在国内引进非衍生化串联质谱技术，对上海部分地区新生儿进行遗传代谢病筛查。现对2010年12月至2016年9月筛查新生儿遗传代谢病的结果作一回顾性分析如下。

1.1 样本滤纸干血片。选取2010年12月至2016年9月出生于上海长宁区、普陀区、浦东新区等接产医院新生儿，在新生儿父母知情同意的前提下，用MSMS 筛查新生儿遗传代谢病。新生儿出生72 h后针刺足跟，采集微量血滴于Scheicher and Schuell 903滤纸上，室温下自然晾干，形成滤纸干血片标本，经专用冷链通道递送至上海市儿童医院新生儿筛查中心检测，共计筛查126 579例新生儿。

1.2 主要仪器与试剂 Quatto micro串联质谱仪、1525u高效液相仪、2777自动进样系统(美国Waters公司)；iEMS孵育震荡仪(芬兰雷勃公司)；流动相和萃取溶液试剂包(美国PerkinElmer公司)，含甲醇、水和草酸；非衍生化串联质谱试剂盒(美国PerkinElmer公司)，包含11种稳定同位素标记的氨基酸标准品和

13种稳定同位素标记的游离肉碱和酰基肉碱标准品。氨基酸内标分别为2H4-丙氨酸(2H4-Alanine, 2H4-Ala)、2H4,13C-精氨酸(2H4,13C-Arginine，2H4,13C-Arg)、2H2-瓜氨酸(2H2-Citrulline，2H2-Cit)、15N,2-13C-甘氨酸(15N,2-13C-

Glycine，15N,2-13C-Gly)、 2H3-亮氨酸(2H3-Leucine，2H3-Leu)、2H3-甲硫氨酸酸(2H3-Methionine, 2H3-Met)、2H6-鸟氨酸(2H6-Ornithine, 2H6-Orn)、13C5-脯氨酸(13C5-Proline，13C5-Pro)、13C6-苯丙氨酸(13C6-Phenylalanine, 13C6-Phe)、13C6-酪氨酸(13C6-Tyrosine, 13C6-Tyr)、2H8-缬氨酸(2H8-Valine, 2H8-Val)，可对丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、瓜氨酸(Cit)、甘氨酸(Gly)、

亮氨酸_异亮氨酸_羟脯氨酸(Leu_Isoleucine_Hydroproline,Leu_IIe_ProOH)、甲

硫氨酸(Met)、鸟氨酸(Orn)、脯氨酸(Pro)、苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)和缬氨酸(Val)共11种氨基酸进行定量。游离肉碱和酰基肉碱的标准品分别为2H9-游离肉

碱(2H9-carnitine,2H9-C0)、2H3-乙酰基肉碱(2H3-acetylcarnitine,2H3-C2)、

2H3-丙酰基肉碱(2H3-propionylcarnitine, 2H3-C3)、2H3-丁酰基肉碱(2H3-butyrylcarnitine, 2H3-C4)、2H9-异戊酰基肉碱(2H9-isovalerylcarnitine,2H9-

C5)、2H6-戊二酰基肉碱(2H6- glutarylcarnitine,2H6-C5DC)、2H3-己酰基肉碱(2H3-hexanoylcarnitine,2H3-C6)、2H3-辛酰基肉碱(2H3-octanoylcarnitine,

2H3-C8)、2H3-葵酰基肉碱(2H3-decanoylcarnitine,2H3-C10)、2H3-月桂酰基肉碱( 2H3-lauroylcarnitine, 2H3-C12)、2H3-肉豆蔻酰基肉碱(2H3-myristoylcarnitine,2H3-C14)、2H3- 棕榈酰基肉碱(2H3-palmitoylcarnitine,

2H3-C16)、2H3-十八碳酰基肉碱(2H3-octadecanoylcarnitine,2H3-C18)，可对C0、C2、C3、丙二酰肉碱_3-羟基丁酰肉碱(malonylcarnitine_3-hydroxybutyrylcarnitine, C3DC_C4OH)、C4、丁二酰肉碱_3-羟基异戊酰肉碱(methylmalonyl_3-hydroxyisovalerylcarnitine,C4DC_ C5OH)、C5、异戊烯酰

肉碱(tiglylcarnitine, C5:1)、C5DC_3-羟基己酰肉碱(C5DC_3-hydroxyhexanoylcarnitine,C5DC_C6OH)、C6、己二酰肉碱(adipylcarnitine ,C6DC)、C8、辛烯酰肉碱(octylenoylcarnitine, C8:1)、C10、

葵烯酰肉碱(decenoylcarnitine, C10:1)、葵二烯酰肉碱(decadienoylcarnitine,